CLBIII八通道殘留農(nóng)藥測定儀使用說明

CL-BIII八通道殘留農(nóng)藥測定儀使用說明上海博納新技術(shù)研究所2006年4月農(nóng)殘常識1

有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑的特點(diǎn)。兩類農(nóng)藥的作用機(jī)理均為抑制動(dòng)物體內(nèi)乙酰膽堿酯酶的活性，破壞神經(jīng)傳導(dǎo)，引起一系列的神經(jīng)中毒癥狀，直至死亡。二者的主要區(qū)別在于：有機(jī)磷類殺蟲、殺螨劑對乙酰膽堿酯酶的抑制是不可逆的，而氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑對乙酰膽堿酯酶的抑制是可逆的。農(nóng)殘常識2

酶抑制率法和酶系酶源：國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T5009.199-2003《蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測》推薦的酶抑制率法能方便、快速、準(zhǔn)確、成本低廉檢測出農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留，也同時(shí)肯定了乙酰膽堿酯酶作為快速檢測推薦試劑的活性量和具體要求。近年來，我們通過對動(dòng)物源和植物源的多種丁酰膽堿酯酶、乙酰膽堿酯酶進(jìn)行檢測實(shí)驗(yàn)和比較研究，發(fā)現(xiàn)乙酰膽堿酯酶對農(nóng)藥的檢測敏感度和綜合指標(biāo)優(yōu)于丁酰膽堿酯酶；確定了有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對乙酰膽堿酸有較專一性的抑制作用；分析出在抑制率70%以下，大多數(shù)農(nóng)藥濃度和乙酰膽堿酯酶抑制率呈較好的線性關(guān)系，并能實(shí)現(xiàn)對單種農(nóng)藥的定量分析；解決了酶的活性和穩(wěn)定性控制等技術(shù)農(nóng)殘常識3

什么是間接比色法:由于只有當(dāng)?shù)孜锱c產(chǎn)物之間，在光學(xué)性質(zhì)或其它理化性質(zhì)有顯著差異時(shí)，才可能直接用分光光度計(jì)法測定，因此對酶活性濃度的監(jiān)測大多是采用間接監(jiān)測法。如對膽堿酯酶的測定：底物（硫代乙酰膽堿）及酶水解產(chǎn)物（硫代膽堿和乙酸）并不具有顏色，不能用分光光度計(jì)法測定。所以必須設(shè)法在原來反應(yīng)體系中添加一些試劑，這些試劑必須不與酶作用也不影響酶活性，同時(shí)又能與酶反應(yīng)物迅速作用，產(chǎn)生可以被直接測定的物質(zhì)。這就產(chǎn)生了Ellman的膽堿酯酶測定法即間接連續(xù)監(jiān)測法。目前國內(nèi)大多廠家生產(chǎn)的快速農(nóng)藥測定儀都采用了Ellman的膽堿酯酶測定法即間接比色法。該方法通過監(jiān)測底物（硫代乙酰膽堿），酶水解產(chǎn)物硫代膽堿與添加的二硫代硝基苯甲酸（DTNB）作用立刻生成黃色化合物的反應(yīng)速度來測定酶活性變化。農(nóng)殘常識4

什么是連續(xù)監(jiān)測法：50年代，Warburg首先用分光光度計(jì)測定酶的活性。該方法不需停止酶反應(yīng)就可測定反應(yīng)物的變化，容易觀察到反應(yīng)的整個(gè)過程和干擾情況（通過繪制反應(yīng)曲線）。因此逐步取代了固定時(shí)間法成為目前測酶活性的主要方法。該方法是利用連續(xù)對反應(yīng)過程進(jìn)行高靈敏度檢測，并通過繪制整個(gè)酶反應(yīng)曲線避開延滯期和非線性反應(yīng)期，只在線性反應(yīng)期測定最大反應(yīng)初速度。由于儀器的高精密度，連續(xù)監(jiān)測法能在很短時(shí)間，甚至在1分鐘反應(yīng)時(shí)間內(nèi)就能準(zhǔn)確測定出活性的抑制率。技術(shù)指標(biāo)CL-BIII八通道殘留農(nóng)藥測定儀的技術(shù)指標(biāo)：?測量波長：410nm?通道數(shù)：8?檢測用樣品器皿：10mm比色皿?光電流漂移：<0.5%

(3min)?

暗電流漂移：<0.5%

(3min)?抑制率顯示范圍：0-100%

?

抑制率測量范圍：10-100%?

農(nóng)藥檢測：（用甲胺磷農(nóng)藥標(biāo)樣測試）?抑制率示值誤差：±10%?抑制率重復(fù)性誤差：5%第一部分試劑配制第二部分聯(lián)機(jī)使用第三部分單機(jī)使用第四部分相關(guān)技巧與常識目錄第一部分

試劑配制

1、試劑的配制提取液：把提取液甲乙粉末倒入大玻璃瓶中，并加入510ml蒸餾水溶解。酶試劑：用移液槍取3.1ml提取液，加入酶試劑瓶中。顯色劑：用移液槍取20ml提取液，加入顯色劑瓶，溶解后倒入棕色瓶中。底物：用移液槍取3.1ml蒸餾水，加入底物瓶中。2、試劑的保存及注意事項(xiàng)返回目錄1、本試劑適用的國家標(biāo)準(zhǔn)為：GB/T5009.199-2003。2、未配制的試劑，要保存在0℃以下的冷凍箱里。

（保質(zhì)期可達(dá)1年）3、配制好的酶和底物試劑，要保存在4℃的冷藏箱內(nèi)。（保質(zhì)期為一周）4、配制好的提取液常溫下可以長期保存。5、配制好的顯色劑需避光保存；常溫或冷藏，可以

保存1年。第二部部分聯(lián)聯(lián)機(jī)機(jī)使用用第一步步儀儀器連連接1、連連接電電源將儀器器的電電源接接頭和和數(shù)據(jù)據(jù)信號號線接接好。。如如圖：：2、連連接電電腦把數(shù)據(jù)據(jù)信號號線（（串口口線））接入入電腦腦主機(jī)機(jī)背后后的COM口（（串口口）上上，然然后把把數(shù)據(jù)據(jù)信號號線與與儀器器聯(lián)接接起來來，這這樣就就完成成了儀儀器與與電腦腦的硬硬件連連接。。第二步步軟軟件安安裝安裝““農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)質(zhì)量安安全檢檢測軟軟件””把“農(nóng)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)量量安全全檢測測軟件件”光光盤放放入電電腦光光驅(qū)中中，等等自動(dòng)動(dòng)讀取取或在在光盤盤目錄錄下找找到并并雙擊擊“setup”后后，按按提示示點(diǎn)擊擊“下下一步步”安安裝。。安裝裝完成成以后后，桌桌面上上會(huì)出出現(xiàn)““食品品質(zhì)量量安全全檢測測平臺(tái)臺(tái)”的的圖標(biāo)標(biāo)。安裝完成桌面上出現(xiàn)的圖標(biāo)第三步步儀儀器器設(shè)置置儀器設(shè)設(shè)置打開儀儀器電電源，，按儀儀器““確認(rèn)認(rèn)”鍵鍵2次次，然然后按按1次次“設(shè)設(shè)置””鍵，，再按按““確定定”鍵鍵，選選擇““受受控””后再再按1次““確定定”鍵鍵。出出現(xiàn)““現(xiàn)正正處于于受控控工作作模式式”即即可。。打開檢檢測軟軟件，，檢測測軟件件的用用戶名名默認(rèn)認(rèn)為““管理理員””，密密碼是是“111111””。檢測軟件登陸設(shè)置為為受控控狀態(tài)態(tài)調(diào)0/100注：以以上是是一個(gè)個(gè)檢測測窗口口的步步驟，，其他他七個(gè)個(gè)窗口口都是是如此此。等待10-15秒

按“確定”

放入黑塊

等待10-15秒

按“確定”

拿出黑塊

按“”鍵按“”鍵按“”鍵

按“”鍵第四步步空空白對對照空白對對照用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“開始對照分析”鍵

等待對照結(jié)束

用大移移液槍槍抽取取2.5ml提提取液液放入入試管管中裝入對對照按“裝裝入對對照分分析””鍵選擇所需對照選擇需要裝入對照的通道號（在通道號碼前√）

按“讀取”鍵完成裝入工作

注：對對照結(jié)結(jié)束后后，對對照曲曲線會(huì)會(huì)自動(dòng)動(dòng)保存存.（（標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)對對照庫庫中已已有30種種蔬菜菜的對對照，，在做做這30種種蔬菜菜時(shí)，，請參參照這這些對對照。。）裝入標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)對對照庫庫按“裝裝入對對照分分析””鍵選擇所需的空白對照和相應(yīng)的樣品修正值選擇需要裝入對照的通道號（在通道號碼前√）

按“讀取”鍵完成裝入工作

第五步步樣樣品檢檢測用天平稱取1克果蔬剪成2cm見方

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中

靜置15分鐘（或震蕩1分鐘）

用大移液槍從燒杯中抽取2.5ml浸泡液移至空試管中

用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中靜置15分鐘

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“開始樣品分析”鍵

等待檢測結(jié)果

第六步步保保存檢檢測結(jié)結(jié)果保存檢檢測結(jié)結(jié)果樣品結(jié)結(jié)束后后，系系統(tǒng)自自動(dòng)彈彈出““檢測測結(jié)果果”對對話框框選擇該通道所測蔬菜名

填寫（選擇）檢測單位

按“退出”鍵

填寫（選擇）被檢單位和生產(chǎn)單位

按“保存”鍵，保存檢測結(jié)果備注注“統(tǒng)統(tǒng)計(jì)計(jì)分分析析””中中的的““農(nóng)農(nóng)殘殘檢檢測測數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)查查詢詢統(tǒng)統(tǒng)計(jì)計(jì)””對對話話框框有有所所有有保保存存過過的的檢檢測測數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)，，在在該該對對話話框框中中有有““開開始始日日期期““、、““結(jié)結(jié)束束日日期期””、、““果果蔬蔬品品種種””、、““被被檢檢單單位位””等等九九項(xiàng)項(xiàng)選選項(xiàng)項(xiàng)，，對對這這些些選選項(xiàng)項(xiàng)進(jìn)進(jìn)行行組組合合選選擇擇后后，，再再按按““查查詢詢””鍵鍵，，就就可可以以將將您您需需要要的的信信息息從從所所有有的的數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)中中篩篩選選出出來來。。另外外，，““農(nóng)農(nóng)殘殘檢檢測測數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)查查詢詢統(tǒng)統(tǒng)計(jì)計(jì)””對對話話框框中中還還有有““統(tǒng)統(tǒng)計(jì)計(jì)分分析析””和和““轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)存存””等等功功能能，，當(dāng)當(dāng)選選擇擇出出需需要要的的檢檢測測數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)后后，，就就可可以以按按““統(tǒng)統(tǒng)計(jì)計(jì)分分析析””鍵鍵或或者者““轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)存存””鍵鍵，，對對數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)進(jìn)進(jìn)行行統(tǒng)統(tǒng)計(jì)計(jì)分分析析或或制制成成相相應(yīng)應(yīng)報(bào)報(bào)表表。。如果果需需要要打打印印單單項(xiàng)項(xiàng)檢檢測測結(jié)結(jié)果果，，則則點(diǎn)點(diǎn)選選該該結(jié)結(jié)果果后后，，按按““打打印印當(dāng)當(dāng)前前記記錄錄””鍵鍵，，瀏瀏覽覽打打印印效效果果，，再再按按打打印印鍵鍵后后打打印印。。檢測測結(jié)結(jié)果果上上傳傳打開開““設(shè)設(shè)置置””項(xiàng)項(xiàng)下下的的““系系統(tǒng)統(tǒng)選選項(xiàng)項(xiàng)””在“系統(tǒng)選項(xiàng)”中在“注冊ID號”處填入ID號及ID密碼

通過右半邊的條件選擇，查詢出需要上傳的數(shù)據(jù)點(diǎn)擊“發(fā)送”下的“發(fā)送查詢的數(shù)據(jù)”

當(dāng)檢測結(jié)束后需要發(fā)送數(shù)據(jù)時(shí)，打開“統(tǒng)計(jì)匯總”中的“農(nóng)殘檢測數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”

返回目錄第三三部部分分單單機(jī)機(jī)使使用用第一一步步設(shè)設(shè)置置儀儀器器1、、連連接接電電源源將儀儀器器電電源源連連接接好好，，（（如如需需打打印印，，則則要要將將專專用用打打印印機(jī)機(jī)連連接接到到儀儀器器的的打打印印接接口口上上。。））如如圖圖：：2、儀器器設(shè)設(shè)置置打開開儀儀器器開開關(guān)關(guān)后后，，按按提提示示進(jìn)進(jìn)入入儀儀器器操操作作主主界界面面。。按按““設(shè)設(shè)置置””鍵鍵進(jìn)進(jìn)入入儀儀器器設(shè)設(shè)置置功功能能，，在在““設(shè)設(shè)置置””里里可可以以對對““日日期期””、、““打打印印方方式式””、、““對對照照查查詢詢””等等進(jìn)進(jìn)行行設(shè)設(shè)置置。。設(shè)設(shè)置置完完成成后后再再按按““設(shè)設(shè)置置””鍵鍵退退回回到到主主界界面面。。3、調(diào)調(diào)0/100在主界界面狀狀態(tài)下下，按按0/100鍵鍵，根根據(jù)屏屏幕提提示逐逐一調(diào)調(diào)1-8通通道的的100值值，最最后按按“確確定””鍵結(jié)結(jié)束。。第二步步空空白白對照照空白對對照注：對對照的的時(shí)間間默認(rèn)認(rèn)為3分鐘鐘，如如需修修改，，則先先要在在“設(shè)設(shè)置””中進(jìn)進(jìn)行設(shè)設(shè)置。。用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入第一通道的比色池

按“對照”鍵，并選擇“新建”

等待對照結(jié)束

用大移移液槍槍抽取取2.5ml提提取液液放入入試管管中第三步步樣樣品檢檢測用天平稱取1克果蔬剪成2cm見方

放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中

靜置15分鐘

用大移液槍從燒杯中抽取2.5ml浸泡液移至空試管中

用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中

用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中靜置15分鐘

用小移液槍取0.1ml底物加入試管中

迅速搖勻并倒入比色皿

放入比色池

按“樣品”鍵

等待檢測結(jié)果

注：按按“樣樣品””鍵后后，會(huì)會(huì)從1-8通道道依次次提示示是否否準(zhǔn)備備好開開始進(jìn)進(jìn)行檢檢測，，如果果該通通道不不需要要進(jìn)行行檢測測，則則選擇擇“不不用””。第四步步數(shù)數(shù)據(jù)打打印及及退出出數(shù)據(jù)打打印及及退出出返回目錄按“打打印””鍵按“確定”鍵

用△/▽鍵選擇檢測數(shù)據(jù)的編號

按“打印”鍵進(jìn)行打印

按“確定”鍵退出打印狀態(tài)

第四部部分相相關(guān)關(guān)技巧巧與常常識常見問問題及及相關(guān)關(guān)技巧巧11.儀儀器聯(lián)聯(lián)機(jī)操操作的的情況況下，，在檢檢測過過程中中或者者開始始檢測測時(shí)，，電腦腦出現(xiàn)現(xiàn)“沒沒有檢檢測到到指定定的設(shè)設(shè)備………””，是是怎么么回事事？一般來來說出出現(xiàn)這這種提提示說說明您您的檢檢測儀儀與電電腦硬硬件連連接出出現(xiàn)問問題，，檢查查的步步驟如如下：：第一步步、確確定檢檢測軟軟件的的設(shè)備備設(shè)置置中相相關(guān)設(shè)設(shè)置與與硬件件連接接相匹匹配；；第二步步、電電腦串串口通通訊故故障，，檢測測方法法：重重新啟啟動(dòng)電電腦，，確認(rèn)認(rèn)是否否故障障依然然存在在，如如果故故障依依然存存在，，檢查查下一一步；；第三步步、更更換一一下電電腦串串口，，并在在檢測測軟件件的設(shè)設(shè)備設(shè)設(shè)置中中進(jìn)行行相應(yīng)應(yīng)的改改動(dòng)，，或者者換一一臺(tái)電電腦，，確認(rèn)認(rèn)故障障是否否存在在，如如果故故障解解決，，則表表明是是電腦腦本身身的問問題，，否則則可進(jìn)進(jìn)行下下一步步檢查查；第四步步、更更換RS232485轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器器，確認(rèn)認(rèn)問題題是否否存在在,如如果故故障解解決，，則表表明為為RS232485轉(zhuǎn)換換器連連接不不通。。常見問問題及及相關(guān)關(guān)技巧巧22.儀儀器聯(lián)聯(lián)機(jī)操操作的的情況況下，，調(diào)100時(shí)看看不到到紅線線是怎怎么回回事？？首先我我們要要學(xué)會(huì)會(huì)看圖圖譜，，圖譜譜的橫橫坐標(biāo)標(biāo)為時(shí)時(shí)間，，縱坐坐標(biāo)為為投射射比，，我們們所所所的調(diào)調(diào)100準(zhǔn)準(zhǔn)確的的所是是指將將投射射比值值調(diào)整整為100％。。圖譜譜在在沒沒有有拖拖拉拉的的情情況況下下，，最最高高只只能能顯顯示示到到100，，如如果果在在調(diào)調(diào)100的的過過程程中中，，其其投投射射比比值值大大于于100，，那那樣樣就就看看不不到到紅紅線線了了，，但但圖圖譜譜右右邊邊的的小小白白框框中中有有數(shù)數(shù)字字顯顯示示，，你你只只要要正正常常的的調(diào)調(diào)0/100就就可可以以了了。。另外外，，對對于于小小白白框框內(nèi)內(nèi)數(shù)數(shù)字字，，顯顯示示的的是是當(dāng)當(dāng)前前的的投投射射比比值值。。在在做做對對照照或或調(diào)調(diào)0/100時(shí)時(shí)，，小小白白框框內(nèi)內(nèi)的的數(shù)數(shù)字字前前有有一一短短紅紅線線，，在在做做樣樣品品時(shí)時(shí)則則為為短短綠綠線線。。大家家不不要要把把這這個(gè)個(gè)短短線線認(rèn)認(rèn)為為是是負(fù)負(fù)號號。常見見問問題題及及相相關(guān)關(guān)技技巧巧33.如如何何檢檢測測儀儀器器的的重重現(xiàn)現(xiàn)性性？？做一一空空白白對對照照后后，，做一一個(gè)個(gè)雙雙倍倍量量的的樣樣品品，，然然后后一一分分為為二二，先先后后或或同同時(shí)時(shí)做做檢檢測測，，即即：：取取2克克樣樣品品，，加加10ml提提取取液液浸浸泡泡，，然然后后取取5ml檢檢液液，，分分別別加加0.2ml的的酶酶、、顯顯色色劑劑，，15分分鐘鐘后后，，如如果果直直接接加加0.2ml底底物物，，然然后后一一分分為為二二在在兩兩個(gè)個(gè)通通道道中中同同時(shí)時(shí)做做檢檢測測，，則則是是檢檢查查不不同同通通道道的的重重現(xiàn)現(xiàn)性性；；如如果果15分分鐘鐘后后先先將將溶溶液液一一分分為為二二，，先先后后加加入入0.1ml底底物物做做檢檢測測，，則則是是檢檢查查同同一一通通道道的的重重現(xiàn)現(xiàn)性性。。4.如何