血細胞分析儀的應用及形態(tài)學復檢

血細胞分析儀的應用及形態(tài)學復檢ProgramofUrbanandRuralCounterpartSupportonClinicalLaboratory

TechnologyStandardDevelopmentandTraining2023/1/11城鄉(xiāng)對口支援臨床檢驗技術(shù)標準制定及培訓主要內(nèi)容一、血細胞分析儀發(fā)展簡史二、血細胞分析儀檢測原理三、血細胞檢驗圖形及臨床應用四、如何保證檢驗結(jié)果的準確性血細胞形態(tài)學復檢血細胞分析儀性能評價及全面質(zhì)量管理血液分析產(chǎn)品的發(fā)展歷程17世紀列文虎克

原始的顯微鏡

1674年

列文虎克《倫敦皇家學會哲學學報》------

第一篇對紅細胞的正式記載1855年

發(fā)明了用于計數(shù)血細胞的計數(shù)板

改良Neubauer

計數(shù)板1879年埃爾利希(德國)發(fā)明活體染色法2023/1/11一、血細胞分析儀發(fā)展簡史庫爾特原理血細胞是相對不良導體，當其懸浮于電解質(zhì)溶液中通過檢測微孔時，會改變微孔內(nèi)外原來恒定的電阻，結(jié)果產(chǎn)生電脈沖。脈沖的大小代表了通過微孔血細胞的體積大小，脈沖的數(shù)量代表了通過微孔血細胞的數(shù)量。WallanceH.Coulter20世紀40年代后期，美國人庫爾特發(fā)明并申請了粒子計數(shù)的設計專利。2023/1/11基于Coulter原理的血細胞計數(shù)在1953年獲得美國發(fā)明專利同年和他的兄弟約瑟夫（Joseph）開創(chuàng)了自己的公司，并成功的設計和制造出了可以計數(shù)血細胞的專用儀器，然后開始了在這一領(lǐng)域的商業(yè)運作華萊士.庫爾特約瑟夫.庫爾特2023/1/11血細胞分析儀的發(fā)展歷史

70年代血小板與紅細胞同時計數(shù)80年代，在8項檢測基礎上加上紅細胞指數(shù)、三個直方圖的報告，不僅提供是否貧血，且可對貧血的類型和原因進行分析；90年代，將激光、射頻、化學染色計數(shù)應用于對細胞特性的分析，五分類血液分析儀出現(xiàn)并得到廣泛的應用VCS原理激光法原理熒光染色法化學染色法血細胞分析儀的現(xiàn)狀血常規(guī)檢驗多參數(shù)化

有的儀器可以提供40~50種測量或計算參數(shù)，有的甚至還整合了免疫化學參數(shù)，如CD3,CD4等以及C反應蛋白水平。多功能合成擴展

已經(jīng)不僅僅局限在進行常規(guī)血細胞分析，近年來它增加了許多擴展的功能。例如將網(wǎng)織紅細胞(RET)的計數(shù)和分析功能加入其中。

檢測速度的提高

增加了自動進樣系統(tǒng)，測定速度加快，一般可以達到每小時80~100個樣品。血細胞分析儀產(chǎn)品的系列化和流水線化

2023/1/11數(shù)字化圖像分析或儀器視覺技術(shù)進入血細胞形態(tài)學檢驗利用單克隆抗體標記技術(shù)提高儀器識別細胞能力同機檢測血細胞和血漿內(nèi)化學或免疫學指標機內(nèi)“專家診斷系統(tǒng)”的臨床應用實現(xiàn)血細胞分析儀與標本前處理儀器、生化分析儀、免疫分析儀更便捷的全自動流水線血細胞分析儀技術(shù)展望2023/1/11二、血細胞分析儀的檢測原理紅細胞、血小板計數(shù)原理白細胞分類計數(shù)原理血紅蛋白檢測原理2023/1/11platelets（一）紅細胞、血小板計數(shù)原理電阻抗法（庫爾特原理）2023/1/11紅細胞與血小板的檢測在同一通道，小紅細胞，細胞碎片及血小板自身的聚集等對血小板計數(shù)及平均血小板體積的影響較大，血小板直方圖能反映這些變化，出現(xiàn)異常血小板直方圖，根據(jù)圖形的變化可了解血小板計數(shù)的準確性。（大于右側(cè)閾值考慮為紅細胞）（二）白細胞分類計數(shù)原理白細胞三分群計數(shù)原理白細胞五分類計數(shù)原理2023/1/11根據(jù)白細胞體積大小，可初步確認細胞分群第一群（30-90fl）：小細胞群，主要分布的是淋巴細胞第二群（90-160fl）：中間細胞群，主要包括單核細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性粒細胞，核左移的各階斷幼稚細胞或白血病時白血病細胞第三群（160fl以上）：大細胞群，主要是中性粒細胞白細胞三分群計數(shù)原理小細胞群中間細胞群大細胞群2023/1/11儀器測定的細胞大小指加入溶血素后的白細胞大小血濃縮圖片：可見中性粒細胞，淋巴細胞，單核細胞，嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞溶血劑處理后的白細胞：白細胞膜縮于細胞核上，只能見大，中，小三群細胞核，淋巴細胞最小，單核細胞次之，分葉核粒細胞最大2023/1/11白細胞三分群計數(shù)原理白細胞經(jīng)特殊溶血素處理后，細胞失水，各群細胞體積分布差異增加。分布范圍：35-450fl(256個通道)白細胞可以根據(jù)體積大小區(qū)分為三個群

三分群血細胞分析儀的缺陷2023/1/11方法學單一，非特異性檢測（1）僅分大小，不辨其他特性，相同大小的顆粒易誤計數(shù)（2）中間細胞包含了多種細胞，和成熟WBC分類有很大差異干擾大，異常標本的處理能力差（1）MID增多:可能是MONO、EOS、BASO、BLAST增多（2）LYM干擾：PLT、NRBC、FWBC（3）PLT干擾：RBC、PLT本身、FWBC等

（4）異常顆?；蛐盘柕母蓴_三分類結(jié)果僅為初步結(jié)果，要求我們進行形態(tài)學檢驗白細胞五分類計數(shù)原理激光與細胞化學法容量、電導、光散射法電阻抗與射頻及特殊染色法多角度偏振光散射法流式細胞術(shù)及核酸熒光染色法2023/1/11流式細胞技術(shù)、核酸熒光染色技術(shù)待測血樣稀釋成單個細胞懸液，經(jīng)過核酸熒光染色后，在鞘液的約束下，排成單列通過測量區(qū)的細胞在垂直入射的激光束照射和激發(fā)下，產(chǎn)生：前向散射光（FSC，主要反映細胞的大?。﹤?cè)向散射光（SSC，主要反映細胞內(nèi)容物的復雜度）側(cè)向熒光（SFL，主要反映核酸含量的多少）舉例：SysmexXE-2100WBC/BASO通道（白細胞總數(shù)和嗜堿性粒細胞計數(shù)）SSC（側(cè)向散射光）FSC（前向散射光）酸性溶血素1.紅細胞溶解2.嗜堿性細胞固定3.其余白細胞胞質(zhì)皺縮DIFF通道（白細胞分類和幼稚粒細胞定量）正常散點圖異常散點圖紅細胞溶解，白細胞膜被打孔，熒光染料染色核酸成分射頻/直流電技術(shù)（RF/DC）電學法：射頻RF：(核/胞質(zhì)比率）直流電DC:細胞體積在IMI通道中，紅細胞、血小板溶解成熟白細胞膜磷脂多，也溶解主要檢測：原始細胞幼稚粒細胞血小板聚集IMI通道(幼稚髓性細胞和血小板聚集的檢測）Ret/PLT-O通道NRBC通道（三）血紅蛋白測定的原理—分光光度比色光學比色法原理檢測物質(zhì)為血紅蛋白衍生物ISCH推薦使用氰化高鐵法（HiCN）吸收峰在540nm氰化血紅蛋白含有氰化物月桂酰硫酸鈉（SLS）血紅蛋白不含氰化物各型號血細胞分析儀必須以HiCN值為標準進行校正2023/1/11血細胞分布直方圖一種可以顯示細胞分群情況的圖形橫坐標（“X”軸）表示細胞體積（以fl表示）縱坐標（“Y”軸）表示細胞相對數(shù)量三、血細胞檢驗圖形及臨床應用2023/1/11白細胞體積分布直方圖紅細胞體積分布直方圖血小板分布直方圖（一）白細胞分布直方圖及臨床應用白細胞正常直方圖在35-450fl范圍內(nèi)分析白細胞的體積根據(jù)體積大小分為三群：小細胞群、中間細胞群、大細胞群出現(xiàn)異常直方圖時，常伴隨相應部位的報警信號。2023/1/11小細胞群中間細胞群大細胞群白細胞直方圖的臨床意義圖形變化決定進一步檢查的內(nèi)容

根據(jù)圖形變化，決定是否進一步鏡檢，提示在顯微鏡分類時注意異常細胞的存在白細胞直方圖變化無特異性

如中間細胞群可包括大淋巴細胞、原始細胞、幼稚細胞、嗜酸性粒細胞、嗜堿性細胞，其中任一細胞增多，均可使直方圖產(chǎn)生相似的變化2023/1/11

反映某些人為或病理因素干擾白細胞計數(shù)和分類計數(shù)※中性粒細胞增多(x400)中性粒細胞峰高、面寬WBCLYM%MXD%NEUT%23.8x109/L8.1%7.9%84.0%StabSegLymMonoEoBaso8%77%7%7%1%0%2023/1/11白細胞分布直方圖及臨床應用※淋巴細胞增多(x1000)StabSegLymphMonoEoBasoAty-Lym4%20%64%4%5%0%3%WBCLYM%MXD%NEUT%7.9x109/L+64.7%15.8%–19.5%2023/1/11※單核細胞增多(x1000)中部突起StabSegLymphMonoEoBasoAty-Lym8%37%17%36%1%0%1%WBCLYM%MXD%NEUT%7.7x109/LF1*13.2%F2*37.7%49.1%2023/1/11※嗜酸性粒細胞增多(x1000)中部突起StabSegLymphMonoEoBasoMyAty-Lym1%19%20%9%48%1%1%1%WBCLYM%MXD%NEUT%4.3x109/L18.3%+62.2%–19.5%2023/1/11慢性淋巴細胞性白血病酷似正常淋巴細胞增多在60fL處出現(xiàn)明顯尖峰，中間細胞群和大細胞群波谷消失骨髓免疫分型確診為B淋巴細胞白血病2023/1/11慢性粒細胞性白血病白細胞三分群消失，出現(xiàn)單一曲線，主峰位于175fL提示出現(xiàn)大量中性和中性幼稚細胞，分類沒有結(jié)果2023/1/11常見報警信息報警提示直方圖異常區(qū)域原因R1淋巴細胞左側(cè)區(qū)域血小板聚集/巨大血小板/瘧原蟲/有核紅細胞/不溶解紅細胞/異常淋巴細胞R2淋巴和單個核細胞之間異常淋巴細胞/原幼細胞/漿細胞/嗜酸性粒細胞/嗜堿性粒細胞R3單個核和粒細胞間未成熟粒細胞/嗜酸性粒細胞/異常細胞R4粒細胞右側(cè)區(qū)域粒細胞增多癥RM多區(qū)異常以上多種原因引起R1R2R4R3ALAMAG2023/1/11報警信息的功能提高血細胞分類結(jié)果的準確性用于篩選血常規(guī)的異常白細胞分類結(jié)果對于疑似血液病患者，無論儀器是否有報警信號，均應作涂片復檢2023/1/11白細胞計數(shù)和分群的注意事項溶血劑處理后的白細胞直方圖變化

溶血劑處理后的白細胞體積與其自然體積不完全一致，電阻抗法白細胞直方圖并不能代表其自然狀況，但可以用于判斷白細胞各亞群的分布情況，作為血涂片顯微鏡檢查前的“初篩”，對病理標本必須經(jīng)顯微鏡檢查確認。血細胞分析儀必須使用配套試劑

不同血細胞分析儀所采用的稀釋液及溶血劑成分不完全相同，對白細胞膜的作用程度不同，同一份血液標本在不同儀器的直方圖形狀有所不同，所以各型號儀器確定白細胞“分群”的區(qū)分界限設置點也不同。不同血細胞分析儀的直方圖不同

不同廠家不同型號儀器的白細胞直方圖是不完全相同的，但各類儀器電阻抗法白細胞直方圖的病理變化趨勢是一致的。2023/1/11紅細胞正常直方圖（二）紅細胞分布直方圖及臨床應用36-360fl范圍內(nèi)分析紅細胞在直方圖上反映的是生理狀態(tài)下的紅細胞大小在典型的紅細胞直方圖可以分兩個群相關(guān)參數(shù)：MCV、RDW紅細胞體積發(fā)生變化時直方圖可左移或右移或出現(xiàn)雙峰2023/1/11紅細胞主群大細胞群fl相對數(shù)量缺鐵性貧血治療前：波峰左移，峰底變寬缺鐵性貧血治療后：雙峰，峰底變寬2023/1/11不同類型貧血時，紅細胞體積的變化使紅細胞體積分布圖形發(fā)生變化，結(jié)合其他參數(shù)對鑒別診斷頗有價值。紅細胞分布直方圖的臨床意義峰左移雙峰小細胞不均一性貧血輕型β-珠蛋白生成障礙性貧血：波峰左移，峰底基本不變2023/1/11峰左移小細胞均一性貧血巨幼細胞性貧血：波峰右移，峰底變寬巨幼細胞性貧血治療后：可有雙峰，峰底變寬2023/1/11峰右移雙峰大細胞不均一性貧血紅細胞計數(shù)的注意事項含有白細胞因素,但可以忽略紅細胞：白細胞約為750：1病理情況下易產(chǎn)生誤差白細胞增加明顯貧血嚴重2023/1/11（三）血小板分布直方圖及臨床應用血小板正常直方圖2023/1/112-30fl范圍內(nèi)分析血小板正常呈左偏態(tài)分布，主要集中在2-15fl相關(guān)參數(shù)：PLT,MPV,PCT,PDW血小板直方圖的臨床意義2023/1/11異常血小板直方圖大血小板小紅細胞聚集的血小板干擾a.正常血小板直方圖；b.大血小板直方圖；c.小血小板直方圖；d、e.聚集的血小板直方圖；f.小紅細胞干擾的血細胞直方圖1/11/2023大血小板出現(xiàn)大血小板的血樣，PLT直方圖分布較寬，顯示出大血小板。2023/1/11小紅細胞干擾血小板計數(shù)特征：直方圖右側(cè)曲線最低點不與X軸重合，然后又高高抬起，該標本紅細胞直方圖左移，峰底變寬，血涂片上見較多小紅細胞。2023/1/11小紅細胞血小板聚集WBC直方圖PLT直方圖血圖片檢查所示，幾十個血小板凝集在一起的血樣。WBC直方圖Ghost區(qū)和小細胞區(qū)域之間的鑒別線與直方圖的交點很高（箭頭所示）同時有WL報警信號。PLT直方圖也提示有大顆粒存在。因此無法測得正確血小板數(shù)目，需重新采血2023/1/11

四、如何保證結(jié)果的準確性？（一）排除病理性誤差干擾因素（二）血細胞形態(tài)學復檢（三）試劑的合理使用及儀器的規(guī)范使用（四）性能評價與質(zhì)量管理2023/1/11常見誤差因素分析白細胞計數(shù)的干擾因素

假性白細胞減少或增多紅細胞計數(shù)干擾因素

假性紅細胞減少或增多血小板計數(shù)干擾因素

假性血小板減少或增多2023/1/11（一）排除病理性誤差干擾因素白細胞計數(shù)的干擾因素白細胞聚集所致假性白細胞減少紅細胞溶血不良所致假性白細胞增多有核紅細胞所致假性白細胞增多2023/1/11紅細胞溶血不良---假性白細胞增多處理方法

形態(tài)學鏡檢2023/1/11典型的紅細胞溶血不良干擾直方圖在WBC直方圖上，WBC低鑒別線與直方圖曲線交點的位置異常高。同時有WL報警信號，“*”表示W(wǎng)BC數(shù)據(jù)不可信。這種現(xiàn)象在肝疾病患者血中多見。白細胞直方圖2023/1/11紅細胞溶血不良的病因和發(fā)病機制發(fā)病機制脂類代謝異常紅細胞膜表面與外周血脂類結(jié)合形成脂質(zhì)顆粒保護膜紅細胞膜表面結(jié)構(gòu)異常正常濃度的溶血素無法破壞紅細胞膜表面病因肝功能低下(肝硬化、肝癌晚期、膽道堵塞)高脂血癥高膽固醇制劑輸液治療過程中異常血紅蛋白癥(Hgb-S癥、Hgb-C癥)2023/1/11有核紅細胞的干擾---假性白細胞增多WBC：56.1X109/L2023/1/11如何排除NRBC對白細胞檢測的干擾形態(tài)學鏡檢高端儀器2023/1/11有核紅細胞增多的原因血液學疾?。杭毙运杓毎籽〖毙约t白血病急性淋巴細胞白血病慢性粒細胞白血病慢性淋巴細胞白血病多發(fā)性骨髓瘤骨髓增生異常綜合征惡性淋巴瘤骨髓轉(zhuǎn)移癌骨髓纖維化原發(fā)性血小板增多癥血液非腫瘤性疾病

缺鐵性貧血巨幼細胞貧血溶血性貧血增生性貧血再生障礙性貧血原發(fā)性血小板減少性紫癜感染性疾病原發(fā)性脾亢

2023/1/11紅細胞計數(shù)的干擾因素紅細胞冷凝集所致假性紅細胞減少巨大血小板所致假性紅細胞增多2023/1/11紅細胞凝集---假性紅細胞減少RBCHGBHCTMCVMCHMCHCRDW2.231440.249111.764.65780.254×1012/Lg/LfLpgg/L處理方法：1.加溫至37OC2.離心洗滌紅細胞（用等量稀釋液置換血漿或上清液）2023/1/11紅細胞冷凝集---假性紅細胞減少冷凝集素綜合癥在31℃以下自身紅細胞抗原發(fā)生可逆性凝集病因白血病、惡性淋巴瘤或全身性紅斑狼瘡肺炎支原體屬感染傳染性單核細胞增多癥血吸蟲病、絲蟲病、瘧疾肝硬化、非典型性肺炎2023/1/11血小板計數(shù)的干擾因素假性血小板減少樣品采集環(huán)節(jié)中的血小板聚集EDTA誘導的血小板聚集血小板衛(wèi)星現(xiàn)象巨大血小板假性血小板增多紅、白細胞碎片小紅細胞2023/1/11PLT:51×109/LEDTA誘導血小板聚集---假性血小板減少2023/1/11EDTA誘導血小板聚集---假性血小板減少發(fā)病率0.07%~0.11%誘因健康人自身免疫病、慢性炎癥、病毒或細菌感染腫瘤潛在的誤診風險高預防性血小板輸血的醫(yī)學決定水平血小板計數(shù)為20×109/L誤診為ITP或TTP2023/1/11EDTA誘導血小板聚集的發(fā)病機制血小板糖膜改變，血小板膜內(nèi)隱匿性抗原暴露血漿中自身抗體與隱匿性抗原形成復合物激活細胞膜中的磷酯酶血小板膜水解并釋放血小板活性物質(zhì)AA、ADP、5-TH、膠原、凝血酶原等血小板纖維蛋白原受體被活化血小板與纖維蛋白原受體結(jié)合后聚集成團出現(xiàn)血小板假性減少2023/1/11EDTA誘導血小板聚集的處理方法光學顯微鏡直接鏡檢采用血小板稀釋液進行預稀釋瑞氏染色更換抗凝劑重新抽血檢測枸櫞酸鈉肝素鈉巨大血小板---假性血小板減少PLT-I32[10^9/L]PLT-O54[10^9/L]2023/1/11巨大血小板的處理辦法五分類血細胞分析儀人工計數(shù)形態(tài)學確認同血小板聚集2023/1/11紅、白細胞碎片的干擾---假性血小板增多PLT-I16[10^9/L]PLT-O6[10^9/L]2023/1/11紅、白細胞碎片產(chǎn)生的原因紅細胞碎片彌散性血管內(nèi)凝血微血管病性溶血性貧血心源性溶血性貧血其它化學中毒、腎功能衰竭血栓性血小板減少性紫癜和化療白細胞碎片AML、淋巴瘤、嚴重感染、化療2023/1/11如何制定形態(tài)學復檢規(guī)則（一）以國際實驗血液學發(fā)表的“41條”規(guī)則為依據(jù)LabHematol2005,11:83中華檢驗醫(yī)學雜志2008,31:752復檢的絕對條件報警提示未成熟細胞原始細胞有核紅細胞儀器分群結(jié)果異常確診為或疑似血液惡性腫瘤者復檢的可調(diào)節(jié)條件血細胞計數(shù)超出參考范圍（二）血細胞形態(tài)學復檢2023/1/11如何制定形態(tài)學復檢規(guī)則（二）涂片鏡檢陽性判斷標準國際血液學復檢專家組LabHematol2005,11:83中國血液學復檢專家組中華檢驗醫(yī)學雜志2008,31:752涂片鏡檢要求由2名人員進行雙盲檢測計數(shù)結(jié)果均值形態(tài)結(jié)果任何1名人員發(fā)現(xiàn)陽性即判斷為鏡檢陽性統(tǒng)計學分析2023/1/11如何制定形態(tài)學復檢規(guī)則（三）陽性率假陽性率陰性率假陰性率符合率復檢率14.23%23.71%59.61%2.45%73.84%37.94%①首先參考“41條”規(guī)則②降低復檢率從降低假陽性率入手不能單純追求復檢率降低③控制漏診率在臨床可接受水平（<5%）防止降低假陽性率導致的假陰性率即漏診率升高④不能改變復檢的絕對條件2023/1/11病例1——單核細胞增多男，23歲感冒9天WBCNEUTLYMPHMONOEOBASO&6.62【109/L】&3.82【109/L】57.7【%】&1.25【109/L】18.9-【%】1.24+【109/L】18.7+【%】0.02*【109/L】0.3*【%】0.06*【109/L】0.9*【%】分析儀測定結(jié)果：報警提示：MonocytosisImmatureGran?LeftShift?復檢規(guī)則：24.懷疑性報警:不成熟粒細胞？34.左移報警？DIFF散點圖上，單核細胞區(qū)域內(nèi)可出現(xiàn)許多綠點（紅色箭頭示），提示單核細胞增多。散點分布在中性粒細胞區(qū)域上方（綠色箭頭示），提示出現(xiàn)幼稚粒細胞。IMI散點圖上的紅點也證實這一結(jié)果。2023/1/11StabSegLymphMonoEoBasoMyeloMetaAty-Lym5.5【%】48.5【%】23.5【%】17.5【%】0.0【%】0.0【%】3.5【%】0.5【%】1.0【%】涂片鏡檢分類結(jié)果：單核細胞2023/1/11核左移中幼粒2023/1/11病例2——嗜酸性粒細胞增多女，20歲蕁麻疹WBCPLTPDWMPVP-LCRPCTNEUTLYMPHMONOEOBASO28.67*【109/L】249*【109/L】10.8*【fl】10.0*【fl】24.5*【%】0.25*【%】2.19*【109/L】2.58*【109/L】0.39+【109/L】23.44*【109/L】0.07*【109/L】分析儀測定結(jié)果：報警提示：EosinophiliaLeukocytosisPLTClumps?DIFF散點圖上，嗜酸性粒細胞區(qū)域內(nèi)可出現(xiàn)許多紅點點（紅色箭頭示），提示嗜酸性粒細胞增多。復檢規(guī)則：20.嗜酸粒細胞絕對計數(shù)：>2.0X109/L26.WBC結(jié)果不可信報警：*30.PLT聚集報警？2023/1/11StabSegLymphMonoEoBasoPLTClumps(+)0.0【%】8.5【%】11.5【%】1.0【%】78.5【%】0.5【%】涂片鏡檢分類結(jié)果：嗜酸性粒細胞血小板凝集2023/1/11嗜酸性桿狀核粒細胞嗜酸性晚幼粒細胞2023/1/11病例3——ALL（L1）女，15歲患者自覺食欲減退，8月初發(fā)熱，約2天后退熱。8月15日就診入院。急性淋巴細胞白血?。↙1）WBCNEUTLYMPHMONOEOBASO&194.4@【109/L】----【109/L】----【%】----【109/L】----【%】----【109/L】----【%】0.20*【109/L】0.1*【%】----【109/L】----【%】分析儀測定結(jié)果：DIFF散點圖上，散點分布在淋巴細胞和單核細胞區(qū)域形成單個集落（紅色箭頭示），提示出現(xiàn)原始細胞。散點分布于側(cè)向熒光強度高的區(qū)域，提示出現(xiàn)異型淋巴細胞（綠色箭頭示）。在IMI散點圖上，可見紅點，提示出現(xiàn)原始細胞。在NRBC散點圖上，可見粉紅點(藍色箭頭示），為NRBC。2023/1/11病例3——ALL（L1）報警提示：WBCAbn

ScattergramLeukocytosisImmatureGran?LeftShit?Blasts?AnemiaStabSegLymphMonoEoBasoBlastAty-Ly0.5【%】0.5【%】4.5【%】0.5【%】0.0【%】0.0【%】93.0【%】1.0【%】涂片鏡檢分類結(jié)果：原始淋巴細胞第一型（L1）原始和幼稚淋巴細胞以小細胞（直徑＜12um為主，染色質(zhì)較粗，結(jié)構(gòu)較一致，核仁少而小，不清楚，胞漿少，輕或中度嗜堿性。2023/1/11復檢規(guī)則：2.WBC超出界值16.無白細胞分類計數(shù)結(jié)果24.懷疑性報警:不成熟粒細胞？34.左移報警？37.原始細胞報警？異型淋巴細胞2023/1/11過氧化物酶染色（陰性）過氧化物酶染色（粒細胞陽性）

（三）試劑的合理使用及儀器的規(guī)范使用試劑的合理使用（直接影響脈沖大?。┍M可能使用配套試劑儀器的規(guī)范使用避免堵孔2023/1/11采血時混入纖維絲采血不暢有小凝塊蛋白沉淀未及時清洗標本未加蓋落入灰塵水分蒸發(fā)形成結(jié)晶堵孔原因不用棉花球擦拭確保采血順利及時清洗儀器注意工作環(huán)境/樣本加蓋去除結(jié)晶預防方法避免堵孔（四）血細胞分析儀性能評價及質(zhì)量管理質(zhì)量管理分析前質(zhì)量管理分析中質(zhì)量管理分析后質(zhì)量管理2023/1/11分析前的質(zhì)量管理做好操作人員上崗前的培訓。按照儀器說明書的要求，選擇合適的儀器安裝環(huán)境。做好儀器的鑒定和校正。

-----血細胞分析儀性能驗證做好儀器的管理工作。標本的采集和運送。注意受檢者生理狀態(tài)對實驗結(jié)果的影響。2023/1/11血細胞分析儀性能驗證內(nèi)容精密度攜帶污染率線性范圍可比性白細胞分類的鑒定性能評價

血細胞分析儀安裝后或每次維修后，必須按照ICSH公布的血細胞分析儀評價指標對分析儀的技術(shù)性能進行測試與評價，這對充分發(fā)揮血細胞分析儀的正常作用、為臨床提供準確檢驗信息起重要作用。2023/1/11精密度實驗方案根據(jù)NCCLSEP15-A文件取低、中、高三個水平的新鮮血，連續(xù)重復測定11次，棄掉第1次結(jié)果采用后面10個結(jié)果計算CV，SD要求CV符合衛(wèi)生部臨檢中心規(guī)定參數(shù)WBCRBCHGBHCTMCVPLT判定標準CV≤3.00%1.50%1.50%1.50%1.50%4.00%2023/1/11精密度實例分析參數(shù)WBCRBCHGBHCTMCVPLT單位ⅹ109/L1012/Lg/LL/LfLⅹ109/L13.803.118631.267.813523.823.088631.367.312733.773.118630.867.212943.873.088731.166.912953.943.078630.966.713063.843.108731.066.713073.693.138731.066.513383.943.138830.966.512993.913.158831.066.2130103.853.168831.266.1135MEAN3.843.1186.931.066.8130.7SD0.0780.0300.8760.1580.5242.710CV2.04%0.98%1.01%0.51%0.78%2.07%標準CV≤3.0%1.5%1.5%1.5%1.5%4.0%結(jié)論合格合格合格合格合格合格不合格考慮血量是否充足、混勻；標本是否新鮮合格；試劑和儀器是否穩(wěn)定攜帶污染率實驗方案取高濃度血液樣本，混合均勻后連續(xù)測定三次，測定值分別為H1、H2、H3再取低濃度血液樣本，連續(xù)測定3次，測定值分別為L1、L2、L3按公式計算攜帶污染率攜帶污染率=（L1－L3）/（H3－L3）×100%要求CV符合衛(wèi)生部臨檢中心規(guī)定參數(shù)WBCRBCHGBHCTPLT要求1.0%1.0%1.0%1.0%1.0%2023/1/11攜帶污染率實例分析試驗材料新鮮血

參數(shù)WBCRBCHGBHCTPLT單位ⅹ109/Lⅹ1012/Lg/LL/Lⅹ109/LH116.265.3517449.6499H216.575.3117449.3506H315.975.3617449.7503L12.832.295717.558L22.962.315717.762L32.922.295717.562攜帶污染率-0.67%0.00%0.00%0.00%-0.91%要求1.0%1.0%1.0%1.0%1.0%結(jié)論合格合格合格合格合格不合格在排除上述影響因素后，考慮儀器本身問題可能性大2023/1/11線性范圍實驗方案選取一份接近預期上限的高值全血樣本（H）分別按100%、80%、60%、40%、20%的比例進行稀釋，每個稀釋度重復測定3次，計算均值將實測值與理論值作比較（偏離應小于10%），計算y=ax+b，驗證線性范圍要求a值在1±0.05范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)r≥0.9752023/1/11線性范圍實例分析稀釋度第一次第二次第三