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文檔簡介
艾滋病實(shí)驗(yàn)室檢查演示文稿第一頁,共十八頁。優(yōu)選艾滋病實(shí)驗(yàn)室檢查第二頁,共十八頁。3實(shí)驗(yàn)室檢查第三頁,共十八頁。4免疫學(xué)檢測AIDS患者正常(×109/L)CD4<0.21(0.8~1.2)CD4/CD8<11.2~2.1淋巴細(xì)胞總數(shù)<12~3流式細(xì)胞儀測定第四頁,共十八頁。5血清學(xué)檢測(1)HIV抗體的初篩試驗(yàn)——ELISA(酶聯(lián)免疫試驗(yàn))第五頁,共十八頁。6血清學(xué)檢測(2)HIV抗體的確證試驗(yàn)——Westernblot(免疫印跡試驗(yàn))第六頁,共十八頁。7血清學(xué)檢測(3)HIV抗原檢測——ELISA夾心法測定p24抗原敏感性很高(7~10pg/ml)特異性稍差(可有假陽性)第七頁,共十八頁。8分子生物學(xué)檢測(1)HIVRNA檢測—RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng))PCR:高溫變性(94℃)→低溫退火(55℃)→適溫延伸(72℃);經(jīng)25~30個(gè)循環(huán),成倍數(shù)擴(kuò)增熒光定量PCR:比常規(guī)PCR多一個(gè)寡聚核苷酸探針(帶一個(gè)熒光發(fā)光分子和一個(gè)熒光淬滅分子)應(yīng)用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血漿中的病毒RNA第八頁,共十八頁。9分子生物學(xué)檢測(2)淋巴細(xì)胞HIVRNA檢測——Northern印跡雜交(Northernblot)
原理:RNA片段經(jīng)電泳分離,從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜,再用探針雜交第九頁,共十八頁。10分子生物學(xué)檢測(3)HIV變異株檢測——Sanger測序法
原理:核酸擴(kuò)增時(shí),核苷酸在某一固定點(diǎn)開始,隨機(jī)在某一特定的堿基處終止,產(chǎn)生A、T、C、G四組不同長度的一系列核苷酸,通過在尿素變性的PAGE膠上電泳,獲得DNA序列第十頁,共十八頁。11病毒檢測血漿、單核細(xì)胞、腦脊液可分離出HIV操作復(fù)雜,主要用于科研第十一頁,共十八頁。12診斷第十二頁,共十八頁。13診斷原則流行病學(xué)史:有靜脈注射毒品史;多個(gè)性伴和不潔性生活史;輸入未經(jīng)HIV抗體檢測的血液和血制品史;HIV抗體陽性所生的子女;其它(如職業(yè)暴露或醫(yī)源性感染史)。臨床表現(xiàn):
高危對象出現(xiàn)上感樣及單核細(xì)胞增多癥樣表現(xiàn),頸、腋及枕部淋巴結(jié)腫大,肝脾腫大,可考慮急性HIV感染。無癥狀期、艾滋病期臨床表現(xiàn)。
實(shí)驗(yàn)室檢查:①HIV抗體陽性,并經(jīng)確證試驗(yàn)確認(rèn)。②CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少。③HIVRNA和P24抗原的檢測有助于早期診斷新生兒的HIV感染。第十三頁,共十八頁。14診斷標(biāo)準(zhǔn)急性期
★流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性
★僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽性無癥狀期
★流行病學(xué)史、HIV抗體陽性
★僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體陽性
第十四頁,共十八頁。15診斷標(biāo)準(zhǔn)艾滋病期
★
流行病學(xué)史,HIV抗體陽性,臨床表現(xiàn)有下列一項(xiàng)或以上:1.短期(6個(gè)月內(nèi))體重下降10%以上;2.咳嗽或腹瀉超過4周;3.持續(xù)或間歇發(fā)熱超過4周;4.全身淋巴結(jié)腫大;5.反復(fù)帶狀皰疹或慢性播散性HSV感染;6.口咽念珠菌病;7.全身搔癢性皮炎;8.反復(fù)發(fā)生的敗血癥;9.深部真菌感染,馬爾尼非青霉菌;10.肺孢子蟲肺炎;11.活動性巨細(xì)胞病毒感染;12.弓形蟲腦病。13.反復(fù)發(fā)生、難治性肺部感染或進(jìn)展迅速的活動性結(jié)核??;14.中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損、占位性病變或中、青年癡呆癥;15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。ⅠⅠ第十五頁,共十八頁。16診斷標(biāo)準(zhǔn)
★HIV抗體陽性
CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)<200/mm3無上述表現(xiàn)或癥狀第十六頁,共十八頁。17鑒別診斷原發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少癥
無HIV感染流行病學(xué)資料,HIV-1和HIV-2病原學(xué)檢測陰性。繼發(fā)性
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