實(shí)驗(yàn)診斷14第八章 免疫學(xué)檢測(cè)臨床醫(yī)學(xué)16年

第八章臨床常用免疫學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)診斷教研室主講教師：于庭教授2

臨床免疫學(xué)是免疫學(xué)中一個(gè)重要的分支學(xué)科，它應(yīng)用免疫學(xué)的理論與技術(shù)，研究疾病的病因、發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸并對(duì)疾病進(jìn)行診斷和防治。臨床免疫學(xué)檢測(cè)常用于感染性疾病、自身免疫性疾病、變態(tài)反應(yīng)性疾病、免疫缺陷病、腫瘤等疾病的診斷與療效監(jiān)測(cè),以及移植后免疫監(jiān)測(cè)和治療。

3第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

一、免疫球蛋白免疫球蛋白(immunoglobulin，ig)是一組具有抗體活性的球蛋白，由漿細(xì)胞合成與分泌，存在于機(jī)體的血液、體液、外分泌液以及部分細(xì)胞的表面，應(yīng)用免疫電泳與超速離心分析可將ig分為五類：即igg、igm、iga、igd和ige。4

第一節(jié)體液免疫檢測(cè)

5(一)免疫球蛋白g

igg主要由脾臟和淋巴結(jié)中的漿細(xì)胞合成與分泌，約占血清中總ig的70-80％，是血清中主要的抗體成分，屬再次免疫應(yīng)答抗體，在機(jī)體的免疫防御中起重要作用。另外igg是唯一能通過胎盤的免疫球蛋白，使新生兒獲得免疫性抗體。[參考值]7.0～16.6g/l[臨床意義]1、生理變化2、病理變化⑴igg增高：各種原因的慢性感染、慢性肝病、淋巴瘤、sle、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；單純igg增高，主要見于免疫增殖性疾病。⑵igg減低：第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)6（二）免疫球蛋白aiga分為血清型（約占血清中總ig的10-15％）與分泌型兩種。[參考值]成人iga0.7～3.5g/l[臨床意義]1、生理變化2、病理變化⑴iga增高：iga型mm、sle、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、肝硬化、中毒性肝損傷。⑵iga減低：常見于反復(fù)呼吸道感染患者、重鏈病、輕鏈病、原發(fā)性和繼發(fā)性免疫缺陷病。第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

7(三)免疫球蛋白migm為五聚體，是初次免疫應(yīng)答反應(yīng)中的ig,由5個(gè)igm單體連接而成，分子結(jié)構(gòu)呈環(huán)形，是ig中分子量最大者。在個(gè)體的發(fā)育過程中，igm是出現(xiàn)最早的ig，當(dāng)機(jī)體受到抗原刺激后，igm亦是最早出現(xiàn)的抗體。[參考值]0.5～2.6g/l[臨床意義]1、生理變化2、病理變化⑴igm增高：初期病毒性肝炎、sle、ra、肝硬化,單純igm增高提示原發(fā)性感染。⑵ig減低：igg型重鏈病、先天性免疫缺陷病、免疫抑制劑治療后、淋巴系腫瘤、腎病綜合癥。第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

8(四)免疫球蛋白e

免疫球蛋白e(immunoglobulin

e，ige)為血清中最少的一種ig，約占血清總ig的0.002％。它是一種親細(xì)胞性抗體，是介導(dǎo)Ⅰ型變態(tài)反應(yīng)的抗體,與變態(tài)反應(yīng)、寄生蟲感染及皮膚過敏等有關(guān)。

[參考值]

成人血清o.1－0.9mg／l第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

9[臨床意義]1、生理變化2、病理變化⑴ige增高：ige型mm、重鏈病、肝臟病、ra、過敏性哮喘、過敏性鼻炎、間質(zhì)性肺炎、蕁麻疹、寄生蟲感染、嗜酸性粒細(xì)胞增多癥、皰疹樣皮炎。⑵ige減低：先天性或獲得性丙種蛋白缺乏癥、免疫抑制劑治療后、淋巴系腫瘤、腎病綜合癥。第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

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(五)m蛋白

m蛋白(mprotein)或稱單克隆免疫球蛋白[參考值]蛋白電泳法、免疫比濁法或免疫電泳法：正常人為陰性。[臨床意義]檢測(cè)到m蛋白，提示單克隆免疫球蛋白增殖病。見于：①多發(fā)性骨髓瘤：以igg型最常見；②巨球蛋白血癥(waldenstrom癥)：存在大量單克隆igm；③重鏈?。撼霈F(xiàn)ig重鏈（、和重鏈)；④惡性淋巴瘤；⑤半分子病：系由一條重鏈和一條輕鏈組成的單克隆ig片段；⑥良性m蛋白血癥；⑦輕鏈病第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)11二、補(bǔ)體系統(tǒng)補(bǔ)體(complement)是血清中具有酶活性的一種不耐熱球蛋白，由三組球蛋白分子組成。第一組：由九種補(bǔ)體成分組成(c1～c9)；第二組：包括b因子、d因子、p因子、h因子等；第三組：則為補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白，如c1抑制物、c4結(jié)合蛋白、促衰變因子等。血清總補(bǔ)體活性或其單一補(bǔ)體成分的變化對(duì)某些疾病的診斷與療效觀察有極其重要的意義。第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

12（一）總補(bǔ)體溶血活性(ch50)測(cè)定totalcomplementhemolyticactivitych50主要反映經(jīng)典途徑補(bǔ)體的綜合水平[參考值]50000－100000u/l[臨床意義]1.ch50活性增高常見于急性炎癥、急性組織損傷、惡性腫瘤及妊娠。2.ch50活性降低見于各種免疫復(fù)合物疾病(腎小球腎炎)、自身免疫性疾病活動(dòng)期、慢性肝炎、肝硬化、hiv。第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

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(二)血清補(bǔ)體(complement3，c3)

c3測(cè)定血清補(bǔ)體c3是血清中含量最高的補(bǔ)體成分。[參考值]免疫比濁法0.8—1.5g/l[臨床意義]1.生理性變化2.病理性變化1．血清c3含量增高見于一些急性時(shí)相反應(yīng)2．血清c3含量降低見于①補(bǔ)體合成能力降低，如慢性肝病、肝硬化、肝壞死；②補(bǔ)體合成原料不足，如營(yíng)養(yǎng)不良(多見于兒童)；③補(bǔ)體消耗或丟失太多，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡活動(dòng)期、急性鏈球菌感染后腎小球腎炎、基底膜增殖性腎小球腎炎、狼瘡性腎炎、慢性活動(dòng)性肝炎、瘧疾等；④先天性補(bǔ)體缺乏，如遺傳性c3缺乏癥。第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

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(三)血清補(bǔ)體c4(complement4,c4)測(cè)定血清補(bǔ)體c4由肝臟、吞噬細(xì)胞合成,在mg++的參與下，c4裂解為c4a與c4b二個(gè)片段，參與補(bǔ)體的經(jīng)典激活途徑。[參考值]成人：0.2－0.6g/l[臨床意義]1.生理性變化2.病理性變化1．增高見于各種傳染病、急性炎癥、組織損傷。2．降低見于自身免疫性肝炎、狼瘡性腎炎、sle、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、iga腎病、遺傳性iga缺乏癥等。第一節(jié)

體液免疫檢測(cè)

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第二節(jié)細(xì)胞免疫檢測(cè)

淋巴細(xì)胞是構(gòu)成機(jī)體免疫系統(tǒng)的主要細(xì)胞群體，占外周血白細(xì)胞總數(shù)的20％-40％，根據(jù)表型和功能可分為不同的群體，如t細(xì)胞、b細(xì)胞、k細(xì)胞、nk細(xì)胞等，t細(xì)胞和b細(xì)胞還可進(jìn)一步分為若干亞群。這些淋巴細(xì)胞群和亞群在免疫應(yīng)答過程中相互協(xié)作、相互制約，共同完成對(duì)抗原物質(zhì)的識(shí)別、應(yīng)答和清除，從而維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定。臨床上常對(duì)淋巴細(xì)胞的數(shù)量，表面標(biāo)志及功能進(jìn)行檢查，以了解機(jī)體的細(xì)胞免疫情況。

一、t細(xì)胞亞群的檢測(cè)t淋巴細(xì)胞是由一群功能不同的異質(zhì)性淋巴細(xì)胞組成，在形態(tài)學(xué)上難以區(qū)分，但是可借助于其細(xì)胞膜表面分子加以區(qū)別，這些細(xì)胞膜表面分子即為t淋巴細(xì)胞的表面標(biāo)志(tlymphocytesurfacemarker)。t淋巴細(xì)胞表面標(biāo)志檢測(cè)的方法眾多，如e玫瑰花形成試驗(yàn)、免疫熒光法(ifa)、流式細(xì)胞術(shù)(facs)、免疫金銀法以及免疫酶染色法等。1718t細(xì)胞分化抗原測(cè)定通過密度梯度離心法獲取外周血單個(gè)核細(xì)胞，再加入熒光素標(biāo)記的抗某種t淋巴細(xì)胞的表面標(biāo)志的單克隆抗體，孵育20～30min后，用熒光顯微鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)，并計(jì)算出陽性細(xì)胞的百分率。也可用facs進(jìn)行分析，此法較其它方法快速，準(zhǔn)確，可靠。[參考值]

指標(biāo)ifafacscd3+63.1％±10.8％61％～85％cd3+cd4+（th）42.8％±9.5％28％～58％cd3+cd8+（ts）19.6％±5.9％19％～48％cd4+/cd8+（th/ts）2.2±0.7/10.9～2.0/1一、t細(xì)胞亞群的檢測(cè)19

[臨床意義]1.cd3+降低常見于自身免疫病，如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；免疫缺陷病，如獲得性免疫缺陷綜合征(aids)。2.cd3+/cd4+降低常見惡性腫瘤,艾滋病,某些病毒感染,應(yīng)用免疫抑制劑等；3.cd3+/cd8+降低常見于自身免疫病,變態(tài)反應(yīng)病。4.cd4+/cd8+增高常見于自身免疫病,病毒性感染,變態(tài)反應(yīng)病,常預(yù)示可能發(fā)生移植排斥反應(yīng)。5.cd4+/cd8+降低常見于aids、惡性腫瘤進(jìn)行期和復(fù)發(fā)時(shí)。一、t細(xì)胞亞群的檢測(cè)20二、b細(xì)胞分化抗原檢測(cè)b淋巴細(xì)胞簡(jiǎn)稱b細(xì)胞，由骨髓中淋巴樣前體細(xì)胞分化而來，是體內(nèi)唯一能產(chǎn)生抗體的細(xì)胞。與t細(xì)胞類似，b細(xì)胞表面有表面抗原與表面受體兩大類。表面抗原包括cdl9、cd20、cd21、cd22和cd40等；表面受體包括b細(xì)胞抗原受體(bcr)、細(xì)胞因子受體(ckr）[參考值]facs：cdl9+細(xì)胞11.74％±3.73％[臨床意義]cdl9為全部b細(xì)胞共有的表面標(biāo)志，b細(xì)胞活化后不消失，因此是最重要的b細(xì)胞標(biāo)記分子。cdl9+升高見于b細(xì)胞系統(tǒng)的惡性腫瘤，急、慢性淋巴細(xì)胞白血病，burkitt淋巴瘤cdl9+降低見于體液免疫缺陷病，無丙種球蛋白血癥、使用化療或免疫抑制劑。21三、自然殺傷細(xì)胞免疫檢測(cè)自然殺傷細(xì)胞活性測(cè)定[參考值]流式細(xì)胞術(shù)13.8%±5.9%[臨床意義]nk細(xì)胞活性可作為判斷機(jī)體抗腫瘤和抗病毒感染的指標(biāo)nk細(xì)胞活性降低見于血液系統(tǒng)腫瘤、實(shí)體瘤、免疫缺陷病、艾滋病和某些病毒感染。nk細(xì)胞活性升高見于宿主抗移植物反應(yīng)22四、細(xì)胞因子檢測(cè)

(一)白細(xì)胞介素2活性和白細(xì)胞介素2受體測(cè)定白介素－2(interleukin-2，il-2)是白細(xì)胞介素中的一種。主要由活化t細(xì)胞產(chǎn)生，是具有多向性作用的細(xì)胞因子。它對(duì)機(jī)體的免疫應(yīng)答和抗病毒感染等有重要作用。[臨床意義]①il-2：隨年齡的增長(zhǎng)，有降低趨勢(shì)。增高：見于自身免疫性疾病(sle、ra等)、再生障礙性貧血、多發(fā)性骨髓瘤、排斥反應(yīng)等。降低：見于免疫缺陷病(艾滋病等)、惡性腫瘤、1型糖尿病、某些病毒感染等；②il-2r：對(duì)急性排斥反應(yīng)和免疫性疾病有診斷意義?？勺鳛椴∏橛^察和藥效監(jiān)測(cè)的一項(xiàng)指標(biāo)。

23(二)腫瘤壞死因子測(cè)定腫瘤壞死因子(tumornecrosisfactor，tnf)分為tnf和tnf兩型。tnf單核細(xì)胞吞噬細(xì)胞→來源于tnf→來源于t淋巴細(xì)胞兩型的結(jié)構(gòu)不同，生物活性類似。兩型都有引起腫瘤組織出血、壞死和殺傷作用，都可引起抗感染的炎癥反應(yīng)，以及對(duì)免疫細(xì)胞進(jìn)行調(diào)節(jié)、誘生。[參考值]elisa法4.3±2.8μg／l四、細(xì)胞因子檢測(cè)

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[臨床意義]①tnf有炎癥介質(zhì)作用，能阻止內(nèi)毒素休克、dic的發(fā)生；②有抗感染效應(yīng)，抑制病毒復(fù)制和殺傷病毒感染細(xì)胞；③有抗腫瘤作用，殺傷和破壞腫瘤細(xì)胞。④血中tnf水平增高特別對(duì)某些感染性疾病(如腦膜炎球菌感染)的病情觀察有價(jià)值。四、細(xì)胞因子檢測(cè)

25(三)干擾素測(cè)定干擾素(intrferon,inf)是宿主細(xì)胞受病毒感染后產(chǎn)生的一種非特異性防御因子,具有抗病毒、抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、抑制細(xì)胞增殖的作用。[參考值]1-4ku/l[臨床意義]增高見于sle、非活動(dòng)性ra、惡性腫瘤早期、急性病毒感染、再生障礙性貧血。減低見于乙型肝炎及攜帶者、哮喘、活動(dòng)性ra。四、細(xì)胞因子檢測(cè)

26腫瘤標(biāo)志物(tumormarker，tm)

是由腫瘤細(xì)胞本身合成、釋放或者是由機(jī)體對(duì)腫瘤細(xì)胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)，存在于血液、細(xì)胞、組織或體液中，反映腫瘤存在和生長(zhǎng)。包括蛋白質(zhì)、激素、酶和多胺等，tm的檢測(cè)對(duì)腫瘤的診斷、鑒別診斷、療效觀察以及預(yù)后評(píng)價(jià)具有一定的價(jià)值。第三節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢查27理想標(biāo)志物特點(diǎn)①靈敏度高；②特異性好；③有器官特異性；④與病情嚴(yán)重程度、腫瘤大小或分期有關(guān)；⑤監(jiān)測(cè)腫瘤治療效果；⑥監(jiān)測(cè)腫瘤復(fù)發(fā)；⑦預(yù)測(cè)腫瘤預(yù)后第三節(jié)腫瘤標(biāo)志物檢查28

一、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)

(一)甲胎蛋白測(cè)定

甲胎蛋白(alphafetoprotein，afp或afp)是在胎兒早期由肝臟和卵黃囊合成的一種糖蛋白。出生后，afp的合成很快受到抑制。當(dāng)肝細(xì)胞或生殖腺胚胎組織發(fā)生惡性病變時(shí)，有關(guān)基因重新被激活，使原來已喪失合成afp能力的細(xì)胞又重新開始合成，以致血中afp含量明顯升高。因此血中afp濃度檢測(cè)對(duì)診斷肝細(xì)胞癌及滋養(yǎng)細(xì)胞惡性腫瘤有重要的臨床價(jià)值。29[參考值]

ria、elisa、clia法＜25g／l。[臨床意義]1．原發(fā)性肝細(xì)胞癌患者血清afp增高，增高率約為67.8％～74.4％；約有50％超過300g／l

，約有18％的原發(fā)性肝癌患者其afp為陰性。2．生殖腺胚胎癌(睪丸癌、卵巢癌、畸胎瘤等)、胃癌或胰腺癌時(shí)，血中afp含量也可升高。3．病毒性肝炎、肝硬化時(shí)afp也有不同程度的升高，通常＜300g／l。4．妊娠3-4個(gè)月，孕婦afp開始升高；7-8個(gè)月達(dá)高峰，以后下降；但多低于400g／l。胎兒神經(jīng)管畸形、雙胎、先兆流產(chǎn)等可使孕婦血液和羊水中afp升高。

一、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)

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(二)癌胚抗原測(cè)定癌胚抗原(carcinoembryonicantigen，cea)是一種富含多糖的蛋白復(fù)合物。胎兒早期的消化管及某些組織均有合成cea的能力，但孕六個(gè)月以后含量逐漸減少，出生后含量極低。是一種廣譜性腫瘤標(biāo)志物，檢測(cè)它對(duì)腫瘤的診斷、預(yù)后、復(fù)發(fā)判斷、療效監(jiān)測(cè)有意義。

[參考值]elisa、ria、clia法＜5g／l

一、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)

31[臨床意義]1．cea明顯增高見于90％的胰腺癌、74％的結(jié)腸癌、60％的乳腺癌患者，常超過60g／l。此外胃癌、肺癌也增高。2．動(dòng)態(tài)觀察，一般病情好轉(zhuǎn)時(shí)，cea濃度下降，病情加重時(shí)可升高。3．結(jié)腸炎、胰腺炎、肝臟疾病、肺氣腫及支氣管哮喘等也常見cea輕度升高。4．少數(shù)大量吸煙者cea>5g／l

一、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)

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(三)前列腺特異抗原測(cè)定

前列腺特異抗原(prostatespecificantigen，psa)是一種由前列腺分泌的單鏈糖蛋白，它存在于前列腺管道的上皮細(xì)胞中，在前列腺癌時(shí)可見psa血清水平明顯升高?，F(xiàn)在發(fā)現(xiàn)血清總psa(t-psa)中有80％以結(jié)合形式存在(c-psa)；20％的以游離psa形式存在(f-psa)。其比值對(duì)診斷更有特異和準(zhǔn)確性。

[參考值]ria、clia、elisa法：t-psa<4.og／Ｌf-psa<0.8g／Ｌ

f-psa／t-psa比值>o.25。

一、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)

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[臨床意義]1．前列腺癌時(shí)60％－90％患者血清psa水平明顯升高；當(dāng)行外科切除術(shù)后，90％患者血清psa水平明顯降低。2．術(shù)后若psa水平無明顯減低或升高，即有轉(zhuǎn)移或復(fù)發(fā)的可能。前列腺增生、前列腺炎等良性疾病，約有14％的患者血清psa水平升高，應(yīng)注意鑒別。3．當(dāng)t-psa為4.0-10.0g/Ｌ時(shí)，f-psa/t-psa比值對(duì)診斷意義更大，<0.1提示前列腺癌。4.肛門指診、前列腺按摩、膀胱鏡檢查、前列腺手術(shù)可引起psa增高。

一、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)

34（四）鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原測(cè)定（squamouscellcarcinomaantigenscca）[參考值]<1.5g/Ｌ[臨床意義]1.血清scca增高見于肺鱗狀細(xì)胞癌；Ⅰ、Ⅲ期食管癌；宮頸癌。2.nacb推薦scca用于宮頸癌的預(yù)后評(píng)估、監(jiān)測(cè)療效和腫瘤復(fù)發(fā)。臨床也常用于肺鱗狀細(xì)胞癌、食管癌的監(jiān)測(cè)3.部分良性疾病也可引起scca增高。

一、蛋白質(zhì)類腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)

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二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

(一)糖鏈抗原199測(cè)定

糖鏈抗原199(carbohydrateantigen19-9，cal99)是一種糖蛋白。胚胎期分布于胎兒的胰腺、肝膽和腸等組織；在成人的唾液腺、胰腺、乳腺、膽管、膽囊等部位也有少量存在。[參考值]血清cal99＜3.7萬u/l(elisa、clia、ria)36

[臨床意義]胰腺癌、肝膽和胃腸道疾病時(shí)血中cal99的水平可明顯升高。1．目前認(rèn)為cal99是胰腺癌的首選腫瘤標(biāo)志物，胰腺癌早期，當(dāng)特異性為95％時(shí)，敏感性可達(dá)80％～90％。若結(jié)合cea檢測(cè)，敏感性可進(jìn)一步提高2.5％～10％胰腺癌cal99不升高3.膽囊癌和膽管癌為85％左右，胃癌、結(jié)腸癌為40％，直腸癌為30％～50％；對(duì)早期病人的敏感度僅為30％。4．連續(xù)檢測(cè)對(duì)病情進(jìn)展、手術(shù)療效、預(yù)后估計(jì)及復(fù)發(fā)診斷有重要價(jià)值。5．急性胰腺炎、膽汁淤積型膽管炎、膽石癥、急性肝炎、肝硬化等，血清cal99也可出現(xiàn)不同程度的升高。6．若結(jié)合cea檢測(cè)，對(duì)胃癌診斷符合率可達(dá)85％。

二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

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(二)癌抗原125測(cè)定癌抗原125(cancerantigen125，cal25)為一種糖蛋白性腫瘤相關(guān)抗原，存在于卵巢腫瘤的上皮細(xì)胞內(nèi)。當(dāng)患有上皮性卵巢癌和子宮內(nèi)膜癌時(shí)，病人血清cal25水平可明顯升高。［參考值］<3.5萬u／l

二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

38[臨床意義]

1．ca125存在于卵巢癌組織細(xì)胞和漿液型腺癌組織中,不存在于黏液性卵巢癌中.早期診斷和復(fù)發(fā)診斷的敏感性可達(dá)50％～90％，故對(duì)診斷卵巢癌有較大臨床價(jià)值，尤其對(duì)觀察治療效果和判斷復(fù)發(fā)較為靈敏。2．宮頸癌、乳腺癌、胰腺癌、膽道癌、肝癌、胃癌、結(jié)腸癌、肺癌等也有一定的陽性反應(yīng)。3．3％-6％的良性卵巢瘤、子宮肌瘤病人血清cal25有時(shí)也會(huì)明顯升高，但多數(shù)不超過10萬u／l。4．肝硬化失代償期血清cal25明顯升高。5.可用于鑒別卵巢包塊。6.早孕期(3個(gè)月)cal25也可升高。

二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

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（三)癌抗原153測(cè)定癌抗原153(cancerantigen153，cal53)是由抗原決定簇、糖和多肽組成的糖蛋白。在乳腺癌患者的血清中可見cal53的水平明顯升高，所以對(duì)乳腺癌有重要的輔助診斷作用，但其特異性有限。[參考值]＜2.5萬u／l。

二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

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[臨床意義]

1．乳腺癌時(shí)，30％-50％的患者可見cal53明顯升高，但在早期乳腺癌時(shí)，它的陽性率僅為20％-30％左右。不能用于篩查和早期診斷,用于觀察乳腺治療后有無復(fù)發(fā)及檢測(cè)乳腺癌的轉(zhuǎn)移。2．在轉(zhuǎn)移性卵巢癌、結(jié)腸癌、肝癌、肺癌、子宮腫瘤時(shí)可增高。3．乳腺、肝臟、肺的良性疾病，cal53也可升高。

二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

41(四)癌抗原50測(cè)定(ca50)主要由唾液酸糖脂和唾液酸糖蛋白組成,,對(duì)腫瘤的診斷無器官特異性。(五)癌抗原724測(cè)定(ca724)是胃腸道和卵巢腫瘤的標(biāo)志物(六)癌抗原242測(cè)定(ca242)增高見于胰腺癌、結(jié)腸癌、胃癌；卵巢癌、子宮癌、肺癌也可見增高。

二、糖脂腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

42三、酶類腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

(一)神經(jīng)元特異性烯醇化酶測(cè)定(neuronspecificenolase，nse)

在糖酵解途徑中，烯醇化酶催化甘油分解。它由三個(gè)亞基(、、)組成的二聚體，并形成5種同工酶(、、、、)。亞基的同工酶存在于神經(jīng)元和神經(jīng)內(nèi)分泌組織，稱為神經(jīng)元特異性烯醇化酶，它與神經(jīng)內(nèi)分泌起源的腫瘤有關(guān)。[參考值]ria或elisa法為<15g／l。43[臨床意義]1．小細(xì)胞肺癌時(shí)，nes水平高出其他類型肺癌的5～10倍，靈敏度達(dá)80％，特異性達(dá)80％-90％；其他組織型肺癌僅10％-20％的病人nes升高。因此它可作為小細(xì)胞肺癌的高特異性和高靈敏度的標(biāo)志物。2．nes是神經(jīng)母細(xì)胞瘤的標(biāo)志物，其靈敏度可達(dá)90％以上。發(fā)病時(shí)，nes水平明顯升高。有效治療后降低，復(fù)發(fā)后又升高。3．正常紅細(xì)胞中存在nes，標(biāo)本溶血影響結(jié)果。

三、酶類腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

44

(二)-l-巖藻糖苷酶測(cè)定

-l-巖藻糖苷酶(-l-fucosidase，afu)是一種溶酶體酸性水解酶，廣泛存在于人體組織細(xì)胞，參與糖蛋白、糖脂和寡糖的代謝。在原發(fā)性肝癌患者血清中增高，是原發(fā)性肝癌的標(biāo)志物之一。

[參考值]elisa法和分光光度連續(xù)監(jiān)測(cè)法為：234－414mol／l。

三、酶類腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

45[臨床意義]1．81.2％的原發(fā)性肝癌患者血清afu水平增高，與afp聯(lián)合檢測(cè)可提高原發(fā)性肝癌診斷陽性率達(dá)93.1％。2．動(dòng)態(tài)觀察對(duì)判斷肝癌療效、預(yù)后、復(fù)發(fā)有重要意義。3．血清afu在轉(zhuǎn)移性肝癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮癌也可增高；在肝硬化、慢性肝炎、消化道出血等也有輕度增高。三、酶類腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

46(三)前列腺酸性磷酸酶測(cè)定pap(prostaticacidphosphatase)是前列腺外分泌物中能水解磷酸酯的糖蛋白。[參考值]≤2.0g／l[臨床意義]前列腺癌時(shí)血清pap明顯增高,其程度與癌瘤發(fā)展基本呈平行關(guān)系,可用于監(jiān)測(cè)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和預(yù)后。

三、酶類腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)

47

四、腫瘤標(biāo)志物的選用

同一種腫瘤可含多種標(biāo)志物，而一種標(biāo)志物可出現(xiàn)在多種腫瘤當(dāng)中。選擇特異標(biāo)志物或最佳組合有利于提高腫瘤診斷的陽性率。動(dòng)態(tài)檢測(cè)有利于良性和惡性腫瘤的鑒別，以及腫瘤疾病復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和預(yù)后判斷。

48afpceapsapapnsehcgca199ca50ca125ca153ca724ca242tpasccaafu原發(fā)性肝癌11干細(xì)胞癌11結(jié)腸癌123前列腺癌11小細(xì)胞肺癌1非小細(xì)胞肺癌23絨毛膜上皮細(xì)胞癌1胰腺癌3122膽道癌12卵巢癌12乳腺癌21胃癌231膀胱癌2宮頸癌32耳鼻喉腫瘤32食管癌33

四、腫瘤標(biāo)志物的選用

49第四節(jié)

自身抗體檢測(cè)

自身免疫性疾病(autoimmunedisease，aid)是指由于某些原因造成免疫系統(tǒng)對(duì)自身成分的免疫耐受性減低或破壞，致使自身抗體或致敏淋巴細(xì)胞損傷含有相應(yīng)自身抗原的器官組織而引起的疾病，表現(xiàn)為相應(yīng)的組織器官的功能障礙。自身免疫性疾病按自身抗原分布的范圍可分為器官特異性(organspecific)和非器官特異性(non-organspecific)兩類。前者指自身抗原為某一器官的特定成分，病變也嚴(yán)格局限于該器官。后者是指自身抗原為細(xì)胞核或細(xì)胞漿成分，病變可遍及全身各組織器官。50全球發(fā)病率:約為3%國(guó)內(nèi):多發(fā)性硬化病800-1000萬系統(tǒng)性紅斑狼瘡70-90萬類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎300-400萬5d痛苦discomfort殘疾disability死亡death藥物中毒drugreactions經(jīng)濟(jì)損失dollarlose第四節(jié)

自身抗體檢測(cè)

51

自身免疫性疾病通?？捎幸韵屡R床特征：①患者以女性多見，并有遺傳傾向；②患者血中可以檢測(cè)到高滴度的自身抗體；③患者組織器官的病理特征為免疫炎癥；④用相同的抗原在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中可復(fù)制出相似的模型；⑤自身免疫性疾病有重疊現(xiàn)象；⑥多數(shù)病因不明，常呈自發(fā)性或特發(fā)性；⑦病程較長(zhǎng)，病情遷延反復(fù)，易伴發(fā)免疫缺陷性疾病或惡性腫瘤；⑧用免疫抑制藥物治療有一定療效。

第四節(jié)

自身抗體檢測(cè)

52一、類風(fēng)濕因子測(cè)定

類風(fēng)濕因子是變性igg刺激機(jī)體產(chǎn)生的一種自身抗體，主要存在于類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的血清和關(guān)節(jié)液內(nèi)。它有igm型，也有igg、iga、igd和ige型。用乳膠凝集法測(cè)出的主要是igm型；速率法敏感但不能分類型。［參考值］乳膠凝集法血清稀釋度低于l:10速率比濁法＜30ku／l。

53[臨床意義]

類風(fēng)濕性疾病，rf陽性70%-90%；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的陽性率為70％。igg型與患者的滑膜炎、血管炎和關(guān)節(jié)外癥狀有關(guān)；igm和iga型的效價(jià)與病情有關(guān)。其他自身免疫性疾病，如多發(fā)性肌炎、硬皮病、干燥綜合征、sle也見rf陽性。某些感染性疾病，也多呈現(xiàn)陽性反應(yīng)。故本試驗(yàn)的特異性不高，應(yīng)予鑒別。一、類風(fēng)濕因子測(cè)定54（一）抗核抗體測(cè)定抗核抗體(anti-nuclearantibody，ana)是以細(xì)胞的核成分為靶抗原的自身抗體的總稱，無器官和種屬特異性。用間接免疫熒光法檢查ana時(shí)，有幾種熒光圖譜：①均質(zhì)型：此型與抗dsdna和抗組蛋白抗體有關(guān)。②核膜型：此型對(duì)應(yīng)的抗核孔復(fù)合物和抗板層素抗體。③顆粒型：與抗u1-rnp、抗sm、抗scl-70、抗ss-a／ro、抗ss-b／la等有關(guān)。④核點(diǎn)型⑤著絲點(diǎn)型⑥核仁型：此型與針對(duì)核糖體、u3-rnp、rna聚合酶的抗體有關(guān)。

二、抗核抗體檢測(cè)5556（二）可提取性抗原抗體譜測(cè)定可提取性抗原（extractablenuclearantigenena）有多種相對(duì)分子量不同的多肽構(gòu)成?？购丝贵w熒光模型臨床意義dsdna核均質(zhì)型活動(dòng)期sle抗sm抗體粗顆粒型sle抗nrnp抗體粗顆粒型mctd抗ssa抗體細(xì)顆粒型ss抗ssb抗體細(xì)顆粒型ss抗jo-1抗體細(xì)顆粒型pm/dm抗scl-70抗體核仁型pss二、抗核抗體檢測(cè)5758(三)抗dna抗體測(cè)定

抗dna抗體分為抗雙鏈dna抗體(doublestrandeddnaantibody，dsdna)、抗單鏈dna抗體(singlestrandeddnaantibody，ssdna)和抗z-dna抗體?？筪sdna抗體的靶抗原是細(xì)胞核中dna的雙螺旋結(jié)構(gòu)。[結(jié)果判斷]間接免疫熒光法陽性時(shí)，dsdna與馬疫錐蟲動(dòng)基體結(jié)合發(fā)出致密熒光亮點(diǎn)。[臨床意義]

抗dsdna抗體陽性見于活動(dòng)期系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)，陽性率70%-90%。本試驗(yàn)特異性較高，但敏感性較低?？筪sdna抗體的檢測(cè)對(duì)于sle的診斷和治療監(jiān)控極為重要，是sle診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。也是迄今為止參與sle發(fā)病機(jī)制唯一的一種自身抗體。

抗ssdna抗體陽性見于sle，尤其合并有狼瘡性腎炎。二、抗核抗體檢測(cè)59（四）抗胞質(zhì)抗體檢測(cè)抗線粒體抗體檢測(cè)(anti-mitochondrialantibody,ama)ama是一組以線粒體內(nèi)膜和外膜蛋白為靶抗原、無器官和種屬特異性的一種自身抗體；主要是igg。［臨床意義］許多肝臟疾病可檢出ama。原發(fā)性膽汁性肝硬化（pbc）時(shí)ama陽性率可達(dá)90％以上，m2是其重要血清學(xué)標(biāo)志。藥物性自身免疫性肝病患者的ama通常為m3和m6。ama可作為原發(fā)性膽汁性肝硬化和肝外膽道阻塞性肝硬化的鑒別診斷指標(biāo)之一二、抗核抗體檢測(cè)60三、抗組織細(xì)胞抗體檢測(cè)㈠.抗腎小球基底膜抗體檢測(cè)（gbm）［臨床意義］抗gbm抗體是抗基底膜抗體型腎小球腎炎特異性抗體。㈡.抗胃壁細(xì)胞抗體(pca)［臨床意義］慢性萎縮性胃炎pca100%陽性，惡性貧血pca90%陽性。㈢.抗甲狀腺抗體(tg&tm)［臨床意義］tg、tm見于橋本甲狀腺炎；tg陽性見于甲亢；tm見于甲減61㈣.抗平滑肌抗體檢測(cè)（sma）［臨床意義］抗平滑肌抗體主要見于自身免疫性肝炎、原發(fā)性膽汁性肝硬化、急性病毒性肝炎。㈤.抗心肌抗體檢測(cè)［臨床意義］心肌炎、心肌衰竭、風(fēng)濕熱、重癥肌無力。㈥.肝臟相關(guān)自身抗體檢測(cè)(lkm&sla)［臨床意義］見于自身免疫性肝炎三、抗組織細(xì)胞抗體檢測(cè)62四、其他抗體檢測(cè)㈠.抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體檢測(cè)（anca）血管炎是指以血管壁炎癥壞死為基礎(chǔ)病理所引起的一組疾病，anca是血管炎的自身抗體，是診斷血管炎的一種特異性指標(biāo)。分為canca、panca。（1）canca

抗蛋白酶3抗體抗pr3抗體

陽性見于韋格納肉芽腫（wg）（2）panca

抗髓過氧化物酶抗體抗mpo抗體

陽性見于血管性腎炎、多動(dòng)脈炎、自身免疫性肝炎、風(fēng)濕性和膠原性血管炎、潰瘍性結(jié)腸炎、pbc63㈡.抗心磷脂抗體測(cè)定

各種帶負(fù)電荷的磷脂是細(xì)胞膜的主要構(gòu)成成分，其中心磷脂最為重要?？沽字贵w是一組針對(duì)各種帶負(fù)電荷磷脂的自身抗體，包括抗心磷脂抗體(anticardiolipin

antibody，aca)、抗磷脂酰絲氨酸等。aca是以心磷脂為靶抗原的一種自身抗體。[結(jié)果判斷]

elisap／n≥2.1則為陽性。

四、其他抗體檢測(cè)64

[臨床意義]①aca見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、干燥綜合征等風(fēng)濕病患者，反復(fù)自然流產(chǎn)患者、以及腫瘤、感染(aids、麻風(fēng)、瘧疾等)、血小板減少癥、腦卒中、心肌梗死患者。②高水平的aca是急性腦血管病愈后不良的信號(hào)。③約70％未經(jīng)治療的aca陽性患者可發(fā)生自發(fā)性流產(chǎn)和宮內(nèi)死胎，尤其是igm型aca可作為自發(fā)性流產(chǎn)的前瞻性指標(biāo)。四、其他抗體檢測(cè)(三).抗環(huán)瓜氨酸肽(ccp)抗體針對(duì)的主要抗原位點(diǎn)是絲集蛋白中的瓜氨酸。[參考值]elisa法:陰性[臨床意義]

對(duì)ra診斷的敏感性是50-78%，特異性為96%。2010年被列為ra的分類診斷標(biāo)準(zhǔn)之一，有助于ra的早期診斷，并于ra的活動(dòng)性相關(guān)。四、其他抗體檢測(cè)66第五節(jié)感染免疫檢測(cè)

病原體(細(xì)菌、病毒、立克次體、支原體、衣原體、寄生蟲等)及其代謝產(chǎn)物刺激人體免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，可利用凝集試驗(yàn)、補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、沉淀試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)(ifa)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)和放射免疫試驗(yàn)(ria)等手段進(jìn)行檢測(cè)；近年來，也利用pcr或dna探針雜交技術(shù)對(duì)病原體核酸進(jìn)行檢測(cè)。67一、細(xì)菌感染免疫檢測(cè)

(一)抗鏈球菌溶血素“o”測(cè)定

鏈球菌溶血素“o”(streptolysin“o”)是a族溶血性鏈球菌的重要代謝產(chǎn)物之一，它是一種具有溶血活性的蛋白質(zhì)，能溶解人及一些動(dòng)物的紅細(xì)胞。同時(shí)鏈球菌溶血素“o”具有抗原性，能刺激機(jī)體產(chǎn)生對(duì)應(yīng)的抗體，稱為抗鏈球菌溶血素“o”(anti-streptolysin“o”，aso)。[參考值]陰性[臨床意義]陽性表示近期有a群溶血性鏈球菌感染常見于活動(dòng)性風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心臟病、急性腎小球腎炎、急性上呼吸道感染。68(二)肥達(dá)(widal)反應(yīng)

傷寒、副傷寒沙門菌含有菌體“o”抗原和鞭毛“h”抗原(副傷寒沙門菌甲、乙、丙的“h”抗原分別為a、b、c)。機(jī)體感染一周后，能逐漸產(chǎn)生相應(yīng)抗體。[參考值]傷寒h<1:160，o<1:80；副傷寒a(chǎn)、b、c<1:80［臨床意義](1)o升高，h正常：傷寒發(fā)病早期或其他沙門菌感染的交叉反應(yīng)。(2)o正常，h升高：不久前曾患過傷寒或傷寒疫苗接種后，或非特異性回憶反應(yīng).(3)o升高，h升高：傷寒可能性大.(4)o升高，a、b、c任何一項(xiàng)升高：可能分別為副傷寒甲、乙、丙。一、細(xì)菌感染免疫檢測(cè)69（三）結(jié)核分枝桿菌抗體和dna測(cè)定［結(jié)果判定］elisa：結(jié)核抗體陰性pcr：結(jié)核分枝桿菌dna陰性［臨床意義］用血清學(xué)方法檢測(cè)抗體，敏感性和特異性可達(dá)90％，簡(jiǎn)便、快速、靈敏，但有一定假陽性。pcr方法靈敏度高、特異性強(qiáng)、速度快，應(yīng)防止標(biāo)本污染一、細(xì)菌感染免疫檢測(cè)70（一）、torch試驗(yàn)torch是指一組病原微生物的英文名稱縮寫。t即剛地弓形蟲或弓形蟲(toxoplasma

gondii)，o即其它病原微生物(others)，r即風(fēng)疹病毒(rubellavirus)，c即巨細(xì)胞病毒(cytomegalo

virus)，h即單純皰疹病毒(herpessimplexvirus)。這組病原體?？赏ㄟ^胎盤傳給胎兒，引起圍生期感染，導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、早產(chǎn)、先天畸形和智力障礙等各種異常結(jié)果，因此受到廣泛關(guān)注。torch感染的抗體檢查在許多地區(qū)已作為孕期檢查的常規(guī)項(xiàng)目二、病毒感染免疫檢測(cè)71

1、弓形蟲(toxoplasma

gondii)抗體測(cè)定

弓形蟲感染是一種人畜共患疾病，廣泛分布于世界各地。貓和其他寵物是主要傳染源。人體感染后，輕型者常無癥狀，但血清中可查到抗體；重型者可引起各種癥狀，如高熱，肌肉、關(guān)節(jié)疼痛，淋巴結(jié)腫大等。孕婦急性弓形蟲感染后，直接威脅胎兒健康。臨床上檢測(cè)弓形蟲特異性igm抗體來進(jìn)行早期診斷。[參考值]ift，elisa：陰性[臨床意義]孕早期感染者可引起流產(chǎn)、死胎、胚胎發(fā)育障礙；妊娠中、晚期感染者，可引起宮內(nèi)胎兒生長(zhǎng)遲緩和一系列中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害，眼損害以及內(nèi)臟的先天損害等，嚴(yán)重威脅胎兒健康。

二、病毒感染免疫檢測(cè)722、風(fēng)疹病毒(rubellavirus)抗體測(cè)定

風(fēng)疹病毒直徑為60nm，具單股rna，屬披膜病毒科。風(fēng)疹是由風(fēng)疹病毒引起的，對(duì)兒童來說，是一種癥狀較輕的出疹性疾病。但孕婦若在妊娠早期感染風(fēng)疹病毒，新生兒致畸致殘率80%，因此，對(duì)早孕婦女進(jìn)行風(fēng)疹病毒特異性igm、igg抗體監(jiān)測(cè)有重要意義。[參考值]elisa：陰性[臨床意義]風(fēng)疹病毒igm抗體陽性，提示有近期感染，必要時(shí)應(yīng)終止妊娠。風(fēng)疹病毒igg抗體陽性，表示機(jī)體已受過風(fēng)疹病毒感染，具有免疫力。

二、病毒感染免疫檢測(cè)733、巨細(xì)胞病毒(cmv)抗體測(cè)定

巨細(xì)胞病毒屬于人類皰疹病毒，多數(shù)人在兒童或少年期受cmv感染而獲免疫。cmv圍產(chǎn)期感染是引起胎兒畸形的主要原因之一，還可引起早產(chǎn)、胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩等。由于臨床表現(xiàn)缺乏特異性，故cmv感染的實(shí)驗(yàn)室檢查對(duì)于該病的早期診斷與治療至關(guān)重要。特異性抗-cmvigm陽性為cmv近期感染的指標(biāo)。[參考值]elisa：陰性[臨床意義]1．cmv可通過胎盤感染胎兒，引起早產(chǎn)、胎兒發(fā)育遲緩、新生兒畸形、黃疸脾腫大、溶血性貧血、視網(wǎng)膜脈絡(luò)膜炎等，新生兒死亡率高。2．免疫功能受損者，如艾滋病、癌癥、器官移植等病人感染cmv后，可合并多臟器疾病。二、病毒感染免疫檢測(cè)744、單純皰疹病毒抗體測(cè)定

單純皰疹病毒．(herpessimplexvirus，hsv)屬皰疹病毒科。hsv原發(fā)感染后，機(jī)體最先出現(xiàn)igm，隨后出現(xiàn)iga及igg，抗體能防止病毒播散，但不能阻止復(fù)發(fā)。臨床上檢出特異性igm陽性或雙份血清特異性igg抗體效價(jià)上升4倍或4倍以上，可提示hsv近期感染。[參考值]間接血凝試驗(yàn)，elisa：陰性[臨床意義]hsvⅠ型和Ⅱ型均有致畸作用，常影響新生兒神經(jīng)發(fā)育。igm抗體陽性提示近期有hsv感染。孕早期感染hsv者可導(dǎo)致流產(chǎn)，妊娠中、晚期感染者，可引起胎兒和新生兒發(fā)病。二、病毒感染免疫檢測(cè)75（二）漢坦病毒抗體測(cè)定漢坦病毒（hantavirushtv）屬布尼亞病毒科，平均直徑120nm，為單股負(fù)鏈rna病毒，鼠是主要的攜帶者和傳染源，人感染后可引起腎綜合征出血熱，臨床以發(fā)熱、出血、急性腎衰為主要特征，檢測(cè)特異性抗體有助于早期診斷。［結(jié)果判斷］ifa、elisa:陰性［臨床意義］感染后2－4天可檢出特異性igm，7－10天達(dá)高峰，igg在病后2周出現(xiàn)，可持續(xù)多年。二、病毒感染免疫檢測(cè)76

(三)柯薩奇病毒抗體測(cè)定

柯薩奇病毒(coxsae以evirus)屬微小核糖核酸病毒科腸道病毒屬，直徑為20—30nm，核心內(nèi)含單鏈rna。檢測(cè)特異性igm，對(duì)本病有早期診斷價(jià)值。[參考值]間接血凝試驗(yàn)，ifa，elisa法：陰性[臨床意義]柯薩奇病毒特異性igm抗體陽性提示現(xiàn)癥感染；特異性igg為中和抗體，陽性提示既往感染。該方法測(cè)定的靈敏度為85％，特異度可達(dá)95％。二、病毒感染免疫檢測(cè)77二、病毒感染免疫檢測(cè)(四)輪狀病毒抗體和rna測(cè)定

輪狀病毒(rotavirus，rv)屬胃腸病毒科，直徑70—75nm，核心為雙股rna。分為a、b、c、d、e、f和g7個(gè)組，其中a組主要引起嬰幼兒腹瀉；b組主要引起成人腹瀉。人感染輪狀病毒后，體內(nèi)可產(chǎn)生特異性igm和igg抗體。[參考值]陰性[臨床意義]人類輪狀病毒主要在寒冷季節(jié)流行，一般通過糞-口途徑傳播。嬰幼兒腹瀉約50%由人類輪狀病毒引起，常igm陽性；也能引起較大兒童及成人腹瀉。78三、寄生蟲感染免疫檢測(cè)囊蟲(cysticercosis)抗體測(cè)定

囊蟲病是豬絳蟲的蚴蟲(囊尾蚴)寄生于人體所致。人因食入豬絳蟲卵而感染。囊蟲主要寄生在皮下組織、肌肉和中樞神經(jīng)系統(tǒng)，以寄生在腦組織者最為嚴(yán)重。elisa試驗(yàn)或間接血凝試驗(yàn)，可檢出病人體內(nèi)的特異性igg抗體，有較高的特異性和敏感性，對(duì)臨床診斷和流行病學(xué)調(diào)查均有實(shí)用價(jià)值。[參考值]elisa法：血清<1:64為陰性；腦脊液<1:8為陰性。[臨床意義]囊蟲特異性igg陽性，見于囊蟲病，陽性率高達(dá)96％。此病以東北、華北、河南、內(nèi)蒙古自治區(qū)較多見。79

四、性傳播疾病的免疫檢測(cè)（一）、梅毒螺旋體抗體測(cè)定梅毒是由蒼白密螺旋體引起的性傳播疾病，臨床分為三期，病程可持續(xù)多年。蒼白密螺旋體感染后，經(jīng)過一段時(shí)間血清中可產(chǎn)生兩種抗體，一種是抗類脂質(zhì)抗原的非特異性抗體，也稱為反應(yīng)素，另一種是抗蒼白密螺旋體的特異性抗體。80目前臨床常用的篩查試驗(yàn)是快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（rapidplasmareaginrpr)。該試驗(yàn)是重要的輔助診斷標(biāo)志物，陽性率在Ⅱ期患者可達(dá)76％，Ⅲ期達(dá)95-100％，隱性感染者可達(dá)70-80％。熒光螺旋體抗體吸收試驗(yàn)（fta-abs)和梅毒螺旋體血球凝集試驗(yàn)(tpha)是確證試驗(yàn)

四、性傳播疾病的免疫檢測(cè)8182（二）、人類免疫缺陷病毒抗體測(cè)定

獲得性免疫缺陷綜合征是由人類免疫缺陷病毒（hiv)引起的綜合征。它源于非洲，早期在歐美流行，現(xiàn)在已波及到世界各地，有全球蔓延趨勢(shì)。主要免疫學(xué)變化為cd4細(xì)胞耗竭，引起免疫缺陷和崩潰，導(dǎo)致腫瘤和多種病原體引起的感染發(fā)生，最終導(dǎo)致死亡。

四、性傳播疾病的免疫檢測(cè)83[參考值]篩選試驗(yàn)elisa法和快速蛋白印跡法:陰性確診試驗(yàn)蛋白印跡試驗(yàn)和rt-pcr法rna:陰性[臨床意義]抗hiv陽性代表hiv感染，對(duì)機(jī)體無保護(hù)性，患者發(fā)病潛伏期即可檢測(cè)到。也是重要的健康查體及獻(xiàn)血員篩查項(xiàng)目。

四、性傳播疾病的免疫檢測(cè)84第六節(jié)移植免疫檢測(cè)一、移植類型二、排斥反應(yīng)三、移植免疫檢測(cè)1.abo血型配型2.hla配型3.淋巴細(xì)胞毒交叉配合試驗(yàn)85

第七節(jié)其他免疫檢測(cè)

一、循環(huán)免疫復(fù)合物檢測(cè)

體內(nèi)游離抗原與相應(yīng)的抗體形成抗原抗體復(fù)合物，即免疫復(fù)合物(immunocomplex，ic)。ic可分為三種：①血循環(huán)中的ic(circulating

immunocomplex，cic)為相對(duì)分子質(zhì)量小的復(fù)合物(＜19s)；②沉淀于組織中的ic為相對(duì)分子質(zhì)量中等的復(fù)合物(19s)；③被單核一吞噬細(xì)胞清除的ic為相對(duì)分子質(zhì)量大的復(fù)合物(＞19s)。通常檢測(cè)的ic為循環(huán)免疫復(fù)合物。86[參考值]聚乙二醇(peg)沉淀法低于正常對(duì)照值+2sd或a值≤o.12。抗補(bǔ)體試驗(yàn)陰性c1q結(jié)合試驗(yàn)陰性[臨床意義]1．增高見于自身免疫病、感染、腫瘤、移植、變態(tài)反應(yīng)等。2．診斷免疫復(fù)合物病：如系統(tǒng)性紅斑狼瘡(sle)、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、血管炎、慢性活動(dòng)性肝炎、部分腎小球腎炎等。

第七節(jié)其他免疫檢測(cè)

87

二、c－反應(yīng)性蛋白檢測(cè)

c-反應(yīng)性蛋白(c-reactiveprotein，crp)是一種由肝臟合成的，能與肺炎雙球菌c多糖起反應(yīng)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。crp能結(jié)合多種細(xì)菌、真菌、原蟲以及核酸、磷脂酰膽堿等，有激活補(bǔ)體、促進(jìn)吞噬和調(diào)節(jié)免疫的作用。廣泛存在于血清和其他體液中。[參考值]

<2.87mg/l(速率散射比濁法)

第七節(jié)其他免疫檢測(cè)

88[臨床意義]

crp是急性時(shí)相反應(yīng)極靈敏的指標(biāo)。①crp升高：見于化膿性感染、組織壞死、惡性腫瘤、結(jié)締組織病、器官移植急性排斥等，且有助于早期診斷；②鑒別細(xì)菌性或非細(xì)菌性感染：前者crp升高，后者不升高；③鑒別風(fēng)濕熱活動(dòng)期和穩(wěn)定期：前者升高，后者不升高；④鑒別器質(zhì)性和功能性疾?。呵罢呱?，后者不升高。但是，孕婦含量較高。

第七節(jié)其他免疫檢測(cè)

89第四節(jié)

病毒性肝炎的檢測(cè)

病毒性肝炎血清標(biāo)志物包括肝炎病毒本身、組成該病毒的成分以及抗病毒抗體等。由于各種肝炎病毒的基因結(jié)構(gòu)，抗原構(gòu)造均不相同，刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的抗體各異，因此，各種肝炎病毒有其特異的血清標(biāo)志物。臨床上通過對(duì)各種肝炎病毒的血清標(biāo)志物檢測(cè)，能準(zhǔn)確地進(jìn)行病毒性肝炎的分型。

90一、甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

甲型肝炎病毒(hepatitisavirus)為小核糖核酸病毒科的一種，1986年將其歸類為腸道病毒屬72型，最近將hav歸類為嗜肝rna病毒。hav是直徑27-32nm的20面體球狀顆粒，核心為單鏈正股rna。hav為甲型病毒性肝炎的病原體，主要通過糞－口途徑傳播。在體內(nèi)，hav主要在肝細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行復(fù)制，通過膽汁從糞便排出。雖然hav可分4個(gè)基因型，但因各株之間氨基酸的同源性很高，故只有一個(gè)血清型，只形成一個(gè)抗原抗體系統(tǒng)。目前主要通過elisa檢測(cè)抗-havigm和抗-havigg以及hav-rna血清標(biāo)志物對(duì)甲型肝炎進(jìn)行病原學(xué)的檢測(cè)。91一、甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

92（一）甲型肝炎病毒抗原測(cè)定[參考值]

陰性[臨床意義]havag陽性：見于70.6-87.5%甲肝患者，可作為急性感染的證據(jù)（二）hav-rna對(duì)診斷特別是早期診斷具有特異性。一、甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

93（三）甲型肝炎病毒抗體測(cè)定[參考值]elisa法陰性[臨床意義]抗-havigm型抗體在發(fā)病后1—2周內(nèi)出現(xiàn)，3個(gè)月后滴度下降，12個(gè)月后可為陰性?？?havigm型抗體陽性，可診斷為急性甲型肝炎?？?haviga型抗體是早期診斷甲肝的指標(biāo)之一。抗-havigg型抗體出現(xiàn)較抗-havigm稍晚，幾乎可終身存在，抗-havigg型抗體陽，則表示過去曾受過hav感染，是一種保護(hù)性抗體，可用于甲肝的流行病學(xué)調(diào)查。一、甲型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

94二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

乙型肝炎病毒(hepatitisbvirus，hbv)為嗜肝dna病毒，完整的hbv顆粒直徑42nm，又稱dane顆粒，分為包膜與核心兩部分，包膜上的糖蛋白，含有乙型肝炎病毒表面抗原(hbsag)，hbsag在肝細(xì)胞漿內(nèi)合成，可大量釋放入血液中，本身無傳染性。核心部分含有環(huán)狀雙股dna、dna聚合酶(dnap)、核心抗原(hbcag)和e抗原(hbeag)等，是病毒復(fù)制的主體。

95是hbv完整顆粒，具有感染性二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

96電鏡下的hbv97二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

98

hbv為乙型病毒性肝炎的病原體，主要通過血液途徑進(jìn)行傳播，亦可由性接觸傳播和母嬰垂直傳播。一般機(jī)體感染hbv后產(chǎn)生相應(yīng)的免疫反應(yīng)，形成三種不同的抗原抗體系統(tǒng)，分別是：乙型肝炎病毒表面抗原（hbsag)；乙型肝炎病毒表面抗體(anti-hbs或抗-hbs)；乙型肝炎病毒e抗原(hbeag)；乙型肝炎病毒e抗體(anti-hbe或抗-hbe)；乙型肝炎病毒核心抗原(hbcag)；乙型肝炎病毒核心抗體(anti-hbc或抗-hbc)。

乙型肝炎病毒血清標(biāo)志物，主要通過elisa，ria等方法進(jìn)行檢測(cè)，健康人檢測(cè)結(jié)果為陰性。

二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

99(一)乙型肝炎病毒六項(xiàng)檢測(cè)[參考值][臨床意義]1.hbsag陽性主要在感染hbv后1-2個(gè)月在血清中出現(xiàn)，可維持?jǐn)?shù)周、數(shù)月至數(shù)年，也可能長(zhǎng)期存在。雖然hbsag本身不具傳染性，但因其常與hbv同時(shí)存在，常被用來作為傳染性的標(biāo)志之一。hbsag陽性見于①乙型肝炎潛伏期和急性期；②慢性遷延性肝炎,慢性活動(dòng)性肝炎,肝硬化,肝癌；③慢性hbsag攜帶者。

hbsag也可從許多乙肝患者體液和分泌物中測(cè)出，如唾液、精液、乳汁、陰道分泌物等。二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

100

2.抗-hbs陽性抗-hbs是機(jī)體針對(duì)hbsag產(chǎn)生的中和抗體，它是一種保護(hù)性抗體，表明機(jī)體具有一定的免疫力。抗-hbs一般在hbsag轉(zhuǎn)陰后出現(xiàn)，是疾病恢復(fù)的開始，抗體可持續(xù)多年，其滴度與特異性保護(hù)作用相平行。①表示既往曾感染過hbv，現(xiàn)已恢復(fù)，而且對(duì)hbv有一定的免疫力；②接種乙肝疫苗后(一般只出現(xiàn)抗-hbs單項(xiàng)陽性)；③被動(dòng)性獲得抗-hbs抗體，如接受免疫球蛋白或輸血治療的患者。

二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

1013.hbeag陽性hbeag位于dane顆粒的核心部分，為一種可溶性抗原。①表明患有乙型肝炎，常在hbsag陽性的血清中檢出，在這種血液中含有較多的dane顆粒，是病毒復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)的指標(biāo)；②hbeag持續(xù)陽性的乙型肝炎，易轉(zhuǎn)變?yōu)槁愿窝?；③hbeag和hbsag陽性的孕婦可將乙肝病毒垂直傳播給新生兒，其感染的陽性率為70％-90％；④hbeag陽性的hbsag攜帶者，將來發(fā)生肝損傷的可能性極大。

二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

102

4.抗-hbe陽性抗-hbe是hbeag的對(duì)應(yīng)抗體，但它不是中和抗體，出現(xiàn)于急性感染的恢復(fù)期，持續(xù)時(shí)間較長(zhǎng)，抗-hbe和hbeag一般不會(huì)同時(shí)陽性，抗-hbe陽轉(zhuǎn)，hbeag即消失。①多見于hbeag轉(zhuǎn)陰的病人，意味著hbv部分被清除或抑制，復(fù)制減少，傳染性降低；②部分慢性乙型肝炎、肝硬化、肝癌病人可檢出抗-hbe。二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

1035.抗-hbc陽性抗-hbc是hbcag的對(duì)應(yīng)抗體，它不是中和抗體，而是反映肝細(xì)胞受到hbv侵害的一種指標(biāo)，主要包括igm、igg和iga等三型，目前常用的方法是檢測(cè)總抗-hbc，也可分別檢測(cè)抗-hbc的igm、igg或iga?？?hbcigm是機(jī)體感染hbv后在血液中最早出現(xiàn)的特異性抗體，在肝炎的急性期滴度高，是診斷急性乙型肝炎和判斷病毒復(fù)制活躍的指標(biāo)，并提示病人血液有強(qiáng)傳染性?？?hbcigm陽性還見于慢性活動(dòng)性肝炎?？?hbcigg在機(jī)體感染hbv后1個(gè)月左右開始升高。臨床上測(cè)定的總抗-hbc主要反應(yīng)的是抗-hbc

igg，其陽性高滴度，表明患有乙型肝炎，是指正在感染；抗-hbcigg低滴度則是既往感染過hbv的指標(biāo)，在體內(nèi)持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)，具有流行病學(xué)的意義。

二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

1046.hbcag陽性hbcag是dane顆粒的核心部分，主要存在于受感染的肝細(xì)胞核內(nèi)，不游離于血清中，檢測(cè)比較麻煩，因此臨床上不作常規(guī)檢查。

hbcag陽性提示患者血液中有感染性的hbv存在，其含量較高，表示復(fù)制活躍，傳染性強(qiáng)，預(yù)后較差。二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

105

發(fā)病期黃疸althbsaghbeag抗-hbe抗－h(huán)bcigm抗－h(huán)bcigg抗-hbs潛伏期1－6mhbv感染

01月2月3月6月1年10年二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

106二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

107

hbv五項(xiàng)血清標(biāo)志物聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義常見模式hbsag

抗-hbs

hbeag

抗-hbe

抗-hbc

臨床意義1+-+-+

急性或慢性乙型肝炎,高傳染性2+---+急性、慢性乙型肝炎或慢性

hbsag攜帶者3+--+

+急性乙肝趨向恢復(fù)或慢性乙肝，弱傳染性4-+--+急性hbv感染康復(fù)期或有既往感染史，目前保持免疫力5---+

+乙肝恢復(fù)期，弱傳染性6----+急性hbv感染“窗口期”或既往感染過乙肝，有流行病學(xué)意義7-+---疫苗接種后或hbv感染后康復(fù)8-+

-+

+急性乙肝康復(fù)期，開始產(chǎn)生免疫9-----非乙肝感染108(二)乙型肝炎病毒前s1(pres1)蛋白與抗前s1抗體測(cè)定前s1蛋白是hbv外膜蛋白的成分，由108～119個(gè)氨基酸組成，通常連接在前s2蛋白的氨基末端。前s1蛋白第21～47位氨基酸為肝細(xì)胞膜的受體，hbv可通過這一受體粘附至肝細(xì)胞膜上，從而侵入肝細(xì)胞。前s1蛋白抗原性較強(qiáng)，可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗-前s1抗體。[臨床意義]前sl蛋白陽性提示病毒復(fù)制活躍，具有較強(qiáng)的傳染性?？?前s1抗體是hbv的中和抗體，能阻止hbv入侵肝細(xì)胞，抗-前s1抗體較早出現(xiàn)，表明病程短，提示預(yù)后良好?？埂皊1陽性，見于急性乙肝恢復(fù)早期，常表示hbv正在或已經(jīng)被清除，是觀察乙肝病情，了解預(yù)后有效的指標(biāo)。

二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

109乙肝表面抗原226氨基酸小分子蛋白(主蛋白shbs)55氨基酸前s2區(qū)226氨基酸中分子蛋白(mhbs)226氨基酸55氨基酸前s2區(qū)108-119氨基酸前s1區(qū)大分子蛋白(lhbs)presl的21-47肽段乙肝前s2(pres2)結(jié)構(gòu)110(三)乙型肝炎病毒前s2(pres2)蛋白與抗前s2抗體測(cè)定前s2蛋白是hbv侵入肝細(xì)胞的主要結(jié)構(gòu)成分，乙型肝炎病毒前s2抗體(抗-pres2)，是hbv的中和抗體[臨床意義]pres2陽性提示hbv復(fù)制異?；钴S,有傳染性,抗-pres2陽性見于乙肝急性期及恢復(fù)早期,提示hbv已被清除,預(yù)后較好二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

111(四)乙型肝炎病毒dna(hbv-dna)定性和定量測(cè)定

血液中hbvdna的存在是hbv感染最直接，最靈敏和最特異的檢測(cè)指標(biāo)。[參考值]定性pcr法、熒光定量pcr法：陰性[臨床意義]1．hbvdna陽性是急性乙肝病毒感染的可靠指標(biāo)。2.用于應(yīng)用hbsag疫苗后垂直傳播阻斷效果的監(jiān)測(cè)。3．抗病毒藥物治療乙肝的療效評(píng)價(jià)4．篩查獻(xiàn)血員，防止乙肝病毒輸血后感染。5．監(jiān)測(cè)血制品的傳染性、乙肝疫苗的安全性。（五）乙型肝炎病毒ymdd變異測(cè)定二、乙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

112三、丙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)

丙型肝炎病毒(hepatitiscvirus，hcv)屬于黃病毒科，直徑30-60nm，由核心和包膜兩部分組成。核心部分含有單鏈正股rna。hcv為丙型病毒性肝炎的病原體，主要通過血液傳播，是引起輸血后肝炎的病原體之一。病人感染hcv后，主要在宿主的肝細(xì)胞內(nèi)復(fù)制引起丙型肝炎，病情雖較乙型肝炎輕，但更易轉(zhuǎn)為慢性。臨床上診斷hcv感染的主要依據(jù)為抗-hcvigm、抗-hcvigg和hcv-rna測(cè)定，健康人檢測(cè)結(jié)果為陰性。113黃病毒科丙型肝炎病毒屬直徑30～60nm

球狀顆粒由包膜、核衣殼和病毒核心構(gòu)成單股正鏈rna，9500個(gè)核苷酸包膜

結(jié)構(gòu)區(qū)編碼結(jié)構(gòu)蛋白非結(jié)構(gòu)區(qū)編碼非結(jié)構(gòu)蛋白或功能蛋白三、丙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)114(一)丙型肝炎病毒(hcv)抗體測(cè)定

抗-hcv測(cè)定常用elisa法進(jìn)行檢測(cè)。[臨床意義]1．抗-hcv為一種非保護(hù)性抗體，測(cè)定陽性是診斷hcv感染的重要依據(jù)。2．抗-hcvigm陽性，①常見于急性hcv感染，是診斷丙肝的早期敏感指標(biāo)；②是hcv活動(dòng)的指標(biāo)，在慢性hcv感染時(shí)，若抗-hcvigm陽性只表示病變活動(dòng)，常伴有alt升高；③是判斷hcv傳染性的指標(biāo)。3.抗-hcvigg出現(xiàn)晚于抗-hcvigm，陽性表明體內(nèi)有hcv感染，但不能作為hcv感染的早期診斷指標(biāo)。在疾病早期抗-hcvigg陰性不能完全排除hcv感染，必要時(shí)行hcv-rna的檢測(cè)。三、丙型肝炎病毒標(biāo)志物檢測(cè)115(二)丙型肝炎病毒rna(hcv-rna)定性和定量測(cè)定血液中hcv-rna的存在是hcv