實驗十七蠕蟲學(xué)剖檢一

實驗十七蠕蟲學(xué)剖檢(一)在畜禽疫病防治工作中,對疾病的準(zhǔn)確診斷是非常重要的。尤其對很多外表不顯特異癥狀的寄生蟲病來說，更有它特殊的意義。通過剖檢可以發(fā)現(xiàn)動物一切器官和組織內(nèi)所有的寄生蟲（包括雄蟲和不成熟的蟲體）。有些雌蟲，它們排出的卵或幼蟲并不達消化道。因此，糞便檢查無法證明其存在與否。單純使用糞便檢查法也不能準(zhǔn)確的查明畜禽體內(nèi)究竟有多少種寄生蟲及它們的數(shù)量。一、內(nèi)容1.豬體的蠕蟲學(xué)剖檢及蟲體的采集2.羊體的蠕蟲學(xué)剖檢及蟲體的采集3.寄生蟲標(biāo)本的保存4.蠕蟲學(xué)剖檢記錄和標(biāo)簽的書寫二、參考資料1.豬體的蠕蟲學(xué)剖檢和蟲體采集1)體外寄生蟲的采集豬虱寄生蟲在豬皮膚上,易于采集,將采集的豬虱放在空瓶內(nèi),饑餓1-2天,然后加入保存液保存。豬虱卵的采集應(yīng)連毛撥下,放在空瓶內(nèi),密閉保存。疥螨的采集,用小刀刮皮膚患部的干硬痂皮,再刮取病部與健康皮膚交界處的皮屑,至微出血為止,將此皮屑放在空瓶內(nèi)或保存液(甘油酒精液)內(nèi)保存。蠕形螨的采集:由于這種寄生蟲在毛囊內(nèi),常在皮下形成米粒大小的結(jié)節(jié),可將結(jié)節(jié)切開取其內(nèi)容物涂片鏡檢,或者連皮膚切下,放在10%福爾馬林或70%酒精內(nèi)固定保存。有時,在皮下還可見到一種灰白色的裂頭蚴小囊。用小刀輕輕切開,將蟲體取出保存。2)體內(nèi)各部位寄生蟲采集體表觀察后,剝下皮膚，觀察皮下組織,然后剖開胸、腹腔,將各器官依次取出并檢查之。采臟器時可以將肺、氣管和心臟一起取出,將食道和直腸末端用繩扎好,然后將消化道一起取出,再取出肝、腎等。肺臟:首先觀察外部的色澤和形狀,在肺臟邊緣有無由于肺線蟲寄生而造成的白色氣腫區(qū)。有無囊包和硬結(jié),如有細頸囊尾蚴,可切開包膜取出,但外膜較厚的棘球蚴包囊切勿隨意切開,應(yīng)將包囊完整地剝離下來,不要弄破,以防工作人員感染棘球砂。如有紅的肺吸蟲包囊,用刀小心切開,取出蟲體,放在生理鹽水內(nèi)洗凈后保存。肺臟內(nèi)部檢查,應(yīng)從喉頭起用剪刀把氣管、支氣管及細支氣管剪開觀察有無白色線狀的肺線蟲,將發(fā)現(xiàn)的蟲體用針挑出,或用眼科鑷子取下,放入0.85-1%鹽水內(nèi)洗凈保存,但不宜在鹽水內(nèi)放置過久,以防蟲體表皮破裂。將檢查過的肺臟剪成小塊,放在水內(nèi)浸泡,可使遺漏的肺線蟲鉆出來.心臟:先用肉眼觀察外表有無豬囊蟲及寄生在冠溝、縱溝處的淋巴管內(nèi)的豬漿膜絲蟲,這種絲蟲,可在放大鏡下,用解剖針挑破淋巴管,取出保存。將心肌切開檢查有無囊蟲,并將心肌剪成許多麥粒大小的肉塊,夾在兩玻片間鏡檢,檢查有無旋毛蟲及住肉孢子蟲,若有可連肌肉保存。四肢肌肉、背最長肌、肋間肌、咬肌及舌肌:切開檢查有無豬囊蟲、裂頭蚴及旋毛蟲幼蟲,若有可連肌肉保存,或者把蟲體分離保存。橫膈肌:撕去肌膜,在橫膈肌腳部,剪取24塊麥粒大小的肌肉,壓片鏡檢有無旋毛幼蟲及住肉孢子蟲。肝臟:先把膽囊取下,放在小杯內(nèi),剪開觀察有無寄生蟲.再檢查肝表面有無細頸囊尾蚴及棘球蚴,若有,采集方法同肺臟。用剪刀剪開膽管,檢查有無肝片吸蟲、華枝睪吸蟲、矛形雙腔吸蟲、截形微口吸蟲、蛔蟲幼蟲、腎蟲幼蟲,再剪開肝門靜脈,檢查有無白色纖細的血吸蟲,然后把肝臟切成2-3cm厚片狀,放在盆內(nèi)加水浸泡并壓擠肝塊,使殘余的蟲體鉆出沉在水底,撈去肝塊,倒去上部液體,保留沉渣,如此加水反復(fù)洗滌數(shù)次,再在底部沉渣中尋找寄生蟲,放在1%鹽水內(nèi)洗凈后保存。脾臟:寄生蟲少見,偶爾見有棘球蚴,在血吸蟲病流行區(qū),還可以在脾靜脈內(nèi)找到日本血吸蟲。網(wǎng)膜:網(wǎng)膜上常見細頸囊尾蚴寄生。腎臟、輸尿管、膀胱以及周圍脂肪組織:主要檢查有無豬腎蟲、裂頭蚴、細頸囊尾蚴及膨結(jié)線蟲寄生,若有寄生,應(yīng)小心將包囊切開,取出蟲體,用1%鹽水洗凈后保存。胰臟:豬胰臟內(nèi)寄生蟲很少.個別的在胰管內(nèi)找到胰闊盤吸蟲。檢查方法同肝臟。食道:沿長軸剪開,檢查粘膜上有無白色彎曲細長的美麗筒線蟲,若有寄生,用針挑破粘膜把蟲體取出,放在1%鹽水內(nèi)洗凈后保存。另外,再檢查食道肌肉內(nèi)有無旋毛蟲及住肉孢子蟲,進行壓片鏡檢。胃:沿大彎剪開,將胃內(nèi)容物倒在盆內(nèi),用水洗沉淀法反復(fù)洗滌,把蟲體檢出放在1%鹽水內(nèi)洗凈后保存。把剪開的胃平放在搪瓷盤內(nèi),粘膜向上,在胃底部,幽門部及賁門部觀察有無顎口線蟲、螺咽胃蟲、環(huán)咽線蟲、西蒙線蟲以及紅色豬圓線蟲,如有,可用眼科鑷子取下,放在1%鹽水內(nèi)洗凈后保存。小腸:沿腸系膜對側(cè)長軸剪開腸壁,先從十二指腸開始,邊剪開邊檢查,并把腸內(nèi)容物接到搪瓷盤內(nèi),如有寄生蟲,用鑷子夾到1%鹽水內(nèi),在小腸內(nèi)常見的寄生蟲有:蛔蟲、巨吻棘頭蟲、絳蟲、姜片吸蟲、球首線蟲等。將收集到的蟲體用1%鹽水洗凈后保存,寄生在十二指腸及空腸的類圓線蟲很少,用肉眼不易檢查,可用小刀刮取上述部位的腸粘膜,夾在兩載玻片間用放大鏡或低倍顯微鏡檢查,若發(fā)現(xiàn)蟲體時用解剖針分離,放在1%鹽水內(nèi)洗凈后固定。腸內(nèi)容物可反復(fù)水洗沉淀,采集沉渣中的蟲體保存。大腸:檢查方法同小腸。沿腸系膜對側(cè)剪開盲腸、結(jié)腸及直腸,邊剪邊檢查。盲腸內(nèi)寄生的有豬毛首線蟲(其纖細的頭部鉆透腸粘膜內(nèi)),寄生在結(jié)腸內(nèi)的有食道口線蟲,發(fā)現(xiàn)這些蟲體,用鑷子取下,放入1%鹽水中洗凈后保存。此外,還應(yīng)注意檢查腸壁上有無粟粒大的由食道口線蟲形成的結(jié)節(jié).直腸內(nèi)的寄生蟲很少,但在鞭蟲嚴重感染時,也可在直腸內(nèi)寄生。血吸蟲病流行區(qū),應(yīng)當(dāng)注意直腸壁上有無日本血吸蟲卵結(jié)節(jié),可刮取粘膜壓片檢查,大腸內(nèi)容物的處理同胃及小腸。腦:豬感染囊蟲嚴重時,可在腦實質(zhì)內(nèi)發(fā)現(xiàn)豬囊蟲。2.羊體的蠕蟲學(xué)剖檢和蟲體采集1)體外寄生蟲的采集在羊的體表注意檢查有無毛虱、顎虱、虱蠅、蠕形蚤等。將采集到的蟲體放于瓶內(nèi),加入保存液保存,虱卵應(yīng)連毛取下放于瓶內(nèi)或保存液內(nèi)保存。疥螨、足螨及蠕形螨的檢查方法與豬體外寄生蟲采集方法相同。2)體內(nèi)寄生蟲的采集體表觀察后,放血剝皮,注意觀察皮下是否有寄生蟲,然后剖開腹腔、胸腔,取出臟器,采臟器時可將肺、氣管和心臟一起取出,而后將小腸和胃相連的地方切斷用繩扎好,將胃和食道一起取出,再將小腸大腸一起取出,最后將肝臟、膀胱、腎臟取出,并逐一進行檢查。①首先打開鼻腔檢查是否有羊狂蠅蚴,再打開頭骨檢查腦內(nèi)是否有腦包蟲(多頭蚴),然后檢查食道的正反面,是否有美麗筒線蟲及住肉孢子蟲,除食道外,還應(yīng)對橫膈膜、心臟等作詳細檢查,如果發(fā)現(xiàn)有狂蠅蚴或腦包蟲時,可用解剖針挑出放在巴氏液中保存,住肉孢子蟲可連同被寄生的組織一起剪下,保存于巴氏液中。②肺臟:首先剪開支氣管及大支氣管,檢查是否有大型肺線蟲(網(wǎng)尾線蟲)，然后檢查小支氣管或細致地撕開肺的邊緣部分看是否有小型肺線蟲(原圓線蟲、繆勒線蟲等)。將采集檢查吸附在胃粘膜到的蟲體放于保存液中,肺臟表面還應(yīng)注意觀察是否有細粒棘球蚴的寄生。如有則應(yīng)連同肺組織一起剪下放于保存液中。③肝臟:先檢查是否有細粒棘球蚴,然后去掉膽囊,檢查內(nèi)部,并切開膽管,檢查有否肝片吸蟲或矛形雙腔吸蟲的寄生,然后將肝撕成小塊用清水反復(fù)沖洗至上部液體清亮為止,倒去上清液,將沉渣倒入盤內(nèi)檢查有無蟲體。④胰臟和檢查肝臟的方法相同,檢查有否胰闊盤吸蟲。⑤腸系膜：檢查腸系膜血管是否有血吸蟲,并將腸系膜淋巴結(jié)切開檢查有無舌形蟲的幼蟲,注意腸系膜上是否有細頸囊尾蚴的寄生,如有,可取下放于70%酒精或巴氏液中。⑥胃:將胃分離,首先切開第一胃(瘤胃)倒出內(nèi)容物,檢查吸附在胃粘膜上的前后盤吸蟲。然后將第四胃(皺胃)的內(nèi)容物倒入瓷盆內(nèi),將其翻過來用生理鹽水充分洗凈,再用生理鹽水反復(fù)沖洗,最后將沉渣倒入大培養(yǎng)皿內(nèi)檢查是否有捻轉(zhuǎn)血矛線蟲、奧斯特線蟲、馬歇爾線蟲以及古柏線蟲等,如發(fā)現(xiàn)蟲體,可用解剖針挑出放于保存液中。⑦小腸：檢查方法與豬小腸的檢查方法相同,在羊小腸內(nèi)可以發(fā)現(xiàn):羊斯克里亞賓吸蟲、莫尼斯絳蟲、無卵黃腺絳蟲、曲子宮絳蟲、仰口線蟲、類圓線蟲、毛細線蟲、古柏線蟲、細頸線蟲、奧斯特線蟲、毛圓線蟲等。當(dāng)發(fā)現(xiàn)有絳蟲時,應(yīng)輕輕的用剪刀尖緊貼腸壁,避免剪斷蟲體。其次應(yīng)留心前端細小的頭節(jié)不可拉斷或失去,要小心的刮下完整頭節(jié),如果有頭節(jié)牢固吸著宿主腸壁則須連同腸壁組織一起取下,一般不超過5分鐘。(時間過久水分滲入蟲體內(nèi),就破壞了內(nèi)部組織器官,影響鑒定)。洗凈的蟲體放于70%酒精或巴氏液固定保存。⑧大腸:將大腸的內(nèi)容物倒入桶中,翻轉(zhuǎn)大腸,用水沖凈,再將內(nèi)容物反復(fù)沖洗,然后將沉渣倒入玻璃盤內(nèi)檢查,在大腸中主要有毛首線蟲、夏伯特線蟲、食道口線蟲等寄生,另外還應(yīng)注意檢查腸壁上有無粟粒大至豌豆大的結(jié)節(jié)(食道口線蟲引起的結(jié)節(jié))。將采集到的蟲體組織浸于70%酒精或巴氏液中保存。此外,尚可對腎、心臟、膀胱等加以檢查。3.寄生蟲標(biāo)本的保存用蠕蟲學(xué)剖檢法采集的蟲體上,附有雜物時,可將蟲體裝入盛有生理鹽水的廣口瓶內(nèi),加以搖蕩將蟲體洗凈然后后放入固定液中。線蟲通常是用巴爾巴卡羅氏液(簡稱巴氏液)固定保存,配方如下:福爾馬林液30毫升,食鹽7.5克,水1000毫升,吸蟲、絳蟲和棘頭蟲則常用70%酒精固定保存。在固定保存吸蟲和絳蟲之前,應(yīng)先將蟲體浸入常水中(或冰箱中12小時)，使之死亡。這樣可使蟲體的組織松弛。為了使蟲體較快的松弛,還可以把它們放入薄荷腦溶液中。薄荷腦溶液的配制:薄荷腦(Menthol)24g,溶于95%酒精10ml中,使用時將此液一滴,加入100ml水中即可。需要制片時,可將蟲體平放于載玻片上,加蓋一張載玻片,并稍加壓力把蟲體壓平至適當(dāng)薄度后(依蟲體的大小薄厚而定),放在培養(yǎng)皿內(nèi),加入10%福爾馬林液固定之。一般固定數(shù)小時,較大型的蟲體要在一天以上。固定后,翻開蓋在上面的玻璃片把蟲體標(biāo)本慢慢取下,置于盛有5%福爾馬林的玻璃瓶中固定保存。絳蟲的幼蟲可固定保存于巴氏液中。在固定棘頭蟲時,如果他們的吻突縮在吻囊里,則須用手輕壓,使吻伸出以后,再用70%酒精固定,也可用巴氏液固定保存。小型線蟲一般比較彎曲,可把蟲體逐條放入40-50℃熱生理鹽水內(nèi),使蟲體伸直,便于鑒定,然后把蟲體移入固定液內(nèi)4.蠕蟲學(xué)剖檢記錄和標(biāo)簽的書寫進行蠕蟲剖檢時,為了避免產(chǎn)生混亂和錯誤,應(yīng)及時用鉛筆在白色硬紙制成的標(biāo)簽上注明動物的種、剖解編號和器官名稱,并將寫好的標(biāo)簽投入盛有該器官的器皿中。搜集到的蟲體,在已固定裝瓶,但還沒有經(jīng)過鑒定的時候,應(yīng)當(dāng)向瓶內(nèi)放入標(biāo)簽,標(biāo)簽正面說明動物的種、性別、年齡、解