標準解讀

《GB/T 24863-2010 畜禽細胞體外培養(yǎng)與冷凍保存技術規(guī)程》是由中國國家標準化管理委員會發(fā)布的一項國家標準，主要針對畜禽細胞在實驗室環(huán)境下的培養(yǎng)及長期保存提供了具體的操作指南。該標準涵蓋了從樣本采集、處理到細胞培養(yǎng)以及最終的冷凍保存等多個環(huán)節(jié)的技術要求。

首先，在樣本采集方面，規(guī)定了應選取健康且無特定病原體感染的動物作為供體，并詳細描述了不同組織或器官樣本的正確采集方法及其注意事項，以確保獲得高質量的起始材料。

接著，對于細胞分離與初步處理，標準中列舉了幾種常用的酶消化法和機械分散法來獲取單個細胞懸液，并對如何根據目標細胞類型選擇合適的分離策略進行了指導。此外還強調了在整個過程中保持無菌操作的重要性，防止污染發(fā)生。

然后是關于細胞培養(yǎng)的部分，包括基礎培養(yǎng)基的選擇、血清及其他添加劑的使用比例、pH值調整等關鍵參數設置；同時指出了定期更換培養(yǎng)液、監(jiān)測細胞生長狀態(tài)、適時傳代擴增等日常維護工作的要求。

最后，針對細胞冷凍保存，《GB/T 24863-2010》推薦采用逐步降溫的方法進行冷凍保護，并介紹了DMSO（二甲基亞砜）等常用凍存劑的配制比例及其作用機制。還特別提到了解凍后細胞復蘇效率評估的重要性，建議通過觀察存活率、貼壁能力等指標來判斷保存效果。


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  • 2010-06-30 頒布
  • 2011-01-01 實施
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GB/T 24863-2010畜禽細胞體外培養(yǎng)與冷凍保存技術規(guī)程_第1頁
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文檔簡介

犐犆犛６５．０２０．３０

犅４０

中華人民共和國國家標準

犌犅／犜２４８６３—２０１０

畜禽細胞體外培養(yǎng)與

冷凍保存技術規(guī)程

犜犲犮犺狀犻犮犪犾狉犲犵狌犾犪狋犻狅狀狅犳犳犪狉犿犪狀犻犿犪犾狊犮犲犾犾犮狌犾狋狌狉犲犪狀犱犮狉狔狅狆狉犲狊犲狉狏犪狋犻狅狀

２０１００６３０發(fā)布２０１１０１０１實施

中華人民共和國國家質量監(jiān)督檢驗檢疫總局

發(fā)布

中國國家標準化管理委員會

書

犌犅／犜２４８６３—２０１０

前言

本標準由中華人民共和國農業(yè)部提出。

本標準由全國畜牧業(yè)標準化技術委員會（ＳＡＣ／ＴＣ２７４）歸口。

本標準起草單位：中國農業(yè)科學院北京畜牧獸醫(yī)研究所。

本標準主要起草人：關偉軍、馬月輝、李向臣、李晗、閆雷、趙倩君、宮雪蓮。

Ⅰ

書

犌犅／犜２４８６３—２０１０

畜禽細胞體外培養(yǎng)與

冷凍保存技術規(guī)程

１范圍

本標準規(guī)定了畜禽體細胞保存方法。

本標準適用于豬、牛、羊、馬、驢、雞、鴨、鵝等畜禽細胞體外培養(yǎng)與保存。

２規(guī)范性引用文件

下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有

的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協(xié)議的各方研究

是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。

ＧＢ／Ｔ６６８２分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法

３術語和定義

下列術語和定義適用于本標準。

３．１

體細胞體外培養(yǎng)犻狀狏犻狋狉狅狊狅犿犪狋犻犮犮犲犾犾犮狌犾狋狌狉犲

將體細胞在模擬體內生存環(huán)境的體外條件中進行培養(yǎng)，使細胞生長增殖，并保留其完整結構和功能

特性的方法。

３．２

原代細胞培養(yǎng)狆狉犻犿犪狉狔犮犲犾犾犮狌犾狋狌狉犲

將體細胞在模擬體內生存環(huán)境中進行培養(yǎng)，使細胞生長增殖達到可傳代狀態(tài)的培養(yǎng)方法。

３．３

細胞冷凍保存犮犲犾犾犮狉狔狅狆狉犲狊犲狉狏犪狋犻狅狀

將體外培養(yǎng)細胞與凍存液按一定比例混勻后，按設定的降溫速率降溫，使其于液氮中長期保存的

過程。

４工作區(qū)條件

工作區(qū)一般要由準備室、緩沖間、無菌室、細胞保存室組成。

其中，緩沖間面積應不小于３ｍ２，并設有更衣柜和紫外燈，紫外燈的強度為不少于１．５Ｗ／ｍ３。紫

外線燈管距地面不應超過２．５ｍ，每次照射時間為２０ｍｉｎ～３０ｍｉｎ。無菌室無菌等級的最低標準應達

到萬級。

５主要儀器、設備

超凈工作臺、冰箱、鼓風干燥箱、高壓蒸汽消毒器、液氮生物容器、離心機、電子天平、ＣＯ２

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