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實驗室化驗結(jié)果的判讀
(血常規(guī)分析)目錄1血液學(及全血細胞計數(shù)儀)相關(guān)基礎(chǔ)知識2影響血常規(guī)結(jié)果的因素3各項指標解讀4直方圖解讀5血常規(guī)結(jié)果出錯解讀6臨床病例研究一、血液學(及血細胞計數(shù)儀)相關(guān)基礎(chǔ)知識(1)血常規(guī)定義(2)血細胞(3)血細胞計數(shù)儀及三分類五分類(1)全血細胞計數(shù)(英文:completebloodcount,CBC):又稱為血常規(guī)、血象、血細胞分析、血液細胞分析、血細胞計數(shù)或血液細胞計數(shù)。(2)血細胞:
血細胞分析儀測試原理的改進,主要體現(xiàn)在白細胞分類方面的改進.對WBC來說,從單分類到三分類,五分類甚至九分類(3)三分類:淋巴細胞(小細胞亞群),中性細胞(單核細胞亞群)和粒細胞群(大細胞亞群)(4)五分類:嗜中性粒細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞、淋巴細胞和單核細胞血液由血漿(plasma)和血細胞(bloodcell)組成。從血管取少量血液加入適量抗凝劑(如肝素或枸櫞酸鈉),有形成分經(jīng)自然沉降或離心沉淀后,血液可分出三層:(1)上層為淡黃色的血漿;(2)下層為紅細胞;(3)中間的薄層為白細胞和血小板。血漿相當于結(jié)締組織的細胞間質(zhì),約占血液容積的55%,其中90%是水,其余為血漿蛋白(白蛋白、球蛋白、纖維蛋白原)、脂蛋白、脂滴、無機鹽、酶、激素、維生素和各種代謝產(chǎn)物。血液流出血管后,溶解狀態(tài)的纖維蛋白原轉(zhuǎn)變?yōu)椴蝗芙鉅顟B(tài)的纖維蛋白,于是凝固成血塊。血塊靜置后即析出淡黃色清明的液體,稱血清(serum)。血細胞紅細胞5.5-8.5*1012/ul白細胞6-17*109/ul血小板200-500*109/ul血細胞體積:紅細胞:呈雙凹圓盤狀,犬為6.0-7.0um,貓為5.5-6.0um,白細胞:也被稱為白血球。血液中紅細胞比白細胞多得多。血液樣本中每有一個白細胞將有600~700個紅細胞;中性粒細胞:直徑10-12μm嗜酸性粒細胞:直徑10~15μm嗜堿性粒細胞:直徑10-12μm單核細胞:直徑14~20μm淋巴細胞:圓形或橢圓形,大小不等。直徑6~8μm的為小淋巴細胞,9~12μm的為中淋巴細胞,13~20μm的為大淋巴細胞血小板體積甚小,直徑2~4μm,呈雙凸扁盤狀白細胞(WBC)紅細胞(RBC)血紅蛋白(HGB)紅細胞壓積(HCT)平均紅細胞體積(MCV)平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)血小板(PLT)中性粒細胞百分比(OTHR%)淋巴細胞百分比(Lym%)嗜酸性粒細胞百分比(Eo%)中性粒細胞絕對值(OTHR#)淋巴細胞絕對值(Lym#)嗜酸性粒細胞絕對值(Eo#)紅細胞體積分布寬度標準差(RDW-SD)紅細胞體積分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)血小板體積分布寬度(PDW)血小板平均體積(MPV)大血小板比率(P-LCR)
血紅蛋白(HGB)血紅蛋白存在于紅細胞內(nèi),通常紅細胞總數(shù)、血細胞壓積和血紅蛋白濃度的變化一致。但是,當發(fā)生低色素性貧血時,可見紅細胞總數(shù)無變化或偏低,血紅蛋白含量較正常少,常見于缺鐵性貧血的犬。紅細胞壓積(HCT)血液經(jīng)抗凝處理后,通過離心可以把血液分為兩大部分,血漿和血細胞。如果將血液放在一個特殊的試管中(溫氏管)按規(guī)定的時間和速度進行離心,最終使得紅細胞完全壓實在試管的底端,紅細胞之間互相接觸密切,盡可能排除所有血漿,此時血漿會全部被擠出到血細胞的上面,這時紅細胞所占全血的百分比就是我們所要得到的紅細胞壓積,即壓實的紅細胞所占的體積數(shù)(或百分比),也叫紅細胞比積或紅細胞比容。平均紅細胞體積(MCV)平均紅細胞體積(MCV)是指機體單個紅細胞的平均體積,通常是間接計算得到。平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)指每個紅細胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量,以皮克(pg)為單位,MCH=Hb含量/紅細胞百萬數(shù),臨床上用于對貧血進行形態(tài)學分類指每升紅細胞中平均所含血紅蛋濃度,以g/L表示。平均紅細胞血紅蛋白濃度(MCHC)紅細胞體積分布寬度(RedbloodCelldistributionwidth,RDW),是用紅細胞直方圖分布的寬度比上其高度來衡量紅細胞體積離散程度的指標,血細胞分析中包括此項目。紅細胞體積分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)血小板平均體積(MPV)代表的是外周血中單個血小板的平均體積,也就是血液中所有血小板的體積的平均數(shù).紅細胞體積分布寬度標準差(RDW-SD)紅細胞體積分布寬度(RedbloodCelldistributionwidth,RDW),是用紅細胞直方圖分布的寬度比上其高度來衡量紅細胞體積離散程度的指標,血細胞分析中包括此項目。紅細胞體積分布寬度變異系數(shù)(RDW-CV)紅細胞體積分布寬度標準差(RDW-SD)血小板分布寬度(plateletdistributionwidth,PDW)是反映血液內(nèi)血小板容積變異的參數(shù),以測得的血小板體積大小的變異系數(shù)表示。PDW在正常范圍內(nèi)表明血小板體積均一性高。大血小板比率(P-LCR)血小板是由一種叫做“產(chǎn)血小板型巨核細胞”形成的?!爱a(chǎn)血小板型巨核細胞”很大,它是被“裁剪”為小小的血小板的?!按笱“濉本褪菦]有被裁剪的血小板。大血小板比值是大血小板占所有血小板的比例。大血小板的比值增高,說明血小板的成熟度降低犬不同年齡段血細胞參考值亦有不同
年齡(天)項目0-314-1728-3140-4556-59犬數(shù)量4646484442RBC(×106/μL)4.8±0.83.5±0.33.9±0.44.1±0.44.7±0.4Hgb(g/dL)15.8±2.99.9±1.19.6±0.99.2±0.710.3±0.9PCV(%)46.3±8.528.7±2.928.4±2.528.3±2.331.4±2.4MCV(fL)94.2±5.981.5±3.371.7±3.568.2±2.665.8±2.3MCH(pg)32.7±1.828.0±2.024.3±1.622.4±1.021.8±1.2MCHC(g/dL)34.6±1.434.3±1.633.5±1.432.4±1.732.6±1.8nRBC/100WBC7.2±6.72.4±3.81.1±1.50.6±0.90.1±0.4Reticulocytes(%)6.56.75.84.53.6WBCs/μL16,800±5,70013,600±4,40013,900±3,30015,300±3,70015,700±4,400AbsolutenumberofWBCs/μL
Bandneutrophils600±500200±200100±200200±200300±300Segmentedneutrophils9,200±6,6006,900±3,1006,800±2,0007,400±2,4008,500±2,900Lymphocytes3,700±2,3004,900±1,7005,400±1,6006,100±1,9005,000±1,500Monocytes1,400±1,3001,100±6001,100±6001,300±6001,400±700Eosinophils400±400500±500400±400300±300400±400Platelets/μL302,000290,000287,000321,000411,000Myeloid:erythroidratio1.6:11.7:11.7:11.8:11.4:1
0~2月齡正常比格犬血細胞參考值正常成年犬血細胞參考值項目單位參考值RBC×106/μL5.5-8.5Hgbg/dL12.0-18.0PCV%37-55MCVfL60-77MCHCg/dL32-36Reticulocytes%0.0-1.5Reticulocytes/μL<70,000Leukocytes(/μL)/μL6,000-17,000Bandneutrophils/μL3,000-11,500Segmentedneutrophils/μL0-300Lymphocytes/μL1,000-4,800Monocytes/μL150-1,350Eosinophils/μL100-1,250Basophils/μLRarePlateletcount/μL200,000-500,000MPVfL6.7-11.1紅細胞評價紅細胞比積(HCT)的臨床意義※
紅細胞數(shù)量和大小※
血漿容量※
貧血輔助診斷與貧血程度判斷※
紅細胞各項平均值計算,輔助貧血分類1.增高:各種原因所致血液濃縮,生理性2.降低:見于各種貧血貧血:指由多種原因引起外周血單位容積內(nèi)血紅蛋白(Hb)濃度、紅細胞計數(shù)(RBC)及血細胞比容(Hct)低于正常值。貧血的形態(tài)學分類1貧血類型MCVMCHMCHC常見疾病正常細胞性NNN急性失血、溶血、再障大細胞性↑↑N葉酸、維B12缺乏小細胞低色素性↓↓N鐵、維B2缺乏、珠蛋白肽鏈合成障礙單純小細胞性↓↓↓慢性炎癥、尿毒癥紅細胞幾個平均值的臨床意義貧血的形態(tài)學分類2RDW的臨床意義類別MCVRDW正常動物NN
缺鐵性貧血↓↑巨幼紅細胞貧血↑↑溶血性貧血↑↑鐵粒幼細胞貧血N↑
再障NN貧血類型常見疾病大細胞均一性部分再障大細胞不均一性巨幼細胞性貧血正細胞均一性急性失血正細胞不均一性再障、部分溶貧小細胞均一性地中海貧血小細胞不均一性缺鐵性貧血缺鐵性貧血的診斷和鑒別診斷采用形態(tài)分類法,除計算紅細胞指數(shù)外,尚應(yīng)強調(diào)血片的觀察,因為紅細胞形態(tài)的改變在血片中最為分明,正細胞性貧血并不意味著所有紅細胞都是正常大小,并且紅細胞大小不勻可能很明顯,但其平均體積在正常范圍內(nèi)。大細胞性貧血中也可有不少小細胞出現(xiàn)。此外,形態(tài)改變的異形細胞也只有在血片中能觀察到。紅細胞形態(tài):
再生性非再生性鐵缺乏MCVN/↑N↓MCHC↓N↓RPI>2<1<1注釋:MCV=紅細胞平均容積MCHC=紅細胞平均血紅蛋白量RPI=網(wǎng)織紅細胞生成指數(shù)RPI根據(jù)以下公式計算:RPI=[網(wǎng)織紅細胞%×(患病動物血細胞比容/品種血細胞比容)]/校正指數(shù)品種血細胞比容=45%(犬),35%(貓)校正指數(shù):PCV>35%=1;PCV25~35%=1.5;PCV15~25%=2;PCV<15%=2.再生性和非再生性貧血的鑒別紅細胞計數(shù)增多紅細胞增多的表現(xiàn):外周血液中RBC增多PCV升高HGB增加紅細胞分類和影響因素相對增多脫水脾臟收縮絕對增多原發(fā)性增多繼發(fā)性增多品種和地理位置的影響海拔品種紅細胞增多脫水相對增多脾收縮紅細胞增多原發(fā)性絕對增多繼發(fā)性缺氧EPO分泌過多白細胞的評價白細胞5分類WBC/白細胞無粒白細胞粒性白細胞淋巴細胞單核細胞嗜中性粒細胞嗜堿性粒細胞嗜酸性粒細胞白細胞計數(shù)及分類計數(shù)的臨床意義:1.白細胞數(shù)量的變化:(1)生理變化:年齡、時間、環(huán)境、身體狀況等(2)病理變化:主要受中性粒細胞等各類細胞數(shù)量的影響炎癥性嗜中性粒細胞增多感染細菌真菌病毒組織壞死無菌性炎癥典型類固醇血像 常見于犬成熟嗜中性粒細胞增多(2-4倍)淋巴細胞減少嗜酸性粒細胞減少單核細胞增多嗜中性粒細胞增多癥其它 愛爾蘭賽特犬白細胞粘附缺陷 雌激素:注射后2-3周嗜中性粒細胞增多癥炎癥粒細胞再生不良內(nèi)毒素血癥無效粒細胞生成外周破壞周期性生血嗜中性粒細胞減少癥周期性造血灰柯利一種血液遺傳病,影響干細胞11-14天一個周期,干細胞分別向嗜中、紅細胞、血小板、單核細胞分化患犬6月齡出現(xiàn)反復(fù)感染嗜中性粒細胞減少癥外周血常見的白細胞形態(tài)異常:核象變化:
核左移(hyposegmentation)核右移(hypersegmentation)左移分類按出現(xiàn)幼稚細胞種類分輕度(桿狀)中度(桿狀+晚幼)重度(桿狀+晚幼+中幼)按未分葉嗜中性粒細胞數(shù)分輕度<1000/ul中度1000-10000/ul重度>10000/ul嗜酸性粒細胞功能過敏原與肥大細胞上IgE結(jié)合時,肥大細胞發(fā)生脫粒并釋放能吸引嗜酸性粒細胞的組織胺具有一定的吞噬作用和殺菌活性嗜酸性粒細胞將IgG或者補體與蟲體表面結(jié)合,從而殺死蟲體★嗜酸性粒細胞
增多(eosinophilia):
過敏性疾病
寄生蟲病
皮膚病
血液病及某些惡性腫瘤
★淋巴細胞1)增多(lymphocytosis):
感染性疾病
淋巴細胞性惡性疾病
其他:免疫性疾病、急性傳染病恢復(fù)期
相對增多2)減少(lymphocytopenia):
相對減少
絕對減少(接觸放射線、應(yīng)用腎上腺皮質(zhì)激素、某些藥物、免疫缺陷性疾病等)淋巴細胞外周血液淋巴細胞起源于骨髓或胸腺循環(huán)路線為從血液到淋巴結(jié)再到淋巴液,最后返回血液能重復(fù)循環(huán)的淋巴細胞壽命較長,一般能存活數(shù)月至數(shù)年功能免疫細胞 體液免疫(B) 細胞免疫(T)外周血液淋巴細胞是免疫系統(tǒng)的記憶細胞 重復(fù)循環(huán)時密切監(jiān)測先前激活他們的抗原 當接觸抗原后,選擇性克隆擴增來激發(fā)機體的細胞免疫應(yīng)答 和體液免疫應(yīng)答血小板的評價生成血小板來源于骨髓內(nèi)的巨核細胞促血小板生成素可促進血小板的生成促血小板生成素是由血小板和巨核細胞消除的。生理巨核細胞的成熟時間為2-10天。血小板量受血小板生成、消耗、破壞和轉(zhuǎn)移的速度的影響。血小板的消耗是持續(xù)性的,如果其數(shù)量減少,平均壽命就會減少。貓的血小板容易結(jié)成團塊??刂蒲“鍓勖囊蛩夭磺澹赡芘c脾有關(guān)犬三分之二到四分之三的血小板都存在于全身循環(huán)1000×視野(油鏡)下觀察到10-12個血小板屬正常計數(shù)功能維持血管的完整性修復(fù)損傷的內(nèi)皮內(nèi)皮的損傷暴露時,血小板就會粘附在膠原纖維上血小板釋放復(fù)合胺、組胺至血液中,促進血小板繼續(xù)粘附形成血小板栓血栓收縮(粘性變形)破壞犬貓血小板在血管內(nèi)的壽命一般在3-7天衰老的血小板被單核吞噬系統(tǒng)內(nèi)的巨噬細胞吞噬MPV的臨床意義:反映血小板的成熟度
與PLT結(jié)合分析鑒別血小板數(shù)量異常的原因:PLT↓MPV↑
表示血小板減少是周圍血的原因PLT↓MPV↓
表示骨髓增生障礙PLT↓MPVN
表示血小板分布異常PLT↑MPV↑
表示反應(yīng)性血小板增加PLT↑MPV↓
表示病變來至于骨髓病情判斷:(1)動態(tài)觀察:MPV增加,表示骨髓造血功能開始恢復(fù);MPV持續(xù)下降,表示造血功能抑制更嚴重。(2)比較觀察:MPV越低,越不易止血,越易出血。
(3)血栓前狀態(tài)或血栓性疾病時MPV增加。影響血常規(guī)結(jié)果的因素(1)合適的采血方法(2)合適的抗凝劑(3)合適的方法儲存血樣(4)合適的時間開始檢測(5)采血量是否充足合適的采血方法采血費時長,針頭在皮下移動時刺入靜脈或皮下組織,血細胞就容易聚集。一旦血小板團塊形成,想要使之徹底離散是非常困難的。加入溶血素后,血小板團塊的大小和小白細胞的體積一致。標本的抗凝
用于血常規(guī)檢驗的血樣必須經(jīng)抗凝劑抗凝處理,在目前的眾多抗凝劑中,EDTA鹽(EDTA-Na2,EDTA-K2,EDTA-K3)是對白細胞形態(tài)和血小板影響相對較小的抗凝劑,最適合用于血常規(guī)檢驗。除采血因素的影響(生理性因素、采血部位等)外,多數(shù)情況下,血樣的質(zhì)量取決于血液和抗凝劑的比例。血液比例過高時,由于抗凝劑相對不足,血漿中出現(xiàn)微凝血塊的可能性增加,在用于血細胞分析儀時,微凝血塊可能阻塞儀器,同時影響一些檢驗指標。血液比例過低,抗凝劑相對過剩,對檢驗指標會造成嚴重影響。血液經(jīng)EDTA抗凝后,白細胞的形態(tài)會發(fā)生改變,這種改變和時間及EDTA濃度有關(guān)。EDTA的最佳濃度(與血液比)為1.5mg/ml,如果血樣少,EDTA的濃度達到2.5mg/ml,中性粒細胞腫脹、分葉消失,血小板腫脹、崩解、產(chǎn)生正常血小板大小的碎片,這些改變都會使血常規(guī)檢驗和血細胞計數(shù)得出錯誤結(jié)果。這一點在用自動血細胞分析儀時尤為重要。
靜脈血和末梢血均可經(jīng)抗凝劑抗凝成全血標本(標本中不含稀釋液,或?qū)吮驹斐傻南♂尩挠绊憳O?。@而易見,末梢血抗凝標本要達到合適的血液和抗凝劑的比例是非常困難的。因此,多數(shù)專家建議,在制備全血比例是非常困難的。因此,多數(shù)專家建議血管采集靜脈血。無論鏡檢或是使用血液細胞分析儀,由于絕大多數(shù)的對標本稀釋的稀釋液中含有抗凝劑,在一定量的稀釋液中可直接加入微量靜脈血或末梢血液(10-40μl)即可制備成通常所說的預(yù)稀釋標本。多數(shù)情況下,預(yù)稀釋標本的制備適用于末梢血的血樣。
標本的儲存
抗凝劑因時間和濃度的不同,會造成對血細胞形態(tài)的影響。有研究表明,用EDTA抗凝靜脈血標本,在標本收集后的5分鐘內(nèi)或30分鐘后,8小時內(nèi)(室溫)檢測,可以得到最佳的檢測結(jié)果。如果不需要血小板和白細胞分類的準確數(shù)據(jù),則標本可以在2℃-8℃的條件下存入至24小時。預(yù)稀釋標本一般需要在標本制備后10分鐘內(nèi)予以測量;如果稀釋液中添加細胞穩(wěn)定劑,預(yù)稀釋標本的存放時間也不可超過4小時??傊?,影響血常規(guī)檢驗結(jié)果的因素很多,要想取得準確的檢驗數(shù)據(jù),就要在實驗的每一個步驟中都嚴格按照操作規(guī)程進行。直方圖解讀血細胞直方圖是一種細胞體積分布圖。用DC(直流電阻抗)檢測方法測量細胞體積。根據(jù)血液中細胞體積的分布,將它分為3個類型(白細胞、紅細胞和血小板)異常直方圖的解讀
實例1:實例2:分析:實例3:分析:實例4:分析:
注意:由于形成的緡錢狀紅細胞(經(jīng)??稍谪埖难獦又锌匆姡┰诜治鰞x上稀釋時可完全解離,將不會影響測量結(jié)果。實例5:
分析:此標本可看到散在的5-20個血小板團塊。由于這些團塊的存在,直方圖上交叉點和PU升高。另外紅細胞破裂產(chǎn)生的碎片、巨血小板癥也可導致PU報警
實例6:白細胞直方圖上陰影區(qū)顯示有顆粒聚集。直方圖上的分布曲線與陰影區(qū)和小白細胞區(qū)的分界線的交叉點抬高,提示血小板聚集。白細胞直方圖的分布寬度不正常地寬提示白細胞聚集或未成熟的白細胞增多。
WL:可能的原因紅細胞不完全溶血、出現(xiàn)有核紅細胞、大血小板增加、血小板聚集、纖維蛋白沉淀和存在冷沉淀蛋白
WU:可能的原因紅細胞不完全溶血、存在不成熟白細胞、白細胞聚集、血小板衛(wèi)星現(xiàn)象實例7:紅細胞直方圖上的分布曲線與血小板和紅細胞的分界線的交叉點抬高,提示紅細胞碎片存在等。紅細胞直方圖的分布寬度不正常地寬。同時,紅細胞直方圖上出現(xiàn)多個峰,提示紅細胞聚集等。RL:可能的原因存在紅細胞碎片、大體積血小板增加、血小板聚集、存在小紅細胞RU:可能的原因》
紅細胞冷凝集作用、包含小-白細胞
實例8:在血小板直方圖上,分布曲線和PL的交叉點位于不正常的高點。微血小板、存在冷沉淀蛋白等在血小板直方圖上,分布曲線和PU的交叉點抬高。出現(xiàn)大血小板、RBC碎片、血小板團塊等PL:可能的原因冷沉淀蛋白的作用、紅細胞碎片、白細胞細胞片PU:可能的原因大血小板增加、包含紅細胞碎片、冷沉淀蛋白、血小板團塊、存在小紅細胞CBC臨床病例應(yīng)用病例1:分析:通常,pocH-100iV的測量值在白細胞直方圖上僅有一個峰,但由于淋巴細胞顯著增加,該樣本的直方圖顯示雙峰。血涂片上小成熟淋巴細胞明顯增加,如上邊照片()所示,表示該系細胞增加。盡管此病例顯示有中等度的貧血,但存在晚幼紅和網(wǎng)織紅(),證實這是增生性貧血。
淋巴細胞核小、胞漿無顆粒,定位在小細胞部分(左側(cè))。相應(yīng)的,由CLL引起的淋巴細胞增加的標本,直方圖上小白細胞部分顯示雙峰,其中之一就是淋巴細胞峰。另一方面,含有片段、顆粒和大核的細胞,定位于大細胞部分(右側(cè))。這樣,顆粒細
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