微生物鑒定系統(tǒng)和藥敏檢測系統(tǒng)性能驗證

微生物鑒定系統(tǒng)和藥敏檢測系統(tǒng)性能驗證微生物鑒定系統(tǒng)和藥敏檢測系統(tǒng)的性能驗證指標、要求、方法和可接受標準性能指標或參數微生物鑒定系統(tǒng)性能驗證藥敏檢測系統(tǒng)性能驗證準確度目標1.與比對方法的一致性2.細菌/真菌正確鑒定準確度1.CA（S/I或SDD/R）2.EA（MIC，適用時）①CA可接受時，不評估EA②若僅檢測有限的倍比稀釋度（如2～3個），不評估EA③若倍比稀釋度＞4個，且報告的MIC值可用于指導治療時，應評估EA檢測方法比較新系統(tǒng)和現(xiàn)有系統(tǒng)應評估每種抗菌/真菌藥物的CA和EA菌種和數量臨床菌株或凍存菌株，實驗室常規(guī)分離菌種占80％～90％1.全面驗證：應至少30個臨床菌株2.部分驗證：應至少10個臨床菌株臨床菌株和凍存菌株1.全面驗證：應至少30個臨床菌株2.部分驗證：應至少10個臨床菌株可接受標準準確度：驗證的標準/QC菌株準確度應為100％，臨床菌株的準確度應≥90％針對特定藥物/菌株組合的檢測系統(tǒng)，應符合：①當與現(xiàn)有系統(tǒng)比較時，CA≥90％和EA≥90％②所有耐藥菌株的VMD或VME＜3％③所有敏感菌株的MD或ME＜3％若上述任意一條未滿足時，宜增加附加測試：重復檢測結果不一致的菌株、檢測額外的菌株或與參考方法進行比較精密度（再現(xiàn)性）目標可重復性1.S/I或SDD/R注結果解釋的可重復性2.MIC值的可重復性，可接受誤差：①細菌：±1個梯度稀釋度②真菌：±2個梯度稀釋度檢測方法（包括菌株數量）1.全面驗證：5個菌株（QC和/或臨床菌株），連續(xù)測3天2.部分驗證：1天測試3次適用于本次方法學變更的QC菌株1.全面驗證：5個菌株（QC和/或臨床菌株），連續(xù)測3天2.部分驗證：1天測試3次適用于本次方法學變更的QC菌株新系統(tǒng)：每株菌采用三份獨立的接種物，同一天或不同天進行檢測。現(xiàn)有系統(tǒng)：不必進行精密度驗證。當新系統(tǒng)某一菌株檢測結果不可重復時，應在現(xiàn)用檢測系統(tǒng)重新檢測。當現(xiàn)有系統(tǒng)的結果仍不可重復，更換菌株重新進行性能驗證可接受標準1.全面驗證：在3個工作日測試5個菌株，至少14個鑒定結果一致2.部分驗證：QC菌株鑒定結果符合率應為100％EA≥95％≥95％QC菌株的結果在QC規(guī)定的范圍內可報告范圍建議廠商數據庫提供的可鑒定菌種范圍不適用矛盾結果解決1.應重新檢測CA不一致的菌株2.宜使用相同的接種物同時在兩個系統(tǒng)上進行三次重復性檢測3.當重復試驗結果仍不一致時，采用第三種檢測方法，優(yōu)先選擇參考方法注：S，susceptible，敏感；I，Intermediate，中介；SDD，susceptible-dosedependent，劑量依賴性敏感；Rresistant，耐藥。

質譜檢測系統(tǒng)常見鑒定錯誤原因異常情況可能原因解決方法多個鑒定結果樣品不純挑取純菌落或重新分純后進行鑒定靶板、試劑導致交叉污染·重新配置試劑·使用標準流程清洗后的靶板進行鑒定質譜儀應用局限性選取相應菌種進行補充試驗或報告結果圖譜質量差/圖譜無峰樣品未選擇合適的前處理方法針對不同樣品采用合適的樣品前處理方法基質未添加或濃度過低·重新添加基質·檢查基質是否有結晶析出，超聲重新溶解或重新配置新基質溶液涂菌過厚或過薄重新制備樣品，挑取少量菌落薄膜狀涂抹粘液型細菌重新制備樣品，拂去表層粘液，取下層樣品涂抹菌種老化或低溫保存重新傳代培養(yǎng)新鮮菌種靶板不平或有刮痕更換靶板或靶位鑒定分值低質量軸偏移按照標準流程校準儀器未選擇正確的比對數