果蔬農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)

果蔬農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)

農(nóng)業(yè)部食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心（石河子)食品安全問(wèn)題概述一食品安全問(wèn)題（一）名詞含義1食品安全是指食品中不應(yīng)含有任何可能損害或威脅人體健康的有毒、有害物質(zhì)或因素。食品安全是食品衛(wèi)生的重要組成部分。2食品安全性是指食品按其原定的用途進(jìn)行生產(chǎn)和/或食用時(shí)不會(huì)對(duì)消費(fèi)者造成損害的一種擔(dān)保。3食品安全問(wèn)題是指食品按其原定的方法食用時(shí)可能損害或威脅人體健康的物質(zhì)或因素。（二）農(nóng)產(chǎn)品安全指標(biāo)農(nóng)產(chǎn)品的安全指標(biāo)主要包括以下內(nèi)容：1、嚴(yán)重危害人體健康的指標(biāo)，如致病菌、毒素、貝類毒素；2、農(nóng)產(chǎn)品污染指標(biāo)，包括化學(xué)和微生物污染指標(biāo)，如農(nóng)藥殘留、獸藥殘留、重金屬、細(xì)菌總數(shù)、大腸菌群等；3、農(nóng)產(chǎn)品摻雜使假，如甲醛、三聚氰胺、增白劑、防腐劑、著色劑等，4、轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性。（三）農(nóng)產(chǎn)品安全問(wèn)題目前的研究成果表明，農(nóng)產(chǎn)品安全主要存在以下幾方面的問(wèn)題：1生物毒素生物毒素主要指生物自然產(chǎn)生的毒素，主要包括：（1）貝類毒素種類：麻痹性貝類毒素（PSP）腹瀉性貝類毒素；(DSP)特點(diǎn)：加熱不易被破壞，所以其危害性相當(dāng)大。PSP存在：PSP存在于世界各處，龍蝦和許多蟹類體中發(fā)現(xiàn)PSP毒素。臨床癥狀：該毒素會(huì)引起神經(jīng)系統(tǒng)的疾病，包括顫抖、興奮及唇舌的灼痛和麻木感，嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致呼吸系統(tǒng)麻木以致死亡，是一種可致命的毒素。DSP存在：DSP在加拿大、亞洲、新西蘭、歐洲等地區(qū)的貝類生物體中發(fā)現(xiàn)。臨床癥狀：PSP毒素可引起輕微的胃腸疾病，但不是一種可致命的毒素。（2）真菌毒素真菌毒素，有時(shí)也俗稱霉菌毒素，是某些真菌的代謝產(chǎn)物，目前已發(fā)現(xiàn)的真菌毒素有十多種，如黃曲霉毒素、赭曲霉毒素、伏馬霉素等，常見(jiàn)的產(chǎn)毒真菌多為曲霉、青霉和鐮刀霉。（注意：在發(fā)霉的菌株中，不一定都存在有真菌毒素。真菌毒素有時(shí)從表面上不一定能觀察到有霉變的現(xiàn)象，兩種者之間不存在必然的因果關(guān)系）真菌存在于大多數(shù)的農(nóng)產(chǎn)品中，真菌毒素直接或間接進(jìn)入食物鏈會(huì)導(dǎo)致動(dòng)植物食品受到毒素污染。在眾多真菌毒素中，黃曲霉毒素是眾所周知的最危險(xiǎn)的毒素之一，是一類強(qiáng)致癌物。它是一組化學(xué)結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)，目前已鑒定出12種，B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM、B2a和毒醇。其中B1毒性最強(qiáng)。2轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的安全性

轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的含義為：農(nóng)產(chǎn)品中含有轉(zhuǎn)基因生物成分或者利用轉(zhuǎn)基因生物，如轉(zhuǎn)基因植物、動(dòng)物或微生物生產(chǎn)的農(nóng)產(chǎn)品目前還沒(méi)足夠的證據(jù)證明轉(zhuǎn)基因食品是否對(duì)人類無(wú)毒、無(wú)副作用，人們對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品與非轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品是否有著“實(shí)質(zhì)等同”、有無(wú)顯著差異，還存在疑慮。目前，世界上較為一致的觀點(diǎn)是生物技術(shù)產(chǎn)品（轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品）對(duì)人類健康和生態(tài)環(huán)境具有潛在危險(xiǎn)。3化學(xué)性物質(zhì)危害

化學(xué)性物質(zhì)的危害主要包括五個(gè)方面：⑴化肥我國(guó)是世界上化肥施用量最大的國(guó)家。氮肥（純N）年使用量2500多萬(wàn)噸，單位面積施用量為世界平均水平的3倍。肥料施用不當(dāng)、濫用化肥生產(chǎn)的蔬菜對(duì)人體健康的威脅不亞于在蔬菜上殘留的農(nóng)藥。這是因?yàn)橄跛猁}本身對(duì)人體無(wú)害，但是它可在土壤、人的口腔和胃中轉(zhuǎn)化為亞硝酸鹽，其對(duì)人體有危害。

亞硝酸鹽危害主要表現(xiàn)在兩方面：A：大量聚集可能引起中毒，長(zhǎng)期攝入，可引發(fā)消化系統(tǒng)癌變，如胃癌、腸癌等；B：NO3-+NO2-+胺類化合物→亞硝胺（高致癌物）

⑵重金屬危害鎘、汞、鉛、砷、鉻的危害為：在人體有蓄積性，半衰期較長(zhǎng)，能產(chǎn)生急性或慢性毒性反應(yīng)，可能導(dǎo)致畸形，致癌和致突變的潛在危害。危害高低依次為：鎘、汞、鉛、砷、鉻。目前我國(guó)兒童金屬鉛污染較為嚴(yán)重。⑶農(nóng)藥藥殘留留危害害我國(guó)是是世界界農(nóng)藥藥施用用量最最大國(guó)國(guó)家，，年施施用量量超過(guò)過(guò)130萬(wàn)萬(wàn)噸，，單位位面積積施用用量為為世界界平均均水平平的2倍.我國(guó)與與歐美美等發(fā)發(fā)達(dá)國(guó)國(guó)家相相比，，農(nóng)藥藥生產(chǎn)產(chǎn)、使使用存存在較較大的的差距距。主主要表表現(xiàn)為為高毒毒農(nóng)藥藥使用用量占占多數(shù)數(shù),具具體表表現(xiàn)在在以下下兩個(gè)個(gè)方面面：A：使使用農(nóng)農(nóng)藥仍仍以殺殺蟲(chóng)劑劑為主主，占占總用用量的的68%；；B：在在殺蟲(chóng)蟲(chóng)劑中中，有有機(jī)磷磷農(nóng)藥藥占70%以上上。我國(guó)每每年因因農(nóng)藥藥中毒毒事件件屢屢屢發(fā)生生，特特別是是蔬菜菜中有有機(jī)磷磷農(nóng)藥藥中毒毒更為為突出出。水水果、、蔬菜菜中有有機(jī)磷磷農(nóng)藥藥被人人體吸吸收后后通過(guò)過(guò)血液液運(yùn)到到人體體的各各個(gè)臟臟器,損害害臟器器.中毒表表現(xiàn):出汗汗,肌肌肉顫顫抖,心跳跳加快快,瞳瞳孔縮縮小等等.⑷添加加劑主要表表現(xiàn)在在:①過(guò)量添添加著著色劑劑、護(hù)護(hù)色劑劑、去去色劑劑、防防腐劑劑等,如苯苯甲酸酸、山山梨酸酸、亞亞硝酸酸鹽、、亞硫硫酸鹽鹽等。。②還有無(wú)無(wú)知或或違法法摻假假，如如甲醛醛、蘇蘇丹紅紅、吊吊白塊塊、三三聚氰氰胺等等等。。⑸獸藥藥藥殘殘獸藥殘殘留是是指動(dòng)動(dòng)物產(chǎn)產(chǎn)品的的任何何可食食部分分所含含獸藥藥的母母體化化合物物及/或其其代謝謝產(chǎn)物物，以以及與與獸藥藥有關(guān)關(guān)的雜雜質(zhì)的的殘留留。獸藥殘殘留的的類型型包括括：1、原原藥；；2、藥藥物在在動(dòng)物物體內(nèi)內(nèi)的代代謝產(chǎn)產(chǎn)物；；3、藥藥物或或其代代謝產(chǎn)產(chǎn)物與與內(nèi)源源大分分子共共價(jià)結(jié)結(jié)合的的物質(zhì)質(zhì)。藥殘是是在畜畜禽和和魚(yú)養(yǎng)養(yǎng)殖過(guò)過(guò)程中中，為為了預(yù)預(yù)防和和治療療而使使用的的抗生生素、、磺胺胺類等等化學(xué)學(xué)藥品品，它它們往往往造造成藥藥物殘殘留于于食品品動(dòng)物物組織織中。。藥殘殘通過(guò)過(guò)食物物進(jìn)入入人體體內(nèi)。。動(dòng)物性性食品品中的的藥物物殘留留對(duì)人人類健健康的的影響響，一一直是是一個(gè)個(gè)眾說(shuō)說(shuō)紛紜紜的問(wèn)問(wèn)題。。以前前，人人們普普遍認(rèn)認(rèn)為藥藥殘?jiān)鲈黾尤巳梭w的的抗藥藥性和和耐藥藥性細(xì)細(xì)菌種種群的的增長(zhǎng)長(zhǎng)，將將增加加潛在在的安安全問(wèn)問(wèn)題。。但近近期的的研究究表明明，有有效抗抗生素素是致致癌物物質(zhì)，，人體體過(guò)量量食用用，將將導(dǎo)致致細(xì)胞胞癌變變。禁用獸獸藥：：鹽酸酸克倫倫特羅羅、萊萊克多多巴胺胺。二農(nóng)農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)質(zhì)量安安全的的相對(duì)對(duì)性不論人類類知道與與否，任任何農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品中或或多或少少都存在在對(duì)人類類健康有有害物質(zhì)質(zhì)，絕對(duì)對(duì)安全的的農(nóng)產(chǎn)品品是沒(méi)有有的；同同時(shí)，農(nóng)農(nóng)產(chǎn)品中中所含的的有害物物質(zhì)的量量很少，，且在正正常范圍圍內(nèi)時(shí)，，其不會(huì)會(huì)對(duì)人體體健康造造成危害害，因此此，農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品安全全是相對(duì)對(duì)的，而而不是絕絕對(duì)的。。人類可做做的是一一方面研研究認(rèn)識(shí)識(shí)農(nóng)產(chǎn)品品中的有有害物質(zhì)質(zhì)；另一一方面則則是盡其其所能減減少或消消除農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品中有有害物質(zhì)質(zhì)的存在在，吃上上安全的的農(nóng)產(chǎn)品品。三農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)量量安全快快速檢測(cè)測(cè)方法的的

特點(diǎn)點(diǎn)及分類類（一）農(nóng)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)質(zhì)量安全全快速檢檢測(cè)的特特點(diǎn)農(nóng)產(chǎn)品快快速檢測(cè)測(cè)簡(jiǎn)單地地說(shuō)就是是當(dāng)試劑劑采購(gòu)準(zhǔn)準(zhǔn)備好后后，從試試劑配置置開(kāi)始，，包括樣樣品處理理時(shí)間，，能夠在在幾分鐘鐘或十幾幾分鐘內(nèi)內(nèi)得到檢檢測(cè)結(jié)果果是最理理想的，，但是這這種方法法目前還還較少，，我們所所說(shuō)的快快速檢測(cè)測(cè)是個(gè)相相對(duì)概念念，即與與常規(guī)檢檢驗(yàn)或傳傳統(tǒng)方法法比較能能夠縮短短1/2或1/3的時(shí)時(shí)間就可可得到檢檢測(cè)結(jié)果果的方法法，就可可認(rèn)為是是較快的的方法了了。快速速檢檢測(cè)測(cè)主主要要從從三三個(gè)個(gè)方方面面體體現(xiàn)現(xiàn)：：1實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)準(zhǔn)準(zhǔn)備備簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單，，使使用用試試劑劑較較少少，，2樣樣品品經(jīng)經(jīng)簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單處處理理后后即即可可測(cè)測(cè)試試，，或或采采用用先先進(jìn)進(jìn)快快速速的的樣樣品品處處理理方方法法，，提提高高樣樣品品處處理理效效率率。。3簡(jiǎn)簡(jiǎn)單單、、快快速速和和準(zhǔn)準(zhǔn)確確的的分分析析方方法法，，能能夠夠?qū)?duì)處處理理好好的的樣樣品品在在短短時(shí)時(shí)間間內(nèi)內(nèi)檢檢出出結(jié)結(jié)果果。。（二二））農(nóng)農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品品質(zhì)質(zhì)量量安安全全快快速速檢檢測(cè)測(cè)方方法法的的分分類類農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品品質(zhì)質(zhì)量量安安全全快快速速檢檢測(cè)測(cè)技技術(shù)術(shù)始始于于上上世世紀(jì)紀(jì)50年年代代，，經(jīng)經(jīng)過(guò)過(guò)50多多年年的的發(fā)發(fā)展展，，特特別別是是近近20多多年年的的快快速速發(fā)發(fā)展展，，檢檢測(cè)測(cè)技技術(shù)術(shù)已已含含蓋蓋農(nóng)農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品品安安全全的的各各個(gè)個(gè)方方面面，，快快速速檢檢測(cè)測(cè)方方法法已已達(dá)達(dá)百百種種以以上上。。這這些些方方法法按按不不同同的的指指標(biāo)標(biāo)可可分分為為不不同同的的種種類類。。目目前前，，主主要要有有下下列列幾幾種種分分類類方方法法：：1按按場(chǎng)場(chǎng)地地可可分分為為：：①現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)場(chǎng)快快速速檢檢驗(yàn)驗(yàn)②實(shí)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)室室快快速速檢檢驗(yàn)驗(yàn)2從從定性性定量量來(lái)分分：①定性性快速速檢驗(yàn)驗(yàn)（多多在現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)））②半定定量快快速檢檢驗(yàn)（（多在在現(xiàn)場(chǎng)場(chǎng)）③定量量快速速檢驗(yàn)驗(yàn)3按按檢測(cè)測(cè)原理理分：：①活體體生物物測(cè)定定法-發(fā)光光細(xì)菌菌或敏感性性家蠅蠅②分子子生物物學(xué)法法③生物物化學(xué)學(xué)測(cè)定定法④化學(xué)學(xué)法——有機(jī)機(jī)磷農(nóng)農(nóng)藥速速測(cè)靈靈法，，氣譜譜法四.農(nóng)農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)量量安全全快速速檢測(cè)測(cè)技術(shù)術(shù)發(fā)展展的現(xiàn)現(xiàn)狀(一)農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)質(zhì)量安安全快快速檢檢測(cè)技技術(shù)發(fā)發(fā)展現(xiàn)現(xiàn)狀(二)我國(guó)國(guó)農(nóng)產(chǎn)產(chǎn)品質(zhì)質(zhì)量安安全快快速檢檢測(cè)技技術(shù)發(fā)發(fā)展現(xiàn)現(xiàn)狀農(nóng)產(chǎn)品品質(zhì)量量安全全快速速檢測(cè)測(cè)方法法的研研究受受到各各國(guó)政政府的的高度度重視視，因因而成成為當(dāng)當(dāng)前研研究的的熱門門課題題之一一。成熟的的水果果、蔬蔬菜農(nóng)農(nóng)藥殘殘留檢檢測(cè)方方法主主要有有下列列幾個(gè)個(gè)方面面1化化學(xué)學(xué)法該方法法是以以氣相相色譜譜法為為代表表的經(jīng)經(jīng)典分分析方方法。。特點(diǎn)：：靈敏敏度高高、準(zhǔn)準(zhǔn)確，，可對(duì)對(duì)幾乎乎所有有農(nóng)藥藥殘留留進(jìn)行行定性性和定定量檢檢測(cè)，，但測(cè)測(cè)定時(shí)時(shí)間周周期較較長(zhǎng)，，成本本較高高，操操作復(fù)復(fù)雜，，不適適合市市場(chǎng)抽抽查和和監(jiān)督督管理理。2生生物物法⑴活體體生物物測(cè)定定法用發(fā)光光細(xì)菌菌或敏敏感性性家蠅蠅作為為測(cè)定定材料料；⑵分子子生物物學(xué)法法采用免免疫反反應(yīng)，，如酶酶聯(lián)免免疫反反應(yīng)，，采用用特異異性的的酶聯(lián)聯(lián)免疫疫試劑劑盒；；⑶生物物化學(xué)學(xué)測(cè)定定法生物化化學(xué)測(cè)測(cè)定法法是利利用膽膽堿酯酯酶抑抑制原原理，，使用用僅限限于能能抑制制膽堿堿酯酶酶活性性的農(nóng)農(nóng)藥。。目前我我國(guó)成成型的的農(nóng)藥藥殘留留快速速測(cè)定定方法法1農(nóng)農(nóng)藥藥殘留留試紙紙法（（農(nóng)藥藥速測(cè)測(cè)卡法法、酶酶試劑劑法或或STRIP法法）2酶酶片片法（（農(nóng)藥藥速測(cè)測(cè)卡法法）3農(nóng)農(nóng)藥藥殘留留分光光光度度法（（抑制制率法法）4酶酶聯(lián)聯(lián)免沒(méi)沒(méi)試劑劑盒法法---分分子生生物學(xué)學(xué)方法法5有有機(jī)磷磷農(nóng)藥藥速測(cè)測(cè)方法法果蔬農(nóng)農(nóng)藥殘殘留速速測(cè)技技術(shù)－酶抑制制率法法一.檢測(cè)測(cè)原理理1.酶酶的特特性（（膽堿堿酯酶酶）⑴選擇擇性酶的分分解和和合成成具有有專一一性。。⑵活性性指酶在在常態(tài)態(tài)下，，能完完成物物質(zhì)的的合成成或分分解⑶適宜宜的條條件PH＝＝8溫度37-38℃2乙乙酰酰膽堿堿酯酶酶的酶酶促反反應(yīng)酶+底底物(硫硫代乙乙酰膽膽堿)→硫硫代膽膽堿+乙酸酸乙酰膽膽堿酯酯酶+擬除除蟲(chóng)菊菊酯類類等農(nóng)農(nóng)藥→→酶活活性不不被抑抑制酶顯顯色色劑底物―――→→分解解產(chǎn)物物――――――→黃黃色溶溶液3存在有有機(jī)磷磷或氨氨基甲甲酸酯酯類農(nóng)農(nóng)藥的的酶反反應(yīng)乙酰膽膽堿酯酯酶+有機(jī)機(jī)磷或或氨基基甲酸酸酯類類農(nóng)藥藥→酶酶活性性被抑抑制顯色劑劑酶―――→→無(wú)分分解產(chǎn)產(chǎn)物―――――→無(wú)無(wú)色溶溶液底物――――――→∣顯色劑劑(硫代代乙酰酰膽堿堿)――→→少量量分解解產(chǎn)物物――――→→淺黃黃色溶溶液→活性性被抑抑制→→含有有機(jī)磷磷或氨氨基甲甲酸酯酯類農(nóng)農(nóng)藥底物+丁酰酰膽堿堿酯酶酶+樣樣本――→活性性正常?！徊缓杏袡C(jī)磷磷或氨氨基甲甲酸酯酯類農(nóng)農(nóng)藥4.原理在一定定條件件下,有機(jī)機(jī)磷和和氨基基甲酸酸酯類類農(nóng)藥藥對(duì)膽膽堿酯酯酶的的正常常功能能有抑抑制作作用,其抑抑制率率與農(nóng)農(nóng)藥的的濃度度呈正正相關(guān)關(guān).在在正常常情況況下,酶催催化神神經(jīng)傳傳導(dǎo)代代謝產(chǎn)產(chǎn)物(乙酰酰膽堿堿)水水解,其水水解產(chǎn)產(chǎn)物與與顯色色劑反反應(yīng),產(chǎn)生生黃色色物質(zhì)質(zhì),用用分光光光度度計(jì)在在412nm處處測(cè)定定吸光光度隨隨時(shí)間間的變變化值值,計(jì)計(jì)算出出抑制制率,通過(guò)過(guò)抑制制率可可以判判定出出樣品品中是是否含含有高高劑量量的有有機(jī)磷磷或氨氨基甲甲酸酯酯類農(nóng)農(nóng)藥的的存在在.二檢檢測(cè)測(cè)范圍圍及靈靈敏度度1檢測(cè)對(duì)對(duì)象蔬菜：：葉菜菜、果果菜、、豆菜菜、瓜瓜菜等等（除除胡蘿蘿卜、、韭菜菜、蔥蔥、蒜蒜、茭茭白、、蘑菇菇等））水果：：蘋果果、梨梨、桃桃、草草莓等等。2檢檢測(cè)測(cè)農(nóng)藥藥的范范圍農(nóng)藥:A：：有機(jī)機(jī)磷類類甲胺磷磷、對(duì)對(duì)硫磷磷、氧氧化樂(lè)樂(lè)果、、甲拌拌磷、、久效效磷、、敵敵敵畏、、殺撲撲磷等等（靈靈敏度度0.5-5mg/kg甲基對(duì)對(duì)硫磷磷、水水胺硫硫磷、、甲基基異硫硫磷、、毒死死蜱、、樂(lè)果果等（（靈敏敏度8-10mg/kg）。。B：氨氨基甲甲酸酯酯類：：克百威威、涕涕滅威威、滅滅多威威、丙丙硫克克百威威、丁丁硫克克百威威（0.2-2.5mg/kg））。三試試劑劑的配配制和和保存存1.專用酶酶(乙乙酰膽膽堿酯酯酶)配制：根據(jù)據(jù)酶的情況況,用緩沖沖液溶解.注意:酶液液的活性應(yīng)應(yīng)為ΔA0＞0.3以以上保存：粉狀狀的酶(密密封)應(yīng)儲(chǔ)儲(chǔ)存在冷凍凍室內(nèi)用時(shí)時(shí)用提取液液溶解，溶溶解后的酶酶液分成2-4小瓶瓶，暫時(shí)不不用的儲(chǔ)存存在冷凍室室內(nèi)，用時(shí)時(shí)解凍，用用后的酶液液儲(chǔ)存在冷冷藏室（0-5℃））內(nèi)，在四四天內(nèi)用完完，酶液反反復(fù)解凍最最多不能超超過(guò)兩次，，否則會(huì)影影響酶的活活性。2.底物物(硫代乙乙酰膽堿)配制：取25mg底物,加3.0mL蒸餾水溶解解,搖勻后后置4℃冰箱內(nèi)保保存.保存存期不超過(guò)過(guò)兩周。保存：固體體(密封)及溶解后后的底物均均應(yīng)保存在在凍箱的冷冷凍室內(nèi)。。溶解后如如長(zhǎng)時(shí)間不不用，應(yīng)貯貯存在凍箱箱的冷凍室室內(nèi)，用時(shí)時(shí)解凍。3.顯色劑劑(二硫代代二硝基苯苯甲酸)配制：分別別取160mg顯色色劑和15.6mg碳酸氫鈉鈉,用20mL緩沖沖液溶解。。保存：固體體及溶解后后的顯色劑劑均應(yīng)在凍凍箱的冷藏藏室內(nèi)（3-5℃））保存。思考題:為為什么用緩緩沖液配置置顯色劑?4.提取取劑(PH8.0緩沖液)配制：分別別取11.9g無(wú)水磷酸氫氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀鉀,用1000毫升蒸餾水水溶解。保存：固體體及溶解后后的提取試試劑均可在在常溫下保保存。思考題:為為什么用緩緩沖液作提提取劑?四取樣樣要求葉菜：用取取樣器隨機(jī)機(jī)取不同植植株的葉片片。果菜及水果果類：用取取樣器沿果果菜表面處處取約1厘厘米厚的樣樣本。五檢測(cè)測(cè)步驟1,選取有有代表性樣樣品,沖洗洗掉表面的的泥土,剪剪成1cm左右見(jiàn)方的的碎片,取取1g樣本，放入入提取瓶中中,加入5mL緩沖液,振振蕩1～2min,倒出提取取液,靜置置3～5min,待用.2,對(duì)照溶溶液測(cè)試:先于試管管中加入2.5mL緩沖液,再再加人0.1mL酶液,0.1mL顯色劑,搖搖勻后于37℃放置15分分鐘以上(每批樣品品的控制時(shí)時(shí)間應(yīng)一致致).加入入0.1mL底物搖勻,此時(shí)檢測(cè)測(cè)液開(kāi)始發(fā)發(fā)生顯色反反應(yīng),應(yīng)立立即放人儀儀器比色皿皿中,記錄錄3min內(nèi)吸光度的的變化ΔA0.3,樣品溶溶液的測(cè)試試:先于試試管中加入入2.5mL樣品提取液液,其他操操作同對(duì)照照相同,記記錄反應(yīng)3min的吸光度變變化值ΔAt.六檢測(cè)結(jié)結(jié)果計(jì)算公公式△Ao-△At抑制率（％）＝――