血球計數板使用課件

血球計數板使用一、血球計數板的規(guī)格

人教版建議使用2mm×2mm×0.1mm方格蘇教版推薦使用1mm×1mm×0.1mm方格

計數室計數室兩種規(guī)格

1．16×25型的計數板將計數室放大，可見它含16中格，一般取四角：1、4、13、16四個中方格（100個小方格）計數。細胞個數／1mL＝100個小方格細胞總數/100×400×10000×稀釋倍數二、血球計數板的使用方法步驟

1．鏡檢計數室。在加樣前，先對計數板的計數室進行鏡檢。若有污物，則需清洗，吹干后才能進行計數；2．加樣品。將清潔干燥的血球計數板的計數室上加蓋專用的蓋玻片，用吸管吸取稀釋后的酵母菌懸液，滴于蓋玻片邊緣，讓培養(yǎng)液自行緩緩滲入，一次性充滿計數室，防止產生氣泡，充入細胞懸液的量以不超過計數室臺面與蓋玻片之間的矩形邊緣為宜。多余培養(yǎng)液可用濾紙吸去；3．計數。稍待片刻（約5min），待酵母菌細胞全部沉降到計數室底部后，將計數板放在載物臺的中央，先在低倍鏡下找到計數室所在位置后，再轉換高倍鏡觀察、計數并記錄。三、血球計數板的使用注意事項1．每天定時取樣計數，記錄數據。2．從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數之前，要將試管輕輕震蕩幾下，這樣使酵母菌分布均勻。3．如果一個小方格內酵母菌過多，難以數清，應當對培養(yǎng)液進行稀釋以便于酵母菌的計數。

具體方法是：搖勻試管，取1mL酵母菌培養(yǎng)液，加入成倍的無菌水稀釋，稀釋n倍后，再用血球計數板計數，所得數值乘以稀釋倍數。以每小方格內含有4—5個酵母細胞為宜。特別是在培養(yǎng)后期的樣液需要稀釋后計數。4．活酵母有芽殖現象，若芽體達到母細胞大小的一半時，即可作為兩個菌體計數，若芽體小于母細胞一半時為1個酵母細胞。5．對于壓在方格界線上的酵母菌應當計數同側相鄰兩邊上的菌體數，一般可采取“數上線不數下線，數左線不數右線”的原則處理，另兩邊不計數。6．計數一個樣品要從兩個計數室中計得的平均數值來計算，對每個樣品可計數三次，再取其平均值。計數時應不時調節(jié)焦距，才能觀察到不同深度的菌體。按公式計算每1ml（或10mL）菌液中所含的酵母菌個數。7．血球計數板的清潔

血球計數板使用后，用自來水沖洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹風機吹干，或用95%的乙醇、無水乙醇、丙酮等有機溶劑脫水使其干燥。通過鏡檢觀察每小格內是否殘留菌體或其他沉淀物。若不干凈，則必須重復清洗直到干凈為止。例題例1：用血球計數板對培養(yǎng)液中酵母菌進行計數，若計數室為1mm×1mm×0.1mm方格，由400個小方格組成，如果一個小方格內酵母菌過多，難以計數，應先

后再計數。若多次重復計數后，算得每個小方格中平均有5個酵母菌，則10mL該培養(yǎng)液中酵母菌總數有

個。稀釋

2×108

解析：根據公式：5×400×10000×10＝2×108

例3（2008江蘇高考31．）（4）在整個實驗過程中，直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計數的做法是錯誤的，正確的方法是

_和

。（5）實驗結束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數板的做法是錯誤的，正確的方法

。搖勻培養(yǎng)液后再取樣

培養(yǎng)后期的樣液稀釋后再計數

浸泡和沖洗

1．（7分）酵母菌是探究細胞呼吸方式、種群數量變化的理想實驗材料。血球計數板是酵母菌計數的常用工具。結合所學知識，回答下列問題：（1）酵母菌與大腸桿菌相比，在結構上的主要區(qū)別是酵母菌具有

。（2）酵母菌常被用來探究細胞呼吸的方式，是因為它

。以核膜為界限的細胞核

在有氧和無氧條件下都能生存（屬于兼性厭氧菌）

（4）某同學為探究溫度對酵母菌種群數量變化的影響，得到上圖2所示結果，由此并不能得出酵母菌的最適培養(yǎng)溫度為25℃。為了確定培養(yǎng)酵母菌的最適溫度，需要進一步實驗，寫出實驗設計思路：

。在25℃左右再設計以上的溫度梯度

2.在生態(tài)學中，通常要從種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)等三個層次開展研究。⑴在“探究培養(yǎng)液中酵母菌數量的動態(tài)變化”實驗中，用血球計數板進行抽樣檢測。下圖是血球計數板放大圖，第一次抽樣檢測結果是4個中方格中共有40個酵母菌，則每毫升菌液中含有酵母菌

個。所計算出的酵母菌是

（從以下選項中選擇）。A.活的菌數B.死的菌數C.總菌數D.新增殖的菌1.6×106C⑵“離離原上草，一歲一枯榮。野火燒不盡，春風吹又生。遠芳侵古道，晴翠接荒城?！痹娭锌审w現出群落的

現象。研究群落通常要研究其豐富度，探究土壤中小動物優(yōu)勢種的種類及豐富度，隨機取樣時常用的方法是

取樣法。⑶人工設計并制作生態(tài)缸，目的是觀察這一人工微生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性。在構建時，是依據生態(tài)系統(tǒng)原理，在有限的空間內把生態(tài)系統(tǒng)具有的