免疫學檢驗教學大綱

《免疫學檢驗》教學大綱課程編碼：課程名稱：免疫學檢驗英文名稱：detection開課學期：7學時學分：40/2.5課程類型：專業(yè)課開課專業(yè)：預防醫(yī)學專業(yè)選用教材免疫學檢驗》人民衛(wèi)生出版社2006年8月第一版主要參考書1.《免疫學檢驗》呂世靜主編人民衛(wèi)生出版社20032第22.《臨床免疫學和免疫檢驗》王蘭蘭主編20041月第33.《簡明免疫學技術》正美主編科學出版社2002年7第14.《免疫學常用實驗技術》柳忠輝主編科學出版社執(zhí)筆人：黎明蘭課程性質、目的與任務免疫學檢驗是研究免疫學技術在醫(yī)學領域中應用的一門學科預防醫(yī)學專業(yè)（衛(wèi)生檢驗方向）一門重要的專業(yè)課。免疫學檢測技術因其特異性強、敏感性高、穩(wěn)定、簡便和快速的優(yōu)勢，現(xiàn)已廣泛應用于生物學、臨床醫(yī)學、預防醫(yī)學及其他有關領域。通過對該課程的學習，掌握各類免疫學檢驗技術的原理、類型、技術要點、實際應用及方法學評價，更好的為防病治病服務。教學基本要求掌握免疫學檢驗常用技術的原理、技術要點、應用及方法學評價。掌握免疫學檢驗常用技術的測定方法。掌握免疫學技術在免疫預防計劃免疫、動植物檢疫、健康相關產(chǎn)品免疫功能評價中的應用。了解免疫學技術的最新進展及與其他學科的關系。各章節(jié)內容及學時分配抗原抗體的純化（2學時）教學目的與要求掌握抗原和抗體純化方法的基本原理方法評價和應用了解抗原抗體各種純化方法的程序及分離物的選擇。教學內容鹽析法原理常用中性鹽操作步驟影響因素方法評價與應用凝膠層析法原理常用凝膠的種類和性質操作步驟方法評價與應用離子交換層析原理常用離子交換劑的種類和性質離子交換層析的程序方法評價與應用親和層析法原理親和層析載體與配基的選擇層析條件的選擇方法評價與應用考核要求：了解蛋白質提純方法的程序及條件掌握蛋白質提純方法的原理第二章免疫原與特異性抗體的制備（學時）教學目的及要求：掌握人工免疫原的制備方法，免疫血清的制備方法，雜交瘤技術的原理及技術要點。了解可溶性抗原的制備方法及單克隆抗體制備流程及應用。教學內容：第一節(jié)免疫原的制備顆粒性抗原的制備可溶性抗原的制備人工免疫原的制備及佐劑第二節(jié)免疫血清的制備免疫動物的選擇確定免疫方案動物采血法免疫血清的分離與保存第三節(jié)單克隆抗體的制備雜交瘤技術的基本原理單克隆抗體的制備要求單克隆抗體的應用考核要求：了解：1.顆粒性抗原、可溶性抗原的制備方法2.單克隆抗體的制備流程掌握：1.人工免疫原的制備2.免疫血清的制備方法第三章沉淀反應與凝集反應（學時）教學目的及要求：掌握常用沉淀反應和凝集反應的原理及應用了解其他凝集技術類型原理和應用。教學內容：沉淀反應免疫濃度測定雙向瓊脂擴散試驗免疫電泳技術凝集反應直接凝集反應間接凝集反應其他凝集技術考核要求：了解：免疫濃度測定，其他凝集技術的原理及應用。掌握：雙向瓊脂擴散試驗、雙免疫電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、間接血凝試驗的原理及應用。第四章溶血反應和補體結合試驗教學目的與要求：掌握溶血反應體系及檢測方法了解補體結合試驗的原理類型方法和評價。教學內容：溶血反應溶血反應的檢測試驗血清總補體溶血（）測定。補體結合試驗類型與原理試驗方法及影響因素方法的評價和應用考核要求：了解：補體結合試驗的類型、原理、方法評價及應用。掌握：血清總補體溶血（）測定。酶免疫技術（2學時）教學目的及要求：掌握固相酶免疫測定的方法類型及原理ELISA技術要點了解其他酶免疫技術及應用。教學內容：酶免疫技術的分類固相酶免疫測定基本原理方法類型和操作步驟ELISA技術要點試劑準備酶標記方法酶標記物的純化與鑒定最適工作濃度的選擇其他酶免疫技術斑點-酶聯(lián)免疫吸附試驗斑點酶免疫滲濾試驗免疫印記法考核要求：了解：其他酶免疫技術的原理及應用掌握：1.雙抗體夾心法和間接法的原理2.ELISA法的技術要點熒光免疫技術（1學時）教學目的及要求：掌握熒光抗體技術的原理技術方法及應用了解熒光抗體的制備方法及熒光免疫顯微技術。教學內容：熒光現(xiàn)象熒光抗體技術基本原理熒光抗體技術方法熒光抗體的制備熒光免疫顯微技術應用考核要求：了解：熒光抗體的制備及熒光免疫顯微技術掌握：熒光抗體技術的基本原理及技術方法。放射免疫技術（1學時）教學目的與要求：掌握放射免疫測定的原理、方法、評價及應用。了解免疫放射測定試驗。教學內容：放射免疫測定原理測定方法方法評價應用免疫放射測定原理技術類型技術要點考核要點：了解：免疫放射測定的原理、技術類型及技術要點。掌握：放射免疫測定的原理、測定方法及應用。金免疫技術（2學時）教學目的及要求：掌握金免疫測定技術的原理技術類型及應用了解膠體金和免疫金的特性與制備。了解金免疫組化技術的方法。教學內容：膠體金與免疫金的制備膠體金的特性及其制備免疫金的特性及其制備金免疫測定技術斑點金免疫滲濾試驗斑點金免疫層析試驗金免疫組織化學技術免疫金光鏡染色技術免疫金電鏡染色技術考核要求：了解：1.膠體金、免疫金的特性及制備方法。2.免疫金（銀）光鏡染色技術的原理及方法。掌握：斑點金免疫滲濾試驗與斑點金免疫層析試驗的原理、技術類型及方法。免疫細胞檢測技術（3學時）教學目的與要求：掌握免疫細胞分離純化技術及評價免疫功能的相關試驗原理、方法、結果判定。教學內容：第一節(jié)免疫細胞的分離與純化血液標本的采集外周血液中白細胞的分離外周血液中單個核細胞的分離淋巴細胞及其亞群的分離純化吞噬細胞的分離淋巴細胞的保存及活力測定。第二節(jié)T淋巴細胞的檢測T淋巴細胞表面標志的檢測T淋巴細胞受體的檢測T淋巴細胞功能的檢測B巴細胞的檢測B巴細胞表面抗原的檢測B巴細胞表面受體的檢測B巴細胞功能的體外檢測自然殺傷細胞的檢測概述NK細胞活性檢測測定NK細胞活性的衛(wèi)生學意義吞噬細胞功能的檢測巨噬細胞吞噬功能的檢測巨噬細胞吞噬功能檢測的衛(wèi)生學意義考核要求：了解：1.了解T淋巴細胞表面標志的測方法及衛(wèi)生學意義的評價。了解T淋巴細胞受體和IL-2受體的檢測方法。了解B巴細胞受體及受體的檢測方法。掌握：1.外周血液中單個核細胞、淋巴細胞及亞群分離純化方法，淋巴細胞保存及活力測定方法。T淋巴細胞功能檢測方法。B巴細胞功能檢測的體外實驗。NK細胞活性檢測方法及衛(wèi)生學意義。噬細胞功能的檢測方法及衛(wèi)生學意義。免疫球蛋白測定（1學時）教學目的及要求：掌握免疫球蛋白定量測定的方法參考值及應用評價解免疫球蛋白定量的醫(yī)學意義。教學內容：免疫球蛋白定量的檢測方法常用檢測方法。參考值免疫球蛋白定量檢測方法學評價及應用免疫球蛋白定量臨床意義血清定量臨床意義。尿微量定量臨床意義。腦脊液定量臨床意義?？己艘螅毫私猓貉錓g、尿微量、腦脊液Ig量檢測的臨床意義。掌握：免疫球蛋白定量檢測方法及參考值，方法評價及應用。第十一章動植物病原體的免疫學檢驗（學時）教學目的與要求：掌握常見動植物疫病的免疫學檢測方法。了解進出口商品檢疫的新進展。教學內容：動物病原體的免疫學檢驗炭疽的免疫學檢驗鼻疽的免疫學檢驗口蹄疫的免疫學檢驗布魯氏病的免疫學檢驗狂犬病的免疫學檢驗瘋牛病的免疫學檢驗禽流感的免疫學檢驗植物病原體的免疫學檢驗植物細菌的免疫學檢驗植物真菌的免疫學檢驗植物病毒的免疫學檢驗考核要求：了解：植物病原體的免疫學檢驗方法。掌握：動物病原體的免疫學檢驗方法。第十二章健康相關產(chǎn)品的免疫學檢驗（學時）教學目的與要求：掌握保健食品免疫學檢驗方法和評價標準及化妝品的免疫學檢驗方法解健康相關產(chǎn)品中有毒有害物質免疫學檢驗方法及新進展。教學內容：有毒有害物質的免疫學檢驗有毒有害物質免疫學檢驗的技術要點。有毒有害物質免疫學檢測方法。有毒有害物質免疫學檢測方法的應用?；瘖y品的免疫學檢驗保健食品免疫學檢驗和評價免疫學檢驗項目免疫學檢驗方法增強免疫功能結果判定與評價。考核要求：了解：有毒有害物質的免疫學檢驗的技術要點、方法和應用。掌握：保健食品免疫學檢驗項目、檢驗方法、結果判定及標價標準。免疫學檢驗實驗課教學大綱一、實驗目的與任務免疫學檢驗實驗課的教學目的是使學生掌握諸項試驗的原理、基本要求、操作步驟，正確分析實驗結果、了解各種影響因素以及在衛(wèi)生檢驗工作中的應用。通過實驗課教學，培養(yǎng)學生認真、嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度和實際動手操作能力，以適應檢驗工作的需要。二、實驗教學基本要求掌握免疫學檢驗諸項試驗的原理掌握諸試驗各種液體的配制方法掌握必做實驗的操作步驟、結果判定及影響因素。了解諸項試驗所需的儀器設備。三、實驗教材或指導書《免疫學檢驗實習指導》人民衛(wèi)生出版社2006年8月第一版五、實驗項目一覽表序號

實驗項目

內容提要

實驗類型

學時分配

主要儀器設備

實驗地點

備注

免疫球蛋白的分離純化免疫球蛋白的分離純化

鹽析法血清中的免疫球蛋白粗提凝膠過濾層析分不

層析柱同分子量大小的抗原）

一組（每學

雙向瓊脂擴散

鑒定抗原和

綜合性

期選取抗體純度的定性分析

個實驗項目）

聚丙烯酰胺凝膠電泳

分離鑒定血清中各類蛋

電泳儀、圓盤電泳槽白質

酶聯(lián)免疫吸附實驗

雙抗體夾心法檢驗未知抗原

酶標儀、微量加樣器、酶標測定板

免疫金（銀）染色實驗

免疫金標記抗體及檢測抗原

超速離心機、顯微鏡、溫箱、分光光度計

保健食品免疫功能評價，包括：血清補體總活性測定

測定血清總補體活性測定淋巴細胞增殖數(shù)量

孔培養(yǎng)板