GB/T 18644-2002豬囊尾蚴病診斷技術(shù)

IcS.11.220B41中華人民共和國國家標準GB/T18644一2002豬囊尾蜘病診斷技術(shù)Diagnostictechniquesforcysticercosiscellulosae2002-02-19發(fā)布2002-05-01實施中華人民共；和國發(fā)布國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局

GB/T18644-2002豬囊尾勤病(cysticercosiscellulosae）(俗稱豬囊蟲?。?，是由寄生在人體小腸內(nèi)的豬帶緣蟲（taeniasolium)的幼蟲(cysticercuscellulosae)所引起的,是一種危害嚴重的人獸互源性寄生蟲病。世界動物衛(wèi)生組織WorldOrganizationforAnimalHealth(英),OfficeintentionaldesEpizootic(法).〇IE將該病列為B類疾病。目前,該病還廣泛存在于發(fā)展中國家，不僅嚴重地影響著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，造成巨大的經(jīng)濟損失.而且還威脅著人類身體健康.乃至生命。因此，1993年聯(lián)合國衛(wèi)生組織將該病列為需要根除的六大疾病之-褚囊尾蜴病多不表現(xiàn)臨床癥狀。目前，該病的檢疫方法有舌檢查法和免疫學(xué)檢查法。前者僅適用于舌上寄生（27%～30%)的病豬。后者包括皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)、炭粒凝集試驗、間接紅細胞凝集試驗、補體結(jié)合反應(yīng)、瓊脂擴散試驗、免疫電泳和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)等等。其中.ELISA法具有高敏感性和特異性·是最常用的一種方法。本標準從病原分離、鑒定和血清學(xué)(ELISA方法)兩方面規(guī)定了豬囊尾蜘病檢查方法，結(jié)果更為可靠本標準規(guī)定的ELISA法，適用于感染豬的定性，最早可以檢出感染9天的囊尾勤病豬。也適用于免疫豬群抗體水平的評估。本標準的附錄A為標準的附錄本標準由中華人民共和國農(nóng)業(yè)部提出。本標準由全國動物檢疫標準化技術(shù)委員會歸口本標準起草單位：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)。本標準主要起草人：韓宇、姜秀云、趙權(quán)

中華人民共和國國家標準豬囊尾蜘病診斷技術(shù)GB/T18644-2002Diagnostictechniquesforcysticercosiscellulosae1范圍本標準規(guī)定了豬囊尾勤病的病原分離與鑒定和酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)兩種診斷技術(shù)，本標準適用于豬囊尾勤病的診斷和流行病學(xué)調(diào)查以及檢疫病原分離與鑒定2.1病原分離2.1.1樣品采集采集豬的咬肌、舌肌、內(nèi)腰肌、隔肌、肋間肌、肩腫肌等·亦可采集腦、心臟、肝臟、肺臟等.2.1.2樣品分離成熟的豬囊尾勤為長楠圓形(6mm～10mm)×5mm],半透明的囊壁內(nèi)充滿液體,上有一個委粒大小的白色小結(jié)節(jié)即為頭節(jié)(scolex)和頸節(jié)(neck)。腦內(nèi)寄生的則為圓球形8mm～10mm。將上述任何部位的囊尾勤，以手術(shù)刀和攝子剝離后，以生理鹽水洗凈,并用濾紙吸干。2.2病原鑒定2.2.1分離樣品的壓片制備以剪刀剪開囊壁，取出完整的頭節(jié)，再以濾紙吸干囊液后，將其置于兩張載玻片之間并壓片,于兩張載玻片間加入1～2滴生理鹽水后置于顯微鏡下鏡檢2.2.2鏡檢以低倍(物鏡8倍、目鏡5倍)觀察囊尾勤頭節(jié)的完整性2.2.3結(jié)果判定低倍鏡檢，可見到頭節(jié)的頂部有頂突，頂突上有內(nèi)外兩圈排列整齊的小鉤，頂突的稍下方有四個均等的圓盤狀吸盤·即判為豬囊尾勤。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）3.1材料準備3.1.1器材ELISA反應(yīng)板、酶聯(lián)免疫檢測儀、加樣器、洗瓶、10cm×lcm普通濾紙條等3.1.2試劑豬囊尾勤層析抗原、葡萄球菌A蛋白(SPA)辣根過氧化物酶(HRP)標記物(HRP-SPA)、豬囊尾蜘標準陰性和陽性全血濾紙片等。3.1.3被檢豬全血血片將10cmX1cm普通濾紙條的一端標記被檢豬號碼,另一端吸取被檢豬任何部位血液