GB/T 26618-2011派琴蟲病診斷操作規(guī)程

ICS11220

B41.

中華人民共和國國家標準

GB/T26618—2011

派琴蟲病診斷操作規(guī)程

ProtocolofdiagnosisforPerkinsosis

2011-06-16發(fā)布2011-11-01實施

中華人民共和國國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

GB/T26618—2011

前言

本標準的附錄為規(guī)范性附錄附錄和附錄為資料性附錄

A,BC。

本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出

。

本標準由全國動物防疫標準化技術(shù)委員會歸口

。

本標準起草單位中國檢驗檢疫科學研究院福建出入境檢驗檢疫局黃島出入境檢驗檢疫局國家

:、、、

海洋環(huán)境監(jiān)測中心深圳出入境檢驗檢疫局上海出入境檢驗檢疫局

、、。

本標準主要起草人吳紹強林祥梅劉建鄭騰李西峰梁玉波劉葒李建韓雪清賈廣樂梅琳

:、、、、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T26618—2011

引言

派琴蟲病是影響世界貝類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要寄生蟲病為國際獸醫(yī)局規(guī)定的必報水生動物

,(OIE)

疫病之一本病年首次報道當時引起美國路易斯安那州的墨西哥海灣的大批牡蠣Crassostrea

。1946,,(

virinica死亡迄今為止已發(fā)現(xiàn)派琴蟲存在于美洲歐洲澳洲亞洲和非洲五大洲的許多貝類體內(nèi)

g)。,、、、,

包括牡蠣鮑魚蛤子扇貝珍珠牡蠣鳥蛤和貽貝等體內(nèi)并在許多地區(qū)造成了嚴重的危害死亡率高

、、、、、,,

達

95%。

年我國在櫛孔扇貝蝦夷扇貝皺紋盤鮑菲律賓蛤仔體內(nèi)檢測到派琴蟲美國年也從

1997,、、、。2005

中國廣西北海進口牡蠣中檢出派琴蟲目前派琴蟲已經(jīng)成為影響我國貝類養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的主要病原之

。,

一據(jù)對黃海北部三個海域的菲律賓蛤仔的派琴蟲感染狀況進行調(diào)查的結(jié)果表明除月份和月份

。,36

的感染率分別為和之外其他月份感染率均為

95%90%,100%。

目前派琴蟲感染的診斷通常依靠推薦的組織切片法組織培養(yǎng)法以及方法組

,OIE、FTMPCR。

織學方法可以通過顯微鏡下直接觀察蟲體或觀察組織損傷來監(jiān)測感染的分布情況培養(yǎng)派琴蟲

。FTM

休眠孢子的方法是將派琴蟲滋養(yǎng)體進行培養(yǎng)培養(yǎng)后蟲體體積增大細胞壁增厚而且不繁殖是一種

,,、,,

傳統(tǒng)有效的定量檢測派琴蟲的方法實時熒光檢測貝類派琴蟲的方法敏感度較高而且特異性

。PCR,

強檢測可在一天之內(nèi)完成定量準確全封閉反應(yīng)等優(yōu)點

,,、。

Ⅱ

GB/T26618—2011

派琴蟲病診斷操作規(guī)程

1范圍

本標準規(guī)定了派琴蟲病診斷時的樣品采集蟲體培養(yǎng)及顯微鏡檢查以及熒光檢測操作

,,PCRPCR

規(guī)程

。

本標準適用于蛤仔牡蠣等水生動物及其產(chǎn)品中攜帶海洋派琴蟲Perkinsusmarinus奧爾森派

、()、

琴蟲Perkinsusolseni等派琴蟲的診斷也可用于派琴蟲病的監(jiān)測和流行病學調(diào)查

(),。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款凡是注日期的引用文件其隨后所有

。,

的修改單不包括勘誤的內(nèi)容或修訂版均不適用于本標準然而鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究

(),,

是否可使用這些文件的最新版本凡是不注日期的引用文件其最新版本適用于本標準

。,。

分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

GB/T6682

出入境動物檢疫采樣

GB/T18088

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本標準

。

31

.

派琴蟲病Perkinsosis

帕金蟲病

由海洋派琴蟲Pmarinus奧爾森派琴蟲Polseni等在宿主血細胞內(nèi)寄生或者游離在結(jié)締組

(.)、(.)

織鰓內(nèi)臟或套膜上皮中而引起的水生動物的一種嚴重的寄生蟲病

、、。

注除PmarinusPolseni之外病原還包括PqugwadiPchesapeakiPandrewsi和Pmediterraneus

:.、.,.、.、..。

32

.

Ct值cyclethreshold

熒光反應(yīng)中熒光信號到達設(shè)定的閾值所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)

PCR,。

4材料

除另有規(guī)定外所用化學試劑均為分析純

,。

試驗用水要求達到中一級水的要求

GB/T6682。

41液體巰基乙酸鹽培養(yǎng)基具體配制方法見附錄

.(fluidthioglycollatemedia,FTM):A。

42盧戈氏碘液配制方法見附錄

.(Lugol’siodine):A。

43氯霉素配制方法見附錄

.2.5%:A。

44制霉菌素配制方法見附錄

.1%: