《菊花的組織培養(yǎng)》課件新人教選修

課題1菊花的組織培養(yǎng)通過必修課的學習，我們已經了解到大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那么，有沒有不用種子來培育植物的方法呢？組織培養(yǎng)營養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條

扦插嫁接壓條

課題目標說明植物組織培養(yǎng)的基本原理，學習植物組織培養(yǎng)的基本技術，進行菊花或其他植物的組織培養(yǎng)。課題重點與難點課題重點：植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術。課題難點：植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術。植物組織培養(yǎng)是二十世紀發(fā)展起來的新技術，近三十年來由于組織培養(yǎng)基礎理論研究的深入，發(fā)展極為迅速，發(fā)表的文獻浩如煙海，幾乎以植物為研究對象的各個分支學科都在廣泛進行組織培養(yǎng)。植物組織培養(yǎng)簡介發(fā)展簡史1838-1839年，德國科學家Schleide和Schwann發(fā)表了細胞學說，奠定了組織培養(yǎng)的理論基礎。

1902年，德國植物學家Haberlandt根據(jù)細胞學說，提出單個細胞的植物細胞全能性（totipotency）理論。

1904年，Hanning最先成功地培養(yǎng)了蘿卜和辣根菜的胚。

1922年，Knudson采用胚培養(yǎng)法獲得大量蘭花幼苗。

1934年，White用番茄根尖建立起第一個活躍生長的無性繁殖系，從而使非胚器官的培養(yǎng)首先獲得成功。

1958年，英國科學家Steward等用胡蘿卜根的愈傷組織細胞進行懸浮培養(yǎng)，成功誘導出胚狀體并分化為完整的小植株，不但使細胞全能性理論得到證實，而且為組織培養(yǎng)的技術程序奠定了基礎。

1962年，Murashinge和Skoog在煙草培養(yǎng)中篩選出至今仍被廣泛使用的MS培養(yǎng)基。

1964-1966年，印度科學家Guha和Maheswari在曼陀羅花藥培養(yǎng)中首次由花粉誘導得到了單倍體植株。

1972年，Carlson通過兩個種的煙草原生質體融合培養(yǎng)，獲得了第一個體細胞雜交的雜種植株?！?/p>

外植體滅菌與接種操作是指在人工培養(yǎng)基上，離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細胞和原生質體，并使其生長、增殖、分化以及再生植株的技術。組織培養(yǎng)1、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？植物細胞具有全能性，即生物體的細胞，具有使后代細胞形成完整個體的能力。思考：（一）植物組織培養(yǎng)的基本過程

基礎知識離體的植物器官、組織、細胞脫分化愈傷組織再分化根或芽植物體2、植物組織培養(yǎng)的基本過程愈傷組織植物組織培養(yǎng)過程示意圖上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的？沒有進行滅菌處理，試管也沒有做密封等。1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔組織培養(yǎng)污染的主要途徑及怎樣預防污染？3、污染的的預防措施施（一）防止止外植體帶帶菌（二）保證證培養(yǎng)基及及接種器具具徹底滅菌菌（三）操作作人員嚴格格遵守無菌菌操作規(guī)程程（四）保證證接種與培培養(yǎng)環(huán)境清清潔1、植物學學家將胡蘿蘿卜的韌皮皮部細胞分分離出來，，將單個細細胞放在特特定的培養(yǎng)養(yǎng)基中培養(yǎng)養(yǎng)，獲得了了許多完整整的植株，，這些植株株的特點是是()Ａ.彼此性性狀極為相相似 Ｂ.都是單倍倍體植株Ｃ.植株的的變異頻率率較高ＤＤ.都是純純合體植株株2、根據(jù)分分裂潛能，，干細胞可可分為全能能干細胞（（可發(fā)育成成完整的個個體）、多多能干細胞胞（可發(fā)育育成多種組組織和器官官）和專能能干細胞（（發(fā)育成專專門的組織織和器官）），則這些些細胞在個個體發(fā)育中中的分化順順序是()Ａ.全能———專能———多能ＢＢ.全能———多能———專能Ｃ.多能———全能———專能ＤＤ.專能———全能———多能練習習AB（二）影響響植物組織織培養(yǎng)的因因素植物組織織培養(yǎng)條條件含有全部部營養(yǎng)成成分的培培養(yǎng)基、、一定的的溫度、、空氣、、無菌環(huán)環(huán)境、適適合的PH、適適時光照照等。（二）影影響植物物組織培培養(yǎng)的因因素1、外植植體的選選取不同植物物的組織織培養(yǎng)難難度不同同同一種植植物的不不同組織織培養(yǎng)難難度不同同2、培養(yǎng)養(yǎng)基的配配制(MS培養(yǎng)養(yǎng)基)大量元素素：C、、H、O、N、、P、K、Ca、Mg、S微量元素素：B、、Mn、、Cu、、Zn、、Fe、、Mo、、I、Co有機物：：甘氨酸酸、煙酸酸、肌醇醇、維生生素、蔗蔗糖等植物激素素：生長長素、細細胞分裂裂素等3、不同同植物激激素使用用順序和和使用量量4、消毒毒在培養(yǎng)的的整個過過程中，，都需要要是一個個無菌環(huán)環(huán)境原因因：5、pH、溫度度、光照照菊花：pH=5.8溫溫度度控制在在18——22℃℃每日日光照12h植物組織織培養(yǎng)用用的培養(yǎng)養(yǎng)基，含含有植物物生長發(fā)發(fā)育所需需要的各各種營養(yǎng)養(yǎng)物質，，這些營營養(yǎng)物質質同樣為為細菌等等微小的的生物提提供了適適合的營營養(yǎng)。在在這種培培養(yǎng)基上上，細菌菌等微小小的生物物比植物物細胞具具有更強強的新陳陳代謝能能力，它它們比植植物細胞胞生長、、繁殖得得更快，，而且它它們會產產生毒素素，使培培養(yǎng)的植植物細胞胞很快中中毒死亡亡。因此此，植物物組織培培養(yǎng)要想想取得成成功，必必須有效效地防止止細菌等等的污染染，保證證培養(yǎng)材材料、培培養(yǎng)基、、培養(yǎng)用用具完全全無菌。。為了達達到這一一要求，，就要在在植物組組織培養(yǎng)養(yǎng)過程中中進行一一系列的的消毒、、滅菌，，并且要要求無菌菌操作。。MS固體體培養(yǎng)基基成分及及比例P331.你能說說出各種種營養(yǎng)物物質的作作用嗎？？同專題題2中微微生物培培養(yǎng)基的的配方相相比，MS培養(yǎng)養(yǎng)基的配配方有哪哪些明顯顯的不同同？答：微量量元素和和大量元元素提供供植物細細胞生活活所必需需的無機機鹽；蔗蔗糖提供供碳源，，同時能能夠維持持細胞的的滲透壓壓；甘氨氨酸、維維生素等等物質主主要是為為了滿足足離體植植物細胞胞在正常常代謝途途徑受到到一定影影響后所所產生的的特殊營營養(yǎng)需求求。微生物培培養(yǎng)基以以有機營營養(yǎng)為主主。與微微生物的的培養(yǎng)不不同，MS培養(yǎng)養(yǎng)基則需需提供大大量無機機營養(yǎng)，，無機鹽鹽混合物物包括植植物生長長必須的的大量元元素和微微量元素素兩大類類。閱讀課文文，思考考以下問問題2、你認認為組織織培養(yǎng)過過程中，，成功的的關鍵有有哪些？？這些步步驟的適適宜條件件是什么么？組織的脫脫分化及及愈傷組組織的再再分化。。植物組織織培養(yǎng)過過程中，，影響植植物細胞胞脫分化化、再分分化的最最重要因因素是植植物激素素，細胞胞分裂素素與生長長素之間間的濃度度比可以以調控植植株組培培過程中中芽和根根的形成成。激素配比比對組織織培養(yǎng)的的影響生長素與與細胞分分裂素的的比例決決定著發(fā)發(fā)育的方方向，是是愈傷組組織、長長根還是是長芽。。如為了了促進芽芽器官的的分化，，應除去去或降低低生長素素的濃度度，或者者調整培培養(yǎng)基中中生長素素與細胞胞分裂素素的比例例。高利利于根根的形成成生長素/細胞分分裂素適適中促促進愈愈傷組織織的形成成低利利于芽芽的形成成生長素/細胞分裂素高利于根和愈傷組織的形成適中利于根芽的分化制備MS固體培培養(yǎng)基外植體消消毒接種培養(yǎng)養(yǎng)栽培培二、實驗驗操作移栽栽沖洗—酒酒精—無無菌水沖沖洗—氯氯化汞——無菌水水沖洗至至少三次次之上此時的組組織或細細胞為離離體的，，即細胞胞所生活活的環(huán)境境為液體體有機物物營養(yǎng)環(huán)環(huán)境，而而不是能能體現(xiàn)其其整個植植物體的的光能自自養(yǎng)在培養(yǎng)過過程中，，是脫分分化、再再分化的的過程，，隨著芽芽和根的的形成，，就具有有了自養(yǎng)養(yǎng)的能力力，是由由細胞到到一個個個體的演演變過程程1、高等等植物是是光能自自養(yǎng)型生生物，為為什么在在植物組組織培養(yǎng)養(yǎng)過程中中還需要要提供有有機物培培養(yǎng)基？？2、培養(yǎng)養(yǎng)過程中中為什么么需要進進行光照照?思考？1、培養(yǎng)養(yǎng)基的滅滅菌（高高壓蒸汽汽滅菌））2、外植植體的消消毒（酒酒精、氯氯化汞））3、接種種的無菌菌操作（（酒精、、酒精燈燈——灼灼燒）4、無菌菌箱中的的培養(yǎng)；；5、移栽栽到消過過毒的環(huán)環(huán)境中生生存一段段時間。。3、在整整個操作作過程中中，是如如何來實實現(xiàn)無菌菌環(huán)境的的？4.你打打算做幾幾組重復復？你打打算設置置對照實實驗嗎？？答：教師師可以安安排學生生分組，，做不同同的材料料或配方方，最后后分別匯匯報成果果。但每每種材料料或配方方至少要要做一組組以上的的重復。。設置對對照實驗驗可以取取用一個個經過滅滅菌的裝裝有培養(yǎng)養(yǎng)基的錐錐形瓶，，與接種種操作后后的錐形形瓶一同同培養(yǎng)，，用以說說明培養(yǎng)養(yǎng)基制作作合格，，沒有被被雜菌污污染。結果分析析與評價價（一）對對接種操操作中污污染情況況的分析析（二）是否完完成了對植物物組織的脫分分化和再分化化（三）是否進進行了統(tǒng)計、、對照與記錄錄（四）生根苗苗的移栽是否否合格②③練習1、下圖圖是植物組織織培養(yǎng)的簡略略表示。據(jù)此此回答：（1）①表示示__________________，它它能被培養(yǎng)成成為④的根本本原因是_________________。（2）②表示示____________，它與與①相比分化化程度____________，，全能性____________。（3）若想制制成人工種子子，應選用____________。（4）若①是是花藥，則④④是____________，繼繼續(xù)對其使用用____________處理可可獲得____________正正常植株，該該過程稱為____________。（5）若①是是胡蘿卜根尖尖細胞，則培培養(yǎng)成④的葉葉片的顏色為為____________，這說說明____________。（6）若利用用此項技術制制造治療燙傷傷、割傷的藥藥物——紫草草素，培養(yǎng)將將進行到____________。④①脫分化②再分化③離體的植物組組織或器官植物細胞具有有全能性愈傷組織低高③單倍體植株秋水仙素純合體單倍體育種綠色含有表達葉綠綠體的基因②同常規(guī)的無性性繁殖方法相相比，組織培培養(yǎng)快速繁殖殖法主要具有有以下優(yōu)點：：（1）快速。。采用常規(guī)的方方法如分株法法，一棵花卉卉一年一般只只能生產幾株株或幾十株，，但用組織培培養(yǎng)的方法則則每年可以繁繁殖出幾萬甚甚至數(shù)百萬的的小植株。（2）周年生生產?；ɑ芙M織培養(yǎng)養(yǎng)快速繁殖是是在實驗室中中進行，因條條件可控，所所以不受季節(jié)節(jié)限制，可以以全年進行連連續(xù)生產。而而常規(guī)的無性性繁殖則受季季節(jié)限制，只只能在花卉生生長季節(jié)進行行繁殖。（3）經濟效效益高。花卉組織培養(yǎng)養(yǎng)快速繁殖所所需要的空間間小，在一個個200平方方米的培養(yǎng)室室內一年可生生產試管苗上上百萬株。如如按每株1元元計算，每年年產值上百萬萬元。（4）以組織織培養(yǎng)繁殖的的種苗與母株株有著相同的的遺傳基因。。所以使用這項項技術可讓優(yōu)優(yōu)良的品種不不斷地延續(xù)。。組織培養(yǎng)與常常規(guī)繁殖相比比優(yōu)點眾多課題延伸（略略）P36課后練練習1.答：植物物組織培養(yǎng)所所利用的植物物材料體積小小、抗性差，，對培養(yǎng)條件件的要求較高高。用于植物物組織培養(yǎng)的的培養(yǎng)基同樣樣適合于某些些微生物的生生長，如一些些細菌、真菌菌等的生長。。而培養(yǎng)物一一旦受到微生生物的污染，，就會導致實實驗前功盡棄棄，因此要進進行嚴格的無無菌操作。2.答：外植植體的生理狀狀態(tài)是成功進進行組織培養(yǎng)養(yǎng)的重要條件件之一。生長長旺盛的嫩枝枝生理狀況好好，容易誘導導脫分化和再再分化。試評價下列操操作正確與否否本課題內容小小結菊花組織培養(yǎng)養(yǎng)基礎知識實驗操作植物體的組織織培養(yǎng)影響組織培養(yǎng)養(yǎng)的因素細胞分化細胞全能性組織培養(yǎng)過程程營養(yǎng)激素環(huán)境條件MS固體培養(yǎng)養(yǎng)基制備外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培9、靜夜夜四無無鄰，，荒居居舊業(yè)業(yè)貧。。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、雨中黃黃葉樹，，燈下白白頭人。。。14:51:0314:51:0314:511/1/20232:51:03PM11、以以我我獨獨沈沈久久，，愧愧君君相相見見頻頻。。。。1月月-2314:51:0314:51Jan-2301-Jan-2312、故故人人江江海海別別，，幾幾度度隔隔山山川川。。。。14:51:0314:51:0314:51Sunday,January1,202313、乍見翻疑疑夢，相悲悲各問年。。。1月-231月-2314:51:0314:51:03January1,202314、他鄉(xiāng)生生白發(fā)，，舊國見見青山。。。01一一月20232:51:03下午午14:51:031月-2315、比比不不了了得得就就不不比比，，得得不不到到的的就就不不要要。。。。。。一月月232:51下下午午1月月-2314:51January1,202316、行動出出成果，，工作出出財富。。。2023/1/114:51:0414:51:0401January202317、做前，能夠夠環(huán)視四周；；做時，你只只能或者最好好沿著以腳為為起點的射線線向前。。2:51:04下午2:51下下午14:51:041月-239、沒有失失敗，只只有暫時時停止成成功！。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、很多多事情情努力力了未未必有有結果果，但但是不不努力力卻什什么改改變也也沒有有。。。14:51:0414:51:0414:511/1/20232:51:04PM11、成功就就是日復復一日那那一點點點小小努努力的積積累。。。1月-2314:51:0414:51Jan-2301-Jan-2312、世世間間成成事事，，不不求求其其絕絕對對圓圓滿滿，，留留一一份份不不足足，，可可得得無無限限完完美美。。。。14:51:0414:51:0414:51Sunday,January1,202313、不知香積積寺，數(shù)里里入云峰。。。1月-231月-2314:51:0414:51:04January1,202314、意意志志堅堅強強的的人人能能把把世世界界放放在在手手中中像像泥泥塊塊一一樣樣任任意意揉揉捏捏。。01一一月月20232:51:04下下午午14:51:041月月-2315、楚楚塞塞三三湘湘接接，，荊荊門門九九派派通通。。。。。。一月月232:51下下午午1月月-2314:51January1,202316、少少年年十十五五二二十十時時，，步步行行奪奪得得胡胡馬馬騎騎。。。。2023/1/114:51:0414:51:0401January202317、空山新雨后后，天氣晚來來秋。。2:51:04下午2:51下下午14:51:041月-239、楊柳散和風風，青山澹吾吾慮。。1月-231月-23Sunday,January1,202310、閱讀一一切好書書如同和和過去最最杰出的的人談話話。14:51:0414:51:0414:511/1/