最新02免疫球蛋白課件

02免疫球蛋白02免疫球蛋白1內(nèi)容提要概述免疫球蛋白的結構抗體的異質(zhì)性免疫球蛋白的生物學特性人工制備抗體內(nèi)容提要概述2最新02免疫球蛋白課件3最新02免疫球蛋白課件4最新02免疫球蛋白課件5最新02免疫球蛋白課件6最新02免疫球蛋白課件7最新02免疫球蛋白課件8第一節(jié)免疫球蛋白的結構第一節(jié)9（一）Ig的基本結構由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈通過二硫鍵連接而成的四肽鏈分子。（一）Ig的基本結構由兩條相同的10（一）輕鏈和重鏈輕鏈（L鏈）

κ鏈λ鏈輕鏈決定型別κ型λ型正常人κ：λ≈2：1重鏈（H鏈）:根據(jù)其抗原性的差異，人類Ig的H鏈分為

鏈鏈鏈鏈鏈重鏈決定Ig類別IgGIgAIgMIgDIgE（一）輕鏈和重鏈輕鏈（L鏈）κ鏈λ鏈重鏈（H鏈）:根11最新02免疫球蛋白課件12可變區(qū)（variableregion，v）重鏈和輕鏈近N端約110個氨基酸序列的變化很大，其組成和排列有較大差異，并決定抗體與抗原結合的特異性。高變區(qū)（hypervariableregion，HVR），在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的排列順序高度可變，此為HVR/CDR。骨架區(qū)（frameworkregion，F(xiàn)R）V區(qū)中非HVR部位的氨基酸組成和排列相對保守，此為FR。可變區(qū)（variableregion，v）13最新02免疫球蛋白課件14最新02免疫球蛋白課件15恒定區(qū)（constantregion，C）恒定區(qū)C端，在同一種屬中其氨基酸的組成或排列比較恒定。不同類Ig其CH的長度不一,CH1，CH2，CH3，CH4，IgC區(qū)生物學效應:激活補體,穿越胎盤和黏膜屏障,結合細胞表面Fc受體從而介導調(diào)理作用,ADCC作用和I型超敏反應.恒定區(qū)（constantregion，C）16鉸鏈區(qū)（hingeregion）位于CH1和CH2之間可轉(zhuǎn)動的區(qū)，含豐富的脯氨酸，因此易伸展彎曲，有利于IgV區(qū)與抗原互補性結合；有利于暴露補體結合位點；對蛋白酶敏感。鉸鏈區(qū)（hingeregion）17FlexibilityofimmunoglobulinsFlexibilityofimmunoglobulins18結構域（domain）/功能區(qū)免疫球蛋白的多肽鏈分子可折疊成若干個由鏈內(nèi)二硫鍵連接的球形結構域。每個球形結構域約由110個氨基酸組成，具有一定的生理功能，故又稱為功能區(qū)。許多膜型和分泌型分子均含有這種獨特的桶狀結構,歸于免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily,IgSF)結構域（domain）/功能區(qū)19最新02免疫球蛋白課件20結構域的二級結構是由兩個反向平行的β片層組成。每個β片層由3~5股多肽鏈折疊而成，兩個β片層通過一個鏈內(nèi)二硫建連接，形成一個“β桶狀”或“β三明治”結構，這種結構稱為免疫球蛋白折疊。結構域的二級結構是由兩個反向平行的β片層組成。每個β片層由321最新02免疫球蛋白課件22（二）免疫球蛋白的其他成分J鏈是富含半胱氨酸的多肽鏈，由漿細胞合成，主要功能是將單體Ig分子連接為多聚體。分泌片含糖肽鏈，是多聚免疫球蛋白受體的胞外段，由黏膜上皮細胞合成和分泌。功能合成和轉(zhuǎn)運SIgA。保護SIgA不被蛋白水解酶降解。（二）免疫球蛋白的其他成分J鏈23最新02免疫球蛋白課件24最新02免疫球蛋白課件25（三）Ig水解片段木瓜蛋白酶(papain)胃蛋白酶(pepsin)（三）Ig水解片段木瓜蛋白酶(papain)26木瓜蛋白酶水解水解部位在重鏈鏈間二硫鍵的近氨基端。水解為2個抗原結合片段（fragmentofantigenbinding，F(xiàn)ab）和1個可結晶片段（fragmentcrystallizable，F(xiàn)c）。木瓜蛋白酶水解27胃蛋白酶水解部位在重鏈鏈間二硫鍵的近羧基端。水解為1個具有雙價活性的抗原結合片段F(ab’)2和多個沒有功能的片段（pFc’）。胃蛋白酶28注射破傷風抗毒素之前需要先做皮試，為什么？抗毒素可以中和毒素抗毒素是動物血清，對人來說是抗原物質(zhì)，重復注射會引起超敏反應胃蛋白酶水解片段（pFc′）抗原性消失應用何種酶水解抗毒素可以防止超敏反應，為什么?緊急預防破傷風需要注射破傷風抗毒素，為什么？注射破傷風抗毒素之前抗毒素可以中和毒素抗毒素是動物血清，對人29第二節(jié)抗體的異質(zhì)性抗體異質(zhì)性指抗體在結構和功能上差異的總和。第二節(jié)抗體的異質(zhì)性抗體異質(zhì)性30（一）免疫球蛋白的分類類及亞類根據(jù)Ig重鏈C區(qū)抗原特異性不同，可將其分為γ、α、μ、δ、ε五類，對應的免疫球蛋白為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。同一類中，根據(jù)重鏈免疫原性及二硫鍵數(shù)目和位置不同，又分為亞類。如IgG有4個亞類，IgA有2個，IgM有2個等。（一）免疫球蛋白的分類類及亞類31型及亞型根據(jù)輕鏈C區(qū)抗原特異性不同，可將其分為κ型和λ型。同一型中，根據(jù)輕鏈C區(qū)N端氨基酸序列差異，又分可為亞型。型及亞型32（二）抗體的多樣性外源性抗原分子結構復雜，可含多種不同表位。每一種抗原表位可誘導產(chǎn)生一種特異性抗體。因此，形成抗體的多樣性。（二）抗體的多樣性外源性抗原分子結構復雜，可含多種不同表位。33（三）免疫球蛋白的血清型同種型指同一種屬所有個體Ig分子共有抗原特異性標志，為種屬型標志，位于IgC區(qū)。同種異型指同一種屬不同個體間Ig分子所具有的不同抗原特異性標志，為個體型標志，位于IgC區(qū)。獨特型指每個Ig分子所特有的抗原特異性標志，其表位又稱為獨特位，存在于IgV區(qū)。（三）免疫球蛋白的血清型同種型34最新02免疫球蛋白課件35第三節(jié)免疫球蛋白的功能第三節(jié)免疫球蛋白的功能36V區(qū)的功能特異性識別和結合抗原:中和毒素,阻斷病原體入侵;通過其C區(qū)而發(fā)揮作用.C區(qū)的功能激活補體細胞親嗜性調(diào)理作用抗體依賴細胞介導的細胞毒作用（ADCC）介導Ⅰ型超敏反應V區(qū)的功能37VL+VH功能區(qū)：抗原結合部位VL+VH功能區(qū)：抗原結合部位38中和毒素中和毒素39中和病毒中和病毒40中和細菌中和細菌41激活補體激活補體42最新02免疫球蛋白課件43

IgG類抗體與靶細胞表面抗原特異性結合，效應細胞（NK細胞、巨噬細胞、中性粒細胞）借助所表達的IgGFcR與靶細胞表面IgG的Fc段結合，從而殺傷靶細胞IgG類抗體與靶細胞表面抗原特異性結合，效應細胞（44動畫演示ADCC作用動畫演示ADCC作用45介導Ⅰ型超敏反應介導Ⅰ型超敏反應46最新02免疫球蛋白課件47第四節(jié)各類免疫球蛋白的特性和功能第四節(jié)各類免疫球蛋白的特性和功能48IgG血清中的主要抗體成分（75-80%）；半壽期長（20-23天）；出生后3個月開始合成，3-5歲接近成人水平；多數(shù)抗菌、抗病毒、抗毒素抗體均屬IgG類是唯一能通過胎盤的Ig，發(fā)揮自然被動免疫功能；具有活化補體經(jīng)典途徑的能力（IgG3>IgG1>IgG2）；具有調(diào)理作用、ADCC作用和結合SPA等；參與Ⅱ型、Ⅲ型超敏反應，某些自身免疫病的抗體也屬IgG。IgG血清中的主要抗體成分（75-80%）；半壽期長（20-49最新02免疫球蛋白課件50IgM為五聚體，分子量最大，稱為巨球蛋白（macroglobulin）；個體發(fā)育中最先出現(xiàn)的Ig，胚胎晚期即能產(chǎn)生，臍帶血IgM增高提示胎內(nèi)感染（如風疹病毒、巨細胞病毒感染等）；抗原初次刺激機體時，是體內(nèi)最先產(chǎn)生的Ig；血清IgM升高說明有近期感染；有強大激活補體能力和調(diào)理作用，在機體早期免疫防御中具有重要作用；天然血型抗體是IgM；膜表面IgM是B細胞抗原識別受體的主要成分，未成熟B細胞只表達mIgM，。IgM為五聚體，分子量最大，稱為巨球蛋白（macroglob51最新02免疫球蛋白課件52IgA分為單體的血清型和二聚體的分泌型IgA；分泌型IgA主要由黏膜相關淋巴組織產(chǎn)生，存在于唾液、淚液、乳汁及呼吸道、消化道、泌尿道的分泌液中和黏膜表面，是機體黏膜局部抗感染免疫的重要因素。初乳中的sIgA可對嬰幼兒發(fā)揮自然被動免疫作用調(diào)理吞噬、中和毒素IgA分為單體的血清型和二聚體的分泌型IgA；53IgD血清中含量低（1%），其生物學作用尚不清楚mIgD可作為B細胞分化成熟標記，成熟B細胞同時表達mIgM和mIgDmIgMmIgD成熟B細胞活化B細胞未成熟B細胞IgDmIgMmIgD成熟B細胞活化B細胞未成熟B細胞54IgE是血清中含量最低的Ig；主要由呼吸道、胃腸道粘膜固有層的漿細胞產(chǎn)生屬嗜細胞抗體，可與肥大細胞、嗜堿粒細胞表面FcεR結合，介導I型超敏反應。IgE是血清中含量最低的Ig；55FcεRI

IgE與肥大細胞和嗜堿性粒細胞FcεRI導致介質(zhì)釋放FcεRI

IgE與肥大細胞和嗜堿性粒細胞FcεRI導56第五節(jié)人工制備抗體第五節(jié)人工制備抗體57多克隆抗體（polyclonalantibody）抗原含有多個不同抗原表位，導致體內(nèi)多個B細胞克隆被激活并產(chǎn)生針對多種不同抗原表位的抗體，即多克隆抗體。來源廣泛,制備容易表位特異性不高,易發(fā)生交叉反應,也不易大規(guī)模制備.多克隆抗體（polyclonalantibody）58帶有多個表位抗原針對不同表位的B細胞克隆增殖多種抗體的混合物（多克隆抗體）刺激小鼠帶有多個表位抗原針對不同表位的B細胞克隆增殖多種抗體的混合物59單克隆抗體

monoclonalantibody,mAb借助小鼠B細胞雜交瘤（hybridoma）技術，所制備的高度均一（屬同一類、亞類、型別）、單一特異性（僅針對特定抗定抗原表位）的抗體。純度高、特異性強、可大量生產(chǎn)。單克隆抗體

monoclonalantibody,mAb60最新02免疫球蛋白課件61最新02免疫球蛋白課件62基因工程抗體又稱重組抗體，借助DNA重組技術和蛋白質(zhì)工程技術，按人們的意愿在基因水平上對Ig進行切割、拼接或修篩，重新組裝成為新型抗體分子。基因工程抗體63Nextlecture補體、細胞因子、CD和黏附分子Nextlecture補體、細胞因子、CD和黏附分子64

結束語謝謝大家聆聽?。?！65

結束語謝謝大家聆聽?。。?502免疫球蛋白02免疫球蛋白66內(nèi)容提要概述免疫球蛋白的結構抗體的異質(zhì)性免疫球蛋白的生物學特性人工制備抗體內(nèi)容提要概述67最新02免疫球蛋白課件68最新02免疫球蛋白課件69最新02免疫球蛋白課件70最新02免疫球蛋白課件71最新02免疫球蛋白課件72最新02免疫球蛋白課件73第一節(jié)免疫球蛋白的結構第一節(jié)74（一）Ig的基本結構由兩條相同的重鏈和兩條相同的輕鏈通過二硫鍵連接而成的四肽鏈分子。（一）Ig的基本結構由兩條相同的75（一）輕鏈和重鏈輕鏈（L鏈）

κ鏈λ鏈輕鏈決定型別κ型λ型正常人κ：λ≈2：1重鏈（H鏈）:根據(jù)其抗原性的差異，人類Ig的H鏈分為

鏈鏈鏈鏈鏈重鏈決定Ig類別IgGIgAIgMIgDIgE（一）輕鏈和重鏈輕鏈（L鏈）κ鏈λ鏈重鏈（H鏈）:根76最新02免疫球蛋白課件77可變區(qū)（variableregion，v）重鏈和輕鏈近N端約110個氨基酸序列的變化很大，其組成和排列有較大差異，并決定抗體與抗原結合的特異性。高變區(qū)（hypervariableregion，HVR），在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的排列順序高度可變，此為HVR/CDR。骨架區(qū)（frameworkregion，F(xiàn)R）V區(qū)中非HVR部位的氨基酸組成和排列相對保守，此為FR?？勺儏^(qū)（variableregion，v）78最新02免疫球蛋白課件79最新02免疫球蛋白課件80恒定區(qū)（constantregion，C）恒定區(qū)C端，在同一種屬中其氨基酸的組成或排列比較恒定。不同類Ig其CH的長度不一,CH1，CH2，CH3，CH4，IgC區(qū)生物學效應:激活補體,穿越胎盤和黏膜屏障,結合細胞表面Fc受體從而介導調(diào)理作用,ADCC作用和I型超敏反應.恒定區(qū)（constantregion，C）81鉸鏈區(qū)（hingeregion）位于CH1和CH2之間可轉(zhuǎn)動的區(qū)，含豐富的脯氨酸，因此易伸展彎曲，有利于IgV區(qū)與抗原互補性結合；有利于暴露補體結合位點；對蛋白酶敏感。鉸鏈區(qū)（hingeregion）82FlexibilityofimmunoglobulinsFlexibilityofimmunoglobulins83結構域（domain）/功能區(qū)免疫球蛋白的多肽鏈分子可折疊成若干個由鏈內(nèi)二硫鍵連接的球形結構域。每個球形結構域約由110個氨基酸組成，具有一定的生理功能，故又稱為功能區(qū)。許多膜型和分泌型分子均含有這種獨特的桶狀結構,歸于免疫球蛋白超家族(immunoglobulinsuperfamily,IgSF)結構域（domain）/功能區(qū)84最新02免疫球蛋白課件85結構域的二級結構是由兩個反向平行的β片層組成。每個β片層由3~5股多肽鏈折疊而成，兩個β片層通過一個鏈內(nèi)二硫建連接，形成一個“β桶狀”或“β三明治”結構，這種結構稱為免疫球蛋白折疊。結構域的二級結構是由兩個反向平行的β片層組成。每個β片層由386最新02免疫球蛋白課件87（二）免疫球蛋白的其他成分J鏈是富含半胱氨酸的多肽鏈，由漿細胞合成，主要功能是將單體Ig分子連接為多聚體。分泌片含糖肽鏈，是多聚免疫球蛋白受體的胞外段，由黏膜上皮細胞合成和分泌。功能合成和轉(zhuǎn)運SIgA。保護SIgA不被蛋白水解酶降解。（二）免疫球蛋白的其他成分J鏈88最新02免疫球蛋白課件89最新02免疫球蛋白課件90（三）Ig水解片段木瓜蛋白酶(papain)胃蛋白酶(pepsin)（三）Ig水解片段木瓜蛋白酶(papain)91木瓜蛋白酶水解水解部位在重鏈鏈間二硫鍵的近氨基端。水解為2個抗原結合片段（fragmentofantigenbinding，F(xiàn)ab）和1個可結晶片段（fragmentcrystallizable，F(xiàn)c）。木瓜蛋白酶水解92胃蛋白酶水解部位在重鏈鏈間二硫鍵的近羧基端。水解為1個具有雙價活性的抗原結合片段F(ab’)2和多個沒有功能的片段（pFc’）。胃蛋白酶93注射破傷風抗毒素之前需要先做皮試，為什么？抗毒素可以中和毒素抗毒素是動物血清，對人來說是抗原物質(zhì)，重復注射會引起超敏反應胃蛋白酶水解片段（pFc′）抗原性消失應用何種酶水解抗毒素可以防止超敏反應，為什么?緊急預防破傷風需要注射破傷風抗毒素，為什么？注射破傷風抗毒素之前抗毒素可以中和毒素抗毒素是動物血清，對人94第二節(jié)抗體的異質(zhì)性抗體異質(zhì)性指抗體在結構和功能上差異的總和。第二節(jié)抗體的異質(zhì)性抗體異質(zhì)性95（一）免疫球蛋白的分類類及亞類根據(jù)Ig重鏈C區(qū)抗原特異性不同，可將其分為γ、α、μ、δ、ε五類，對應的免疫球蛋白為IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。同一類中，根據(jù)重鏈免疫原性及二硫鍵數(shù)目和位置不同，又分為亞類。如IgG有4個亞類，IgA有2個，IgM有2個等。（一）免疫球蛋白的分類類及亞類96型及亞型根據(jù)輕鏈C區(qū)抗原特異性不同，可將其分為κ型和λ型。同一型中，根據(jù)輕鏈C區(qū)N端氨基酸序列差異，又分可為亞型。型及亞型97（二）抗體的多樣性外源性抗原分子結構復雜，可含多種不同表位。每一種抗原表位可誘導產(chǎn)生一種特異性抗體。因此，形成抗體的多樣性。（二）抗體的多樣性外源性抗原分子結構復雜，可含多種不同表位。98（三）免疫球蛋白的血清型同種型指同一種屬所有個體Ig分子共有抗原特異性標志，為種屬型標志，位于IgC區(qū)。同種異型指同一種屬不同個體間Ig分子所具有的不同抗原特異性標志，為個體型標志，位于IgC區(qū)。獨特型指每個Ig分子所特有的抗原特異性標志，其表位又稱為獨特位，存在于IgV區(qū)。（三）免疫球蛋白的血清型同種型99最新02免疫球蛋白課件100第三節(jié)免疫球蛋白的功能第三節(jié)免疫球蛋白的功能101V區(qū)的功能特異性識別和結合抗原:中和毒素,阻斷病原體入侵;通過其C區(qū)而發(fā)揮作用.C區(qū)的功能激活補體細胞親嗜性調(diào)理作用抗體依賴細胞介導的細胞毒作用（ADCC）介導Ⅰ型超敏反應V區(qū)的功能102VL+VH功能區(qū)：抗原結合部位VL+VH功能區(qū)：抗原結合部位103中和毒素中和毒素104中和病毒中和病毒105中和細菌中和細菌106激活補體激活補體107最新02免疫球蛋白課件108

IgG類抗體與靶細胞表面抗原特異性結合，效應細胞（NK細胞、巨噬細胞、中性粒細胞）借助所表達的IgGFcR與靶細胞表面IgG的Fc段結合，從而殺傷靶細胞IgG類抗體與靶細胞表面抗原特異性結合，效應細胞（109動畫演示ADCC作用動畫演示ADCC作用110介導Ⅰ型超敏反應介導Ⅰ型超敏反應111最新02免疫球蛋白課件112第四節(jié)各類免疫球蛋白的特性和功能第四節(jié)各類免疫球蛋白的特性和功能113IgG血清中的主要抗體成分（75-80%）；半壽期長（20-23天）；出生后3個月開始合成，3-5歲接近成人水平；多數(shù)抗菌、抗病毒、抗毒素抗體均屬IgG類是唯一能通過胎盤的Ig，發(fā)揮自然被動免疫功能；具有活化補體經(jīng)典途徑的能力（IgG3>IgG1>IgG2）；具有調(diào)理作用、ADCC作用和結合SPA等；參與Ⅱ型、Ⅲ型超敏反應，某些自身免疫病的抗體也屬IgG。IgG血清中的主要抗體成分（75-80%）；半壽期長（20-114最新02免疫球蛋白課件115IgM為五聚體，分子量最大，稱為巨球蛋白（macroglobulin）；個體發(fā)育中最先出現(xiàn)的Ig，胚胎晚期即能產(chǎn)生，臍帶血IgM增高提示胎內(nèi)感染（如風疹病毒、巨細胞病毒感染等）；抗原初次刺激機體時，是體內(nèi)最先產(chǎn)生的Ig；血清IgM升高說明有近期感染；有強大激活補體能力和調(diào)理作用，在機體早期免疫防御中具有重要作用；天然血型抗體是IgM；膜表面IgM是B細胞抗原識別受體的主要成分，未成熟B細胞只表達mIgM，。IgM為五聚體，分子量最大，稱為巨球蛋白（macroglob116最新02免疫球蛋白課件117IgA分為單體的血清型和二聚體的分泌型IgA；分泌型IgA主要由黏膜相關淋巴組織產(chǎn)生，存在于唾液、淚液、乳汁及呼吸道、消化道、泌尿道的分泌液中和黏膜表面，是機體黏膜局部抗感染免疫的重要因素。初乳中的sIgA可對嬰幼兒發(fā)揮自然被動免疫作用調(diào)理吞噬、中和毒素IgA分為單體的血