檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)包-微生物clsi m02-a11紙片法

文件中文版修訂說明!$$')..#早認(rèn)定的標(biāo)準(zhǔn)制定機(jī)構(gòu)"$自3445年以來"衛(wèi)生部將.制定的藥敏標(biāo)準(zhǔn)定為我國的部頒標(biāo)準(zhǔn)$.3.673753=8<%63.5373.43床%$"巨大貢獻(xiàn)的專家表示衷心感謝"同時(shí)對(duì)生物梅里埃公司的大力支持表示由衷謝意&由于時(shí)間倉促"在編譯過程中"難免會(huì)有疏漏和錯(cuò)誤之處"還請(qǐng)廣大檢驗(yàn)同仁批評(píng)指正&我們將在今后的更新版本中不斷改進(jìn)$表 #!年相關(guān)檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)及操作規(guī)范修訂版文件名翻譯審校377.66'2.$/+)".)-$(.'.CC,孫長王33.) .1C)CC'''K李胡云4'1$).)&(CC'.''K$孫自鏞張莉余方中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志.臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)編譯小6736年9!!改編"拷貝或以其他任何方式復(fù)制電子"機(jī)械"影印"錄像"網(wǎng)絡(luò)或其他$本出版物的任何部分%臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)提高醫(yī)療保健檢測(cè)質(zhì)!.#際性%跨學(xué)科%非贏利%制訂標(biāo)準(zhǔn)和教育的組織"它促其在$相.它界的$療保健服務(wù)水平"就應(yīng)具備一致的標(biāo)準(zhǔn)"這便是.".討鍵問題$出文件是以標(biāo)準(zhǔn)%指南或委員會(huì)報(bào)告形式出版的$標(biāo)準(zhǔn)明確規(guī)定了材料%方法或?qū)嵤┑木唧w的基本要求"并已達(dá)成共識(shí)"不允許變更使用的文件另外標(biāo)準(zhǔn)可能包含有自由選擇的要素"均有明確標(biāo)識(shí)$指南敘述了用于一般操作實(shí)踐%步驟或材料的標(biāo)準(zhǔn)"并已達(dá)成共識(shí)自愿使用的文件$使用者可以按指南的規(guī)定要求使用也可按需要變更使用$報(bào)告 由董事會(huì)發(fā)布的尚未經(jīng)一致評(píng)議的文件$達(dá)成共識(shí)的過.自愿達(dá)成共識(shí)的過程是遵循制定正式標(biāo)準(zhǔn)的過程'標(biāo)準(zhǔn)草案的認(rèn)文件的形成與公開評(píng)針對(duì)實(shí)驗(yàn)室使用者的評(píng)論意見進(jìn)行修文件被接受為臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)或指邀請(qǐng)參與達(dá)成共識(shí)的過.的過$."是按照.行政程序規(guī)定的程序的共識(shí)"取

$同意"者已受所$.修改以跟上在技術(shù)%程序%方法等方面不斷發(fā)展的步伐$評(píng)論文件草.人和!過程的專家$評(píng)論評(píng)論性意"$."提供$對(duì)已發(fā)布文件的評(píng)客戶對(duì)已公布的.文件的評(píng)論也是在達(dá)成共識(shí)的過程中必不可少的$任何人都可以提交評(píng)論$所有評(píng)論都會(huì)由委員會(huì)的專家考慮$一個(gè)匯總的意見和委員會(huì)的回應(yīng)都要保留需要時(shí)能及時(shí)提供$我們歡迎客戶在任何時(shí)間對(duì)文件進(jìn)行評(píng)論$上訴過.的共識(shí)過程包括上訴過"在行政程序的第5節(jié)中有詳細(xì)描述$志愿者參我們希望醫(yī)療保健界所有學(xué)科的專家自愿參與到.的計(jì)劃中來$關(guān)于參加委員會(huì)的詳細(xì)信息或提交評(píng)論請(qǐng)通過以下方式聯(lián)系.$0(')$'2'".16?77$"7=9379557377375='33.N3?96=536.N3?96=567..N3??59?761>61 ..N63966438!抗菌藥物敏感性試驗(yàn)紙片法執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)(批準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)第十一$H$! $"."!.#" $"K"!::#" "K"K". $$ 'K$K H"."!<.#K $$''G $) 摘如果實(shí)驗(yàn)室不能通過確認(rèn)該微生物而預(yù)測(cè)其藥物敏感性"抗生素敏感性試驗(yàn)則是對(duì)引起感染的微生物進(jìn)行抗生素化療的有效指征$敏感性試驗(yàn)常可用來判斷該病原體屬于某一種對(duì)幾種常用抗生素具有耐藥性的細(xì)菌$$"擴(kuò)散法常規(guī)用來檢測(cè)常見%生長迅速和一些苛氧的細(xì)菌病原體$臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì).#0文件7633 抗菌藥物敏感試驗(yàn)紙片法執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)"核準(zhǔn)標(biāo)十一版已經(jīng)完成"包括了一系列規(guī)范紙片擴(kuò)散法的程序$現(xiàn)有.推薦方法的操作%應(yīng)用和限制也在其中$377*376"%和質(zhì)$"的版本$自上一版本377.63*6中更改的部分用黑體表示并且在文件的前面部分也有總結(jié)$臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)!.#0$抗菌藥物敏感試驗(yàn)紙片法執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)(批準(zhǔn)標(biāo) 第十一版33.N3?6>=536.N3?96>5=56726?7P"$47=.6736.文件進(jìn)行一致評(píng)議$使用者應(yīng)盡量使用文件的修訂版$因?yàn)榧夹g(shù)的快速變化可能會(huì)影響到標(biāo)準(zhǔn)和指南中%"..$.$本目錄時(shí)請(qǐng)與我們聯(lián)系'電話'939557377傳真757"'V( 6736'.-作""%電%手工%影印%錄音或其他方法$.0特此準(zhǔn)許個(gè)人會(huì)員或購買者制作一份本出版物復(fù)制品"用在單一場(chǎng)所實(shí)驗(yàn)室操作手冊(cè)中$.726?7"$3475"S.<$引用建.',',*4(,,,(;(.'17633$" ).6提出標(biāo)34年批準(zhǔn)標(biāo)344年3第六暫行標(biāo)34=4年37批準(zhǔn)標(biāo)6777年3第七批準(zhǔn)標(biāo)3458年36批準(zhǔn)標(biāo)677年3第八暫行標(biāo)3455年33第四批準(zhǔn)標(biāo)6779年3第九批準(zhǔn)標(biāo)3447年8第四批準(zhǔn)標(biāo)6774年3第十批準(zhǔn)標(biāo)344年36第五批準(zhǔn)標(biāo)6736年3第十一.N3?96=536.N3?96=567..N3??59?76..N63966438委員會(huì)成微生物專業(yè)委員)*1!2!6)$$#.主) <1$$"K".:!!..C$"$!#"0:!::#'$K"!::#副主:::C.1$$.!!'"".K$1$'$$..<K!#K''"$".K""".抗菌藥物敏感試驗(yàn)分*!!!K'$$"主$$.: *$"".* :!"H".K$1$'K=!!'PK"G.<K$副主L::!.'.K"*!::!$$'".!<.#$$<)'K$$".1$H"F$)H"F$"K"!::#"KK1'"K"."".".". ."":<1$'$"$'$K$K".K'""志.0K H"."!<.# K$ $"..$.""文字和表格工作*1C"."!.#.主G$..CH$".::!*H:!5$'$$"K"!::#.K)"K"!::#::#K$"記錄秘:***HB.". 1 "=!!"".$""<$11 b1#"K!::#C...C$"$K)"".<K'"".1$1$"!.#$$"$$'".!<.#"".$.<$"".".$.H"K":1'$.1)1K$"..".$$)'K$$.1$H"F質(zhì)量控制工作P*!!22$"K"!::#聯(lián)合主:***HB$".=!!"".$'!!"聯(lián)合主K)"".<$$"'=::*!::!H$$HB$K".$$).G$..CH$1'"! .#$$"..C$"'"..""..1$1$"!.#"".$$'".!<.#<$$ 葡萄球菌和鏈球菌工作):,:!!# 1$$主K)'K$$*$K".1$H"F::!*H:!5."K::!!#'$"".記錄秘.1$.KC"K"!#!*!'$".''"K$$K"."".B$.!#'$$$ K$)$".腸桿菌科工作:!:!B1.K主$#!#1::!$$.$*!::!'..CK$$H$"K"!#::!!:#1K1記錄秘FH)$$: ::FH"FH:!!$".$'H):B!3$$*HK)"".<)'K$$PB** ."K1$H"F* K!5$ .$"K1)"..K$'."."H".氟喹諾酮折點(diǎn)工作:*!1K主K1H$::!K1*!5$K".1K"K"".."$)H"FK)"".<K)"".<.""$$' :<)'K$$"H".$'$"$'$1$H"F固有耐藥工作主::=::*!::!:!!#$2記錄秘F3:*7$)H"F$.$"K $.1)1$)'".

.$'.K"!::#$''".1.K!::#"U!:#$'..1$.C"!#$'$".'".K'""$$C".K2$B$"".工作人$$ )'$"$$"1$$"標(biāo)準(zhǔn)開發(fā)市場(chǎng)副會(huì)"."!.#聯(lián)絡(luò)$"編志去的年里擔(dān)任抗菌藥物敏感實(shí)驗(yàn)分會(huì)主席"分會(huì)的許多成員!目前有357多位志愿者"%和觀在的準(zhǔn)備過程中做出無法替代的工作$另外"我衷心感謝抗菌藥物敏感實(shí)驗(yàn)分會(huì)主席工作組在這的卓越貢獻(xiàn)$以下是沒有列在委員會(huì)和工作組但列在此文件的人員'$K$'$$$$"'..$ $.e "!抗菌藥物敏感實(shí)驗(yàn)分會(huì)主目錄摘要'委員 #序言(本文件主要變更概述).立解釋標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制!#范圍過程概*.參考方法與商品化方法以及.與折點(diǎn)!解釋標(biāo)準(zhǔn)#的比 抗菌藥物敏感性試驗(yàn)分委會(huì)任務(wù)聲明 3范圍36介紹3>標(biāo)準(zhǔn) 38術(shù)語683 定86 縮

!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!語!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 進(jìn)行藥敏性試驗(yàn)的指征 用于常規(guī)檢測(cè)和報(bào)告的抗菌藥物的選擇 9 常規(guī)報(bào)9 非專有名9> 選擇指

9 常規(guī)和選擇性檢測(cè)及報(bào)告的建議性指 5=紙片擴(kuò)散法的試劑4 X瓊脂4= 生長不良菌株的檢測(cè)=> 抗菌藥物紙片5紙片擴(kuò)散法的接種物制 5 接種物制備用的濁度標(biāo)準(zhǔn)5 接種物制備4紙片擴(kuò)散法操作流 4 接種平板4 紙片在已接種的瓊脂平板上的放置4> 平板判讀和結(jié)果解釋苛養(yǎng) 37 流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿菌37 淋病奈瑟菌37> 腦膜炎奈瑟菌目錄續(xù)37肺炎鏈球菌和其他鏈球菌 需特別考慮的微生 33 葡萄球菌33 腸球菌33> 革蘭陰性桿菌33 肺炎鏈球菌 誘導(dǎo)性克林霉素耐 內(nèi)酰胺酶試 3 目的3>6 選擇內(nèi)酰胺酶試 紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)結(jié)果的解 38 抑菌環(huán)直徑判讀標(biāo)準(zhǔn)38 判讀分類 質(zhì)量控制和質(zhì)量保證程 3 目的3 質(zhì)量控制責(zé)任3> 選擇用于質(zhì)量控制和質(zhì)量保證的質(zhì)控菌株3 儲(chǔ)存和檢測(cè)質(zhì)量控制菌株3 批次或批號(hào)的質(zhì)量控制3 抑菌環(huán)直徑質(zhì)量控制范圍3? 質(zhì)量控制試驗(yàn)的頻率!也請(qǐng)參見附錄<和377*3+表># 3 糾正措施3 當(dāng)失控結(jié)果出現(xiàn)時(shí)如何報(bào)告病人檢測(cè)結(jié)果3?37 病人檢測(cè)結(jié)果的驗(yàn)證3?33 其他控制程序 紙片擴(kuò)散法的局限 39 應(yīng)用于各種生物群體39 誤導(dǎo)性結(jié)果39> 耐藥性的出現(xiàn) 篩選試 參考文 附錄質(zhì)量控制方案流程 附錄培養(yǎng)基和試劑的制 T 附錄抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的質(zhì)控菌株!最新方案請(qǐng)參見當(dāng)前版本377*3 附錄質(zhì)量控制菌株的維 質(zhì)量管理體系方案相關(guān).參考資 .文件76中"分都已列在下面的變更概述$377*3+本每年出版一次"與本文件一同發(fā)行"可以確保使用者注意到方法和表格信息相關(guān)的最新分會(huì)指南$766774來的$表377*3.377*3$76總結(jié)如下$本文件主要變更概與435$增加了推薦各實(shí)驗(yàn)室確認(rèn)其使用的商業(yè)化抗菌藥物敏感實(shí)驗(yàn)設(shè)備中軟件系統(tǒng)的折點(diǎn)信息闡明了不敏感的定義"增加了折點(diǎn)解釋標(biāo)準(zhǔn)的定義##增加了關(guān)

;.內(nèi)酰胺酶抑制劑活性的信息#V增加了一個(gè)新的亞類"對(duì)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌:.<#具有活性的頭孢菌素##U增加了硝基咪唑類部分"包括甲硝唑和替硝唑W增加了惡唑烷酮類部分"包括利奈唑胺##X增加了鏈陽菌素類部分"包括奎奴普汀;達(dá)福普汀

T##明確了替加環(huán)素在一個(gè)單獨(dú)的分類中"甘氨酰環(huán)素類#!!刪除了鏈陽菌素增加了夫西地酸%非達(dá)霉素%莫匹羅星和大觀霉素T增加了建議實(shí)驗(yàn)室對(duì)常規(guī)實(shí)驗(yàn)中對(duì)所有的抗菌藥物都耐藥的菌株給予證實(shí)的試驗(yàn)流程T增加了關(guān)于用紙片擴(kuò)散法檢測(cè)達(dá)托霉素結(jié)果不準(zhǔn)確的信息V平板判讀和結(jié)果解增加了對(duì)于檢測(cè)葡萄球菌屬耐頭孢西丁%甲氧西林%奈夫西林實(shí)驗(yàn)的建議$TT#肺炎鏈球菌抑菌環(huán)直徑解釋標(biāo)闡明了從非腦膜炎中分離的肺炎鏈球菌對(duì)笨唑西林敏感性的建議"76或抑菌環(huán)直徑#64BB"霉素敏感之前"應(yīng)加做頭孢硝噻酚實(shí)驗(yàn)或?qū)η嗝顾丶埰志h(huán)邊緣進(jìn)行評(píng)估來檢測(cè);.內(nèi)酰胺酶#W增加了關(guān)于報(bào)告對(duì).具有活性的頭孢菌素信息V#增加了關(guān)于可能出現(xiàn)的篩選實(shí)驗(yàn)結(jié)果變化的信息!!V闡明了表格中每一分子類別的活性部位<$在<增加了關(guān)

;.內(nèi)酰胺酶和它們的耐藥機(jī)制的信息V超廣譜內(nèi)酰胺酶#.提供了.關(guān)于對(duì)抑制劑敏感的酶的信息增加了如何

內(nèi)酰胺類藥物折點(diǎn)解釋通過!值來判斷對(duì)產(chǎn).的抗菌活性信息VV擴(kuò)展了C胺酶及其作用方式的信息VT結(jié)合了上述有關(guān)其

內(nèi)酰胺酶和金

內(nèi)酰胺酶介導(dǎo)的耐藥部分"提供了關(guān)于在臨床分離的桿菌科中碳青霉烯酶活性的詳細(xì)信息"其中包括一個(gè)舉例的表格!可誘導(dǎo)的克林霉素耐闡明了對(duì)于葡萄球菌誘導(dǎo)性實(shí)驗(yàn)紙片放置的試驗(yàn)方法增加了在葡萄球菌中青霉素紙片實(shí)驗(yàn)對(duì)于抑菌環(huán)邊緣的評(píng)估可作為檢測(cè)內(nèi)酰胺酶的一種方法#增加了具有對(duì):.抗菌活性的頭孢菌素信息附錄紙片擴(kuò)散抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的條件闡明了葡萄球菌屬的孵育方法$增加了檢測(cè)腦膜炎奈瑟球菌分離株的注意事項(xiàng)附錄抗菌藥物敏感性試驗(yàn)的質(zhì)量控制菌增加了對(duì)于用紙片擴(kuò)散法檢測(cè)達(dá)托霉素的注釋.!.#%自愿的%非盈利性%跨學(xué)%育機(jī)""$制定"并在公開和協(xié)商的論壇中尋求發(fā)$對(duì)..0驗(yàn)分委會(huì)查閱了大量的研究數(shù)據(jù)如'體外試驗(yàn)%藥代動(dòng)力學(xué)[藥效動(dòng)力學(xué)和臨床研究#試驗(yàn)方法%解釋標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制#參數(shù)$建立解釋標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)控參數(shù)所要求的詳細(xì)數(shù)據(jù)以及這些數(shù)據(jù)是如何評(píng)價(jià)在.的6>*文件中已有描述$推移"一種微生物對(duì)某種抗菌藥物的敏感性可能會(huì)降"欠佳$此外""以保證更準(zhǔn)確和更好地進(jìn)$如此".$."學(xué)和""%相結(jié)合來指導(dǎo)病人的治療$本文件中其他的信息%更新和改變可以在網(wǎng)站有關(guān)藥敏分委會(huì)的會(huì)議紀(jì)要中找到7633和7=<4者應(yīng)認(rèn)識(shí)到在這些文件中是沒有注明商品化的藥敏試驗(yàn)檢測(cè)設(shè)備的解釋折點(diǎn)"這點(diǎn)非常重要$臨床實(shí)驗(yàn)室可以利用這里描述的非專利的參考方法做常規(guī)藥敏檢測(cè)"或者可以用于評(píng)估商品化方法是否適用于臨床常規(guī)檢測(cè)$在美國"商品化的檢測(cè)體系在獲得進(jìn)入市場(chǎng)許可之前"必須由組織應(yīng)用.的參考方法評(píng)估其性能$獲得頒發(fā)的許可證意味著商業(yè)機(jī)構(gòu)得出的細(xì)菌鑒定和藥敏結(jié)果等同于應(yīng)用.0參考方法得出的結(jié)果$一些實(shí)驗(yàn)室可以利用商抗素濃度梯度條帶色度法比濁熒光計(jì)或者其他方法做選擇性檢測(cè)或常規(guī)檢測(cè)$由于諸多原因?qū)е赂鞣N管理部門制定的折點(diǎn)與.0的折點(diǎn)有所不同"包括以下方面'不同的數(shù)據(jù)庫%數(shù)據(jù)解釋的差異%世界不同地方使用劑量的差異和公共衛(wèi)生政策等$導(dǎo)致差異的原因還包括.%.法在.的6>*文件中均有列表$.""是如$"家應(yīng)""$"廠家行一個(gè)改變的解釋折點(diǎn)"可以要求.建議的3年試用周期延長$在美國"藥敏室允許使用現(xiàn)有的解釋折點(diǎn)$對(duì)于臨床實(shí)驗(yàn)室的授權(quán)而言UG或.的藥$$驗(yàn)檢測(cè)的儀器設(shè)備進(jìn)行確認(rèn)"了解關(guān)于其系統(tǒng)軟件中使用的解釋標(biāo)準(zhǔn)等更多信息$與適當(dāng)?shù)娜藛T進(jìn)行討論之后!如感染科醫(yī)生和藥事部門!以及藥學(xué)和治療學(xué)以及感染控制委員會(huì)的醫(yī)務(wù)人員!臨床實(shí)驗(yàn)室可以執(zhí)行最新批準(zhǔn)或修改的折點(diǎn)%!$$文件出版后!可以立即執(zhí)行

%'紙片擴(kuò)散法折點(diǎn)值如果一臺(tái)裝置包括用折點(diǎn)解釋某種抗菌藥物敏感的足夠濃!那么這個(gè)實(shí)驗(yàn)室在進(jìn)行適當(dāng)?shù)拇_認(rèn)后可以用的折點(diǎn)進(jìn)行解釋和報(bào)告結(jié)果%抗菌藥物敏感試驗(yàn)分委會(huì)由專業(yè)人士%政府%工業(yè)部門的代表組成"包括臨床實(shí)驗(yàn)室%政府代理機(jī)構(gòu)%衛(wèi)生保健的提供者和教育者%藥學(xué)和診斷微生物學(xué)廠商$應(yīng)用.0志愿形成的共識(shí)性程序"分委員制定準(zhǔn)確的抗菌藥物敏感試驗(yàn)方法和恰當(dāng)?shù)膱?bào)告標(biāo)準(zhǔn)$抗菌藥物敏感試驗(yàn)分委會(huì)的任務(wù)如下制定抗菌藥物敏感試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)參考方為標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法提供質(zhì)量控制參為標(biāo)準(zhǔn)的抗菌藥物敏感性試驗(yàn)方法建立解釋標(biāo)為臨床相關(guān)且經(jīng)濟(jì)的檢查和報(bào)告策略提供建通過新的或修訂的方法%解釋標(biāo)準(zhǔn)和質(zhì)量控制參數(shù)的發(fā)展"不斷地改進(jìn)與完善新發(fā)現(xiàn)的耐藥機(jī)制的檢測(cè)方法和標(biāo)準(zhǔn)通過多媒體交流培訓(xùn)使用者應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)和指促進(jìn)方法的使用者和提供者之間的對(duì)分委會(huì)的最終目的是提供有用的信息"使實(shí)驗(yàn)室能夠幫助臨床醫(yī)生選擇合適的抗生素治療患者"標(biāo)準(zhǔn)和指南具有廣泛性"所有的抗菌藥物必須符合由.0制定的準(zhǔn)則$執(zhí)行這個(gè)任務(wù)的價(jià)值是保證質(zhì)量%準(zhǔn)確"公平%適時(shí)%協(xié)助%一致和信任$關(guān)鍵瓊脂擴(kuò)散(抗生素(抗菌藥物(紙片擴(kuò)散(敏感性試抗菌藥物敏感性試驗(yàn)紙片法執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn) 范!"條件$%"結(jié)"質(zhì)量控%程序"散法的局限性!為了幫助臨床實(shí)驗(yàn)室"提供了進(jìn)行常規(guī)測(cè)試和報(bào)告的抗菌藥物的建議選擇方法!體外需氧標(biāo)準(zhǔn)2)*4文件'體外厭氧菌敏感性試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)參見2--'0123罕見苛養(yǎng)菌敏感性試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)化準(zhǔn)則未包括在2*($*4&5或)--'文件中"可參見256文件7! 介!"片擴(kuò)!$用和!2%&6%&4的商業(yè)產(chǎn)品或設(shè)備"而不能批準(zhǔn)或不能認(rèn)可商業(yè)產(chǎn)品或設(shè)備!如果紙片擴(kuò)散試驗(yàn)僅僅基于抑菌環(huán)的有無"而不考慮抑菌環(huán)的大小"則無法檢測(cè)抗菌藥物的敏感性!只有將檢測(cè)方法和抑菌環(huán)直徑測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)化的方法相結(jié)合進(jìn)行紙片擴(kuò)散試驗(yàn)"才能獲得可信的結(jié)果"并與已知對(duì)各種抗菌藥物敏感或者耐藥的菌株的最低抑菌濃度%相一致!!由藥物分委薦的標(biāo)準(zhǔn)化方法是基于$等&-*首先描述的方法!隨著解釋標(biāo)準(zhǔn)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室和臨床數(shù)據(jù)不斷發(fā)展和改進(jìn)"使其成為對(duì)紙片擴(kuò)散法描述最為完善的文件!了目前推薦的紙片擴(kuò)散敏感性試驗(yàn)的方法$0和解釋準(zhǔn)則當(dāng)出現(xiàn)新的問題"標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了改進(jìn)"變動(dòng)的部分會(huì)納入新版本的標(biāo)準(zhǔn)中"并補(bǔ)充進(jìn)每年的信息增之中#)-*&-'! 標(biāo)準(zhǔn)防由于通常不知道什么菌株或標(biāo)本可能具有傳染性"因此所有病人和實(shí)驗(yàn)室來源的標(biāo)本均應(yīng)視為有傳染性并根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)來處理!標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)是結(jié)合通用防護(hù)和身體物質(zhì)隔離規(guī)定的主要部分而制定的指南!通用防護(hù)常僅適用于血源性病原體的傳播"而標(biāo)準(zhǔn)防護(hù)涵蓋了所有傳染性因素的傳播所以較通用防護(hù)更為全面!美國疾病控制和預(yù)防中心%已有標(biāo)準(zhǔn)和通用防護(hù)指南&對(duì)于來自實(shí)驗(yàn)器材的傳染性因素的特殊防護(hù)"或者對(duì)于暴露于各種傳染性疾病的處理辦法"最好參照文件(:&- 術(shù)%! 定抗菌藥物敏感性試驗(yàn)解釋分類 基于細(xì)菌在體外常規(guī)劑量下對(duì)在血液或組織可達(dá)到的抗菌藥物水平的反應(yīng)!-敏感指對(duì)感染部位使用推薦劑量時(shí)"該菌株被通?？蛇_(dá)到的抗菌藥物濃度水平所抑制(中指細(xì)菌對(duì)抗菌藥物接近血液和組織中通常可達(dá)到的濃度"療效低于敏感株注+理濃集的部位具有臨床效力如尿液中的喹諾酮類和內(nèi)酰胺類或者可使用高于正常劑量的藥物進(jìn)行治療如內(nèi)酰胺類!另外"中介還作為緩沖區(qū)"以防止微小的$未受控制的技術(shù)因素導(dǎo)致較大的錯(cuò)誤結(jié)果"特別是對(duì)那些藥物毒性范圍狹窄的藥物'指"和或證如內(nèi)酰胺酶"或在治療研究中表現(xiàn)為抗菌藥物臨床療效不可靠!5非敏感用在僅有敏感解釋"無中介或耐藥解釋的細(xì)菌即僅有敏感解釋折點(diǎn)受試菌!-+分離!#可敏感,(+"抗%折點(diǎn)解釋標(biāo)準(zhǔn)如上所述通過最低抑菌濃度%0或抑菌環(huán)直徑值來判斷敏感$中介和耐藥舉例+對(duì)于抗菌藥物C具有如下的判斷標(biāo)準(zhǔn)#抑菌環(huán)直徑%敏中耐-敏感折點(diǎn)+5或(*%%耐藥折點(diǎn)'(或-5%%&實(shí)在葡萄球菌和鏈球菌的檢測(cè)中&'用克林霉素和紅霉素紙片臨近放置的紙片擴(kuò)散法來檢測(cè)克林霉素是否存在可誘導(dǎo)耐藥!質(zhì)$"2G:**-6'%包括確保并持持特產(chǎn)品要求的程序和活動(dòng)在試驗(yàn)環(huán)境"包括控制所有的原材"必"儀"程"樣傳儲(chǔ)處"保"校"質(zhì)"能"人培訓(xùn)"以及一切與結(jié)果報(bào)告相關(guān)的其他因素!質(zhì)量控制#$ 2'的確認(rèn)體系"通過定期對(duì)結(jié)果和操作技術(shù)的檢查來確保準(zhǔn)確性和可重復(fù)性!生理鹽 *E6:#%%# 縮略2K抗菌藥物敏感性驗(yàn)美國分類和培養(yǎng)準(zhǔn)菌腦心浸液生物安全柜生物安全水平國疾病控制和預(yù)防心美國,O2,,

菌落形成單位腦脊液脫氧核糖核酸乙二胺四乙超廣譜內(nèi)酰胺食品藥品管理局美國嗜血桿菌試驗(yàn)培養(yǎng)異質(zhì)性萬古霉素中介的金黃色葡萄球菌肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶瓊脂肉湯改良的S試驗(yàn)最低抑菌濃度)2耐甲氧西林葡萄球菌2耐甲氧西林金黃色葡萄球9煙酰胺腺嘌呤二核苷青霉素結(jié)合蛋白Q(=青霉素結(jié)合蛋白0,N

質(zhì)量保證質(zhì)量控制核糖核T#)美萬古霉素耐藥的腸球 進(jìn)行敏感性試驗(yàn)的指如果不能通過對(duì)細(xì)菌特性的了解來預(yù)測(cè)其藥物敏感性"那么就有指征做敏感性試驗(yàn)"以決定對(duì)于一種感染如何進(jìn)行抗菌藥物治療!敏感性試驗(yàn)常能夠提示病原菌存在對(duì)常用抗菌藥物耐藥機(jī)制"包括藥物滅活酶的產(chǎn)生"藥物靶位的改變和藥物攝取和外排的改變!可預(yù)知一些微生物對(duì)抗菌藥物的敏感性"對(duì)這些微生物的經(jīng)驗(yàn)性治療已被廣泛接受!如果感染細(xì)菌被認(rèn)為是對(duì)有效藥物敏感的微生物"則極少需要藥+化膿鏈球菌對(duì)青霉素持續(xù)的敏感性!對(duì)從青霉素過敏的患者分離的化膿鏈球菌株"紅霉素或者其他的大環(huán)內(nèi)酯類藥物可被用于檢測(cè)這些菌株的耐藥性!藥敏試驗(yàn)在耐藥流行病學(xué)調(diào)查和新型抗菌藥物的研究中也十分重要!各種細(xì)菌的分離菌落都可能存在致病性"因此應(yīng)從原始瓊脂平板上選擇并分別測(cè)試其敏感性!鑒定通常同時(shí)進(jìn)行!不同類型的微生物的混合物不能在同一平板上做敏感性試驗(yàn)!應(yīng)避免直接用臨床材料如"正常應(yīng)該是無菌的體液和尿液%進(jìn)行藥敏試驗(yàn)"除了在臨床緊急情況時(shí)"革蘭染色提示單一的病原體時(shí)可以這樣做!當(dāng)我們直接用臨床材料進(jìn)行藥敏試驗(yàn)時(shí)"結(jié)果應(yīng)作為初步報(bào)告"并且隨后必須用標(biāo)準(zhǔn)方法重復(fù)做藥敏試驗(yàn)!當(dāng)感染性質(zhì)不明確"樣本包含混合生長或正常菌群時(shí)在該微生物可能與感染過程沒有多大聯(lián)系時(shí)"藥敏試驗(yàn)通常是不必要的并且其結(jié)果也可能造成誤解! 用于常規(guī)檢測(cè)和報(bào)告的抗菌藥物的選"$院藥$"!在)-**&-,-<!組的藥+$$$$,選和藥物的一意見!采擇的藥物藥敏試驗(yàn)有助于感染的控!)-**&-'-,和-<推薦的為前最合適測(cè)和報(bào)告物!避"給臨床醫(yī)生的常規(guī)報(bào)告應(yīng)該僅包含-,和-<!些藥物可能會(huì)被到或從這些基本名單中刪除!某些治療中不適合使用的藥物也可以為我們提供測(cè)試數(shù)據(jù)和流行病"但出現(xiàn)在患者的報(bào)告中!然而"這些結(jié)果應(yīng)該對(duì)感染控醫(yī)院家開放在實(shí)驗(yàn)室中%#為了盡量減少混亂"所有的抗菌藥物應(yīng)使用官方的非專有即通用名名稱報(bào)告!為了強(qiáng)調(diào)現(xiàn)有許多可用抗菌藥物的相關(guān)性"可以按照藥物種類進(jìn)行如下分類見)-**&詞匯表-%#!內(nèi)酰胺類抗菌藥物都具有共同結(jié)構(gòu)"中央為四元內(nèi)酰胺環(huán)"作用方式主要是抑制細(xì)胞壁合成!依據(jù)與內(nèi)酰胺環(huán)相連的附加環(huán)結(jié)構(gòu)或替代基團(tuán)的不同可分為青霉素類$頭孢烯類$碳青霉烯類或單環(huán)內(nèi)酰胺類!(- 青霉素青霉素類主要對(duì)不產(chǎn)內(nèi)酰胺酶的需氧革蘭陽性菌$部分苛氧菌$需氧革蘭陰性桿菌以及部分厭氧菌活性!氨基青霉素氨芐西林和阿莫西林對(duì)包括腸桿菌科在內(nèi)的一些革蘭陰性桿菌具有活性!羧芐西林和替卡西林和脲基青霉素美洛西林和哌拉西林對(duì)革蘭陰性菌的抗菌譜更廣"包括假單胞菌屬和伯克霍爾德菌屬的許多菌種!對(duì)青霉素酶穩(wěn)定的青霉素氯唑西林$雙氯西林$甲氧西林$萘夫西林和苯唑西林主要對(duì)革蘭陽性菌包括產(chǎn)青霉素酶的葡萄球菌有活性!7(-(胺酶抑制劑復(fù)合""活性"!"聯(lián)合!'+$!中內(nèi)酰胺部分對(duì)產(chǎn)"內(nèi)酰胺酶菌的試驗(yàn)結(jié)果通常不能預(yù)測(cè)兩種藥物作為復(fù)合劑時(shí)的敏感性!(-'不同的頭孢類抗菌藥物對(duì)需氧和厭氧的革蘭陽性和陰性菌的抗菌譜不盡相同!頭孢烯類包括經(jīng)典的頭孢菌素類以及頭霉素$氧頭孢烯類和碳青霉烯類等亞類中的抗菌藥物"并且包括一個(gè)新的亞類"西林金黃色葡萄球菌)2%具有活性的頭孢菌素見)-**&-'術(shù)語表%!頭孢菌素類以對(duì)多種藥物耐藥革蘭陰性菌的抗菌活性不同分為第一$二$三$四代頭孢菌素!不是所有屬于同一特定組或代中的抗菌藥物具有相同的抗菌活性譜!因此每一組中可能選擇不止一種的抗菌藥物用于常驗(yàn)(- 青霉烯"""胺酶水解的能力更強(qiáng)"因此對(duì)許多革蘭陽性和革蘭陰性菌具有更廣的抗菌譜!(- 單環(huán)內(nèi)酰胺!"類抗微生物藥物"它僅對(duì)需氧革蘭陰性桿菌具有活性!##!..&(((-氨基糖苷類是結(jié)構(gòu)相關(guān)的抗菌藥物"可在核糖體水平上抑制細(xì)菌蛋白的合成!這類抗菌藥物不同程度地受氨基糖苷滅活酶的影響而導(dǎo)致其抗菌活性譜有差異!氨基糖苷類主要用于治療革蘭陰性桿菌感染或與對(duì)細(xì)胞壁具有活性的抗微生物藥物如青霉素$氨芐西林和萬古霉素%聯(lián)合應(yīng)用以協(xié)同治療一些耐藥的革蘭陽性菌"如腸球菌屬!(((磺胺類藥物和三甲氧芐啶是具有相似活性的化療藥物"均可抑制細(xì)菌的葉酸合成途徑!磺胺異口惡唑是最常使用的治療尿路感染的磺胺類藥物"因此適合進(jìn)行體外試驗(yàn)!磺胺甲口惡唑通常與三甲氧芐啶聯(lián)合試驗(yàn)"因?yàn)樗鼈兎謩e抑制一些革蘭陽性和革蘭陰性菌葉酸合成的連續(xù)步驟!((%""抑制細(xì)胞壁的合成"但作用位點(diǎn)與內(nèi)酰胺類藥物不同!該類抗生菌有!素過敏病人的革蘭陽性菌的感染"而且有類藥的陽性細(xì)菌引起的感染如耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌和部分腸球菌!((5"!<和多"對(duì)革蘭陰性菌有活性!!基中"#6*%達(dá)托霉素的活性是必須的!((6大環(huán)內(nèi)酯類抗微生物藥物結(jié)構(gòu)上相近"在核糖體水平上抑制細(xì)菌蛋白的合成!該類藥物現(xiàn)用的幾種藥物需要考慮用于測(cè)試對(duì)革蘭陰性苛氧菌的活性對(duì)革蘭陽性菌"僅有紅霉素需要常規(guī)測(cè)試!大環(huán)內(nèi)酯類抗微生物由幾個(gè)亞組組成"包括阿齊霉素$克拉霉素$地紅霉素$酮內(nèi)脂類的泰利霉素T

((7""宿主的"它們只對(duì)厭氧菌有效!((4惡唑烷酮類是一種抑制蛋白質(zhì)合成的藥物!此類藥物中第一個(gè)被批準(zhǔn)使用的藥物是利奈唑胺"它對(duì)革蘭陽性菌具有抗菌活性!((E喹喏酮類喹喏酮和氟喹喏酮是一類結(jié)構(gòu)相似的抗微生物劑"主要抑制革蘭陽性和革蘭陰性菌,旋轉(zhuǎn)酶或拓?fù)洚悩?gòu)酶的活性!該類藥物抗菌譜不盡相同"因此需要單獨(dú)測(cè)試每種藥物((:鏈陽菌素類包括奎奴普汀達(dá)福普汀和T[T[T"是鏈霉素產(chǎn)生的兩個(gè)環(huán)肽的聯(lián)合"兩個(gè)!"的治療!甾體類$莫匹羅星假單胞酸$大觀霉素氨基環(huán)醇類$非達(dá)霉素大環(huán)類!((- 四環(huán)素四環(huán)素類是一類結(jié)構(gòu)相似的抗微生物藥物"主要在核糖體水平上抑制某些革蘭陽性和革蘭陰性菌的蛋白的合成!該組藥物中各藥物活性密切相關(guān)"常規(guī)試驗(yàn)僅需測(cè)試四環(huán)素!對(duì)四環(huán)素敏感的微生物可認(rèn)為對(duì)多西環(huán)素和米諾環(huán)素也敏感!但一些對(duì)四環(huán)素中介或耐藥的微生物對(duì)多西環(huán)素和或%米諾環(huán)素也敏感!替加環(huán)素"一種甘氨酰環(huán)素"是米諾環(huán)素的衍生物"對(duì)那些可能耐其他四環(huán)素類藥物的微生物具有活性!((- 單一藥物!些藥$$甾$%,喃"通常只!磷霉素磷霉素類也是,批準(zhǔn)的只用于治療尿路感染的藥物"它抑制與細(xì)胞壁合成相關(guān)的酶!$"應(yīng)限制測(cè)試藥物的數(shù)量!)-**&表-,-<物!"對(duì)應(yīng)的抗生素以協(xié)助實(shí)驗(yàn)室選擇常規(guī)試驗(yàn)的藥物組合!元格的藥物其結(jié)果解釋敏感$中介或耐藥和臨床療效相近在每一單元格中"在每或字表示其交叉耐藥和敏感的結(jié)果幾乎完全一致基于對(duì)大量細(xì)菌的測(cè)試表明和極重要誤差小于'次要誤差小于-*H此外"為證明或字符合要求"必須少測(cè)試-**株對(duì)該藥物耐藥的細(xì)菌"其中必須有至少:6H的菌株對(duì)所有試驗(yàn)藥物的測(cè)試結(jié)果應(yīng)為)!似的抗微生物藥物只有敏感的解釋標(biāo)準(zhǔn)時(shí)如流感嗜血桿菌對(duì)頭孢噻"可以從以或相連的一種藥物的結(jié)果預(yù)測(cè)另一種藥物的結(jié)果例如"腸桿菌科菌對(duì)頭孢噻肟敏感時(shí)也可被認(rèn)為對(duì)頭孢曲松敏感在報(bào)告頭孢噻肟敏感的試驗(yàn)結(jié)果時(shí)"同時(shí)報(bào)告曲松敏感的評(píng)注!在單元格中沒有或連接的藥物"因存在差異或沒有足夠的數(shù)據(jù)"一種藥物的測(cè)試結(jié)果不能用來預(yù)測(cè)另一種藥物的敏感性!%)-**&-'-,-<素"$報(bào)告的藥物<!"",藥物!+菌或,,,對(duì),$病例,或以感染控制為目的!0組"+"如耐藥$局,,,行病學(xué)的感染控制!M如呋和酮%他感!M于治療特殊的泌尿道病原菌如+銅綠假單胞菌和氧氟沙星!G組其他包括對(duì)該組菌有臨床適應(yīng)證的藥物"但這些藥物在美國一般不進(jìn)行常規(guī)試驗(yàn)與報(bào)告組研究性的指尚在進(jìn)行臨床試驗(yàn)而目前還未被9,批準(zhǔn)在美國使用的藥物每個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)咨詢感染科醫(yī)生$藥房$醫(yī)療機(jī)構(gòu)中的藥事委員會(huì)$治療和感染控制委員會(huì)"以決)-**&-'-,-<物哪些用于常規(guī)報(bào)告和哪些只是選擇性報(bào)告組!選擇性報(bào)告有提高試驗(yàn)報(bào)臨床的相關(guān)減少濫用廣譜藥物壓的多!<"要時(shí)應(yīng)提供或些特定的標(biāo)本報(bào)告!意料在經(jīng)過確認(rèn)后應(yīng)當(dāng)報(bào)告如對(duì)第二代藥物耐藥而對(duì)第一代藥個(gè)實(shí)驗(yàn)室都應(yīng)該建立相應(yīng)的流程"來明確如何處理鑒定對(duì)常規(guī)藥敏都耐藥的菌株"該流程應(yīng)包括用自己建立的方法或送到相關(guān)參考實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的內(nèi)容 紙片擴(kuò)散試驗(yàn)的試! L瓊脂"L)%養(yǎng)基"原因如下+藥敏試驗(yàn)顯示了可接受的批間重復(fù)性其含有影響磺胺$甲氧芐啶和四環(huán)素敏感性試驗(yàn)結(jié)果的抑制劑濃度低能使絕大多數(shù)非苛氧病原體生長良好已積累了用此培養(yǎng)基進(jìn)行的敏感性測(cè)試的大量數(shù)據(jù)和經(jīng)驗(yàn)),"!"0*-',使用可應(yīng)用市場(chǎng)制備的平皿或按附錄<的要求制備平皿!"),的[L值瓊脂培養(yǎng)基的[L值在室溫下應(yīng)在4(F45之間調(diào)節(jié)[L值的方法見附錄<--!!#"#\"直到-*FT%""出!$""清晰的抑菌環(huán)"甚至沒有抑菌環(huán)的產(chǎn)生"這可能導(dǎo)致錯(cuò)誤的耐藥報(bào)告!使用),時(shí)盡量降低胸苷含量!磺!,$$(*(*!%"主要是鎂和鈣"影響氨基糖苷類和四環(huán)素對(duì)銅綠假單胞菌菌株的!過量"!量的!"量環(huán)小"高可!"!類抑菌環(huán)變)L,的多性能測(cè)試必須符合)-**&-'',中的質(zhì)控范!#),"!"$$$$""),!"<本文件介紹的方法測(cè)試!含,嗜血桿菌試驗(yàn)培養(yǎng)基^0瓊脂基質(zhì)_-H規(guī)定的生長添加物在第十部分和附錄0中給出了相關(guān)的測(cè)試細(xì)節(jié)$$!應(yīng)購買可靠的供應(yīng)商的紙片!紙片應(yīng)當(dāng)同時(shí)至少有一個(gè)分析說明的紙片批號(hào)和濃度的證書"并能提供用推薦的質(zhì)控細(xì)菌進(jìn)行質(zhì)控的數(shù)據(jù)!$#藥敏紙片盒專門用于儲(chǔ)存敏感性試驗(yàn)的商業(yè)用藥敏紙片"其包裝可以確保適當(dāng)?shù)臒o水條件!紙片儲(chǔ)存條件如下+-.E\"`-5\!!"!$$劑"使用前冷凍儲(chǔ)存可以保持更好的穩(wěn)定性!,0$是OT[$$T的注冊(cè)商標(biāo)(室溫!這可以最大限度地減少熱空氣接觸冷的紙片時(shí)產(chǎn)生冷凝水!'."!用紙""!平衡至室溫!如指示劑改變顏色時(shí)應(yīng)通過更換干燥劑來防止過多的水分的影響!不使用時(shí)"冷藏含有藥敏紙片的紙片分配器只使用沒有超過制造商標(biāo)明的有效期的紙片"丟棄過期的紙片 紙片擴(kuò)散法接種物制3 接種物制備的濁度標(biāo)"5"*6學(xué)%563# 接種物制#直接菌落懸浮法是接種準(zhǔn)備最方便的方法!該方法可用于大多數(shù)生物"它是測(cè)試苛養(yǎng)嗜血桿菌"淋病奈瑟菌"腦膜炎奈瑟菌和鏈球菌見第-*項(xiàng)%"以及測(cè)試潛在甲氧西林或苯唑西林耐藥葡萄球菌的推薦方法!#-%-EF(5O上挑取"肉湯或生理鹽水制成菌懸液!(6菌,0$6:((F%a-*E個(gè)菌落形成單位%!準(zhǔn)確地執(zhí)行此步驟"使用光度比濁儀"或者"如果進(jìn)行肉眼觀察"應(yīng)在足夠的光線下貼靠著有白色背景和對(duì)比黑線的比色卡比較接種管和*6麥?zhǔn)蠞舛葮?biāo)準(zhǔn)管!##"!氧養(yǎng)基中選擇F6個(gè)形態(tài)相同的單個(gè)菌!用接種環(huán)或無菌拭子將菌落轉(zhuǎn)移至含有5F6%#合適的肉湯培養(yǎng)基的試管"如胰蛋白酶大豆肉湯!(在6b孵育培養(yǎng)液"直到達(dá)到或超過標(biāo)準(zhǔn)的*6麥?zhǔn)蠞舛韧ǔＪ荈7O濁度'*6!相對(duì)$(6Fa-*E%"光"""色6 紙片擴(kuò)散法操作流4 接種平#-%-6T!轉(zhuǎn)拭子數(shù)次"這樣能除去棉簽上多余的液體!(用拭子劃線整個(gè)瓊脂表面"接種于表面干燥的,平板!重復(fù)兩次此過程"每次旋轉(zhuǎn)平板7*度"以確保每次接種均勻分布!最后在瓊脂平板的邊緣涂抹一圈T"T"水分!注意%避免接種濃度過高切勿使用未稀釋過夜的肉湯培養(yǎng)物或其他不標(biāo)準(zhǔn)的接種物來劃線涂布平板!4# 紙片在已接種的瓊脂平板上的放定的一組抗菌藥物紙片分置在已接種細(xì)菌的瓊脂表面!每個(gè)紙片必須壓下以確保與瓊脂表面完全接觸!無論是單獨(dú)放置的紙片或有紙片分配設(shè)備"紙片必須分布均勻"兩紙片之距離不少于(5一般來說"一個(gè)直徑-6*的瓊脂平板應(yīng)放置不超過個(gè)紙片"-**板放置不超過6個(gè)紙片最好是在預(yù)期的產(chǎn)生小的抑菌環(huán)的紙片例如+慶旁的抑菌環(huán)的紙片如頭孢菌素類%"以避免重疊!注意紙片脂邊緣的距離同樣重要"無論有多少紙片!如果紙片放置得太靠近瓊脂的邊緣一些藥物的抑菌環(huán)可能會(huì)不完整!由于一些藥物幾乎是瞬間擴(kuò)散的"一旦紙片與瓊脂表面接觸"就不能"如不佳瓊脂一個(gè)位置重新放置一個(gè)紙如果是為誘導(dǎo)克林霉素耐藥的測(cè)試"紙片的放置位置請(qǐng)看部分和)-**&-'的表格$L-中的指!#(后-6T內(nèi)倒置瓊脂板并將它放置在#b\的孵箱中在'\以上的溫度測(cè)試能無法檢測(cè)到2%除了嗜血桿菌屬$淋病奈瑟菌"腦膜炎奈瑟菌和鏈球菌見第-*部分"孵育不應(yīng)在0G(含量較高的環(huán)境中進(jìn)行"因?yàn)榕凶x標(biāo)準(zhǔn)是在需氧孵育環(huán)境下建立的"0G(濃度變化會(huì)顯著改變一些藥物的抑菌環(huán)的大小4$ 平板判讀和結(jié)果解#--7F-EO見下文第-*和部分"以及例外情況見附錄%"檢查每個(gè)平板如果平板的涂布令人滿意"接種正確"由此產(chǎn)生的抑制圈是均勻的圓形"并會(huì)有融合生長的菌苔!"說明接種量過稀"必須重復(fù)試驗(yàn)測(cè)量完全抑制區(qū)的直徑由肉眼來判斷%包的直徑!測(cè)量抑菌環(huán)至最接近的整毫米數(shù)采用游標(biāo)卡尺或尺子在培養(yǎng)板的背面測(cè)量!將培養(yǎng)板放在一個(gè)黑色不反光的背景上并用反射的光照射"但下列情況除外+如果是加入血液的瓊脂平板如鏈球菌%"應(yīng)除去蓋子并用反射光照射"在瓊脂的上方測(cè)量抑菌環(huán)!$$"孵育時(shí)間必須達(dá)到(5O,-7F-EO!!域出現(xiàn)可辨別的生長都判為苯唑西林耐藥!檢測(cè)萬古霉素對(duì)金黃色葡萄球菌或腸球菌屬的敏感性"孵育時(shí)間必須達(dá)到(5"才能報(bào)告!-7F-EO!--如果用頭孢西丁測(cè)試葡萄球菌屬"讀取抑菌環(huán)直徑時(shí)用反射光"不用透射光如果測(cè)試?yán)芜虬穼?duì)葡萄球菌屬的敏感性"讀取直徑時(shí)用透射光(生長區(qū)即可認(rèn)制圈邊緣!在抑菌環(huán)邊緣的只能在放大鏡到的微小菌落的生長可以忽略不計(jì)!然而"在一個(gè)明顯的抑菌環(huán)內(nèi)有分散的菌落生長時(shí)"應(yīng)該從原始培養(yǎng)基中的純培養(yǎng)物或挑取單個(gè)菌落移種后重新測(cè)試!如果分散的菌落仍然在抑菌環(huán)內(nèi)生長則應(yīng)測(cè)量無菌落的抑菌環(huán)內(nèi)徑!變形桿菌屬菌株可遷徙生長至某種抗菌藥物抑菌環(huán)內(nèi)"因而"對(duì)于變形桿菌屬"要忽略明顯的抑菌環(huán)內(nèi)薄紗樣遷徙生長!當(dāng)應(yīng)用血液補(bǔ)充培養(yǎng)基測(cè)試鏈球菌時(shí)"測(cè)量的是生長抑制圈"而不是溶血抑制圈含甲氧芐啶和磺胺類藥物測(cè)試中"培養(yǎng)基中含有的某些拮抗劑可能會(huì)導(dǎo)致輕微的生長,因此"忽略少量生長#(*H或更少的邊緣生長"并測(cè)量比較明顯的邊緣"以確定抑菌環(huán)的直徑!')-**&-'表(至3"見第-5"這是因?yàn)闆]有或極少出現(xiàn)明確的耐藥菌株"只給出了敏感的折!!.苛養(yǎng)先前介紹的適合快速增長需氧菌的L培養(yǎng)基對(duì)苛養(yǎng)菌是不夠的!如果對(duì)苛養(yǎng)菌進(jìn)行紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)"培養(yǎng)$質(zhì)控程序及解釋性標(biāo)準(zhǔn)必須進(jìn)行修"以適應(yīng)每個(gè)細(xì)!本文闡述對(duì)流感嗜血桿"淋病奈瑟菌"腦膜炎奈瑟菌"肺炎鏈球菌"溶血性鏈球菌和草綠色鏈球菌的紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)及藥物的正確選擇"方法參見-*-F-*5!其他苛養(yǎng)菌可用稀釋或紙片擴(kuò)散法進(jìn)行"方法描述見文6&7'2-!.!流感嗜血桿菌和副流感嗜血桿)&4!和副"%"56&7菌其!<"脂用于嗜血桿菌的常規(guī)測(cè)試!!!—般測(cè)試程序參照第部分"以下情況屬于例外#-"按照E(-部分?jǐn)⑹龅闹苯泳鋺乙悍ㄟM(jìn)行直接使用一個(gè)孵育過夜(*F(5O%瓊脂培養(yǎng)皿上生長的菌落"用)L肉湯)%或生理鹽水制備菌懸液!*65%a-*E"因?yàn)檩^高的接種濃度可能導(dǎo)致一些內(nèi)酰胺類抗菌藥物產(chǎn)生假耐藥結(jié)果"尤其是檢測(cè)產(chǎn)內(nèi)酰胺酶的流感嗜血桿菌時(shí)調(diào)整好懸液的濁度后-6T內(nèi)接種!(-6*的培養(yǎng)基中放置不超過個(gè)紙片"-**的培養(yǎng)基中放置不超過5個(gè)!'"在6H的0G"#'b\-7F-EO#:'&部分%!#常規(guī)測(cè)試推薦的嗜血桿菌的抗菌藥物見)-**&表-<!嗜血桿菌專用的抑菌環(huán)直徑判斷標(biāo)準(zhǔn))-**&表(N!不推薦嗜血桿菌與其他抗菌藥物進(jìn)行紙片擴(kuò)散法藥敏試驗(yàn)#淋病奈瑟測(cè)試淋病奈瑟菌的培養(yǎng)基是包含-H特定的生長添加劑的^0瓊脂&-'制備說明見附錄<"或不"的釋參見文件*4&5不推薦使用營養(yǎng)增強(qiáng)的巧克力瓊脂進(jìn)行淋病奈瑟菌的測(cè)試!#!—般測(cè)試程序參照第部分"以下情況屬于例外(-過")L)%!理6T(-6*個(gè)"-**%%5個(gè)一些藥物如喹諾酮或頭孢菌素類產(chǎn)生的抑菌環(huán)很大"在一個(gè)瓊脂板內(nèi)僅放置F'個(gè)紙片!%"控制6H的0G"#7b-%4%(*F(5O:'&('##淋病奈瑟菌的抗菌藥物見)-**&-'表-<!準(zhǔn)見)-**&-'表(8不推薦淋病奈瑟菌與其他抗!!而"-'快于紙片擴(kuò)散試驗(yàn)"因此推薦霉素耐藥質(zhì)粒介導(dǎo)的對(duì)四環(huán)素耐藥的淋病奈瑟菌其抑菌環(huán)直徑#四環(huán)素紙片一般-而針對(duì)對(duì)青霉素和四環(huán)素的染色體耐藥機(jī)制的淋病奈瑟菌能產(chǎn)生較大的抑菌環(huán)直徑"可以利用)-**&表(8中的解釋標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)確地解釋$注%應(yīng)全柜<2-(-'中執(zhí)行有腦膜炎瑟菌對(duì)抗藥物敏性試在<20外操作瑟菌懸液罹患腦膜炎球菌疾病風(fēng)險(xiǎn)增實(shí)驗(yàn)室獲得性腦膜炎球菌感染有6*H的致死率!得性感染最可能的風(fēng)險(xiǎn)因當(dāng)對(duì)腦膜炎奈瑟菌進(jìn)行微生物操作時(shí)包括抗菌藥物敏感試驗(yàn)"要求操作人員防范液體滴漏或氣溶膠!假如無<20"應(yīng)盡量減少對(duì)這種分離菌處理"局限于革蘭染色或血清型鑒定"使用石碳酸鹽水處理"操"并高膠和涉及生產(chǎn)大量染材料時(shí)"應(yīng)使用'設(shè)施$程序及設(shè)備假如沒有(或'設(shè)施"應(yīng)將分離株送交至少具有2設(shè)施的參考或公共衛(wèi)生實(shí)驗(yàn)室!"根據(jù)疾病預(yù)防和%接種前建議O[+[%"應(yīng)考慮預(yù)防接種!接種疫苗可以降低但""<護(hù)作用!腦膜炎奈瑟菌的紙片擴(kuò)散試驗(yàn)可以檢測(cè)新出現(xiàn)的對(duì)某些抗生素但不包括青霉素%耐藥的細(xì)菌!迄今為止"耐藥大多發(fā)現(xiàn)于使用時(shí)間較長的治療用藥青霉素或氨芐西林%或接觸者預(yù)防用藥!由于尚未發(fā)現(xiàn)用作侵襲性感染治療的藥物"如頭孢曲松或頭孢噻肟等的耐藥"因此不必做常規(guī)的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)!,得!不推薦使用營養(yǎng)增強(qiáng)的巧克力培養(yǎng)基作腦膜炎奈瑟菌的敏感性試驗(yàn)!$!—般測(cè)試程序參照第部分"以下情況屬于例外(-0G(*FO")L<!調(diào)整肉湯或生理鹽水懸液的濁度至*6麥?zhǔn)蠞舛日{(diào)整好懸液的濁度后-6T內(nèi)接種培養(yǎng)基!(在直徑是-6*%%的培養(yǎng)基中放置紙片不超過6個(gè)"-**的培養(yǎng)基中放置不超過個(gè)'#:'&(部分$#抑菌環(huán)直徑判斷標(biāo)準(zhǔn)見)-**&-'表(3!不推薦紙片擴(kuò)散試驗(yàn)用于腦膜炎奈瑟菌測(cè)試其他抗菌藥物 肺炎鏈球菌和其他鏈球菌用于測(cè)試肺炎鏈球菌和其他鏈球菌的培養(yǎng)基建議使用含6H羊血的),培養(yǎng)基!制備說明見附<"也可通過廠商獲得%!—般測(cè)試程序參照第部分"以下情況屬于例外#-%"E(-!#-EF(*O"制備待測(cè)細(xì)菌的)L<或!理6T(%在直徑-6*的培養(yǎng)基中放置紙片不超過個(gè)"-**的培養(yǎng)基中放置不超過5個(gè)#'測(cè)量抑菌環(huán)"6H的0G濃"#6b\孵育(*F(5O參見:'&('部分%#常規(guī)測(cè)試推薦的肺炎鏈球菌的抗菌藥物見)-**&表-<!肺炎鏈球菌專用的抑菌環(huán)直徑判斷折點(diǎn)見)-**&-'表%(*"$$舒$克$頭孢地$頭孢托$頭孢泊$頭孢丙$頭孢唑$$$!!素$$值&!!%%"檢測(cè)的則不能報(bào)告為青霉素耐藥!%$常規(guī)測(cè)試推薦的其他鏈球菌的抗菌藥物見)-**&表-<!其他鏈球菌專用的抑環(huán)圈直徑判斷折點(diǎn)見)-**&-'表(L-和(L(除肺炎鏈球菌外不推薦使用苯唑西林紙片進(jìn)行鏈球菌屬青霉素敏感性的測(cè)定!青霉素或氨芐西林紙片只用于預(yù)測(cè)溶血性鏈球菌的敏感性!通常從無菌部位分離的草綠色鏈球菌菌株如028$血液$骨需測(cè)定青霉素0值!青霉素和氨芐西林紙片擴(kuò)散試驗(yàn)對(duì)草綠色鏈球菌不可靠應(yīng)用第-(部分介紹的方法進(jìn)行溶血性鏈球菌的誘導(dǎo)性克林霉素耐藥的檢測(cè)!!需特別考慮的微生本節(jié)討論有特殊檢測(cè)要求的細(xì)菌或特定的耐藥機(jī)制!紙片擴(kuò)散法和稀釋法檢測(cè)中存在的問題也將在這里討論!!!!"!青霉素類"例如氨芐西林$阿莫西林$阿洛西林$羧芐西林$美洛西林$哌拉西林和替卡西林!!菌感"很容易誘導(dǎo)出內(nèi)酰胺"所以存在治療風(fēng)!內(nèi)酰胺酶的幾種方法已講述過!包括硝噻酚實(shí)驗(yàn)或?qū)η嗝顾丶埰志h(huán)邊緣進(jìn)行評(píng)估的邊緣不產(chǎn)生內(nèi)酰胺酶"突起的邊緣提示產(chǎn)生內(nèi)酰胺&(''!環(huán)進(jìn)"!""如果陽性報(bào)告為產(chǎn)或?qū)η嗝顾啬退?""!菌包括路鄧葡萄球菌"建議只使用硝噻酚實(shí)驗(yàn)檢測(cè)!目前最常見檢測(cè)葡萄球菌的內(nèi)酰胺酶方法"參見!#---( 背"將青霉素類耐藥稱為耐甲氧西林例如"青霉$萘夫西林和苯唑西林%"西林已不再用于藥敏試驗(yàn)和治療"縮寫字母)2#耐甲氧西林金黃色葡萄球菌或)2仍使用!在本文件中"用以下幾個(gè)名詞代表此類耐藥性如)2甲氧西耐藥%多數(shù)耐苯唑西林的葡萄球菌由#"基因介導(dǎo)"編碼產(chǎn)生一個(gè)變異的青霉Q(%"呈質(zhì)或異質(zhì)性表達(dá)!均質(zhì)性的耐藥根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)藥敏試驗(yàn)方法很容易檢測(cè)"而異質(zhì)性為困難"因?yàn)橹挥幸恍〔糠掷?/p>