合成鹽酸普魯卡因的純檢查

合成鹽酸普魯卡因的純度檢查2鹽酸普魯卡因化學名為4-氨基苯甲酸-2-(二乙氨基)乙酯鹽酸鹽，屬于芳酸酯類局麻藥。麻醉強度強，毒性小約、穿透力強、作用迅速、持久，臨床上用于浸潤麻醉，硬膜外麻醉和阻滯麻醉。藥物介紹3

雜質來源之一，酯化不完全的對硝基苯甲酸經還原產生PABAprocaine水解產生PABA藥化合成路線直接酯化法合成過程原料殘留，反應進行不充分，生成各種雜質主要雜質——對氨基苯甲酸44來源對硝基苯甲酸的還原鹽酸普魯卡因的水解鹽酸普魯卡因水溶液不穩(wěn)定，PH值及溫度是影響水解的主要因素。5測定方法介紹薄層色譜法——2005版藥典HPLC法——文獻6薄層色譜法薄層板：羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠H

薄層板展開劑：苯-冰醋酸-丙酮-甲醇（14:1:1:4）顯色劑：對二甲氨基苯甲醛溶液限度：檢測鹽酸普魯卡因中的PABA的限

度不得超過1.2%7重現性好分離度好快速準確靈敏HPLC法

文獻一1

文獻二2

文獻三3該法可以同時對鹽酸普魯卡因合成品中主成分鹽酸普魯卡因和雜質對氨基苯甲酸含量進行測定，以峰面積計算PABA含量8文獻一色譜柱：

ThermoHypersilCl8（4.6mm

×250mm，5m）；流動相：水-乙腈-三乙胺（85:1:0.02），用冰乙酸調節(jié)pH3.9；檢測波長：UV286nm；流速：1ml/min；進樣體積：20μl。條件選擇依據鹽酸普魯卡因水溶液不穩(wěn)定，pH值>6或遇高溫易水解，故選擇流動相的pH值為3.9。由于制劑中要求含對氨基苯甲酸的量小于1.2％，即與鹽酸普魯卡因相比較含量相差較大，為提高對氨基苯甲酸的響應信號，滿足準確度、靈敏度的要求，故選擇PABA的最大吸收波長286nm為檢測波長。在該色譜條件下，對氨基苯甲酸和鹽酸普魯卡因達到良好分離的保留時間為：7.02和8.85min。9色譜柱：Luna5μC18柱流動相：甲醇-緩沖液（23:77）

（0.05mol/L磷酸二氫鉀，pH3.0，0.1%庚烷磺酸鈉）檢測波長：UV287nm；流速：1.5ml/min；進樣體積：20μl。柱溫：35℃10文獻二條件選擇依據流動相選擇：經試驗，采用多種比例的甲醇-水作為流動相，結果PABA與普魯卡因的分離度不好，采用離子對試劑，峰形及分離度得到改善。該條件下，鹽酸普魯卡因與PABA的分離度滿意，PABA出峰時間約2.7min，普魯卡因約10min。1112色譜柱：Nova-PakCl8（150mm×4.0mm，4m）流動相：甲醇-10mmol/LNaH2PO4溶液（pH6.48，2mmol/L三乙胺）（30:70，V/V）檢測波長：UV287nm；流速：

0.7ml/min柱溫：

30℃進樣量：10μl文獻三條件選擇依據流動相中采用NaH2PO4

緩沖液，使峰型和分離度較好，加入一定量三乙胺使原來峰型拖尾現象得到改善，并用磷酸調節(jié)pH6.48，可以更好保護柱子。該條件下，PABA出峰時間約

2.7min，普魯卡因10min，PABA與普魯卡因的分離度符合要求。13色譜柱流動相流速檢測波長ThermoHypersilCl8（4.6mm

×250mm，5m）水-乙腈-三乙胺（85:1:0.02），用冰乙酸調節(jié)pH3.91ml/minUV286Luna5μC18柱甲醇-緩沖液（0.05mol/L磷酸二氫鉀，pH3.0，0.1%庚烷磺酸鈉）（23:77）1.5ml/minUV287Nova-PakCl8（150mm×4.0mm，4m）甲醇-10mmol/LNaH2PO4溶液（pH6.48，2mmol/L三乙胺）（30:70）0.7ml/minUV287AgilentEclipseXDB-C18（4.6×150mm5μm）甲醇-15mmol/LNaH2PO4（0.1%三乙胺、醋酸調pH至3.31）（30：70，V/V）1ml/minUV28714總結采用面積歸一化法進行定量。實驗擬定的色譜條件15溶液的配制

精密稱取普魯卡因樣品0.015g甲醇與水混合液溶解5.0mg/mL稀釋為0.50mg/mL的樣品溶液

微孔濾膜濾過。16理論塔板數均大于2000分離度大于1.5拖尾因子應在之間峰面積的相對標準偏差不大于2.0%分離度理論塔板數拖尾因子精密度藥典系統(tǒng)適應性要求17精密度試驗取10μl樣品溶液，按所選的色譜條件進樣，記錄色譜圖，如分離度、理論板數、拖尾因子符合要求，則進行精密度試驗以進一步考察方法。同一樣品溶液連續(xù)進樣6次，測定普魯卡因峰面積，計算峰面積的相對標準偏差溶劑峰面積測定樣品峰面積測定面積歸一化法計算含量18樣品測定改進方法拖尾嚴重峰展寬出峰過快，分離度低必要時恒定柱溫，也可考慮采用離子對試劑。19調整三乙胺的量，也可改變有機相和水的比例增加柱溫降低流動相PH，提高緩沖鹽溶度參考文獻中國藥典.國家藥典委員會編.2005年版，二部：581.郭宗儒．藥物化學．第二版．北京：高等教育出版社．2005：163-164．李發(fā)美.分析化學.人民衛(wèi)生出版社.2003，第五版:411.MeredithL.Storms，JamesT.Stewart.Stability-indicatingHPLCassaysforthedeterminationofprilocaineandprocainedrugcombinations.JournalofPharmaceuticalandBiomedicalAnalysis.2002，30：49-58.MugunthuR.Dhananjeyan.CrystalBykowski，et.Simultaneousdeterminationofprocaineandpara-aminobenzoicacidbyLC–MS/MSmethod.JournalofchromatographyB.2007，847:224-23020劉群，阮健，徐阿妮.高效液相色譜法測定鹽酸普魯卡因注射液的含量和對氨基苯甲酸的限量.中國醫(yī)院藥學雜志.2004，24（4）：252-253.苗惠珠，劉玉波，張雷.HPLC法測定鹽酸普魯卡因注射液中分解產物對氨基苯甲酸含量.解放軍藥學學報.2000，16（6）：323-324.祝清蘭，李方實.普魯卡因分析方法的研究進展.2004，19（1）：5