2023年專(zhuān)題細(xì)胞工程知識(shí)點(diǎn)背誦

專(zhuān)題2細(xì)胞工程一概述細(xì)胞工程是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法,通過(guò)細(xì)胞水平_或細(xì)胞器水平上操作,按照人的意愿來(lái)改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門(mén)綜合科學(xué)技術(shù)。分為植物細(xì)胞工程和動(dòng)物細(xì)胞工程兩大類(lèi)。植物細(xì)胞工程通常采用的技術(shù)手段有植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交技術(shù)等。３、動(dòng)物細(xì)胞工程常用的的技術(shù)手段有＿動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、_動(dòng)物細(xì)胞核移植、動(dòng)物細(xì)胞融合、_＿生產(chǎn)單克隆抗體_等,其中動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)是其他動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)。二細(xì)胞的全能性１、細(xì)胞的全能性是指具有某種生物所有遺傳信息的任何一個(gè)細(xì)胞,都具有發(fā)育成完整生物體的潛能的特點(diǎn)。2、理論上講:生物體的每一個(gè)細(xì)胞均具全能性_。但在生物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞不會(huì)表現(xiàn)出全能性，而是分化為各種器官和組織__這是由于在特定的時(shí)間和空間條件下,細(xì)胞中的基因會(huì)選擇性表達(dá)出各種蛋白質(zhì)從而形成了生物體的不同組織和器官。３、①受精卵細(xì)胞全能性最高，卵細(xì)胞有較高的潛在的全能性,體細(xì)胞的全能性比生殖細(xì)胞低。②高度分化的植物細(xì)胞能保持細(xì)胞的全能性,高分化的動(dòng)物細(xì)胞它的全能性受到限制,但它的細(xì)胞核能保持細(xì)胞的全能性４、植物細(xì)胞表現(xiàn)出全能性的條件:（1)處在離體狀態(tài)時(shí)，（２)一定的外界條件:無(wú)菌,一定的營(yíng)養(yǎng),激素，溫度及其他外界條件。三實(shí)驗(yàn)：胡蘿卜的組織培養(yǎng)1、原理：植物體的根,莖,葉細(xì)胞一般都具有全能性,在_一定的營(yíng)養(yǎng)和激素條件下,可以脫分化形成愈傷組織。將＿愈傷組織轉(zhuǎn)接到具有不同激素成分的培養(yǎng)基上,就可以誘導(dǎo)其在分化生成胚狀體_或_叢芽。2、方法環(huán)節(jié):植物材料消毒接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基誘導(dǎo)出愈傷組織接種到分化培養(yǎng)基分化出幼苗完整植株四植物體細(xì)胞雜交1、概念:就是將不同種的植物體細(xì)胞在一定條件下融合成雜種細(xì)胞,并且把該細(xì)胞哺育成新的植物體的技術(shù)。(用到植物組織培養(yǎng)嗎？)２、過(guò)程：Ａ：先去掉細(xì)胞壁：重要用纖維素酶和果膠酶,獲得具有活力的原生質(zhì)體B:原生質(zhì)體的融合:常用物理法，如運(yùn)用離心,振動(dòng)，電刺激等化學(xué)法,如用聚乙二醇（ＰEＧ）作為誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)融合Ｃ：組織培養(yǎng)新個(gè)體:通過(guò)此過(guò)程得到雜種植株３、意義：能克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交的障礙 (一）植物繁殖的新途徑：１、微型繁殖：（１）概念:人們形象地把用于快速繁殖優(yōu)良品種的額植物組織培養(yǎng)技術(shù)叫做微型繁殖技術(shù)。也叫快速繁殖技術(shù)。(2)優(yōu)點(diǎn)：高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖,保持優(yōu)良品種的遺傳特性

２、作物脫毒：(1）?植物的分生區(qū)附近（如莖尖)部位的病毒很少甚至無(wú)病毒。目前采用莖尖組織培養(yǎng)技術(shù)來(lái)脫除病毒,種植的作物就不會(huì)或很少感染病毒。(２)脫毒植物的優(yōu)點(diǎn):產(chǎn)量高,品質(zhì)優(yōu)。3、神奇的人工種子:20世紀(jì)8０年代，運(yùn)用植物組織培養(yǎng)技術(shù)發(fā)明出了人工種子，所謂人工種子，就是以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料，通過(guò)人工薄膜包裝得到的種子。在適宜的條件下同樣可以萌發(fā)成幼苗。(二）作物新品種的哺育:1、單倍體育種:2、突變體的運(yùn)用：（三)細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn):1、組織培養(yǎng)技術(shù)的運(yùn)用:①在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用。②用于細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。２、細(xì)胞產(chǎn)物：涉及蛋白質(zhì)、脂肪、糖類(lèi)、藥物、香料、生物堿等。3、舉例:①②一.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)１.概念:就是從動(dòng)物機(jī)體中取出＿相關(guān)的組織＿,將它分散成＿單個(gè)細(xì)胞_，然后,放_(tái)適宜的培養(yǎng)基_中,讓這些細(xì)胞__＿生長(zhǎng)和增殖_。２．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法:動(dòng)物組織塊單個(gè)細(xì)胞細(xì)胞懸液原代培養(yǎng)接觸克制傳代培養(yǎng)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過(guò)程的酶:①用胰蛋白酶；和②膠原蛋白酶(解決使細(xì)胞分散)１.原代培養(yǎng):直接從有機(jī)體取得組織分散成細(xì)胞在培養(yǎng)液中的培養(yǎng)（到接觸克制時(shí)止)，這時(shí)培養(yǎng)稱(chēng)為原代培養(yǎng)；(從1~１0代）2.傳代培養(yǎng)：分瓶后的培養(yǎng)(從10～50代）3。50代以后細(xì)胞發(fā)生了癌變。3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(1)無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：加抗生素:防止污染更換培養(yǎng)液:防止細(xì)菌的細(xì)胞代謝產(chǎn)物對(duì)細(xì)胞體危害（２)營(yíng)養(yǎng)：合成培養(yǎng)基(糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素、通常還加血清，血漿等一些天然成分。)(3)溫度和PＨ，適宜的溫度:３6.５±0。5適宜的ｐＨ：7.2—7.4（4)氣體環(huán)境：重要有O2和CO２,O２供細(xì)胞代謝,CO2維持培養(yǎng)液的pＨ4.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用①大規(guī)模生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品。如:病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等。②動(dòng)物細(xì)胞是基因工程技術(shù)中常用的受體細(xì)胞,因此,基因工程也離不開(kāi)動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)。③培養(yǎng)的動(dòng)物細(xì)胞還可以用于檢測(cè)有毒物質(zhì),判斷某種物質(zhì)的毒性。④科學(xué)家培養(yǎng)正?；蚋鞣N病變的細(xì)胞,用于生理、病理、藥理等方面的研究。二．動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)和克隆動(dòng)物１．動(dòng)物核移植：將一個(gè)動(dòng)物的，移入另一個(gè)去的中，使其成一個(gè)胚胎,最終發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體將動(dòng)物的一個(gè)細(xì)胞的＿細(xì)胞核_＿，移入一個(gè)已經(jīng)去掉_核的卵母細(xì)胞中，使其重組并發(fā)育成一個(gè)胚胎，這個(gè)新的胚胎最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。２.用核移植的方法得到的動(dòng)物稱(chēng)為克隆動(dòng)物。３.哺乳動(dòng)物核移植可以分為_(kāi)胚胎細(xì)胞核移植__和_＿體細(xì)胞核移植__,但_體細(xì)胞核移植__難度明顯高于＿＿胚胎細(xì)胞核移植。４.體細(xì)胞核移植的過(guò)程供體細(xì)胞(供核)細(xì)胞培養(yǎng)體細(xì)胞細(xì)胞融合雜種細(xì)胞卵母細(xì)胞(MⅡ中期:供質(zhì)）去核無(wú)核母細(xì)胞構(gòu)建重組胚胎代孕母體新個(gè)體(與母體相同的個(gè)體)歸納:1共提成兩大階段;核移植和胚胎移植2取卵細(xì)胞作受體細(xì)胞的因素是:它是最大的細(xì)胞，易操作,它發(fā)育可直接表達(dá)性狀3嚴(yán)格來(lái)說(shuō)新個(gè)體有卵巢母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)所以有兩個(gè)親本的性狀P8４5．體細(xì)胞移植技術(shù)的應(yīng)用前景（1）畜牧生產(chǎn)中，運(yùn)用_體細(xì)胞克隆_技術(shù)加快家畜遺傳改良進(jìn)程（2)保護(hù)頻危物種(3)在醫(yī)藥衛(wèi)生領(lǐng)域:６.體細(xì)胞移植技術(shù)存在的問(wèn)題(1)成功率_非常低__,克隆技術(shù)的各個(gè)環(huán)節(jié)也有待進(jìn)一步改善。（2）絕大多數(shù)克隆動(dòng)物還存在_＿健康__問(wèn)題，許多克隆動(dòng)物表現(xiàn)出_＿＿_(dá)___＿_(dá)_______,對(duì)克隆動(dòng)物的食品的_安全性_問(wèn)題也存有爭(zhēng)議。一、動(dòng)物細(xì)胞融合1．動(dòng)物細(xì)胞融合的概念:動(dòng)物細(xì)胞融合也稱(chēng)細(xì)胞雜交,是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過(guò)程。2.動(dòng)物細(xì)胞融合的過(guò)程：動(dòng)物細(xì)胞融合的基本原理與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同。誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的方法與植物原生質(zhì)體融合的方法,但動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)用作為誘導(dǎo)劑，由于滅活的病毒能使細(xì)胞膜上的蛋白質(zhì)分子和脂質(zhì)分子重新排布,細(xì)胞膜流動(dòng)性增強(qiáng)，細(xì)胞發(fā)生融合。

假如用不滅活的病毒作為誘導(dǎo)劑,則不滅活的病毒會(huì)感染細(xì)胞，而不能誘導(dǎo)細(xì)胞融合。過(guò)程:把兩個(gè)不同DNA的動(dòng)物細(xì)胞放在一起，用滅活的病毒解決細(xì)胞后，它們就先細(xì)胞膜融合,再細(xì)胞核融合，進(jìn)而形成雜種細(xì)胞,這個(gè)細(xì)胞一次有絲分裂后仍能形成2個(gè)完整的雜交細(xì)胞。3.動(dòng)物細(xì)胞融合的意義和應(yīng)用:(1）細(xì)胞融合技術(shù)能打破生殖隔離,突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為也許。（2)細(xì)胞融合技術(shù)已廣泛應(yīng)用于細(xì)胞遺傳，細(xì)胞免疫，腫瘤和生物新品種哺育等領(lǐng)域，但此技術(shù)尚有一個(gè)十分重要的用途,就是制備單克隆抗體(雜交瘤技術(shù))。二、單克隆抗體1.傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動(dòng)物產(chǎn)生抗體,然后從動(dòng)物血清中分離所需要的抗體。這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量和純度都很低,并且制備的抗體特異性差。２.單克隆抗體制備需要的條