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第一節(jié)生物成分的分離與測(cè)定技術(shù)第四章生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐第一節(jié)生物成分的分離與測(cè)定技術(shù)第四章生物化學(xué)與分子生蘇教版高中生物選修一41《生物成分的分離與測(cè)定技術(shù)》教學(xué)課件蘇教版高中生物選修一41《生物成分的分離與測(cè)定技術(shù)》教學(xué)課件1.掌握電泳法分離大分子的原理。(重點(diǎn))2.運(yùn)用常用的方法提取和分離蛋白質(zhì)。(重、難點(diǎn))3.了解芳香油的特點(diǎn),知道提取芳香油的原理及會(huì)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)裝置進(jìn)行提取。(重點(diǎn))1.掌握電泳法分離大分子的原理。(重點(diǎn))離心沉降法和薄膜透析法分離蛋白質(zhì)研磨超聲波完全破碎離心沉降法和薄膜透析法分離蛋白質(zhì)研磨超聲波完全破碎特性偏堿性偏酸性有機(jī)溶劑特性偏堿性偏酸性有機(jī)溶劑離心速度分子大小密度不同半透膜小分子化合物離心速度分子大小密度不同半透膜小分子化合物凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)分子的大小膠體溶液葡聚糖瓊脂糖多孔網(wǎng)狀凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)分子的大小膠體溶液葡聚糖瓊較短較快較長(zhǎng)緩慢較短較快較長(zhǎng)緩慢蒸餾蒸氣液體易揮發(fā)不易揮發(fā)沸點(diǎn)蒸餾蒸氣液體易揮發(fā)不易揮發(fā)沸點(diǎn)血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳支架前沿緩沖液濕潤(rùn)后氣泡光澤面巴比妥緩沖液朝下蓋玻片血清血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳支架前沿緩沖液濕潤(rùn)后氣泡光負(fù)極朝上正極繃直電泳槽蓋染色液漂洗液底色脫凈透明液透明膜圖譜負(fù)極朝上正極繃直電泳槽蓋染色液漂洗液底色脫凈提取橘皮中的芳香油

檸檬烯隨水蒸氣蒸餾切碎水酒精燈蒸餾錐形瓶分液漏斗提取橘皮中的芳香油檸檬烯隨水蒸氣蒸餾切碎水酒精燈植物原料較強(qiáng)蒸餾法機(jī)械壓力壓榨法蒸餾法壓榨法萃取植物原料較強(qiáng)蒸餾法機(jī)械壓力壓榨法蒸餾法壓榨法萃1.離心沉降法和薄膜透析法分離蛋白質(zhì)的原理是一樣的。(×)【提示】不一樣,前者是離心沉降,后者是根據(jù)半透膜的透性。2.凝膠色譜法是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的大小而對(duì)其進(jìn)行有效分離的方法。(√)1.離心沉降法和薄膜透析法分離蛋白質(zhì)的原理是一樣的。(×)3.醋酸纖維薄膜電泳是采用濾紙為支持物的電泳方法。(×)【提示】采用醋酸纖維薄膜為支持物。4.振蕩處理后,芳香油位于分液漏斗中液體的下部。(×)【提示】上部。3.醋酸纖維薄膜電泳是采用濾紙為支持物的電泳方法。(×)蛋白質(zhì)分子在凝膠中的運(yùn)動(dòng)情況分析①凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是什么?②蛋白質(zhì)分子的大小不同在凝膠中的運(yùn)動(dòng)情況有什么不同?蛋白質(zhì)分子在凝膠中的運(yùn)動(dòng)情況分析①凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小直徑大小大于凝膠顆粒空隙直徑小于凝膠顆??障吨睆竭\(yùn)動(dòng)方式垂直向下運(yùn)動(dòng)不規(guī)則的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)運(yùn)動(dòng)速度較快較慢運(yùn)動(dòng)路程較短較長(zhǎng)洗脫次序先從凝膠柱中洗脫出來(lái)后從凝膠柱中洗脫出來(lái)相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小直徑大小大于凝膠顆粒空隙直徑小于醋酸纖維薄膜電泳①醋酸纖維薄膜電泳的特點(diǎn)是什么?②如何消除電荷對(duì)蛋白質(zhì)遷移速度的影響?1.原理帶電粒子在電場(chǎng)中向與其帶電性相反的電極泳動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為電泳。2.過(guò)程配制試劑→架濾紙橋→浸泡薄膜→細(xì)心點(diǎn)樣→平懸薄膜→實(shí)施電泳→染色→漂洗→脫色。醋酸纖維薄膜電泳①醋酸纖維薄膜3.特點(diǎn)(1)電泳后區(qū)帶界限清晰。(2)通電時(shí)間較短(60~90min)。(3)醋酸纖維薄膜對(duì)各種蛋白質(zhì)都幾乎完全不吸附,因此無(wú)拖尾現(xiàn)象。(4)醋酸纖維薄膜對(duì)染料也沒(méi)有吸附,因此不結(jié)合的染料能完全洗掉,無(wú)樣品處幾乎完全無(wú)色。3.特點(diǎn)植物芳香油的提?、僦参锓枷阌偷奶崛》椒ㄖ饕心膸追N?②每種提取方法的原理、適用范圍有什么不同?比較方法優(yōu)點(diǎn)局限性實(shí)驗(yàn)原理適用范圍水蒸氣蒸餾法簡(jiǎn)單易行便于分離水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致某些原料焦糊和有效成分水解利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油植物芳香油的提?、僦参锓枷阌偷奶崛》椒ㄖ饕心膸追N?比較比較方法優(yōu)點(diǎn)局限性實(shí)驗(yàn)原理適用范圍壓榨法生產(chǎn)成本低,易保持原料原來(lái)的結(jié)構(gòu)和功能分離較為困難,出油率相對(duì)較低通過(guò)機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取萃取法產(chǎn)出率高,易分離使用有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響提取物的質(zhì)量使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機(jī)溶劑中比較優(yōu)點(diǎn)局限性實(shí)驗(yàn)原理適用范圍壓榨法生產(chǎn)成本低,易保持原料1.下列關(guān)于蛋白質(zhì)的提取的說(shuō)法中,不正確的是 (

)。A.一般用機(jī)械方法破碎生物組織B.破碎細(xì)胞常用的方法有研磨法、超聲波法和酶解法C.一般來(lái)說(shuō),酸性蛋白質(zhì)要用酸性溶液抽提D.抽提得到的蛋白質(zhì)粗提取物可用離心法去除固體雜質(zhì)1.下列關(guān)于蛋白質(zhì)的提取的說(shuō)法中,不正確的是 ()。解析蛋白質(zhì)呈溶液狀態(tài)釋放出來(lái)后,要根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性,選擇不同的溶液進(jìn)行抽提,如酸性蛋白質(zhì)可以用稀堿性溶液抽提。答案C解析蛋白質(zhì)呈溶液狀態(tài)釋放出來(lái)后,要根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性,選2.離心沉降法是純化蛋白質(zhì)的方法之一,在這一過(guò)程中蛋白質(zhì)會(huì)分層,這一現(xiàn)象與蛋白質(zhì)的何種性質(zhì)有關(guān) (

)。A.酸堿性

B.所帶電荷多少C.分子大小和密度

D.種類(lèi)解析

根據(jù)蛋白質(zhì)之間或蛋白質(zhì)與其他分子之間在分子大小和密度上的不同,采用離心沉降法,使其分層而分離。答案C2.離心沉降法是純化蛋白質(zhì)的方法之一,在這一過(guò)程中蛋白質(zhì)會(huì)分3.下列關(guān)于植物芳香油的描述,正確的是 (

)。A.易揮發(fā)、沸點(diǎn)高、易溶于水B.不揮發(fā)、沸點(diǎn)高、易溶于有機(jī)溶劑C.不揮發(fā)、沸點(diǎn)低、易溶于水D.易揮發(fā)、沸點(diǎn)低、易溶于有機(jī)溶劑解析

植物芳香油具有較強(qiáng)的揮發(fā)性,其沸點(diǎn)比水低,不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,因此可用有機(jī)溶劑來(lái)提取。答案D3.下列關(guān)于植物芳香油的描述,正確的是 ()。4.橘皮精油的提取過(guò)程中,過(guò)濾得到水、果蠟和橘皮油的混合物,靜止5~7d后,用吸管吸出的物質(zhì)是(

)。A.上層中的水

B.下層中的果蠟C.下層中的水和果蠟

D.上層中的橘皮油答案D4.橘皮精油的提取過(guò)程中,過(guò)濾得到水、果蠟和橘皮油的混合物,5.分析下面的圖,回答有關(guān)問(wèn)題。5.分析下面的圖,回答有關(guān)問(wèn)題。(1)寫(xiě)出圖中數(shù)字所代表的含義:[1]________、[2]________、[3]________。(2)在圖中用箭頭表示水的流向。(3)該裝置為_(kāi)_______裝置,其原理是_______________________________________________________________________。按原料放置的位置,對(duì)于玫瑰精油的提取,屬于_____蒸餾。(4)某同學(xué)用了1.5kg的玫瑰花瓣,出油為45g,則出油率為_(kāi)_______。(1)寫(xiě)出圖中數(shù)字所代表的含義:答案(1)溫度計(jì)出水口進(jìn)水口(2)水由進(jìn)水口[3]進(jìn),出水口[2]出(圖略)

(3)水蒸氣蒸餾利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來(lái),形成油水混合物,冷卻后,混合物又會(huì)重新分出油層和水層水中(4)3%答案(1)溫度計(jì)出水口進(jìn)水口(2)水由進(jìn)水口[3]進(jìn)結(jié)束放映結(jié)束放映第一節(jié)生物成分的分離與測(cè)定技術(shù)第四章生物化學(xué)與分子生物學(xué)技術(shù)實(shí)踐第一節(jié)生物成分的分離與測(cè)定技術(shù)第四章生物化學(xué)與分子生蘇教版高中生物選修一41《生物成分的分離與測(cè)定技術(shù)》教學(xué)課件蘇教版高中生物選修一41《生物成分的分離與測(cè)定技術(shù)》教學(xué)課件1.掌握電泳法分離大分子的原理。(重點(diǎn))2.運(yùn)用常用的方法提取和分離蛋白質(zhì)。(重、難點(diǎn))3.了解芳香油的特點(diǎn),知道提取芳香油的原理及會(huì)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn)裝置進(jìn)行提取。(重點(diǎn))1.掌握電泳法分離大分子的原理。(重點(diǎn))離心沉降法和薄膜透析法分離蛋白質(zhì)研磨超聲波完全破碎離心沉降法和薄膜透析法分離蛋白質(zhì)研磨超聲波完全破碎特性偏堿性偏酸性有機(jī)溶劑特性偏堿性偏酸性有機(jī)溶劑離心速度分子大小密度不同半透膜小分子化合物離心速度分子大小密度不同半透膜小分子化合物凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)分子的大小膠體溶液葡聚糖瓊脂糖多孔網(wǎng)狀凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)分子的大小膠體溶液葡聚糖瓊較短較快較長(zhǎng)緩慢較短較快較長(zhǎng)緩慢蒸餾蒸氣液體易揮發(fā)不易揮發(fā)沸點(diǎn)蒸餾蒸氣液體易揮發(fā)不易揮發(fā)沸點(diǎn)血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳支架前沿緩沖液濕潤(rùn)后氣泡光澤面巴比妥緩沖液朝下蓋玻片血清血清蛋白醋酸纖維薄膜電泳支架前沿緩沖液濕潤(rùn)后氣泡光負(fù)極朝上正極繃直電泳槽蓋染色液漂洗液底色脫凈透明液透明膜圖譜負(fù)極朝上正極繃直電泳槽蓋染色液漂洗液底色脫凈提取橘皮中的芳香油

檸檬烯隨水蒸氣蒸餾切碎水酒精燈蒸餾錐形瓶分液漏斗提取橘皮中的芳香油檸檬烯隨水蒸氣蒸餾切碎水酒精燈植物原料較強(qiáng)蒸餾法機(jī)械壓力壓榨法蒸餾法壓榨法萃取植物原料較強(qiáng)蒸餾法機(jī)械壓力壓榨法蒸餾法壓榨法萃1.離心沉降法和薄膜透析法分離蛋白質(zhì)的原理是一樣的。(×)【提示】不一樣,前者是離心沉降,后者是根據(jù)半透膜的透性。2.凝膠色譜法是根據(jù)蛋白質(zhì)分子的大小而對(duì)其進(jìn)行有效分離的方法。(√)1.離心沉降法和薄膜透析法分離蛋白質(zhì)的原理是一樣的。(×)3.醋酸纖維薄膜電泳是采用濾紙為支持物的電泳方法。(×)【提示】采用醋酸纖維薄膜為支持物。4.振蕩處理后,芳香油位于分液漏斗中液體的下部。(×)【提示】上部。3.醋酸纖維薄膜電泳是采用濾紙為支持物的電泳方法。(×)蛋白質(zhì)分子在凝膠中的運(yùn)動(dòng)情況分析①凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理是什么?②蛋白質(zhì)分子的大小不同在凝膠中的運(yùn)動(dòng)情況有什么不同?蛋白質(zhì)分子在凝膠中的運(yùn)動(dòng)情況分析①凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小直徑大小大于凝膠顆粒空隙直徑小于凝膠顆??障吨睆竭\(yùn)動(dòng)方式垂直向下運(yùn)動(dòng)不規(guī)則的擴(kuò)散運(yùn)動(dòng)運(yùn)動(dòng)速度較快較慢運(yùn)動(dòng)路程較短較長(zhǎng)洗脫次序先從凝膠柱中洗脫出來(lái)后從凝膠柱中洗脫出來(lái)相對(duì)分子質(zhì)量大相對(duì)分子質(zhì)量小直徑大小大于凝膠顆??障吨睆叫∮诖姿崂w維薄膜電泳①醋酸纖維薄膜電泳的特點(diǎn)是什么?②如何消除電荷對(duì)蛋白質(zhì)遷移速度的影響?1.原理帶電粒子在電場(chǎng)中向與其帶電性相反的電極泳動(dòng)的現(xiàn)象稱(chēng)為電泳。2.過(guò)程配制試劑→架濾紙橋→浸泡薄膜→細(xì)心點(diǎn)樣→平懸薄膜→實(shí)施電泳→染色→漂洗→脫色。醋酸纖維薄膜電泳①醋酸纖維薄膜3.特點(diǎn)(1)電泳后區(qū)帶界限清晰。(2)通電時(shí)間較短(60~90min)。(3)醋酸纖維薄膜對(duì)各種蛋白質(zhì)都幾乎完全不吸附,因此無(wú)拖尾現(xiàn)象。(4)醋酸纖維薄膜對(duì)染料也沒(méi)有吸附,因此不結(jié)合的染料能完全洗掉,無(wú)樣品處幾乎完全無(wú)色。3.特點(diǎn)植物芳香油的提?、僦参锓枷阌偷奶崛》椒ㄖ饕心膸追N?②每種提取方法的原理、適用范圍有什么不同?比較方法優(yōu)點(diǎn)局限性實(shí)驗(yàn)原理適用范圍水蒸氣蒸餾法簡(jiǎn)單易行便于分離水中蒸餾會(huì)導(dǎo)致某些原料焦糊和有效成分水解利用水蒸氣將揮發(fā)性較強(qiáng)的芳香油攜帶出來(lái)適用于提取玫瑰油、薄荷油等揮發(fā)性強(qiáng)的芳香油植物芳香油的提取①植物芳香油的提取方法主要有哪幾種?比較比較方法優(yōu)點(diǎn)局限性實(shí)驗(yàn)原理適用范圍壓榨法生產(chǎn)成本低,易保持原料原來(lái)的結(jié)構(gòu)和功能分離較為困難,出油率相對(duì)較低通過(guò)機(jī)械加壓,壓榨出果皮中的芳香油適用于柑橘、檸檬等易焦糊原料的提取萃取法產(chǎn)出率高,易分離使用有機(jī)溶劑處理不當(dāng)會(huì)影響提取物的質(zhì)量使芳香油溶解在有機(jī)溶劑中,蒸發(fā)溶劑后就可獲得芳香油適用范圍廣,要求原料的顆粒要盡可能細(xì)小,能充分浸泡在有機(jī)溶劑中比較優(yōu)點(diǎn)局限性實(shí)驗(yàn)原理適用范圍壓榨法生產(chǎn)成本低,易保持原料1.下列關(guān)于蛋白質(zhì)的提取的說(shuō)法中,不正確的是 (

)。A.一般用機(jī)械方法破碎生物組織B.破碎細(xì)胞常用的方法有研磨法、超聲波法和酶解法C.一般來(lái)說(shuō),酸性蛋白質(zhì)要用酸性溶液抽提D.抽提得到的蛋白質(zhì)粗提取物可用離心法去除固體雜質(zhì)1.下列關(guān)于蛋白質(zhì)的提取的說(shuō)法中,不正確的是 ()。解析蛋白質(zhì)呈溶液狀態(tài)釋放出來(lái)后,要根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性,選擇不同的溶液進(jìn)行抽提,如酸性蛋白質(zhì)可以用稀堿性溶液抽提。答案C解析蛋白質(zhì)呈溶液狀態(tài)釋放出來(lái)后,要根據(jù)蛋白質(zhì)的不同特性,選2.離心沉降法是純化蛋白質(zhì)的方法之一,在這一過(guò)程中蛋白質(zhì)會(huì)分層,這一現(xiàn)象與蛋白質(zhì)的何種性質(zhì)有關(guān) (

)。A.酸堿性

B.所帶電荷多少C.分子大小和密度

D.種類(lèi)解析

根據(jù)蛋白質(zhì)之間或蛋白質(zhì)與其他分子之間在分子大小和密度上的不同,采用離心沉降法,使其分層而分離。答案C2.離心沉降法是純化蛋白質(zhì)的方法之一,在這一過(guò)程中蛋白質(zhì)會(huì)分3.下列關(guān)于植物芳香油的描述,正確的是 (

)。A.易揮發(fā)、沸點(diǎn)高、易溶于水B.不揮發(fā)、沸點(diǎn)高、易溶于有機(jī)溶劑C.不揮發(fā)、沸點(diǎn)低、易溶于水D.易揮發(fā)、沸點(diǎn)低、易溶于有機(jī)溶劑解析

植物芳香油具有較強(qiáng)的揮發(fā)性,其沸點(diǎn)比水低,不溶于水,易溶于有機(jī)溶劑,因此

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