β2整合素ELISA檢測(cè)試劑盒,人(integrin β2CD11+CD18)ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

β2ELISA檢測(cè)試劑盒,人（integrinβ2/CD11+CD18）ELISA試劑盒使用說(shuō)明書(shū)上海古朵生物供應(yīng)本試劑僅供研究使用 標(biāo)本：血清或血漿Ourcompanyspecializesintheproductionofthesupplyofkitproductsare:doubleantisandwichELISAdetection,ELISAkit,HumanELISAkit,ELISAkit,domesticimportreagent,reagentkitfortestingELISAkit,ELISATestkit,ratELISAkit,mouseELISAkit,apoptosisrelatedfactorkit,white使用目的：2β2/CD11+CD18）含量。ELISAkit,ELISAkitVIP使用目的：2β2/CD11+CD18）含量。試驗(yàn)原理：integrinβ2/CD11+CD18試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)integrinβ2/CD11+CD18濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。先將integrinβ2/CD11+CD18和生物素標(biāo)記的抗體同時(shí)溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過(guò)的。再經(jīng)過(guò)溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物、B，和酶結(jié)合物同時(shí)作用。產(chǎn)生顏色。顏色的integrinβ2/CD11+CD18的濃度呈比例關(guān)系。β2整合素試劑盒,elisa試劑盒說(shuō)明書(shū),ELISA試劑盒,ELISA檢測(cè)試劑盒,elisa試劑盒說(shuō)明書(shū)試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96/48份酶標(biāo)板塑料膜板蓋96孔配置1塊板（96T）1塊48孔配置半塊板（48T）半塊配制即用型即用型標(biāo)準(zhǔn)品：80ng/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀稀空白對(duì)照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素標(biāo)記的抗integrinβ2/CD11+CD18抗體1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物AB。一旦接觸到這些液體，請(qǐng)盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物BOD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法110分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿－－－－-EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液－－-1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿－－－－-將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂37充分解凍?！睛?整合素β試劑盒】試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋?xiě)?yīng)在實(shí)驗(yàn)時(shí)準(zhǔn)備，不能儲(chǔ)存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：80ng/ml（6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。40ng/ml（5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液20ng/ml（4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul5100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液10ng/ml（3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul4100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液5.0ng/ml（2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul3100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.5ng/ml（1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品）100ul2100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0ng/ml（空白對(duì)照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時(shí)加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：150ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，1小時(shí)。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次數(shù)增加一次。80ul-HRP30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿(mǎn)洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次數(shù)增加一次。每孔加入底物AB50ul10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。450nmOD值。標(biāo)準(zhǔn)品濃度標(biāo)準(zhǔn)品濃度A8080樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品B4040樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品C2020樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品D1010樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品E5.05.0樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品F2.52.5樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品G00樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品H樣品樣品樣樣樣樣樣樣樣樣樣樣品品品品品品品品品品局限6號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線(xiàn)性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)無(wú)法得到精確的結(jié)果。β2整合素（integrinβ2/CD11+CD18）ELISA試劑盒性能靈敏度：最小的檢測(cè)濃度小于1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線(xiàn)性。樣品線(xiàn)性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為。特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的integrinβ2/CD11+CD18標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線(xiàn)，樣品的integrinβ2/CD11+CD18含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測(cè)值范圍：0-80ng/ml4、敏感度：0.1ng/mlELISAELISA試劑盒、ELISAelisaELISAELISA盒、白介素ELISAVIPELISAkitTheperformanceofkit:1sensitivity:minimumdetectionconcentrationislessthan1standard.Liintegrin 2/CD11+CD18arityofdilution.Sampleliintegrinβ2/CD11+CD18arregressionandtheexpectedconcentrationcorrelationcoefficientRvalueis0.990.2:nospecificreactionwithothercytokiintegrinβ2/CD11+CD18s.3repeaintegrinβ2/CD11+CD18ility:plate,platebetweenthecoefficientsofvariationwerelessthan10%.HumantypeIIIprocollagenaminoterminalpeptideELISAkitsteps:beforeuse,allreagentsandmixing.Donotallowliquidtoproducealargenumberofbubbles,soastoavoidaddingalargenumberofbubbles,resultingintheadditionoftheerror.accordingtodetermiintegrinβ2/CD11+CD18thenumberofsamplenumberplusstandardstripnumber.Eachstandardandblankholeisrecommendedtodothehole.Eachsamplecanbemadeaccordingtoitsownquantity,andcanbeusedasaholeinthehole.dilutedafterstandard50ulinreactionhole,addedtothesample50ULinreactionholetobemeasured.Immediatelyjoiintegrin β2/CD11+CD18dthe50ULantibodybiotin.Coverthemembraintegrinβ2/CD11+CD18plate,gentlyoscillatingmixing,37degreesCelsiusfor45minutes.leftholeliquid,eachholefilledwithwashingliquid,oscillating30secondsoffthewashingliquid,patdrywithabsorbentpaper.Repeatthisoperation4times.Ifthewashingmachiintegrinβ2/CD11+CD18withwashing,washingtimesincreasedonce.perholeaddingchainaffinityenzyme-HRP100ul,gentlyoscillatingmixing,37degrees30minutesincubation.leftholeliquid,eachholefilledwithwashingliquid,oscillating30secondsoffthewashingliquid,patdrywithabsorbentpaper.Repeatthisoperation4times.Ifthewashingmachiintegrinβ2/CD11+CD18withwashing,washingtimesincreasedonce.perholeaddingsubstrateA,B50ul,gentlyoscillatingmixing,37degrees5minutesincubation.Avoidlight.removeELISAplate,quicklyadd50ulterminatedliquid,addingthestopsolutionimmediatelyafterthedeterminationresults.oddeterminationofeachholeatthewavelengthof450nm.Theresultofjudgmentandanalysis:1,instrumentvalue:YuBo450nmELISAodreadtheholeontheinstrument2,totheODvalueasaverticalcoordinate(y),correspondingotstandardconcentrationsasahorizontalcoordinate(x),dohavecorrespondingcurve,sampleotcontentcanbeaccordingtotheODvaluebystandardcurveconversionoutcorrespondingconcentration,multipliedbythedilutionmultiple;orwiththestandardconcentrationandtheODvaluecalculatedthe