《動(dòng)物醫(yī)學(xué)開題報(bào)告（含提綱）》

論文題目豬源大腸桿菌的血清型鑒定及耐藥性監(jiān)測(cè)一、立題依據(jù)（一）研究背景隨著人們生活水平的提高，肉制品的質(zhì)量和安全成為人們關(guān)注的重點(diǎn)，綠色健康和營(yíng)養(yǎng)的飲食成為人們的生活追求，現(xiàn)在的消費(fèi)趨勢(shì)基本上都是圍繞著健康和綠色來發(fā)展，因此生豬產(chǎn)業(yè)的發(fā)展加劇，而豬源大腸桿菌疾病風(fēng)險(xiǎn)也不斷加大，傳播也不斷加快，致病率不斷上升。而在過去的40年內(nèi)，較為嚴(yán)重的致瀉性大腸桿菌感染事件均是通過食物傳播引起的。例如，美國(guó)多次暴發(fā)的與肉有關(guān)的食物中毒事件，日本1996年暴發(fā)的與進(jìn)食牛肉有關(guān)的大腸桿菌疫情，2020年我國(guó)貴州省一所學(xué)校發(fā)生的200多名學(xué)生大腸桿菌食物中毒事件?？梢姡聻a性大腸桿菌在食源性疾病中扮演著重要角色，目前已成為各國(guó)畜禽產(chǎn)品致病微生物監(jiān)測(cè)和控制的重點(diǎn)。（二）理論依據(jù)大腸桿菌是各種動(dòng)物的腸道內(nèi)常駐菌,分布非常廣泛。但直到20世紀(jì)中葉,人們才認(rèn)識(shí)到一些特殊血清型的大腸桿菌對(duì)人和動(dòng)物有致病性,尤其易引起嬰兒和幼畜的嚴(yán)重腹瀉和敗血癥。目前,豬源大腸桿菌在世界各地均有發(fā)生,養(yǎng)豬業(yè)較發(fā)達(dá)的國(guó)家如美國(guó),其豬源大腸桿菌的發(fā)病率為20%左右,死亡率為15.5%，荷蘭豬源大腸桿菌的發(fā)病率為16.5%左右,死亡率為11.5%。臺(tái)灣每年豬源大腸桿菌發(fā)病率為15%-25%,直接損失3.6億元。有資料顯示我國(guó)華東地區(qū)部分規(guī)?；i場(chǎng),豬源大腸桿菌平均發(fā)病率為29%,平均死亡率為20.4%，如果豬源大腸桿菌病與其他豬病混合感染,死亡率可達(dá)60%以上,造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。隨著養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展,由豬源大腸桿菌引起的感染有明顯上升趨勢(shì),仔豬死亡率增高,成活率降低,斷奶窩重降低,嚴(yán)重制約了養(yǎng)豬業(yè)發(fā)展。但許多國(guó)家和地區(qū)通過對(duì)豬源大腸桿菌的流行病學(xué)調(diào)查和耐藥性監(jiān)測(cè)積累了翔實(shí)的資料,并結(jié)合分子生物學(xué)方法研究豬源大腸桿菌耐藥性的傳播規(guī)律,這些研究對(duì)現(xiàn)所在地區(qū)豬源大腸桿菌的防治發(fā)揮了重要作用。本文將根據(jù)研究的需要，通過學(xué)術(shù)期刊網(wǎng)、互聯(lián)網(wǎng)和圖書館的館藏資料等方式，系統(tǒng)地獲取與豬源大腸桿菌相關(guān)的文獻(xiàn)資料，了解該領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀與動(dòng)態(tài)。查閱各種學(xué)術(shù)期刊、書籍等等相關(guān)論著和文獻(xiàn)，從中獲取所需要的文獻(xiàn)素材，了解與本選題有關(guān)的基本知識(shí)，為本選題的研究提供理論支持。（三）立題意義雖然通過改善養(yǎng)殖條件及使用針對(duì)性的疫苗可以減少豬源大腸桿菌的發(fā)生,但在現(xiàn)在生產(chǎn)中，通常用K88、K99雙價(jià)苗，K88、K99、K987P三價(jià)苗對(duì)豬大腸桿菌病進(jìn)行免疫，采用多價(jià)滅活苗免疫較單價(jià)苗而言對(duì)仔豬黃痢具有較高的保護(hù)率；但是基因工程苗僅針對(duì)當(dāng)前大范圍內(nèi)流行的大腸桿菌，因大腸桿菌抗原血清型存在地域差異，因此采用基因工程苗對(duì)小區(qū)域內(nèi)大腸桿菌的預(yù)防效果差異較大，相比而言采用自家滅活苗免疫能有針對(duì)性和目標(biāo)性的預(yù)防該地區(qū)豬源大腸桿菌病的發(fā)生。但長(zhǎng)期以來,人們對(duì)仔豬黃白痢的防治仍然以藥物控制為主要手段。常用于治療豬源大腸桿菌病的藥物主要是青霉素類、氯霉素類、磺胺類、氨基糖昔類等抗菌藥物。在臨床上使用抗菌藥物,常常是先喜后憂,一方面可以及時(shí)地解決致病性大腸桿菌的困擾,另一方面,由于使用抗菌藥物,給大腸桿菌耐藥株的產(chǎn)生形成壓力,促使大腸桿菌產(chǎn)生耐藥性,這使得抗菌藥的使用效果變得越來越差,臨床上越易出現(xiàn)抗菌藥的不合理和超量使用,進(jìn)而形成更大選擇壓力,因此把用藥物治療豬源大腸桿菌的效果陷入惡性循環(huán)。目前,大腸桿菌的耐藥性已成為一個(gè)全球性問題,凡乎所有大腸桿菌都獲得耐藥基因,幾乎每一種抗菌藥物都能被大腸桿菌中某些物質(zhì)抵抗或破壞。由于大腸桿菌復(fù)雜的血清型以及全國(guó)各地區(qū)存在的大腸桿菌耐藥性的差異導(dǎo)致其防治越來越困難。鑒于此。本文對(duì)豬源大腸桿菌的血清型鑒定及耐藥性進(jìn)行了具體分析。并提供科學(xué)的理論依據(jù),給出相應(yīng)的防治措施。二、研究?jī)?nèi)容及方案（一）研究目標(biāo)豬源大腸桿菌病是由大腸桿菌引起的傳染病，是導(dǎo)致豬發(fā)病率、死亡率增加的主要原因之一。從發(fā)生豬源大腸桿菌的地區(qū)對(duì)豬腸道內(nèi)容物及糞便檢樣，進(jìn)行血清型鑒定。免疫學(xué)血清檢測(cè)技術(shù)的原理是基于抗原抗體的特異性反應(yīng)，通過標(biāo)記反應(yīng)物上的示蹤物，對(duì)抗原抗體進(jìn)行定性或定量的檢測(cè)技術(shù)。目前用于檢測(cè)大腸桿菌的免疫測(cè)方法主要有酶附法、熒光免疫測(cè)定、免疫膠體金、標(biāo)記技術(shù)等。伴隨著抗生素在疾病防治和飼料添加中的廣泛使用，豬源大腸桿菌對(duì)其抗生素耐藥性日益嚴(yán)重。菌株可感染生豬、污染豬肉而進(jìn)一步通過食物鏈將其耐藥性傳播至人類，造成嚴(yán)重的食品安全和公共衛(wèi)生問題。由于耐藥基因轉(zhuǎn)移進(jìn)入食物鏈的可能性，抗生素耐藥性往往會(huì)限制養(yǎng)殖業(yè)的治療選擇范圍，并且會(huì)增加公共衛(wèi)生危險(xiǎn)。本文將針對(duì)豬源大腸桿菌的血清型鑒定以及耐藥性檢測(cè)進(jìn)行比較法分析，系統(tǒng)地分析收集相關(guān)文獻(xiàn)資料，并將兩者的相同點(diǎn)與不同點(diǎn)進(jìn)行比較，找出兩者之間的共性和個(gè)性問題，總結(jié)研究成果，并作為理論依據(jù)。再從文章出發(fā)，通過相關(guān)著論和文獻(xiàn)，相互借鑒、相互融合，進(jìn)行全面地分析論述。（二）預(yù)期達(dá)到的研究結(jié)果和創(chuàng)新點(diǎn)如今中獸醫(yī)也逐漸進(jìn)入人們的視野，中草藥對(duì)豬源大腸桿菌也有較好的治療作用，楊廷桂對(duì)主要由白頭翁、魚腥草、車前草、金銀花等研制的“仔豬腹瀉康”研究發(fā)現(xiàn)，“仔豬腹瀉康”對(duì)豬源大腸桿桿菌具有較好的治療效果，謝家聲報(bào)道穿心蓮、博落回和魚腥草等的注射液對(duì)豬源大腸桿桿菌也有顯著的治療效果，通過對(duì)豬源大腸桿菌的耐藥性檢測(cè)研究得出，微生態(tài)制劑可以調(diào)控腸道微生物穩(wěn)態(tài)和機(jī)體免疫系統(tǒng)，并產(chǎn)生抑菌物質(zhì)，抑制有害菌的生長(zhǎng)。進(jìn)行血清型鑒定試驗(yàn)后發(fā)現(xiàn)采用工程苗或者滅活苗對(duì)妊娠母豬進(jìn)行免疫可顯著降低仔豬患黃白痢的發(fā)生率和死亡率，并且較工程苗而言，滅活苗對(duì)仔豬黃白痢的發(fā)生率具有顯著的保護(hù)作用，表明滅活苗對(duì)仔豬黃白痢的發(fā)生具有較好的預(yù)防效果，更好的為臨床上防治該病提供理論依據(jù)和技術(shù)指導(dǎo)。（三）完成論文需具備的條件1.在實(shí)事求是、深入實(shí)際調(diào)查研究的基礎(chǔ)上，運(yùn)用所學(xué)知識(shí)，能深入分析，并有獨(dú)到見解；要觀點(diǎn)明確、材料詳實(shí)、結(jié)構(gòu)合理嚴(yán)謹(jǐn)、語言通順。2.具有理論與現(xiàn)實(shí)意義，研究?jī)?nèi)容科學(xué)合理，研究計(jì)劃方案可行；理論聯(lián)系實(shí)際，對(duì)實(shí)際工作或?qū)W術(shù)研究有一定的現(xiàn)實(shí)意義。3.嚴(yán)格遵守學(xué)術(shù)道德規(guī)范，不得抄襲、剽竊他人學(xué)術(shù)成果。（四）論文提綱1.摘要2.目錄3.研究?jī)?nèi)容2.1豬源大腸桿菌概述2.2豬源大腸桿菌病的流行病學(xué)2.3大腸桿菌抗原特性2.4抗生素防治研究進(jìn)展2.5本研究目的意義和主要內(nèi)容4.研究方法4.1豬源大腸桿菌血清型鑒定4.2研究的目的與意義4.3研究材料及動(dòng)物4.4豬源大腸桿菌耐藥性檢測(cè)4.5研究材料及動(dòng)物4.6研究的目的與意義4.7總結(jié)5.豬源大腸桿菌滅活疫苗的制備及免疫保護(hù)效力評(píng)價(jià)5.1研究的目的與意義5.2試驗(yàn)方法及材料5.3滅活苗的研制及檢驗(yàn)6.結(jié)論參考文獻(xiàn)（五）參考文獻(xiàn)[1]仔豬水腫病防治方法[J].和光林.畜牧業(yè)環(huán)境.2020(05)[2]豬大腸桿菌病的診治[J].田和江.今日畜牧獸醫(yī).2019(12)[3]豬沙門氏菌與大腸桿菌混合感染的診治[J].孔玲.農(nóng)家參謀.2019(16)[4]淺析豬大腸桿菌病診斷及防治[J].周香錦,王英利.山西農(nóng)經(jīng).2018(16)[5]仔豬腹瀉大腸桿菌分離鑒定及血清型與耐藥性分析[J].吳利軍,周丹娜,邵志勇,金爾光,姚艷豐,王富國(guó),陳夏冰,何斌,楊文海,劉武,童偉文,夏瑜,陳潔.湖北農(nóng)業(yè)科學(xué).2018(06)[6]楊廷桂,王冬梅,周根來等.“仔豬腹瀉康”對(duì)仔豬黃痢瀹療效果研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2012（1：208-209,212）[7]謝家聲,李錦宇,王貴波等.三種獸用中藥注射液后海穴注射治療仔豬黃痢的效果[J].中獸醫(yī)醫(yī)藥雜志,2014（4:48-49）三、進(jìn)度安排（一）完成時(shí)間及撰寫階段計(jì)劃2020.10.21—2020.11.18明確論文【選題】,制定寫作大綱2020.12.01—2020.12.02接受【論文任務(wù)書】，閱讀收集寫作材料2020.12.10—2020.12.11完成論題論證，填寫【開題報(bào)告】2020.12.12—2021.01.15完成論文【初稿】及【查重】2020.12.2