SE技術在畜禽產品殘留的應用

報告人：單吉浩SPE技術在畜禽產品殘留分析中的應用1/18/20231

食品與農產品：殘留分析要求

高選擇性—降低或消除基質干擾高靈敏度—痕量物質可靠的結果：定量準確度和化合物確認—重現性，穩(wěn)定性和動態(tài)范圍—樣品基質中低濃度目標物質的準確定量—按照法規(guī)要求進行確認方法穩(wěn)定性—復雜樣品基質，減少樣品凈化操作1/18/20232殘留分析:樣品前處理的重要性

是影響實驗成敗的決定性步驟

—占樣品分析時間的比例最大(70-80%)–樣品預處理所用時間遠多于色譜分離的時間

—占分析消耗總成本的比重最大

–消耗大量的溶劑及其它化學品

—對分析結果的重現性及準確性影響最大的環(huán)節(jié)—影響實驗結果好壞的最重要因素(回收率,%RSD）1/18/20233樣品前處理的通用方法

高速離心取上清液過濾、超濾選擇性沉淀衍生反應液-液萃取

固相提取(SolidPhaseExtract,SPE)1/18/20234為什么要用SPE?

樣品濃縮–提高靈敏度

樣品凈化–提高靈敏度–延長系統(tǒng)不間斷開機時間–延長色譜柱壽命

比液－液萃取更快,節(jié)省溶劑可自動化批量處理重現性好1/18/20235不斷革新的SPE技術

1977–率先推出業(yè)界第一個硅膠基質固相提取技術的商品化產品：Sep-Pak

1996–推出第一個水－浸潤性聚合物基質SPE吸附劑(Oasis?HLB)–快速通用性反相SPE方法學1997–用于Oasis?HLB的先進的新型方法學，可以獲得更干凈的本底(2D優(yōu)化方法學)1999–推出混合機理吸附劑(Oasis?MCX和MAX)，從而可以對堿性和酸性化合物進行高選擇性和高靈敏度的提取–Oasis?96孔提取板設計獲得R&D100大獎1/18/20236不斷革新的SPE技術2002–Waters最新革新SPE技術首次使得洗脫體積低至25μL無需揮發(fā)與重現配制，洗脫后直接進樣即可是小體積樣品的理想提取工具靈敏度可以提高25x

2004–推出用于保留強堿(如季銨鹽)和強酸(如磺酸鹽)的WCX和WAX吸附劑1/18/20237SPE小柱的種類

根據吸附劑的劃分

–正相

Silica/Alumina(A,B,N)/Florisil/NH2/CN–反相

C18/tC18/C8/tC2/Porapak/RDX/NH2/CN–離子交換

SCX、MCX、PCX、WCX、MAX1/18/20238傳統(tǒng)(C18)SPE吸附劑的問題對極性化合物—保留不足

–藥物（農藥）及代謝產物難以同時提取對堿性化合物回收不足—強硅羥基相互作用

–堿性樣品回收率低小柱跑干—不吸附

–操作過程需仔細控制回收率低，重現性差是其主問題。1/18/20239理想的樣品處理方法除去干擾物在很寬的極性范圍內，對酸性、堿性及中性化合物均有可重現的高回收率很容易實現自動化，對大量樣品進行高通量處理容易使用并且耐受性好快速并且最終的成本低1/18/202310PEP(Polymerenhancedpolymer)：：極性性提高了了的共聚聚物具有反相相SPE的最佳佳性質pH：0-14，810m2/g親水性單單體：親親水”—使填料料具有水水可浸潤潤性質—允許溶溶劑跑干干而不會會損失回回收率和和重現性性“親脂”—提供對對分析物物的反相相保留能能力1/4/202311C18與PEP小柱柱相比：—溶劑跑干對回回收率的影響響(普魯卡因胺、、醋氨酚酚、雷尼替替丁、心心得安、、多慮平)1/4/202312C18與PEP小柱柱相比：—溶劑跑干對回回收率的影響響1/4/202313PEP可取取代C18的優(yōu)勢–吸附容量量更大是C18的3到10倍，常用規(guī)規(guī)格1mL/30mg（C18：100mg）–操作更簡簡便小柱干涸不不影響回收收率–方法更通通用適合性質各各異的各種種物質的提提取1/4/202314PEP可取取代C18的優(yōu)勢–開發(fā)方法更更容易聚合物基質質，無硅醇醇基影響–對極性物物質的提取取回收率更更高藥物(農藥)及代謝產物物同時提高高1/4/202315樣品前處理理：適適于HPLC分析的的通用SPE方法—此通用方方法適于多多種樣品基基質的絕大大多數被測測物?！敺治鰤A堿性化合物物時，不要要使用高有有機含量的的水溶液進進行清洗，，因為PEP吸附劑劑中不含硅硅醇基?！紫仁褂糜猛ㄓ梅椒ǚㄌ崛　Ｈ羧粜柽M一步步降低干擾擾，可使用用優(yōu)化方法法1/4/202316樣品前處理理：適適于HPLC分析的的通用SPE方法1/4/202317pH與化化合合物物反反相相保保留留1/4/202318血清清中中的的四四環(huán)環(huán)素素1/4/202319血清清中中四四環(huán)環(huán)素素的的提提取取結結果果比比較較SPE化化合合物物%回回收收率率%RSDPEP二二甲甲胺胺四四環(huán)環(huán)素素94.81.4四環(huán)環(huán)素素1040.55C18二甲甲胺胺四四環(huán)環(huán)素素52.82.82四環(huán)環(huán)素素68.42.446次次實實驗驗結結果果：：加加標標水水平平：：2.5μg/mL1/4/202320四環(huán)環(huán)素素類類殘殘留留分分析析（日本本政政府府食食品品安安全全公公告告））2003年年８８月月宣宣布布有有關關來來自自中中國國的的蝦蝦中中的的四四環(huán)環(huán)素素類類藥藥物物監(jiān)監(jiān)測測（（TetracyclineintheshrimpfromChina））–如如果果為為養(yǎng)養(yǎng)殖殖蝦蝦，，政政府府要要求求必必須須監(jiān)監(jiān)測測四四環(huán)環(huán)素素類類藥藥物物殘殘留留(mandatory)–如如果果為為非非養(yǎng)養(yǎng)殖殖蝦蝦，，政政府府推推薦薦監(jiān)監(jiān)測測殘殘留留(voluntary)–需需HPLC、熒熒光光檢檢測測器器法規(guī)規(guī)更更新新：：蔬蔬菜菜和和蜂蜂蜜蜜加加工工的的食食品品必必須須監(jiān)監(jiān)測測殘殘留留–法法規(guī)規(guī)以以前前不不要要求求檢檢測測農農藥藥殘殘留留，，但但因因在在加加工工食食品品和和蜂蜂蜜蜜中中發(fā)發(fā)現現了了許許多多農農藥藥，，故故現現在在要要求求檢檢測測1/4/202321食用用肉肉中中的的四四環(huán)環(huán)素素1/4/202322牛奶中的四環(huán)環(huán)素1/4/202323四環(huán)素—食品品分析的結果果化合物牛牛肉豬豬肉牛牛奶奶牛牛奶0.5μg/g0.5μg/g25μg/L50μg/L4土霉素96.2(5.7)103(5.0)70.7(3.5)67.7(5.8)四環(huán)素素91.4(5.5)99.8(6.1)73.7(7.3)68.5(5.1)金金霉素80.6(6.8)83.4(6.1)76.7(2.9)67.3(1.8）結果以%回回收率表示,括號內數字字為%RSD1/4/202324反相－－離子子交換換雙重重機理理吸附附劑MCX：陽陽離子子交換換—反反相吸吸附劑劑—用于于堿性性物質質提取取MAX：陰陰離子子交換換—反反相吸吸附劑劑—用于于酸性性物質質提取取WCX：弱弱陽離離子交交換——反相相吸附附劑—用于于強堿堿性物物質(如季銨銨鹽類類)提取WAX：弱弱陰離離子交交換——反相相吸附附劑—用于于強酸酸性物物質提提取1/4/202325適合于于堿性性藥物物提取取的MCX小小柱1/4/202326雙機理吸吸附劑：：堿性化化合物的的保留1/4/202327混合機理理:陽離離子交換換與反相相的保留留1/4/202328MCXSPE通用方方法1/4/202329常見獸藥殘留留的SPE推薦方法法名稱規(guī)規(guī)格克侖特羅MCX/SCX/PCX沙丁胺醇MCX/SCX/PCX磺胺C18/PEP/AluminaB氯霉素C18/PEP/Silica氟喹諾酮PEP/C18硝基咪唑類藥藥物PEP/C18己烯雌酚PEP/C18四環(huán)素PEP/C18萊克多巴胺AluminaA/MCX1/4/202330SPE在殘留留分析方面的的成功實例硝基咪唑類藥藥物：JAOACInternational,2003,86(3),505-509四環(huán)素:JchromatographyA,2003,987,227-233動物組織中鹽鹽酸克倫特羅羅的SPE與GC/MS分析液相色譜通訊訊，37，13-141/4/202331SPE在殘留留分析方面的的成功實例萊克多巴胺：：Analyticachim,2003,483(1-2)P137-145氯霉素：動物源食品中中氯霉素的液液相色譜-質質譜測定,分分析測試學報報，2002，21增刊刊，185-186磺胺：動物組織中磺磺胺類藥物殘殘留量檢測方方法---HPLC法1/4/202332磺胺藥物樣品品前處理—SPE法HLB雞組織中磺胺胺類藥物殘留留量檢驗方法法－高效液相相色譜紫外檢檢測法–廣州出入境境檢驗檢疫局局食品檢驗處處B(堿性氧化化鋁小柱)羊肉組織中七七種磺胺殘留留的測定–《Waters液相色色譜通訊》35期，2002年動物源食品中中磺胺類藥物物殘留的檢測測方法－高效效液相色譜法法–農業(yè)部３８８號文C18高效液相色譜譜法測定肉類類奶粉中四種種磺胺藥物殘殘留量的方法法研究–《Waters液液相色色譜通通訊》》15期，，1990年動物源源食品品中磺磺胺二二甲嘧嘧啶殘殘留檢檢測方方法－－高效效液相相色譜譜法–農業(yè)業(yè)部３３８號號文；；1/4/202333典型成成功開開發(fā)：：動物組組織中中磺胺胺藥物物的殘殘留檢檢測方方法——HPLC法—NY5029-2001農農業(yè)業(yè)部““無公公害畜畜產品品例行行監(jiān)測測”專專用方方法艾杰爾爾科技技———磺胺胺專用用柱1/4/202334動物源源食品品中磺磺胺類類藥物物殘留留檢測測方法法－－高效效液相相色譜譜法簡介農業(yè)部部畜禽禽產品品質量量監(jiān)督督檢驗驗測試試中心心1/4/202335主要內內容一、適適用范范圍二、原原理三、試試劑和和材料料四、儀儀器設設備五、檢檢驗步步驟1/4/2023361、、適適用用范范圍圍本方方法法用用于于測測定定動動物物可可食食性性組組織織中中磺磺胺胺間間甲甲氧氧嘧嘧啶啶（（SMM）、、磺磺胺胺二二甲甲基基嘧嘧啶啶（（SM2）、、磺磺胺胺甲甲噁噁唑唑（（SMZ）、、磺磺胺胺二二甲甲氧氧嘧嘧啶啶（（SDM）、、磺磺胺胺喹喹噁噁啉啉（（SQ）單單個個或或混混合合物物的的殘殘留留量量。。1/4/2023372．．原原理理組織織經經乙乙腈腈提提取取后后，，其其上上清清液液加加入入正正己己烷烷進進行行液液液液分分配配，，取取下下層層溶溶液液加加入入正正丙丙醇醇減減壓壓干干燥燥，，殘殘留留物物用用乙乙腈腈溶溶解解，，過過Sep-Pak堿堿性性氧氧化化鋁鋁柱柱,洗洗脫脫，，干干燥燥后后定定容容，，用用高高效效液液相相色色譜譜儀儀進進行行檢檢測測。。1/4/2023383、試劑劑和材料料除特別注注明外，，所用試試劑均為為分析純純；水為為超純水水。3.1磺磺胺類類藥物標標準品（（SMM、SDM、SM2、SMZ和SQ），（（Sigma公公司，含含量不少少于98.9%）3.2甲甲醇醇色色譜純3.3乙乙腈腈色色譜純3.4正正已已烷3.5正正丙丙醇3.6無無水水硫酸鈉鈉1/4/2023393、試劑劑和材料料3.7堿堿性性氧化鋁鋁SPE柱（6毫升，，500毫克））3.8磺磺胺胺類藥物物標準儲儲備液（（1mg/mL）分分別精精密稱取取上述磺磺胺類藥藥物標準準品各50mg，甲醇醇溶解并并轉移到到50mL容量量瓶，定定容，搖搖勻。置置-20℃以下下冰箱中中保存,有效期期3個月月。3.9磺磺胺類類藥物標標準工作作液取取磺胺胺類藥物物標準儲儲備液用用流動相相稀釋成成濃度為為0.05,0.1,0.2,0.5,1.0，，2.0μg/mL的的標準工工作液。。置2℃℃-8℃℃冰箱中中保存，，有效期期1周。1/4/2023404、儀器器設備4.1高高效液液相色譜譜儀（配配紫外檢檢測器））4.2離離心機機4.13固相相萃取裝裝置（配配考克閥閥）4.4分分析析天平精精度度0.0001g4.5天天平平精精度0.01g4.6旋旋轉轉蒸發(fā)儀儀4.7振振蕩蕩器4.8勻勻漿漿機4.9渦渦動動混合器器4.10分分液漏斗斗50mL4.11梨梨形瓶100mL4.12離離心管50mL4.13微微孔濾膜膜0.45μm1/4/2023415檢檢驗驗步驟驟5.1試料的的制備備5.1.1取絞碎碎后的的供試試樣品品,作為供供試試試料。。5.1.2取絞碎碎后的的空白白樣品品,作為空空白試試料（（陰性性對照照）。。5.1.3取絞碎碎后的的空白白樣品品5g,添加5μg/mL的工工作液液0.1mL，，作為為空白白添加加試料料（陽陽性對對照））。1/4/2023425檢檢驗驗步驟驟5.2提取取和純純化5.2.1組織樣樣品5.00g———5g無水水硫酸酸鈉+25mL乙乙腈———均均質———振振蕩10min———以3000r/min的速速度離離心5min———重重復兩兩次———并并兩次次的上上清液液———加入入正己己烷30mL———振振蕩10min———離心心5min———取下下層液液體于于100mL梨形形瓶中中。1/4/2023435檢檢驗驗步驟驟5.2.1（續(xù)續(xù)）加正丙丙醇5mL，50℃℃下減減壓干干燥至至干，，殘留留物用用95%乙乙腈3ml溶解解，過氧化化鋁B柱。。用5mL乙腈腈-水水（95+5））過柱柱，不不收集集，再再用10mL乙乙腈腈-水水（70+30）洗洗脫。。洗脫液液中加加入5mL正丙丙醇，，50℃下下減壓壓干燥燥至干干，殘殘留物物用2.0mL流動動相溶溶解，，溶液用用濾膜膜過濾濾，作作為試試樣溶溶液，，供高高效液液相色色譜分分析。。1/4/2023445檢檢驗驗步驟驟5.3色色譜條條件5.3.1色譜柱柱：C18柱，250×4.6mm（i.d.），粒粒徑5μm，或相相當者者；5.3.2流動相相：乙乙腈-甲醇醇-水水-乙乙酸(2+2+9+0.2)；5.3.3流速：：1mL／min；5.3.4檢測波波長：：270nm；5.3.5進樣量量：20μμL。1/4/2023455檢驗驗步驟5.5測測定法5.5.1取試樣樣溶液和0.05μμg/mL的對照溶溶液，作單單點校準，，以峰面積積計算。對對照溶液及及試樣溶液液中磺胺類類藥物的響響應值均應應在儀器檢檢測的線性性范圍之內內，試樣溶溶液測定過過程中應參參插注入對對照溶液，，以便準確確定量。5.5.2試劑劑空白試驗驗除不加試料料外，采用用完全相同同的測定步步驟進行平平行操作。。5.5.3結果果計算和表表述按下式計算算供試組織織中磺胺類類藥物的殘殘留量：Xi=(CSVA)/(ASm)1/4/2023465檢驗驗步驟5.6結結果判定5.6.1線性性范圍在0.02μg/mL～1.0μg/mL范圍圍考察線性性，計算回回歸方程，，其相關系系數≥0.995。。5.6.2準確度本方法在100μg/kg添添加濃度水水平上的回回收率范圍圍為50%～110%。5.6.3允許許相對偏差差允許相對偏偏差≤26%。1/4/202347SPE在鹽鹽酸克侖特特羅（瘦肉肉精）殘殘留檢測中中的應用樣品前處理理：SPE法–參見：中中華人民共共和國農業(yè)業(yè)部行業(yè)標標準：飼料料中鹽酸克克侖特羅的的測定參見：中華華人民共和和國國家標標準：動物物組織中鹽鹽酸克侖特特羅的測定定1/4/202348SPE在鹽酸酸克侖特羅（（瘦肉精）殘殘留檢測中中的應用中華人民共和和國農業(yè)行業(yè)業(yè)標準NY/T468——2005動物組織中鹽鹽酸克倫特羅羅的測定－氣氣相色譜-質質譜法NY/XQ421-2003“動物尿液中中鹽酸克倫特特羅（瘦肉精精）殘留的檢檢測氣相色色譜-質譜（（GC-MS）方法”——起草單位位：農業(yè)部畜畜禽產品質量量監(jiān)督檢驗測測試中心1/4/202349動物組織中鹽鹽酸克倫特羅羅的測定－氣氣相色譜-質質譜法——原理對樣品在堿化化的條件下用用乙酸乙酯提提取，合并提提取液后，利利用鹽酸克倫倫特羅易溶于于酸性溶液的的特點，用稀稀鹽酸反萃取取，萃取的樣樣液pH調至至5.2后用SCX固相相萃取小柱凈凈化，分離的藥物物殘留經過雙雙三甲基硅烷烷三氟乙酰胺胺（BSTFA）衍生后后用帶有質量量選擇檢測器器的氣相色譜譜儀測定。1/4/202350動物組織中鹽鹽酸克倫特羅羅的測定－氣氣相色譜-質質譜法提取(5±0.05)g動物物肝組織———加入15mL乙酸乙酯酯——加入3mL10.0%碳酸鈉鈉溶液——均均質——離心心2min———上層有機機溶劑——在在殘渣中再次次提取后———并合——加加入5mL0.10mol/L的鹽鹽酸——離心心2min———重復萃取取——合并下下層溶液———2.5mol/L氫氧氧化鈉溶液調調節(jié)pH至5.2。1/4/202351動物組織中鹽鹽酸克倫特羅羅的測定－氣氣相色譜-質質譜法凈化SCX小柱———5mL甲甲醇——5mL水———5mL30mmol/L鹽酸活化———萃取液上上樣——5mL水———5mL甲甲醇——淋洗洗柱子——抽抽干SCX小小柱——5mL4%氨化甲醇醇溶液——洗洗脫。衍生化在50℃水浴浴——氮氣吹吹干——100L甲苯———100LBSTFA——80℃衍生lh——冷卻———加入0.3mL甲苯苯——氣相色色譜-質譜分分析。1/4/202352動物組織中鹽鹽酸克倫特羅羅的測定－氣氣相色譜-質質譜法GC/MS測測定參數設定定色譜柱：HP-5MS5%苯基甲甲基聚硅氧烷烷，30m××0.25mm（內徑）），0.25m（膜厚）；；進樣口：220℃；進樣方式：不不分流；進樣體積：1L；柱溫：70℃℃（保持0.6min））,以25℃/min升溫至200℃（保保持6min），以25℃/min升溫至280℃（保持持5min））；載氣：氦氣，，流速：0.9mL/min（恒流流）；GC/MS傳傳輸線溫度度：280℃℃；溶劑延遲：8min；EM電壓：高高于調諧電壓壓200V；；離子源(EI)溫度：200℃；四極桿溫度：：160℃；；選擇離子監(jiān)測測:(m/z)86，212，262，2771/4/202353動物物尿尿液液中中鹽鹽酸酸克克倫倫特特羅羅的的測測定定－－氣氣相相色色譜譜-質質譜譜法法凈化化依次次用用甲甲醇醇5mL、、水水5mL和和30mmol/L鹽鹽酸酸5mL潤潤洗洗固固相相萃萃取取小小柱柱，，將將上上述述備備用用液液過過柱柱，，依依次次用用水水5mL、、甲甲醇醇5mL淋淋洗洗，，真真空空抽抽干干，，用用4%氨氨化化甲甲醇醇5mL洗洗脫脫SCX小小柱柱，，收收集集洗洗脫脫液液于于具具塞塞玻玻璃璃試試管管中中，，50℃℃下下氮氮氣氣吹吹干干。。在在樣樣液液過過柱柱和和洗洗脫脫過過程程中中流流速速控控制制在在1mL/min左左右右。。1/4/202354殘留留分分析析SPE前前處處理理應應用用小小結結———以以常常規(guī)規(guī)方方法法為為起起點點———如如需需要要，，根根據據樣樣品品性性質質與與基基質質進進行行方方法法優(yōu)優(yōu)化化———對對于于堿堿性性或或酸酸性性組組分分采采用用雙雙機機理理吸吸附附劑劑1/4/202355SPE小小柱柱的的典典型型應應用用實實例例磺胺胺：：Sep-PakAl2O3(B),12cc/2g,WAT054260–動動物物源源食食品品中中磺磺胺胺類類藥藥物物殘殘留留物物檢檢測測方方法法———HPLC金霉霉素素：：Sep-PakC18或者者tC18–金金霉霉素素殘殘留留的的HPLC測定定伊維維菌菌素素：：Sep-PakC18或者者tC18–伊伊維維菌菌素素殘殘留留的的HPLC測定定法法1/4/202356SPE小小柱柱的的典典型型應應用用實實例例恩諾沙星星，環(huán)丙丙沙星：：Sep-PaktC18(含碳量≥≥16%)–動物性性食品中中恩諾沙沙星和環(huán)環(huán)丙沙星星殘留物物檢測方方法——HPLC噁喹酸，，氟甲喹喹：Sep-PaktC18(含碳量≥≥16%)–動物性性食品中中噁喹酸酸和氟甲甲喹殘留留物檢測測方法——HPLC1/4/202357國家科技技攻關計計劃課題題畜禽產品品質量安安全關鍵鍵控制技技術系列列標準研研究(課題編編號：2002BA906A75)農業(yè)部畜畜禽產品品質量監(jiān)監(jiān)督檢驗驗測試中中心1/4/202358國家科技技攻關計計劃子課課題三種獸藥藥使用規(guī)規(guī)范驗證證和四種獸獸藥殘留留檢測方方法研究究(子課題題編號：：2002BA906A37-01)農業(yè)部畜畜禽產品品質量監(jiān)監(jiān)督檢驗驗測試中中心2005年11月10日1/4/20235920種種獸藥藥殘留留檢測測方法法的技技術要要點22.1豬豬組織織中已已烯雌雌酚、、已烷烷雌酚酚、已已二烯烯雌酚酚殘留留檢測測方法法研究究（氣氣相色色譜-質譜譜法））在堿化化的條條件下下用乙酸乙乙酯提提取豬組織織樣品品中己己烯雌雌酚、、已二二烯雌雌酚和和已烷烷雌酚酚殘留留，然然后通通過碳酸鈉鈉溶液液和硅硅膠柱柱對洗洗脫物物質進進行凈凈化處理。。凈化化后的的樣品品平均均分兩兩份進進行吹吹干后后衍生，，BSTFA衍衍生后進行行氣相相色譜譜－質質譜分分析。。檢測限限:0.25g/kg-0.5g/kg；；回收收率:60.9%～～85.6%批內變變異系系數≤≤15%，，批間間變異異系數數≤20%1/4/20236022.1豬豬組織織中已已烯雌雌酚、、已烷烷雌酚酚、已已二烯烯雌酚酚殘留留檢測測方法法研究究（氣氣相色色譜-質譜譜法））已二烯烯雌酚酚標準準溶液液經衍衍生化化后選選擇離離子模模式下下的總總離子子流圖圖豬肝添添加樣樣品總總離子子流圖圖(已已二烯烯雌酚酚添加加濃度度為4μg/kg)1/4/2023612.2豬豬組織中雌雌二醇殘留留檢測方法法研究（液液相色譜-質譜法））試樣勻漿后后,加入氘代雌二醇醇內標,經正己烷脫脂脂,經HLB柱、硅硅膠柱、氨氨基柱凈化化后，于液液質聯用儀儀上進行測定定。同位素素內標定量量。檢測限:1g/kg；；回收率:97.1%～106.1%批內變異系系數≤15%，批間間變異系數數≤20%1/4/2023622.2豬豬組織中雌雌二醇殘留留檢測方法法研究（液液相色譜-質譜法））豬肝添加雌雌二醇色譜譜圖(從上至下添添加濃度依依次為0μg/kg,5μg/kg,2μg/kg,1μg/kg)1/4/2023632.3豬豬尿液中丙丙酸睪酮殘殘留檢測方方法（液相相色譜-質質譜法）豬尿樣品經經固相萃取小小柱凈化后后，供液相相色譜-質質譜儀測定。丙酸睪酮檢檢測限:1.0g/kg丙酸睪酮回回收率:62.2%～73.5%批內變異系系數≤15%，批間間變異系數數≤20%丙酸睪酮標標準溶液質質譜圖空白豬尿中中添加50μg/L的丙酸睪睪酮標準溶溶液后的SIR色譜譜圖1/4/2023642.5豬組組織及豬尿尿中克倫特特羅、沙丁丁胺醇殘留留檢測方法法（氣相色色譜-質譜譜法）試樣用高氯酸溶液勻漿、、超聲加熱熱提取，用用異丙醇+乙乙酸乙酯(40+60)萃取，有機機相濃縮，，經弱陽離子交交換柱進行行分離，用乙醇+濃氨氨水(98+2)溶液洗脫，，洗脫液濃濃縮，經N,O雙三三甲基硅烷烷三氟乙酰酰胺(BSTFA)衍生后于氣質聯聯用儀上進進行測定。。外標法定定量。檢測限:1g/kg；；回收率:60.37%～93.86%批內變異系系數≤15%，批間間變異系數數≤20%1/4/2023652.5豬豬組織及豬豬尿中克倫倫特羅、沙沙丁胺醇殘殘留檢測方方法（氣相相色譜-質質譜法）豬肝加標樣樣色譜圖(2g/kg)1/4/2023662.6豬豬組組織及豬豬尿中萊萊克多巴巴胺殘留留檢測方方法（氣氣相色譜譜-質譜譜法）樣品經過過高氯酸水解提取取，用乙酸乙酯酯和異丙丙醇（4：6））再次提取取后過SCX陽陽離子小小柱凈化，用用合適的的溶劑選選擇洗脫脫后,氮氮氣吹吹干，供供高效液液相色譜譜定量（（質譜檢檢測器））測定。。外標法法定量。。檢測限:1g/kg；回收收率:66.47%～～86.21%批內變異異系數≤≤15%，批間間變異系系數≤20%1/4/2023672.6豬豬組組織及豬豬尿中萊萊克多巴巴胺殘留留檢測方方法（氣氣相色譜譜-質譜譜法）300g/L標標準溶液液質譜圖圖肉添加10g/kg質譜圖1/4/2023682.7豬豬組織織中氯霉霉素殘留留檢測方方法（液液相色譜譜-質譜譜法）樣品經過過乙腈-水水（1+1）溶液、乙酸乙乙酯重復提取取，用正己烷除去樣品品中的脂脂肪等雜雜質，C18固相萃取取柱進一步凈凈化，N2氣吹干后后供高效效液相色色譜定量量（質譜譜檢測器器）測定定。外標標法定量量。檢測限:0.1g/kg；回收收率:67.4%～87.0%批內變異異系數≤≤15%，批間間變異系系數≤20%1g/L標標準溶液液圖肉添加1g/kg圖1/4/2023692.7豬豬組織織中氯霉霉素殘留留檢測方方法（液液相色譜譜-質譜譜法）1/4/2023702.8豬組組織中粘桿菌菌素殘留檢測測方法（液相相色譜法）待測動物組織織中殘留的粘粘桿菌素經三氯乙酸-甲甲醇溶液提取，C18固相萃取柱凈化后，與熒光衍生化試劑反應，用用高效液相色色譜（熒光檢檢測器）進行行檢測，外標標法定量。檢測限:75g/kg；定定量限:150g/kg,回回收率:80.1%～108.5%批內變異系數數≤15%，，批間變異系系數≤20%a：空白樣品品圖b：添添加0.05μg/g粘粘桿菌素樣品品圖1/4/2023712.9豬組組織中磺胺類類藥物殘留檢檢測方法（液液相色譜法））組織樣品經乙腈提取后，在上上清液中加入入正己烷進行液液分配配，取下層溶溶液加入正丙醇減壓干燥，殘殘留物用乙酸乙酯溶解，過氨基鍵合小柱柱,以乙酸乙乙醇溶液洗脫脫，氮氣吹干干后用流動相相溶解，定容容后用高效液液相色譜儀進進行檢測。檢測限:3～～5g/kg；回回收率:65.1%～92.1%批內變異系數數≤15%，，批間變異系系數≤20%1/4/2023722.9豬豬組織織中磺磺胺類類藥物物殘留留檢測測方法法（液液相色色譜法法）磺胺類類藥物物標準準品色色譜圖圖豬肝添添加磺磺胺類類藥物物色譜譜圖1/4/2023732.10豬豬組組織中中乙酰酰甲喹喹殘留留檢測測方法法（液液相色色譜法法）動物組組織勻勻漿用用雙蒸水水、三三氯乙乙酸提取，，經C18固相小小柱凈化，，80%甲醇醇洗脫，，收集集洗脫脫液，，作為為試樣樣溶液液供高高效液液相色色譜（（配紫紫外檢檢測器器）分分析，，外標標法定定量檢測限限:50g/kg回回收率率:60.1%～83.1%批內變變異系系數≤≤15%，，批間間變異異系數數≤20%空白豬豬肉組組織試試樣色色譜圖圖豬肉試試樣中中添加加乙酰酰甲喹喹色譜譜圖1/4/2023742.11動動物物組織織（豬豬、雞雞）中中硝基基咪唑唑類藥藥物多多殘留留檢測測方法法（液液相色色譜-質譜譜法））待測動動物組組織中中殘留留的硝硝基咪咪唑類類藥物物用乙酸乙乙酯提取，，液/液萃萃取分分離,固相萃萃取柱柱凈化化后，通通過高高效液液相色色譜/質譜譜聯用用的大氣壓壓化學學電離離正離離子檢測（APCI+））方式,進行行選擇擇離子子(SIR)檢測測，外外標法法定量量，實實現了了三種種硝基基咪唑唑類化化合物物的多多殘留留確證證。。。檢測限限:0.5-1.0g/kg；；回收收率:55.31%～88.66%批內變變異系系數≤≤15%，，批間間變異異系數數≤20%豬肝加加標樣樣選擇擇離子子檢測測色譜譜圖.(a)洛硝噠噠唑(M/Z=201,2.0μμg/kg);(b)甲硝唑唑（M/Z=172,1.0μg/kg）;(c)地美硝硝唑（（M/Z=142,1.0μg/kg）1/4/2023752.12動動物物（羊羊、豬豬）組組織中中伊維維菌素素類藥藥物多多殘留留檢測測方法法（液液相色色譜法法）待測測動動物物組組織織中中殘殘留留的的伊伊維維菌菌素素類類藥藥物物經經乙腈腈提取取，，堿性性氧氧化化鋁鋁固相相萃萃取取柱柱凈凈化化后后，，與與熒光光衍衍生生化化試試劑劑反應應，，用用高高效效液液相相色色譜譜（（熒熒光光檢檢測測器器））,進進行行檢檢測測，，外外標標法法定定量量，，實實現現了了三三種種阿阿維維菌菌素素類類藥藥物物的的多多殘殘留留分分析析。。檢測測限限:1.0g/kg；