GB/T 28068-2011柑桔潰瘍病菌實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法

ICS6502001

B16..

中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)

GB/T28068—2011

柑桔潰瘍病菌實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法

DetectionofXanthomonascitrisubspcitriusingthereal-time

.

fluorescentPCR

2011-12-30發(fā)布2012-06-01實(shí)施

中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局發(fā)布

中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì)

GB/T28068—2011

前言

本標(biāo)準(zhǔn)按照給出的規(guī)則起草

GB/T1.1—2009。

本標(biāo)準(zhǔn)由全國(guó)植物檢疫標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)提出并歸口

(SAC/TC271)。

本標(biāo)準(zhǔn)起草單位重慶大學(xué)農(nóng)業(yè)部農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣服務(wù)中心中華人民共和國(guó)北京出入境檢驗(yàn)檢

:、、

疫局

。

本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人王中康殷幼平王福祥高文娜夏玉先李正國(guó)曹月青

:、、、、、、。

Ⅰ

GB/T28068—2011

柑桔潰瘍病菌實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法

1范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了柑桔潰瘍病菌Xanthomonascitricitri的實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)的樣品制

(subsp.,Xcc)PCR

備檢測(cè)技術(shù)操作方法及結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

、、。

本標(biāo)準(zhǔn)適用于柑桔植物材料中柑桔潰瘍病菌的實(shí)時(shí)熒光檢測(cè)和病害鑒定

PCR。

2規(guī)范性引用文件

下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的凡是注日期的引用文件僅注日期的版本適用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改單適用于本文件

。,()。

柑桔苗木產(chǎn)地檢疫規(guī)程

GB5040

轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)要求

GB/T19495.2

3術(shù)語(yǔ)和定義

下列術(shù)語(yǔ)和定義適用于本文件

。

31

.

柑桔潰瘍病citruscankerdisease

由柑桔潰瘍病菌引起的國(guó)內(nèi)外柑桔檢疫性細(xì)菌病害癥狀特征表現(xiàn)為柑桔葉片枝條和果實(shí)表面

。、

出現(xiàn)隆起的木栓化潰瘍病斑造成柑桔落葉落果樹(shù)勢(shì)衰弱嚴(yán)重影響柑桔產(chǎn)量與果品外觀質(zhì)量

,、,。

32

.

柑桔潰瘍病菌Xanthomonascitrisubspcitri

.

指引起亞洲型柑桔潰瘍病的病原細(xì)菌為黃單胞菌屬的柑桔黃單胞柑桔亞種新組合

,(Schaad2006;

Young2008)。

33

.

實(shí)時(shí)熒光PCRreal-timefluorescentPCR

實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)一種在體外擴(kuò)增微量的特殊片段的方法在擴(kuò)增過(guò)程中由于熒光

,DNA,

物質(zhì)的釋放并被實(shí)時(shí)檢測(cè)而能夠快速靈敏地檢出模板的存在

、DNA。

34

.

擴(kuò)增引物primer

人工合成的寡核苷酸序列其序列與待擴(kuò)增的目標(biāo)序列中的一段相同用于引導(dǎo)體外

,DNA,DNA

擴(kuò)增

。

35

.

擴(kuò)增模板templet

體外擴(kuò)增中所用的待擴(kuò)增的靶標(biāo)序列

DNA。

36

.

Ct值cyclethresholdvalue

實(shí)時(shí)熒光反