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正常下頜乳中切牙釉質(zhì)表層50μm內(nèi)鈣含量及分布,口腔科學(xué)論文齲病的產(chǎn)生是一個脫礦與再礦化不平衡交替的連續(xù)動力學(xué)經(jīng)過[1-2].鈣是組成牙體硬組織的主要化學(xué)元素[1].在齲病的發(fā)生經(jīng)過中,牙齒鈣含量的變化可作為反映脫礦與再礦化的重要指標(biāo).在齲病發(fā)展的早期階段,臨床表現(xiàn)為白斑或棕色斑,其典型的病理損害是釉質(zhì)表層相對完好,但表層下嚴(yán)重脫礦.表層的構(gòu)成與釉質(zhì)表層固有特征和齲損外表發(fā)生的再礦化有關(guān).本實驗擬運用電子探針顯微分析儀研究正常下頜乳中切牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)鈣含量及分布,試圖發(fā)現(xiàn)其特點,并討論其與年齡、齲患狀況之間的關(guān)系,為牙體硬組織的基礎(chǔ)研究及乳牙齲病研究提供資料.1資料與方式方法1.1一般資料選取2018年1月-3月間在口腔門診就診的40名5~7歲患兒為研究對象,收集其因滯留或替牙期松動而鏟除的下頜乳中切牙40顆,肉眼觀察牙冠完好,無裂紋、齲壞、白堊斑及釉質(zhì)發(fā)育不全等病損.拔牙前全口牙齒進行具體檢查及記錄.分別計算每顆患牙的齲補牙數(shù)(decayed-filledtooth,dft)、齲補牙面(decayed-filledsurface,dfs)和齲蝕指數(shù)(cariesseverityindex,CSI).dft、dfs參照世界衛(wèi)生組織的檢查計算標(biāo)準(zhǔn),CSI參考下野勉之方式方法[3]以齲患狀況記分計算所得.計分標(biāo)準(zhǔn)為:無齲0分,因齲充填0.5分,繼發(fā)齲、牙釉質(zhì)齲、牙本質(zhì)淺齲1分,牙本質(zhì)深齲或露髓、殘冠、殘根2分.若一個牙有多個牙面同時患齲則以其牙面中之最高分為準(zhǔn).計算公式:CSI=齲蝕牙計分總和(牙數(shù)2)100.1.2方式方法1.2.1分組有兩種分組方式方法,其一為以標(biāo)本所在個體的年齡為指標(biāo)分組.5歲組兒童為7人,平均年齡為5歲10個月;6歲組兒童21人,平均年齡為6歲6個月;7歲組兒童為12個人,平均年齡為7歲2個月.其二為以標(biāo)本所在個體的dft和CSI為指標(biāo)分組.無齲組:dft=0且CSI=0,共14例;患齲低危組:5dft0且10CSI0,共12例;患齲高危組:dft5且CSI10,共14例.1.2.2標(biāo)本的制備將標(biāo)本從0.9%的生理鹽水中取出,在牙科低速渦輪機上,用金剛超薄砂片以唇舌方向縱向片切牙體為左右對稱的兩半,隨機取華而不實一半為實驗對象.環(huán)氧樹脂包埋,暴露牙剖面.經(jīng)研磨拋光、超聲清洗后自然枯燥,真空噴碳,碳膜厚度約200A[4].1.2.3定點及測試①將制備好的樣本涂導(dǎo)電膠后固定于樣品座,置入電子探針顯微分析儀(JXA-8100型,JEOL公司,日本)樣品室內(nèi)測試平臺上;②真空狀態(tài)下,觀察樣本的低倍圖象,區(qū)分樣本的唇側(cè)和舌側(cè),并確定釉質(zhì)唇側(cè)外表中點A、牙齒切端頂點B以及髓腔頂點C,由A向BC作垂線(圖1);③在該垂線上,釉質(zhì)內(nèi)取釉質(zhì)外表下10、20、30、40、50m處5點;④測試時將樣本放大至高倍下,進行微區(qū)分析.電子探針顯微分析儀工作條件為:工作電壓20kV,發(fā)射電流110-9A,工作距離11mm,計數(shù)有效時間100s,電子束直徑小于1m,光斑直徑1~2m.1.3統(tǒng)計學(xué)方式方法全部數(shù)據(jù)用SAS8.02版統(tǒng)計軟件包處理.處理數(shù)據(jù)時,對于鈣含量及個體齲患狀況指標(biāo)的數(shù)據(jù)分布分析采用正態(tài)性檢驗;對于不同年齡、不同齲患狀況組及不同深度的鈣含量比擬分析采用Kruskal-Wallis檢驗;對于鈣含量與個體齲患狀況指標(biāo)的相關(guān)性分析采用Spearman等級相關(guān)分析法.2結(jié)果40例下頜乳中切牙標(biāo)本的牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)鈣含量質(zhì)量百分比均值為(38.390.92)%.2.1不同年齡兒童乳牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)鈣含量比擬如表1所示,5、6、7歲3個年齡組兒童的下頜乳中切牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)平均鈣含量固然各不一樣,尤其是5歲組和7歲組之間平均值相差0.31,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05).2.2乳牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)不同深度鈣含量比擬由表2可見,下頜乳中切牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)不同深度的鈣含量是相近的,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05).2.3不同齲患狀況組間乳牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)鈣含量比擬比擬無齲組、齲病低危組、高危組之間下頜乳中切牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)平均鈣含量,結(jié)果顯示各組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),表3.進一步比擬不同齲患狀況組間不同深度鈣含量的差異,如表4所示,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05).2.4乳牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)鈣含量與個體齲患狀況的關(guān)系采用Spearman等級相關(guān)法分析下頜乳中切牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)鈣含量分別與個體齲患狀況指標(biāo)dft(r=-0.2728,P=0.0886)、dfs(r=-0.1945,P=0.2292)、CSI(r=-0.2176,P=0.1774)的相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)r均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05).進一步分析釉質(zhì)表層10~50m不同深度鈣含量分別與dft、dfs、CSI的相關(guān)性,結(jié)果如表5所示,釉質(zhì)外表下40m鈣含量與dft之間呈低度負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.3573,P=0.0236,P0.05),除此之外,其余各組等級相關(guān)分析的P值均大于0.05,相關(guān)系數(shù)r無統(tǒng)計學(xué)意義.以牙釉質(zhì)外表下40m鈣含量為橫坐標(biāo),以dft為縱坐標(biāo)繪制Spearman等級相關(guān)圖,如此圖2所示.3討論本研究結(jié)果顯示5、6、7歲3個年齡組兒童的下頜乳中切牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)鈣含量的差異無統(tǒng)計學(xué)意義.5歲組和7歲組兒童的平均年齡較為接近6歲,分別為5歲10個月和7歲2個月,結(jié)果可能與此有關(guān).牙釉質(zhì)有萌出后成熟現(xiàn)象,表現(xiàn)為鈣、磷、氟等元素的含量增加,鈉、鎂、碳酸鹽等減少,釉質(zhì)的浸透性減低,硬度和抗酸性加強,羥磷灰石結(jié)晶增大[5-8].本研究中所取標(biāo)本為處于替牙期的下頜乳中切牙.該牙約在幼兒6~8個月時萌出,約1歲半時牙根發(fā)育完成.采集標(biāo)本時該牙在幼兒口腔內(nèi)存留已接近或超過5年時間,早已過了乳牙釉質(zhì)的萌出后成熟階段.另一方面,也有研究顯示萌出后成熟現(xiàn)象可能表現(xiàn)為釉質(zhì)表層的鈣磷比值顯著增大,而鈣磷含量無統(tǒng)計學(xué)差異[7].本實驗結(jié)果表示清楚,固然處于替牙期的下頜乳中切牙在兒童口腔內(nèi)存留時間不同,但釉質(zhì)表層的鈣含量是一樣的.本研究結(jié)果中下頜乳中切牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)不同深度的鈣含量無統(tǒng)計學(xué)差異不同.用掃描電子顯微鏡觀察乳牙釉質(zhì)的斷面,表層內(nèi)約30m左右未見釉柱構(gòu)造,結(jié)晶排列與牙外表成直角[5].本研究結(jié)果提示,此乳牙釉質(zhì)外表無釉柱表層中的鈣含量與外表下40m、50m處鈣含量一樣.之前的研究報道說明下頜乳中切牙釉質(zhì)表層下50m和100m處鈣含量差異無統(tǒng)計學(xué)意義,它們均顯著高于釉質(zhì)表層下250m處鈣含量[9].由此推斷下頜乳中切牙釉質(zhì)表層100m范圍內(nèi)鈣含量是一致的,而且是一個高度鈣化的區(qū)域.許強等[10]關(guān)于乳前牙及乳磨牙釉質(zhì)鈣元素的分析得出同樣結(jié)論.多項研究表示清楚,釉質(zhì)表層與外環(huán)境不斷進行著離子交換,其表層內(nèi)元素含量是動態(tài)變化的[11-13].乳牙釉質(zhì)表層高鈣化區(qū)域可能與口腔環(huán)境,尤其是唾液的影響有關(guān)[11].Driessens等[8]用電子探針顯微分析儀測定第三磨牙和前磨牙釉質(zhì)表層100m內(nèi)鈣含量,間隔2m測定一點,結(jié)果顯示在整個100m范圍內(nèi)鈣含量是一致的,其研究對象是恒牙,但與本研究結(jié)果有類似之處.齲病發(fā)生早期脫礦與再礦化交替進行,可看作是鈣和磷酸鹽移出、移進釉質(zhì)的動力學(xué)經(jīng)過,這華而不實鈣離子的運動起了重要作用.LeGeros等[14]研究以為牙齒晶體構(gòu)造中的鈣、磷等含量與齲易感性有關(guān).而本研究結(jié)果顯示乳牙釉質(zhì)表層50m內(nèi)平均鈣含量及不同深度鈣含量在不同齲患狀況組之間無統(tǒng)計學(xué)差異.在乳牙釉質(zhì)表層鈣含量與個體齲患狀況的多項等級相關(guān)分析中,僅釉質(zhì)外表下40m鈣含量與dft之間呈低度負(fù)相關(guān)關(guān)系(r=-0.3573,P0.05).此現(xiàn)象能否與乳牙釉質(zhì)外表約30m厚的無釉柱表層的存在有關(guān)還需進一步研究.Derise等[15]研究表示清楚,正常恒牙釉質(zhì)和牙本質(zhì)的礦物質(zhì)含量與齲失補牙數(shù)(DMFT)之間有一定相關(guān)性,r值在-0.17~-0.35之間,本研究結(jié)果的r值與其相近.通過本研究能夠推斷,正常乳牙釉質(zhì)表層的鈣含量差異不是影響齲病發(fā)生的主要因素,不能作為反映個體齲患狀況的單一指標(biāo).齲病的發(fā)生遭到全身和局部各種因素的影響.在齲病的牙齒易感性方面,除了鈣、磷含量外,還包括氣孔率和浸透性、微量元素組成、不同化學(xué)相晶體的構(gòu)成和轉(zhuǎn)化等.除此之外,牙齒的解剖形態(tài)及在牙列中的位置也與齲易感性有關(guān).因而,在研究牙齒對齲病的易感性時,單純的鈣含量值僅為參考指標(biāo)之一.[參考文獻][1]SilverstoneLM.Laboratorystudiesonthedemineralizationandremineralizationofhumanenamelinrelationtocariesmechanisms[J].AustDentJ,1980,25(3):163-168.[2]KoulouridesT,CameronB.Enamelremineralizationasafactorinthepathogenesisofdentalcaries[J].JOralPathol,1980,9(5):255-269.[3]ShimonoT,MjzunoJ,NonomuraE,etal.Studiesonanewcariesactivitytest(cariostat):C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