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體外受精(tǐwàishòujīnɡ)和早期胚胎培養(yǎng)第二節(jié)體外受精(tǐwàishòujīnɡ)和早期胚胎培養(yǎng)榜山中學(xué)(zhōngxué)楊美山2013.5.14第一頁,共26頁。1988年3月10日我國首例試管嬰兒“神州試管嬰兒之母”張麗珠教授(jiàoshòu)和我國大陸首例試管嬰兒鄭萌珠試管嬰兒(shìɡuǎnyīnɡér)1978年7月26日,世界首例試管嬰兒(shìɡuǎnyīnɡér)“路易斯.布朗”在英國誕生,現(xiàn)已成為母親。第二頁,共26頁。根據(jù)資料回答下列問題:1.資料上用到了什么生物技術(shù)?試管嬰兒技術(shù)(包括體外受精、胚胎體外培養(yǎng))和胚胎移植技術(shù)。2.試管嬰兒和母親正常懷孕,生產(chǎn)的過程有何異同?相同之處:都通過有性生殖產(chǎn)生,在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成(xíngchéng)胎兒。不同之處:受精作用在體外,并在體外發(fā)育成早期胚胎進(jìn)行胚胎移植。第三頁,共26頁。存在困難(kùnnɑn):1、引進(jìn)一頭良種成年奶牛需要3萬-5萬元。2、牛的生育率低,一頭牛一胎只一個(gè),一生只能生育四五次。(牛的妊娠期約280天)討論1:是否有可能讓引進(jìn)的良種??焖?kuàisù)大量的繁殖?為什么?第四頁,共26頁。牛的生育率雖然很低,但是牛的卵母細(xì)胞卻相當(dāng)?shù)亩?,其卵巢中卵母?xì)胞數(shù)目要比一生(yīshēng)中排卵數(shù)多1000倍左右。公牛產(chǎn)生的精子數(shù)目就更多了(精子數(shù):50億/mL)理論(lǐlùn)基礎(chǔ):討論(tǎolùn)2:如何讓引進(jìn)的良種??焖俅罅康姆敝常康谖屙?,共26頁。試管(shìguǎn)動(dòng)物技術(shù)是指通過(tōngguò)人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精,并通過(tōngguò)培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)??焖?kuàisù)繁殖動(dòng)物優(yōu)良品種目的:技術(shù)手段:體外受精和早期胚胎培養(yǎng)第六頁,共26頁。試管動(dòng)物(dòngwù)技術(shù)的三個(gè)基本操作環(huán)節(jié):第一步:體外受精(tǐwàishòujīnɡ)第二步:胚胎(pēitāi)的早期培養(yǎng)第三步:胚胎移植精子卵子受精卵早期胚胎幼體①②③新個(gè)體哺乳動(dòng)物個(gè)體發(fā)育過程試管動(dòng)物第七頁,共26頁。思考(sīkǎo):子代數(shù)目的多少取決于精子數(shù)還是卵子數(shù)?方法1:給供體注射促性腺激素,使一頭母畜(mǔchù)的卵巢一次排出比自然情況下多幾倍到十幾倍的卵子(超數(shù)排卵),之后從輸卵管中沖取卵子,直接與獲能的精子在體外受精。第八頁,共26頁。方法(fāngfǎ)2-1:從屠宰場(chǎng)得到的廢棄牛卵巢中采集卵母細(xì)胞第九頁,共26頁。借助超聲波探測(cè)儀、內(nèi)窺鏡或腹腔鏡等的引導(dǎo),從活母畜卵巢采集卵母細(xì)胞。操作員先將帶有超聲波探頭和吸卵針的采卵器通過生殖道插入子宮,同時(shí)將探頭貼在卵巢上。根據(jù)(gēnjù)B超屏幕所顯示的卵泡位置,利用采卵針穿刺卵泡并同時(shí)抽吸卵母細(xì)胞。方法(fāngfǎ)2-2:從活體卵巢中采集卵母細(xì)胞第十頁,共26頁。比較兩種方法采集(cǎijí)的卵母細(xì)胞在體外受精前的處理有所不同,為什么?比較兩種方法采集(cǎijí)的卵母細(xì)胞在體外受精前的處理有所不同,為什么?第十一頁,共26頁。2.精子(jīngzǐ)的收集和獲能1)收集的方法:假陰道法,手握法和電刺激(cìjī)等2)獲能處理:
培養(yǎng)法:把精子放入獲能液中。(嚙齒動(dòng)物、家兔和豬)化學(xué)法:把精子放入一定濃度肝素等溶液中。(牛、羊)第十二頁,共26頁。3.受精(shòujīng)在獲能溶液或?qū)S玫氖芫?shòujīng)溶液中完成受精(shòujīng)過程離心的目的(mùdì)是什么?卵母細(xì)胞的培養(yǎng)的目的是什么?第十三頁,共26頁。CO2培養(yǎng)箱二、胚胎(pēitāi)的早期培養(yǎng)復(fù)習(xí):動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件(tiáojiàn)是什么?第十四頁,共26頁。二、胚胎(pēitāi)的早期培養(yǎng)
發(fā)育(fāyù)培養(yǎng)液成分:水、無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素(jīsù)、氨基酸、核苷酸以及動(dòng)物血清等.第十五頁,共26頁。牛、羊:桑椹(sānɡzhēn)胚或囊胚小鼠、家兔:卵裂期或囊胚試管嬰兒:8個(gè)或16個(gè)細(xì)胞階段胚胎培養(yǎng)發(fā)育到適宜(shìyí)階段時(shí),可將其取出向受體移植。注意:不同動(dòng)物胚胎移植的時(shí)間不同第十六頁,共26頁。為充分利用屠宰母畜卵巢上的卵母細(xì)胞,不妨(bùfáng)將屠宰場(chǎng)和“胚胎工廠”合建。這樣屠宰場(chǎng)的產(chǎn)品就不僅是鮮肉,還會(huì)生產(chǎn)出大量的胚胎和胚胎工程所需的原材料,你看這個(gè)想法可行嗎?奇思妙想(qísīmiàoxiǎnɡ)第十七頁,共26頁。采集(cǎijí)良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)(péiyǎng)采集良種公牛(ɡōnɡniú)精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場(chǎng)采集卵巢中的卵母細(xì)胞“試管?!惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖第十八頁,共26頁。保存(bǎocún)剩余的卵子和精子的方法是什么?第十九頁,共26頁。試管動(dòng)物與克隆動(dòng)物相比(xiānɡbǐ)生殖方式:技術(shù)手段:遺傳規(guī)律:有性生殖(yǒuxìngshēngzhí)無性生殖核移植技術(shù)(jìshù)、胚胎移植遵循無體外受精胚胎移植第二十頁,共26頁。胚胎(pēitāi)移植采集(cǎijí)良種母牛的卵母細(xì)胞卵母細(xì)胞的體外培養(yǎng)(péiyǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場(chǎng)采集卵巢中的卵母細(xì)胞“試管?!惫S化生產(chǎn)的技術(shù)流程圖第二十一頁,共26頁。1哺乳動(dòng)物的體外受精主要(zhǔyào)包括___________,___________和_______等主要(zhǔyào)步驟。卵母細(xì)胞的采集(cǎijí)精子(jīngzǐ)的獲取受精2收集精子的方法①___________:②___________:③___________:假陰道法手握法電刺激法第二十二頁,共26頁。3對(duì)家畜進(jìn)行卵母細(xì)胞采集(cǎijí)時(shí),可用()處理促性腺激素B.促性腺激素釋放激素C.肝素D.性激素第二十三頁,共26頁。4從活體動(dòng)物的卵巢(luǎncháo)中直接采卵時(shí),不正確的方法是超聲波探測(cè)儀B.內(nèi)窺鏡C.腹腔鏡D.陰道鏡第二十四頁,共26頁。5體外受精的場(chǎng)所A.在水溶液(róngyè)中B.在鹽溶液(róngyè)中C.在獲能溶液(róngyè)或?qū)S玫氖芫芤?róngyè)中D.在酒精溶液(róngyè)中第二十五頁,共26頁。3.2體外受精和早期(zǎoqī)胚胎培養(yǎng)一、從試管牛說起二、體外受精
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