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《免疫學(xué)實驗》預(yù)習(xí)報告實驗名稱:《乙肝表面抗體的檢測》姓名: 劉海濤 學(xué)號: 2012013337實驗原理:在微孔板上預(yù)包被純化的乙肝表面抗原配以酶標(biāo)記抗體及

組別: 2TMB等其他試劑采用夾心法原理檢測人血清或其他動物血清的乙肝表面抗體。實驗方法與步驟:1樣品采集;取靜脈血 3-4ml于干凈容器中,分離出血清或血漿標(biāo)本,如果不及時處理,就將其置于冰箱中。,試劑準(zhǔn)備;乙肝病毒表面抗體診斷試劑盒。3,平衡:將試劑盒各組分從盒中取出,平衡至室溫(18~25℃),微孔板板開封后,余者即時以自封袋封存。5.2配液:濃縮洗滌液配置前充分搖勻(如有晶體應(yīng)充分溶解),濃縮洗滌液和蒸餾水去離子水按1:19稀釋后使用。5.3編號:取所需數(shù)量微孔條固定于支架,按序編號。4加樣:分別在相應(yīng)孔中加入50ul陰、陽性對照血清或待測樣本。5加酶:分別在每孔中加入酶標(biāo)記抗體50ul;輕拍混勻。5.6溫育:置37℃溫育25min。6洗滌:用洗滌液充分洗滌5次、洗滌后扣干(每次應(yīng)保持30~60s的浸泡時間)。7顯色:每孔加入底物A、B各50ul,輕拍混勻,37℃暗置15min。8終止:每孔加入終止液50ul,混勻。9測定:用酶標(biāo)儀單波長450nm或雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(用單波長測定時,需用空白對照調(diào)零 ,30min鐘內(nèi)完成測定),并記錄結(jié)果。 6結(jié)果判定與分析臨界值(C.O.)的計算:臨界值 =陰性對照孔 OD均值*2.1;陰性對照 OD均值小于 0.05時以0.05計算。 結(jié)果判定:樣本 OD值S/C.O.>=1者為HbsAb陽性 樣本OD值S/C.O.<1者為HbsAb陰性 陰性對照均值>0.1或陽性對照均值 <0.4時,實驗無效,應(yīng)重新試驗。注意事項:1每板設(shè)陰、陽性對照血清各兩孔, 設(shè)空白對照時,不加樣品及酶標(biāo)記抗原, 其余各步相同。2洗滌時各孔均須加滿,防止孔內(nèi)有游離酶未能洗凈。 12.3加試劑前應(yīng)將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次,是液體混勻。3所用樣品、廢液和廢棄物都應(yīng)按傳染源處理。12.5所有樣本、試劑和各種廢棄物應(yīng)按傳染物處理,嚴(yán)格防止交叉感染,嚴(yán)格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。對于含有傳染病和懷疑含有傳染源的物質(zhì),應(yīng)有合適的生物安全保證制度。樣本顯色深淺與樣品中抗體的含量沒有一定的正相關(guān)。不同品名、不同批號的試劑不可混用,以免產(chǎn)生錯誤結(jié)果。遇到失意傷心事,多想有一個懂你的人來指點迷津,因他懂你,會以我心,換你心,站在你的位置上思慮,為你排優(yōu)解難。一個人,來這世間,必須懂得一些人情事理,才能不斷成長。就像躬耕于隴畝的農(nóng)人,必須懂得土地與種子的情懷,才能有所收獲。一個女子,一生所求,莫過于找到一個懂她的人,執(zhí)手白頭,相伴終老。即使蘆花暖鞋,菊花枕頭,也覺溫暖;即使粗食布衣,陋室簡靜,也覺舒適,一句 “懂你”,叫人無怨無悔,愿以自己的一生來交付。懂得是彼此的欣賞,是靈魂的輕喚,是惺惺相惜,是愛,是暖,是彼此的融化;是走一段很遠的路,驀然回首卻發(fā)現(xiàn),我依然在你的視線里;是回眸相視一笑的無言;是一條偏僻幽靜的小路,不顯山,不露水,路邊長滿你喜愛的花草,靜默無語卻馨香盈懷,而路的盡頭,便是通達你心靈的小屋 ??瑟瑟嚴(yán)冬,窗外雪飄,絮絮自語說了這多,你可懂我了嗎?若你知曉,無需說話,只報一聲心靈的輕嘆,那,便是我的花開春暖。你相不相信,人生有一

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