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2023學(xué)年高考生物模擬試卷請(qǐng)考生注意:1.請(qǐng)用2B鉛筆將選擇題答案涂填在答題紙相應(yīng)位置上,請(qǐng)用0.5毫米及以上黑色字跡的鋼筆或簽字筆將主觀題的答案寫(xiě)在答題紙相應(yīng)的答題區(qū)內(nèi)。寫(xiě)在試題卷、草稿紙上均無(wú)效。2.答題前,認(rèn)真閱讀答題紙上的《注意事項(xiàng)》,按規(guī)定答題。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.果蠅的眼色有一種隱性突變體——猩紅眼(r1r1)。研究者獲得了兩個(gè)新的朱砂眼隱性突變體——朱砂眼a(r2r2)和朱砂眼b(r3r3),做了如下雜交實(shí)驗(yàn)。據(jù)此分析不合理的是組別親本組合F1Ⅰ朱砂眼a×猩紅眼野生型Ⅱ朱砂眼a×朱砂眼b朱砂眼Ⅲ朱砂眼b×猩紅眼野生型A.r1和r2不是等位基因B.r2和r3是等位基因C.r1和r3一定位于非同源染色體上D.III組F1的自交后代一定出現(xiàn)性狀分離2.在培養(yǎng)基中加入青霉素培養(yǎng)金黃色葡萄球菌,并逐漸提高青霉素濃度,可得到抗藥性不斷增強(qiáng)的金黃色葡萄球菌品系。下列敘述正確的是()A.金黃色葡萄球菌的抗藥性受多對(duì)等位基因控制B.全部抗藥性基因構(gòu)成了金黃色葡萄球菌品系的基因庫(kù)C.青霉素使金黃色葡萄球菌的抗藥性基因不斷突變加強(qiáng)D.金黃色葡萄球菌抗藥性增強(qiáng)過(guò)程發(fā)生了多個(gè)突變基因的重組3.下列有關(guān)遺傳基本規(guī)律的敘述,錯(cuò)誤的是()A.孟德?tīng)柾ㄟ^(guò)測(cè)交實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證其假說(shuō)是否正確B.孟德?tīng)柼岢龅摹斑z傳因子”后來(lái)被命名為“基因”C.F1高莖豌豆自交所得F2中出現(xiàn)了高莖豌豆和矮莖豌豆,這是基因重組的結(jié)果D.通過(guò)單倍體育種的方法可以驗(yàn)證分離定律和自由組合定律4.下圖所示為人體細(xì)胞的部分生命歷程,Ⅰ-Ⅳ代表細(xì)胞的生命現(xiàn)象,細(xì)胞1具有水分減少、代謝減慢的特征,細(xì)胞2在適宜條件下可以無(wú)限增殖。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A.成體干細(xì)胞經(jīng)過(guò)Ⅰ過(guò)程形成漿細(xì)胞等,體現(xiàn)了細(xì)胞的全能性B.Ⅰ-Ⅲ過(guò)程中,遺傳物質(zhì)沒(méi)有發(fā)生改變的是Ⅰ過(guò)程和Ⅱ過(guò)程C.效應(yīng)T細(xì)胞經(jīng)過(guò)Ⅳ過(guò)程使細(xì)胞1和細(xì)胞2凋亡,屬于細(xì)胞免疫D.細(xì)胞2與正常肝細(xì)胞相比,細(xì)胞膜上的糖蛋白減少,細(xì)胞間黏著性下降5.已知某種伴X染色體隱性遺傳病是由一對(duì)等位基因控制的,患者在幼年期均會(huì)死亡。不考慮突變,下列關(guān)于該遺傳病的敘述,錯(cuò)誤的是A.患者的母親都攜帶該遺傳病的致病基因B.該遺傳病屬于單基因遺傳病,有男患者,也有女患者C.調(diào)查該遺傳病的發(fā)病率應(yīng)在自然人群中隨機(jī)取樣D.該遺傳病的致病基因的頻率隨著世代的延續(xù)而降低6.下圖為甲、乙兩種遺傳病的遺傳系譜圖,其中Ⅱ-4不含甲病治病基因,乙病在人群中的發(fā)病率為1/625。下列敘述正確的是()A.乙病為伴X染色體隱性遺傳病B.Ⅲ-10的致病基因來(lái)自Ⅰ-1C.若Ⅱ-5和Ⅱ-6再生一個(gè)孩子,只患一種病的概念為5/8D.若Ⅲ-11與某正常男性婚配,后代患兩病的概率為1/3127.蛋白質(zhì)是細(xì)胞完成生命活動(dòng)的主要承擔(dān)者。下列關(guān)于蛋白質(zhì)的敘述,正確的是()A.蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所是核糖體和溶酶體B.胰島素分子的基本單位是氨基酸C.細(xì)胞免疫主要依賴(lài)于抗體來(lái)實(shí)現(xiàn)D.淀粉酶遇雙縮脲試劑呈現(xiàn)磚紅色8.(10分)美國(guó)研究人員發(fā)現(xiàn)了一種含有集光綠色體的喜氧罕見(jiàn)細(xì)菌,每個(gè)集光綠色體含有大量葉綠素,使得細(xì)菌能夠同其他生物爭(zhēng)奪陽(yáng)光來(lái)維持生存。下列有關(guān)該菌的敘述,正確的是A.該菌的基本結(jié)構(gòu)包括細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核B.該菌是好氧細(xì)菌,其生命活動(dòng)所需能量主要由線粒體提供C.由該細(xì)菌可知,細(xì)菌不一定都是分解者,也可以是生產(chǎn)者D.該菌是光能自養(yǎng)細(xì)菌,其光合作用的場(chǎng)所是葉綠體二、非選擇題9.(10分)下圖是中心法則及其發(fā)展圖解,反映了生物體內(nèi)遺傳信息的流向,回答下列問(wèn)題:(1)在線粒體和葉綠體中能夠發(fā)生的生理過(guò)程有________(填序號(hào)),④過(guò)程需要的一種特殊的酶是_______。(2)與③過(guò)程相比較,②過(guò)程特有的堿基配對(duì)方式是________。(3)若某基因編碼的氨基酸序列為“色氨酸—苯丙氨酸—……—.絲氨酸—半胱氨酸”,根據(jù)該氨基酸序列及密碼子表________(填“能”或“不能”)推測(cè)出該基因的堿基序列,理由是________________。10.(14分)Rag2基因缺失小鼠不能產(chǎn)生成熟的淋巴細(xì)胞??蒲腥藛T利用胚眙干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療,其技術(shù)流程如圖(圖中數(shù)字序號(hào)表示的是相關(guān)過(guò)程)。請(qǐng)回答:(1)過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的卵母細(xì)胞中,接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于__________________時(shí)期。(2)過(guò)程②利用的技術(shù)是____________________,當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí),可從其_________分離出ES細(xì)胞。(3)過(guò)程③中獲取的目的基因是____________________,若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,需要構(gòu)建_______________________,構(gòu)建之前可以根據(jù)_______________________設(shè)計(jì)引物,利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因,可采用______________技術(shù)。(4)按此方法和圖示技術(shù)流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的酶有___________和耐高溫的DNA聚合酶(Taq酶)等。通測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況,可提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì),用__________________進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。11.(14分)類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種自身免疫病,致殘性強(qiáng)。研究表明,該病的病理改變與腫瘤壞死因子-α(TNF-α)密切相關(guān),而一種人鼠嵌合的抗TNF-α單克隆抗體能有效治療RA。下圖為該單克隆抗體制備過(guò)程示意圖。(1)圖中的抗原A是______________,常用的促融劑是_______________。細(xì)胞融合完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞。體系中出現(xiàn)多種類(lèi)型細(xì)胞的原因是________________。(2)HAT培養(yǎng)基的作用是經(jīng)選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細(xì)胞,之后還需要進(jìn)行__________培養(yǎng)和抗體檢測(cè),經(jīng)多次篩選,就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。最后獲得的雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的原因是___________________。(3)單克隆抗體的特點(diǎn)是__________________。單克隆抗體的制備涉及細(xì)胞工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和____________技術(shù)。(4)單克隆抗體主要的用途有:_______________________________(至少答兩點(diǎn))。12.利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中,然后通過(guò)核移植技術(shù)培育基因編輯豬,可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。下圖為基因編輯豬培育流程,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:(1)對(duì)1號(hào)豬使用_________處理,使其超數(shù)排卵,收集并選取處在__________時(shí)期的卵母細(xì)胞用于核移植。(2)采集2號(hào)豬的組織塊,用__________處理獲得分散的成纖維細(xì)胞,放置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中CO2的作用是________。(3)為獲得更多基因編輯豬,可在胚胎移植前對(duì)胚胎進(jìn)行__________。產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來(lái)自于_________號(hào)豬。(4)為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號(hào)豬并正常表達(dá),可采用的方法有__________(填序號(hào))。①DNA測(cè)序②染色體倍性分析③體細(xì)胞結(jié)構(gòu)分析④抗原—抗體雜交
參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】
基因分離定律的實(shí)質(zhì):等位基因隨同源染色體的分開(kāi)而分離;時(shí)間:減數(shù)第一次分裂后期。基因自由組合定律的實(shí)質(zhì):非同源染色體上的非等位基因自由組合;時(shí)間:減數(shù)第一次分裂后期。【詳解】A、根據(jù)第Ⅰ組雜交朱砂眼a和猩紅眼雜交,子代全為野生型,說(shuō)明朱砂眼a和猩紅眼是由不同的基因控制的,第Ⅰ組朱砂眼a基因型為R1R1r2r2,第Ⅲ組猩紅眼基因型為r1r1R2R2,子代全為R1r1R2r2,表現(xiàn)為野生型,因此r1和r2不是等位基因,A正確;B、根據(jù)第Ⅱ組雜交結(jié)果,朱砂眼a和朱砂眼b雜交,子代全為朱砂眼,說(shuō)明朱砂眼ab實(shí)際上是一種性狀,因此r2和r3是等位基因,B正確;C、根據(jù)第Ⅲ組雜交朱砂眼b和猩紅眼雜交,子代全為野生型,說(shuō)明了r1和r3是非等位基因,但由于一條染色體上有多個(gè)基因,所以r1和r3可能在一對(duì)同源染色體上,C錯(cuò)誤;D、根據(jù)C項(xiàng)的分析親代Ⅲ組雜交朱砂眼b的基因型為R1R1r3r3,猩紅眼的基因型為r1r1R3R3,所以子代全為R1r1R3r3,自交后代一定出現(xiàn)性狀分離,D正確。故選C?!军c(diǎn)睛】本題要深刻理解基因分離定律和自由組合定律的實(shí)質(zhì),如果是由1對(duì)基因控制的則子代與親代相同,如果是兩對(duì)基因則為野生型。2、D【解析】
金黃色葡萄球菌屬于原核生物,沒(méi)有染色體,不能進(jìn)行有性生殖和減數(shù)分裂,所以其抗藥性差異的主要來(lái)源是基因突變;金黃色葡萄球菌存在著各種各樣的基因突變,青霉素對(duì)金黃色葡萄球菌產(chǎn)生的抗藥性變異進(jìn)行選擇,最終得到抗藥性不斷增強(qiáng)的金黃色葡萄球菌品系?!驹斀狻緼、等位基因位于同源染色體的同一位置上,而金黃色葡萄球菌沒(méi)有染色體,A錯(cuò)誤;B、金黃色葡萄球菌品系的基因庫(kù)包括其含有的抗藥性基因在內(nèi)的所有基因,B錯(cuò)誤;C、青霉素對(duì)金黃色葡萄球菌突變產(chǎn)生的抗藥性基因進(jìn)行選擇,C錯(cuò)誤;D、金黃色葡萄球菌抗藥性增強(qiáng)過(guò)程發(fā)生了多個(gè)突變基因的重組,D正確。故選D。3、C【解析】
測(cè)交的定義是孟德?tīng)栐隍?yàn)證自己對(duì)性狀分離現(xiàn)象的解釋是否正確時(shí)提出的,為了確定子一代是雜合子還是純合子,讓子一代與隱性純合子雜交,這就叫測(cè)交。在實(shí)踐中,測(cè)交往往用來(lái)鑒定某一顯性個(gè)體的基因型和它形成的配子類(lèi)型及其比例,測(cè)交還可以用來(lái)推測(cè)待檢個(gè)體產(chǎn)生的配子類(lèi)型及比例。【詳解】A、孟德?tīng)柾ㄟ^(guò)測(cè)交實(shí)驗(yàn),對(duì)其假說(shuō)進(jìn)行了驗(yàn)證,A正確;B、孟德?tīng)柼岢龅摹斑z傳因子”后來(lái)被丹麥生物學(xué)家約翰遜命名為“基因”,B正確;C、F1高莖豌豆自交所得F2中出現(xiàn)了高莖豌豆和矮莖豌豆,原因是等位基因分離產(chǎn)生兩種類(lèi)型的配子經(jīng)過(guò)雌雄配子隨機(jī)結(jié)合出現(xiàn)的,不是基因重組的結(jié)果,C錯(cuò)誤;D、通過(guò)單倍體育種的方法,根據(jù)獲得的純合子的表現(xiàn)類(lèi)型及比例可以驗(yàn)證分離定律和自由組合定律,D正確。故選C。4、A【解析】
據(jù)圖分析,圖中過(guò)程Ⅰ表示細(xì)胞的分裂和分化;由于“細(xì)胞1具有水分減少、代謝減慢的特征”,因此過(guò)程Ⅱ表示細(xì)胞的衰老;由于“細(xì)胞2在適宜條件下可以無(wú)限增殖”,說(shuō)明過(guò)程Ⅲ表示細(xì)胞癌變;過(guò)程Ⅳ表示細(xì)胞免疫過(guò)程中的效應(yīng)階段?!驹斀狻緼、成體干細(xì)胞經(jīng)過(guò)Ⅰ過(guò)程形成漿細(xì)胞等的過(guò)程發(fā)生了細(xì)胞的分裂和分化,沒(méi)有形成完整的個(gè)體,而已經(jīng)分化的細(xì)胞必需要發(fā)育為完整個(gè)體才能夠體現(xiàn)細(xì)胞的全能性,A錯(cuò)誤;B、細(xì)胞分裂和分化、細(xì)胞衰老、細(xì)胞癌變過(guò)程中,只有細(xì)胞癌變過(guò)程(Ⅲ)中細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生改變,B正確;C、效應(yīng)T細(xì)胞經(jīng)過(guò)IV過(guò)程使細(xì)胞1和細(xì)胞2凋亡,屬于細(xì)胞免疫,C正確;D、細(xì)胞2為癌細(xì)胞,與正常肝細(xì)胞相比,細(xì)胞膜上的糖蛋白減少,細(xì)胞間黏著性下降,D正確。故選A?!军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是了解細(xì)胞的生命歷程以及免疫調(diào)節(jié)的有關(guān)知識(shí),能夠根據(jù)題干和題圖信息確定圖中細(xì)胞的類(lèi)型以及各個(gè)數(shù)字表示的生理變化。5、B【解析】
伴X隱性病的遺傳特點(diǎn):母親患病,兒子一定患??;女兒患病,父親一定患病。基因頻率在沒(méi)有選擇,沒(méi)有突變的條件下是不會(huì)發(fā)生改變的?!驹斀狻緼、該遺傳病為伴X染色體隱性遺傳病,患者在幼年期均會(huì)死亡,故男性患者的父親一定正常,而其母親是該遺傳病致病基因的攜帶者,A正確;B、假設(shè)有女性患者,那么女性患者的父親也一定是患者,但患者在幼年期均會(huì)死亡,因此,假設(shè)錯(cuò)誤,即不存在女性患者,B錯(cuò)誤;C、調(diào)査該遺傳病的發(fā)病率應(yīng)在自然人群中隨機(jī)取樣,C正確;D、由于患者都是男性且患者在幼年期均會(huì)死亡,致使致病基因的頻率隨著世代的延續(xù)而降低,D正確。故選B?!军c(diǎn)睛】本題主要考查伴性遺傳及基因頻率的推算,掌握伴X隱性病的遺傳特點(diǎn)和基因頻率的相關(guān)計(jì)算。6、D【解析】
據(jù)圖分析,Ⅱ-3、Ⅱ-4不患甲病,其兒子Ⅲ-7患甲病,說(shuō)明甲病是隱性遺傳病,又因?yàn)棰?4不含甲病治病基因,因此甲病為伴X隱性遺傳病;Ⅱ-5、Ⅱ-6不患乙病,其女兒Ⅲ-9患乙病,說(shuō)明乙病為常染色體隱性遺傳病;由于乙病在人群中的發(fā)病率為1/625,假設(shè)乙病致病基因?yàn)閎,則b的基因頻率為1/25,B的基因頻率為24/25,因此正常人群中雜合子的概率=2Bb÷(2Bb+BB)=2b÷(2b+B)=1/13?!驹斀狻緼、根據(jù)以上分析已知,乙病為常染色體隱性遺傳病,A錯(cuò)誤;B、Ⅲ-10患甲病,而甲病為伴X隱性遺傳病,則來(lái)自于Ⅱ-5,而Ⅱ-5的致病基因又來(lái)自于Ⅰ-2,B錯(cuò)誤;C、假設(shè)甲病致病基因?yàn)閍,則Ⅱ-5基因型為AaXBXb,Ⅱ-6AaXbY,后代甲病發(fā)病率為1/4,乙病發(fā)病率為1/2,因此后代只患一種病的概率=1/4+1/2-1/4×1/2×2=1/2,C錯(cuò)誤;D、Ⅲ-11基因型為2/3AaXBXb,正常男性為甲病致病基因攜帶者(AaXBY)的概率為1/13,兩者婚配,后代患甲病的概率為2/3×1/13×1/4=1/78,患乙病的概率為1/4,因此后代患兩病的概率=1/78×1/4=1/312,D正確。故選D。7、B【解析】【分析】試劑成分實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象常用材料蛋白質(zhì)雙縮脲試劑
A:0.1g/mLNaOH紫色大豆、蛋清B:0.01g/mLCuSO4脂肪蘇丹Ⅲ橘黃色花生蘇丹Ⅳ紅色還原糖
斐林試劑、班氏(加熱)甲:0.1g/mLNaOH磚紅色沉淀蘋(píng)果、梨、白蘿卜乙:0.05g/mLCuSO4淀粉碘液I2藍(lán)色馬鈴薯構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸,其結(jié)構(gòu)通式是,即每種氨基酸分子至少都含有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基,且都有一個(gè)氨基和一個(gè)羧基連接在同一個(gè)碳原子上,氨基酸種類(lèi)的不同在于R基的不同。因?yàn)榻M成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類(lèi)、數(shù)目、排列次序不同,肽鏈的空間結(jié)構(gòu)千差萬(wàn)別,因此蛋白質(zhì)分子的結(jié)構(gòu)具有多樣性。【詳解】A、蛋白質(zhì)合成場(chǎng)所是核糖體,A錯(cuò)誤;B、胰島素分子是蛋白質(zhì),其基本組成單位是氨基酸,B正確;C、細(xì)胞免疫主要依賴(lài)于效應(yīng)T細(xì)胞攻擊靶細(xì)胞來(lái)實(shí)現(xiàn),C錯(cuò)誤;D、淀粉酶的化學(xué)本質(zhì)是蛋白質(zhì),遇雙縮脲試劑呈現(xiàn)紫色,D錯(cuò)誤。故選B。8、C【解析】
根據(jù)題意,該細(xì)菌含有集光綠色體,每個(gè)集光綠色體含有大量葉綠素,故該細(xì)菌可進(jìn)行光合作用,但細(xì)菌屬于原核生物,無(wú)細(xì)胞核等結(jié)構(gòu)。【詳解】A、細(xì)菌屬于原核生物,原核細(xì)胞沒(méi)有細(xì)胞核,A錯(cuò)誤;B、細(xì)菌屬于原核生物,無(wú)線粒體,B錯(cuò)誤;C、據(jù)題意可知,該細(xì)菌含葉綠素,能進(jìn)行光合作用,屬于自養(yǎng)細(xì)菌,故細(xì)菌不一定都是分解者,也可以是生產(chǎn)者,C正確;D、細(xì)菌沒(méi)有葉綠體,之所以能進(jìn)行光合作用,是因?yàn)榧?xì)胞中含有葉綠素,D錯(cuò)誤。故選C。二、非選擇題9、①②③逆轉(zhuǎn)錄酶T-A不能密碼子具有簡(jiǎn)并性,由氨基酸序列不能確定mRNA的堿基序列,也就推測(cè)不出基因的堿基序列【解析】
試題分析:據(jù)圖分析,圖示中心法則反映了生物體內(nèi)遺傳信息的傳遞過(guò)程,其中①表示DNA的自我復(fù)制,②表示轉(zhuǎn)錄,③表示翻譯,④表示逆轉(zhuǎn)錄,⑤表示RNA的自我復(fù)制?!驹斀狻浚?)線粒體和葉綠體是半自主性細(xì)胞器,有獨(dú)立的遺傳物質(zhì),能夠發(fā)生DNA的自我①?gòu)?fù)制、②轉(zhuǎn)錄、③翻譯,④表示逆轉(zhuǎn)錄,需要逆轉(zhuǎn)錄酶;(2)②表示轉(zhuǎn)錄,特有的堿基配對(duì)方式是T-A;(3)由于密碼子具有簡(jiǎn)并性,即多個(gè)密碼子可能對(duì)應(yīng)1個(gè)氨基酸,所以由氨基酸序列不能確定mRNA的堿基序列,也就推測(cè)不出基因的堿基序列?!军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握中心法則的基本內(nèi)容,能夠根據(jù)箭頭、模板和產(chǎn)物判斷各個(gè)數(shù)字代表的遺傳學(xué)過(guò)程。10、MⅡ中早期胚胎培養(yǎng)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(正常的)Rag2基因含(正常的)Rag2基因的基因表達(dá)載體(正常的)Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對(duì)序列或遺傳信息)DNA分子雜交限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和胰蛋白酶抗Rag2蛋白的抗體【解析】
題圖分析:圖示是利用胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)對(duì)Rag2基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療的過(guò)程圖解,其中①表示核移植過(guò)程,②表示早期胚胎培養(yǎng)過(guò)程,③表示采用基因工程技術(shù)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞。然后將改造后的受體細(xì)胞經(jīng)過(guò)培養(yǎng)之后回輸?shù)交蛉毕菪∈篌w內(nèi)獲得治療?!驹斀狻浚?)MII中期的卵母細(xì)胞含有細(xì)胞核全能性表達(dá)的物質(zhì)和環(huán)境條件,故接受細(xì)胞核的卵母細(xì)胞應(yīng)處于MII中期,即過(guò)程①將進(jìn)行培養(yǎng)的上皮細(xì)胞注入去核的處于MII中期的卵母細(xì)胞中。(2)過(guò)程②利用的技術(shù)是早期胚胎培養(yǎng),內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來(lái)發(fā)育成胚胎的各種組織,滋養(yǎng)層細(xì)胞將來(lái)發(fā)育成胎膜和胎盤(pán),故當(dāng)重組胚胎培養(yǎng)到囊胚期時(shí),可從其內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離出具有全能性的ES細(xì)胞。(3)根據(jù)題干信息可知,過(guò)程③中獲取的目的基因是(正常的)Rag2基因,若要將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,需要構(gòu)建含(正常的)Rag2基因的基因表達(dá)載體,構(gòu)建之前可以根據(jù)Rag2基因的脫氧核苷酸序列(或堿基對(duì)序列或遺傳信息)設(shè)計(jì)引物,利用PCR技術(shù)對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增。將目的基因?qū)隕S細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法,為了檢測(cè)ES細(xì)胞的DNA上是否插入了干擾素基因,可采用DNA分子雜交技術(shù)。(4)按此方法和圖示技術(shù)流程,完成Rag2基因缺失小鼠的基因治療涉及的技術(shù)包括基因工程、PCR技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),其中基因工程涉及的酶有限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶,動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)涉及的酶有胰蛋白酶,PCR技術(shù)涉及的酶有耐高溫DNA聚合酶(Taq酶)等。檢測(cè)Rag2基因的表達(dá)情況,可采用抗原一抗體雜交法,即提取治療后小鼠骨髓細(xì)胞的蛋白質(zhì),用抗Rag2蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。【點(diǎn)睛】熟知圖中個(gè)步驟的含義以及操作流程是解答本題的關(guān)鍵!掌握關(guān)于基因治療的各個(gè)環(huán)節(jié)的基礎(chǔ)知識(shí)是解答本題的另一關(guān)鍵!11、腫瘤壞死因子-α(或TNF-α)聚乙二醇(PEG)細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%克隆化培養(yǎng)每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只分泌一種特異性抗體特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)作為診斷試劑、用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物【解析】
單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對(duì)某一特定抗原的抗體。通常采用雜交瘤技術(shù)來(lái)制備,雜交瘤抗體技術(shù)是在細(xì)胞融合技術(shù)的基礎(chǔ)上,將具有分泌特異性抗體能力的效應(yīng)B細(xì)胞和具有無(wú)限繁殖能力的骨髓瘤細(xì)胞融合為雜交瘤細(xì)胞,雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生抗體,又能無(wú)限增殖。用具備這種特性的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)成細(xì)胞群,可制備針對(duì)一種抗原的特異性抗體即單克隆抗體。題圖分析,單抗制備過(guò)程為:將特定的抗原注射小鼠→篩選出產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞→誘導(dǎo)細(xì)胞融合→用HAT培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞→篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞→大規(guī)模培養(yǎng)獲得單克隆抗體。單克隆抗體典型優(yōu)點(diǎn)是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。
動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ),是單克隆抗體技術(shù)的基礎(chǔ)。單克隆抗體最廣泛的用途是作為診斷試劑,也可用于治療疾病、用于運(yùn)載藥物,主要是用于癌癥治療、也有少量是是用于其他治療的?!驹斀狻浚?)要制備抗TNF-a單克隆抗體需要給小鼠注射腫瘤壞死因子a(TNF-a),即圖中的抗原A。常用物理或化學(xué)方法促融,最常用的化學(xué)促融劑是聚乙二醇(PEG),細(xì)胞融合完成后,由于細(xì)胞融合是隨機(jī)的,且融合率達(dá)不到100%,所以細(xì)胞融合完成后,融合體系中除含有未融合的細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞外,可能還有骨髓瘤細(xì)胞自身融合細(xì)胞、淋巴細(xì)胞自身融合細(xì)胞。
(2)HAT培養(yǎng)基的作用是選擇性培養(yǎng)篩選出雜交瘤細(xì)胞,在抗體檢測(cè)之前需要進(jìn)行克隆化培養(yǎng),以增加雜交瘤細(xì)胞數(shù)量。經(jīng)多次篩選,就可獲得能分泌單一抗體的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞只能產(chǎn)生一種單一抗體的
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