人過(guò)氧化物酶pod說(shuō)明書

書--谷研生物公司銷售本試劑 研究使用檢測(cè)范圍5U/L-120使用目的

本試劑盒用于測(cè)定人、血漿及相關(guān)液體樣本中過(guò)氧化物酶（POD）含量。本試劑盒應(yīng)抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人過(guò)氧化物酶（POD）水平。用純化的人過(guò)氧（POD），再與HRP標(biāo)記的過(guò)氧化物酶（POD）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的過(guò)氧化物酶（POD）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人過(guò)氧化物酶（POD）濃度。試劑盒組130倍濃縮洗滌20ml×17終止6ml×12酶標(biāo)試6ml×18標(biāo)準(zhǔn)品（2400.5ml×13酶標(biāo)包被12孔×89標(biāo)準(zhǔn)品稀釋1.5ml×146ml×1說(shuō)明1顯色劑A顯色劑B液

6ml×16ml×1/

封板 2密封 1標(biāo)本后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性操作步 釋5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)150μl5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋

3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)

150μl4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋150μl3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋150μl2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔50μl然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備洗滌：揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如重復(fù)5次，拍干加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外溫育：操作同3洗滌：操作同5A50μlB50μl，輕輕震蕩混勻，3715分鐘終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。操作程序總結(jié)計(jì)以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)封板膜只限使用，以避免交叉污染底物請(qǐng)避光保存嚴(yán)格