微生物第七章-

第七章微生物的生長(zhǎng)及其控制第一節(jié)微生物生長(zhǎng)規(guī)律第二節(jié)影響微生物生長(zhǎng)的環(huán)境因素第三節(jié)微生物生長(zhǎng)的控制方法第一節(jié)微生物的生長(zhǎng)規(guī)律7.1.1微生物的培養(yǎng)和群體生長(zhǎng)7.1.2生物量測(cè)定方法7.1.3微生物的生長(zhǎng)規(guī)律7.1.4生長(zhǎng)參數(shù)和生長(zhǎng)過(guò)程控制7.1.5維持穩(wěn)定生長(zhǎng)的方法微生物的培養(yǎng)：在實(shí)驗(yàn)室或在工業(yè)上，使用培養(yǎng)基和培養(yǎng)容器，在特定培養(yǎng)工藝和培養(yǎng)條件下，人工培養(yǎng)微生物，獲得微生物菌體或代謝產(chǎn)物的過(guò)程；在培養(yǎng)過(guò)程中，微生物的個(gè)體生長(zhǎng)表現(xiàn)為細(xì)胞組分的均衡增加，細(xì)胞形態(tài)略有增大；微生物的繁殖導(dǎo)致個(gè)體數(shù)量或生物量有規(guī)律的增長(zhǎng)，表現(xiàn)為群體的生長(zhǎng)；群體生長(zhǎng)與培養(yǎng)條件（培養(yǎng)基和環(huán)境因素）密切相關(guān)；7.1.1微生物培養(yǎng)和群體生長(zhǎng)在人工培養(yǎng)條件下培養(yǎng)微生物，通過(guò)繁殖而得到的微生物群體稱為培養(yǎng)物（culture）；只有一種微生物的培養(yǎng)物，或者由單個(gè)細(xì)胞繁殖得到的微生物群體，稱為純培養(yǎng)物（pureculture），簡(jiǎn)稱純培養(yǎng)；微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)和工業(yè)發(fā)酵，一般都是純培養(yǎng)；微生物由于個(gè)體微小，很容易混雜，需要經(jīng)常性的進(jìn)行菌種純化，以獲得微生物的純培養(yǎng)；微生物的純培養(yǎng)平板單菌落分離法：使微生物的單細(xì)胞或單孢子充分分散，彼此分開，然后涂布在固體平面培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后長(zhǎng)出的單菌落，很可能是由一個(gè)細(xì)胞或孢子繁殖形成的純培養(yǎng)；平板劃線法分離法稀釋涂（倒）平板法顯微操縱器分離：借助顯微鏡和顯微操作工具，直接分離單細(xì)胞（單孢子），然后接種培養(yǎng)；純培養(yǎng)的分離方法用接種環(huán)取一環(huán)菌懸液或菌苔，在平板上劃線；每畫一組平行線，灼燒接種環(huán)一次；反復(fù)劃線、可拉出單細(xì)胞；平板劃線法分離法

稀釋涂（倒）平板法將待分離材料制備成懸液，使細(xì)胞或孢子充分分散；用10倍稀釋法稀釋，取適當(dāng)濃度的稀釋液，涂布平板或與培養(yǎng)基混合后倒平板：涂平板加菌懸液0.2mL倒平板加菌懸液1mL微生物的培養(yǎng)方法根據(jù)培養(yǎng)基物理狀態(tài)和培養(yǎng)規(guī)模，好氧微生物培養(yǎng)方式分為：固體斜面培養(yǎng)、固體平板培養(yǎng)、茄子瓶培養(yǎng)、大規(guī)模固體發(fā)酵；半固體試管培養(yǎng)；搖管培養(yǎng)、搖瓶培養(yǎng)、小型發(fā)酵罐培養(yǎng)、大規(guī)模深層攪拌液體發(fā)酵；實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)厭氧菌需要驅(qū)除和隔絕氧氣；工業(yè)厭氧液體發(fā)酵；在微生物生理代謝基礎(chǔ)研究，或者微生物工程應(yīng)用中，大多使用發(fā)酵罐（生物反應(yīng)器）進(jìn)行液體培養(yǎng)；分批培養(yǎng)（batchculture）：指恒定體積的液體培養(yǎng)，從接種開始，直到培養(yǎng)結(jié)束，在培養(yǎng)過(guò)程中不補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)，也不移出培養(yǎng)物；流加分批培養(yǎng)：在培養(yǎng)過(guò)程中，不斷流加營(yíng)養(yǎng)物，培養(yǎng)體積不斷增加；連續(xù)培養(yǎng)：在培養(yǎng)過(guò)程中，不斷流加營(yíng)養(yǎng)物，同時(shí)不斷移出培養(yǎng)物；發(fā)酵罐微生物液體培養(yǎng)方式微生物工業(yè)發(fā)酵過(guò)程發(fā)酵工程包含三個(gè)過(guò)程：上游技術(shù)（微生物遺傳育種技術(shù)）、微生物發(fā)酵過(guò)程和下游技術(shù)（分離工程）；微生物發(fā)酵過(guò)程包含同時(shí)進(jìn)行的微生物培養(yǎng)過(guò)程和微生物反應(yīng)過(guò)程；在工業(yè)微生物發(fā)酵過(guò)程中，既要控制微生物的生長(zhǎng)，又要控制微生物的代謝；通常的微生物培養(yǎng)僅需要控制微生物的生長(zhǎng)；控制微生物生長(zhǎng)，必需了解微生物的生長(zhǎng)規(guī)律，清楚影響生長(zhǎng)的主要因素；青霉素G的發(fā)酵生生產(chǎn)工藝藝——發(fā)酵（反反應(yīng)）過(guò)過(guò)程種子培養(yǎng)養(yǎng)：產(chǎn)生生健壯和和大量的的種子；；產(chǎn)黃青霉霉接種到到固體培培養(yǎng)基上上，在25℃下培養(yǎng)7天，收獲獲產(chǎn)黃青青霉的孢孢子；將孢子洗洗脫下來(lái)來(lái)，制備備孢子懸懸液，接接種到液液體種子子培養(yǎng)基基中，在在27℃下，種子子罐通氣氣攪拌培培養(yǎng)24h；發(fā)酵培養(yǎng)養(yǎng)（微生生物反應(yīng)應(yīng)）：獲獲得大量量次級(jí)代代謝產(chǎn)物物；將種子培培養(yǎng)液接接種到發(fā)發(fā)酵罐中中，在27℃下，通氣氣攪拌培培養(yǎng)7天，期間間流加苯苯乙酸，，作為合合成青霉霉素的前前體物；；種子擴(kuò)大大培養(yǎng)和和發(fā)酵的的工藝流流程和工工藝條件件工業(yè)發(fā)酵酵：通過(guò)過(guò)控制微微生物的的培養(yǎng)條條件，使使微生物物正常生生長(zhǎng)，并并大量積積累目標(biāo)標(biāo)代謝產(chǎn)產(chǎn)物；平面培養(yǎng)養(yǎng)一級(jí)種子子罐培養(yǎng)養(yǎng)搖管培養(yǎng)養(yǎng)搖瓶培養(yǎng)養(yǎng)二級(jí)種子子罐培養(yǎng)養(yǎng)發(fā)酵培養(yǎng)養(yǎng)7.1.2生物量測(cè)測(cè)定方法法微生物培培養(yǎng)物的的定量測(cè)測(cè)定，稱稱為生物物量測(cè)定定；測(cè)定定對(duì)象不不同，方方法不同同，單位位也不同同，但可可互相校校正；顯微鏡直直接計(jì)數(shù)數(shù)法：測(cè)測(cè)單細(xì)胞胞或單孢孢子；平板菌落落計(jì)數(shù)法法：測(cè)單單細(xì)胞或或單孢子子；細(xì)胞濕重重和干重重法：測(cè)測(cè)定單細(xì)細(xì)胞或絲絲狀微生生物；分光光度度法：測(cè)測(cè)單細(xì)胞胞或單孢孢子；生理指標(biāo)標(biāo)法：測(cè)測(cè)定單細(xì)細(xì)胞或絲絲狀微生生物；顯微鏡直直接計(jì)數(shù)數(shù)法顯微鏡直直接計(jì)數(shù)數(shù)法：是是在顯微微鏡下，，用血球球計(jì)數(shù)板板對(duì)單細(xì)細(xì)胞或單單孢子直直接計(jì)數(shù)數(shù)，單位位為：個(gè)個(gè)數(shù)/mL；顯微鏡直直接計(jì)數(shù)數(shù)法不能能區(qū)分死死菌與活活菌，，稱為全全菌計(jì)數(shù)數(shù)法；血球計(jì)數(shù)數(shù)板是一一塊特殊殊的載波波片，在在中間的的兩個(gè)平平臺(tái)上各各刻有一一個(gè)大方方格網(wǎng)；；大方格格網(wǎng)由九九個(gè)大方方格組成成，中間間的正方方形大方方格為計(jì)計(jì)數(shù)室；；計(jì)數(shù)室邊邊長(zhǎng)1mm、高0.1mm，體積0.1mm3（10-4ml）血球計(jì)數(shù)數(shù)板的結(jié)結(jié)構(gòu)計(jì)數(shù)室平臺(tái)方格網(wǎng)方格網(wǎng)計(jì)數(shù)室被被劃分為為25個(gè)中方格格，每個(gè)個(gè)中方格格分為16個(gè)小方格格，共400個(gè)小方格格；上面面蓋上蓋蓋玻片；；血球計(jì)計(jì)數(shù)板板的使使用方方法濃度約約108個(gè)細(xì)胞胞/毫毫升的的菌懸懸液，，滴加加在蓋蓋玻片片與血血球計(jì)計(jì)數(shù)板板平臺(tái)臺(tái)的結(jié)結(jié)合處處，使使菌懸懸液經(jīng)經(jīng)毛細(xì)細(xì)作用用吸入入計(jì)數(shù)數(shù)室，，靜置置，使使細(xì)胞胞沉底底；計(jì)數(shù)若若干小小格內(nèi)內(nèi)的細(xì)細(xì)胞數(shù)數(shù)，計(jì)計(jì)算每每小格格平均均數(shù)，，則：：菌濃（（個(gè)/ml）＝每格平平均數(shù)數(shù)×400××104×稀釋倍倍數(shù)將待測(cè)測(cè)菌懸懸液適適當(dāng)稀稀釋后后，涂涂布在在平面面培養(yǎng)養(yǎng)基上上，培培養(yǎng)后后進(jìn)行行菌落落計(jì)數(shù)數(shù)，一一個(gè)菌菌落相相當(dāng)于于一個(gè)個(gè)活細(xì)細(xì)胞；；平板菌菌落計(jì)計(jì)數(shù)屬屬于活活菌計(jì)計(jì)數(shù)法法，適適用于于單細(xì)細(xì)胞或或單孢孢子計(jì)計(jì)數(shù)，，單位位：菌菌落形形成單單位/mL（cfu/mL）（colonyformingunit，cfu)平板菌菌落計(jì)計(jì)數(shù)法法選擇生生長(zhǎng)50～300個(gè)單菌菌落的的平板板進(jìn)行行計(jì)數(shù)數(shù)，結(jié)結(jié)果準(zhǔn)準(zhǔn)確；；平板菌菌落計(jì)數(shù)方法10倍稀釋釋法制制備待待測(cè)菌菌懸液液，選選擇適適當(dāng)?shù)牡南♂屷尪龋?，定量量?.1~0.2mL）取稀稀釋液液涂布布平板板，或或者定定量（（1mL）取稀稀釋液液與融融化后后冷卻卻至45℃的培培養(yǎng)基基混合合倒平平板；；培養(yǎng)后后，對(duì)對(duì)長(zhǎng)出出的單單菌落落計(jì)數(shù)數(shù)，根根據(jù)稀稀釋倍倍數(shù)，，得到到原菌菌液的的生物物量：：cfu/mL通常選選擇三三個(gè)稀稀釋度度涂平平板，，擇其其合適適者計(jì)計(jì)數(shù)；；單細(xì)胞胞或絲絲狀微微生物物的生生物量量均可可用直直接測(cè)測(cè)量濕濕重或或干重重的方方法測(cè)測(cè)量；；離心收收集細(xì)細(xì)胞沉沉淀，，無(wú)菌菌水充充分洗洗滌后后，直直接分分析天天平稱稱重—濕重（（mg/ml）；洗滌后后的細(xì)細(xì)胞沉沉淀在在105℃℃下烘烘干至至恒重重，分分析天天平稱稱重—干重（（mg/ml）；培養(yǎng)液液菌體體濕重重約40g/L，干重重約4mg/mL；濕重受受培養(yǎng)養(yǎng)基成成分影影響大大，而而不準(zhǔn)準(zhǔn)確；；干重重法費(fèi)費(fèi)時(shí)，，靈敏敏度低低，適適于測(cè)測(cè)定絲絲狀微微生物物：細(xì)胞濕濕重和和干重重法在一定定范圍圍內(nèi)，，菌懸懸液的的菌體體濃度度與一一定波波長(zhǎng)下下的光光密度度值（（opticaldensity,OD值）呈呈線性性關(guān)系系；用用分光光光度度計(jì)，，在600nm波長(zhǎng)下下，測(cè)測(cè)定菌菌懸液液的OD600值，或或吸光光度值值（A600），可可校正正為1OD=n個(gè)細(xì)胞胞/mL；分光光光度法法OD值在0.2~0.8之間呈呈線性性關(guān)系系；適用于于單細(xì)細(xì)胞或或單孢孢子懸懸液的的生物物量測(cè)測(cè)定；；在不方方便使使用顯顯微計(jì)計(jì)數(shù)、、平板板菌落落計(jì)數(shù)數(shù)、細(xì)細(xì)胞濕濕重和和干重重測(cè)定定、分分光光光度測(cè)測(cè)定生生物量量的情情況下下，可可測(cè)定定與生生物量量成比比例關(guān)關(guān)系的的細(xì)胞胞總蛋蛋白量量，總總核酸酸量，，或者者呼吸吸強(qiáng)度度，間間接測(cè)測(cè)定總總生物物量，，稱為為生理理指標(biāo)標(biāo)法；；測(cè)定總總蛋白白：凱凱氏定定氮法法測(cè)定定測(cè)總核核酸：：定磷磷法測(cè)測(cè)定測(cè)呼吸吸強(qiáng)度度：CO2產(chǎn)生量量（速速率））生理指指標(biāo)法法生長(zhǎng)規(guī)規(guī)律：：二分分裂殖殖的單單細(xì)胞胞微生生物在在分批批培養(yǎng)養(yǎng)過(guò)程程中，，其生生物量量的增增長(zhǎng)隨隨培養(yǎng)養(yǎng)時(shí)間間的變變化規(guī)規(guī)律：：即生生長(zhǎng)過(guò)過(guò)程表表現(xiàn)出出延遲遲期、、指數(shù)數(shù)生長(zhǎng)長(zhǎng)期（（對(duì)數(shù)數(shù)期））、穩(wěn)穩(wěn)定期期、對(duì)對(duì)數(shù)衰衰亡期期（死死亡期期）的的規(guī)律律變化化；非二分分裂殖殖或非非單細(xì)細(xì)胞的的微生生物在在分批批培養(yǎng)養(yǎng)過(guò)程程中，，生長(zhǎng)長(zhǎng)規(guī)律律類似似，但但不典典型；；一般通通過(guò)繪繪制微微生物物培養(yǎng)養(yǎng)過(guò)程程的生生長(zhǎng)曲曲線，，反映映其生生長(zhǎng)規(guī)規(guī)律和和生長(zhǎng)長(zhǎng)參數(shù)數(shù)；7.1.3微生物物的生生長(zhǎng)規(guī)規(guī)律微生物物的生生長(zhǎng)曲曲線生長(zhǎng)曲曲線：：在分分批培培養(yǎng)中中，以以微生生物的的生物物量為為縱坐坐標(biāo)，，以培培養(yǎng)時(shí)時(shí)間為為橫坐坐標(biāo)繪繪制的的曲線線圖，，反映映生物物量隨隨培養(yǎng)養(yǎng)時(shí)間間的變變化；；對(duì)于二二分裂裂殖的的單細(xì)細(xì)胞微微生物物，用用細(xì)胞胞數(shù)量量的對(duì)對(duì)數(shù)值值為生生長(zhǎng)曲曲線的的縱坐坐標(biāo)；；對(duì)于于其其它它微微生生物物可可用用培培養(yǎng)養(yǎng)液液的的OD值或或者者細(xì)細(xì)胞胞干干重重作作為為縱縱坐坐標(biāo)標(biāo)；；在確確定定的的液液體體培培養(yǎng)養(yǎng)條條件件下下，，接接種種后后，，每每隔隔一一定定時(shí)時(shí)間間取取樣樣，，測(cè)測(cè)定定生生物物量量，，至至培培養(yǎng)養(yǎng)結(jié)結(jié)束束；；用用生生物物量量對(duì)對(duì)培培養(yǎng)養(yǎng)時(shí)時(shí)間間作作圖圖，，得得到到某某種種微微生生物物在在特特定定條條件件下下的的生生長(zhǎng)長(zhǎng)曲曲線線；；生長(zhǎng)長(zhǎng)曲曲線線的的繪繪制制方方法法實(shí)線線為為活活菌菌計(jì)計(jì)數(shù)數(shù)，，虛虛線線為為總總菌菌計(jì)計(jì)數(shù)數(shù)延遲遲期期和和指指數(shù)數(shù)生生長(zhǎng)長(zhǎng)期期延遲遲期期（（lagphase）：：培培養(yǎng)養(yǎng)的的最最初初階階段段，，生生物物量量不不隨隨培培養(yǎng)養(yǎng)時(shí)時(shí)間間增增加加；；此階階段段，，細(xì)細(xì)胞胞繁繁殖殖速速率率很很低低，，細(xì)細(xì)胞胞處處于于吸吸收收營(yíng)營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)，，調(diào)調(diào)整整代代謝謝的的生生理理階階段段；；此階階段段，，細(xì)細(xì)胞胞繁繁殖殖速速率率最最大大且且穩(wěn)穩(wěn)定定，，細(xì)細(xì)胞胞代代謝謝旺旺盛盛生生理理狀狀態(tài)態(tài)均均一一；；對(duì)數(shù)數(shù)期期（（logphase）或或指指數(shù)數(shù)生生長(zhǎng)長(zhǎng)期期（（exponentialgrowthphase）：：生生物物量量隨隨培培養(yǎng)養(yǎng)時(shí)時(shí)間間呈呈指指數(shù)數(shù)曲曲線線增增長(zhǎng)長(zhǎng)；；穩(wěn)定定期期穩(wěn)定定期期（（stationaryphase）：：生生物物量量保保持持穩(wěn)穩(wěn)定定，，不不隨隨培培養(yǎng)養(yǎng)時(shí)時(shí)間間變變化化，，此此階階段段，，細(xì)細(xì)胞胞繁繁殖殖速速率率與與死死亡亡速速率率相相同同，，活活細(xì)細(xì)胞胞量量處處于于動(dòng)動(dòng)態(tài)態(tài)平平衡衡；；生長(zhǎng)長(zhǎng)到到穩(wěn)穩(wěn)定定期期，，培培養(yǎng)養(yǎng)基基中中的的營(yíng)營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)物物消消耗耗、、代代謝謝廢廢物物積積累累、、環(huán)環(huán)境境條條件件改改變變；；部分分細(xì)細(xì)胞胞開開始始衰衰老老、、死死亡亡和和自自溶溶裂裂解解，，細(xì)細(xì)胞胞形形態(tài)態(tài)多多樣樣、、生生理理狀狀態(tài)態(tài)不不均均一一；；衰亡亡期期衰亡亡期期或或?qū)?duì)數(shù)數(shù)衰衰亡亡期期（（logarithmicdeclinephase）：：活活細(xì)細(xì)胞胞數(shù)數(shù)量量隨隨培培養(yǎng)養(yǎng)時(shí)時(shí)間間呈呈指指數(shù)數(shù)曲曲線線下下降降，，細(xì)細(xì)胞胞幾幾乎乎停停止止繁繁殖殖，，而而死死亡亡速速率率達(dá)達(dá)到到最最大大；；此階階段段，，營(yíng)營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)物物耗耗盡盡、、有有毒毒代代謝謝物物積積累累、、環(huán)環(huán)境境惡惡化化；；多數(shù)數(shù)細(xì)細(xì)胞胞進(jìn)進(jìn)入入衰衰老老、、死死亡亡和和自自溶溶狀狀態(tài)態(tài)，，細(xì)細(xì)胞胞多多畸畸形形，，活活細(xì)細(xì)胞胞數(shù)數(shù)量量降降低低；；7.1.4生長(zhǎng)長(zhǎng)參數(shù)數(shù)和和生生長(zhǎng)長(zhǎng)過(guò)過(guò)程程控控制制描述述生生長(zhǎng)長(zhǎng)過(guò)過(guò)程程的的參參數(shù)數(shù)：：延遲遲期期的的長(zhǎng)長(zhǎng)短短；；指數(shù)數(shù)期期的的代代時(shí)時(shí)和和最最大大比比生生長(zhǎng)長(zhǎng)速速率率；；穩(wěn)定定期期的的長(zhǎng)長(zhǎng)短短、、最最大大生生物物量量和和生生長(zhǎng)長(zhǎng)得得率率；；可通通過(guò)過(guò)一一定定方方式式控控制制這這些些參參數(shù)數(shù)而而控控制制生生長(zhǎng)長(zhǎng)過(guò)過(guò)程程；；延遲遲期是休休眠眠細(xì)細(xì)胞胞的的活活化化期期，，或或者者是是細(xì)細(xì)胞胞代代謝謝系系統(tǒng)統(tǒng)與與營(yíng)營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)和和環(huán)環(huán)境境條條件件的的適適應(yīng)應(yīng)期期；；在工工業(yè)業(yè)發(fā)發(fā)酵酵中中有有必必要要采采取取措措施施縮縮短短延延遲遲期期，，而而縮縮短短發(fā)發(fā)酵酵周周期期：：使用用活活化化的的新新鮮鮮培培養(yǎng)養(yǎng)物物作作為為菌菌種種；；使用用營(yíng)營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)豐豐富富的的天天然然培培養(yǎng)養(yǎng)基基，，或或速速效效碳碳、、氮氮源源；；使種種子子培培養(yǎng)養(yǎng)基基與與發(fā)發(fā)酵酵培培養(yǎng)養(yǎng)基基的的營(yíng)營(yíng)養(yǎng)養(yǎng)物物質(zhì)質(zhì)成成分分相相近近；；增大大接接種種量量，，縮縮短短延延遲遲期期；；延遲遲期期長(zhǎng)長(zhǎng)短短的的控控制制指數(shù)數(shù)期期是是細(xì)細(xì)胞胞以以穩(wěn)穩(wěn)定定（（最最大大））速速率率繁繁殖殖的的階階段段，，繁繁殖殖速速率率可可用用代代時(shí)時(shí)或或倍倍增增時(shí)時(shí)間間表表征征；；代時(shí)時(shí)（（generationtime，G）：：二二分分裂裂殖殖的的單單細(xì)細(xì)胞胞微微生生物物在在指指數(shù)數(shù)期期繁繁殖殖一一代代（（分分裂裂一一次次））所所需需要要的的時(shí)時(shí)間間；；倍增增時(shí)時(shí)間間（（doubletime，D）：：非非二二分分裂裂殖殖或或絲絲狀狀微微生生物物在在指指數(shù)數(shù)期期生生物物量量增增加加一一倍倍所所需需時(shí)時(shí)間間；；代時(shí)時(shí)或或倍倍增增時(shí)時(shí)間間越越短短，，表表明明微微生生物物的的生生長(zhǎng)長(zhǎng)（（繁繁殖殖））速速率率越越快快；；代代時(shí)時(shí)或或倍倍增增時(shí)時(shí)間間與與培培養(yǎng)養(yǎng)條條件件相相關(guān)關(guān)；；指數(shù)數(shù)期期的的代時(shí)時(shí)或或倍倍增增時(shí)時(shí)間間(G)代時(shí)時(shí)和倍倍增增時(shí)時(shí)間間的測(cè)測(cè)定定方方法法二分分裂裂殖殖單單細(xì)細(xì)胞胞微微生生物物的的生生長(zhǎng)長(zhǎng)曲曲線線縱縱坐坐標(biāo)標(biāo)上上選選擇擇指指數(shù)數(shù)期期內(nèi)內(nèi)細(xì)細(xì)胞胞數(shù)數(shù)量量為為倍倍數(shù)數(shù)關(guān)關(guān)系系的的兩兩點(diǎn)點(diǎn)，，其其對(duì)對(duì)應(yīng)應(yīng)橫橫坐坐標(biāo)標(biāo)兩兩點(diǎn)點(diǎn)之之差差為為代代時(shí)時(shí)；；非二分裂裂殖火絲絲狀微生生物在生生長(zhǎng)曲線線縱坐標(biāo)標(biāo)上取生生物量為為倍數(shù)關(guān)關(guān)系的兩兩點(diǎn)對(duì)應(yīng)應(yīng)的時(shí)間間差為倍倍增時(shí)間間；N0：初始細(xì)胞胞量；Nt：t時(shí)間的細(xì)細(xì)胞量;n：從0~t時(shí)間內(nèi)繁繁殖的代代數(shù)二分裂殖殖單細(xì)胞胞微生物物代時(shí)的計(jì)算公式式G=————tt–t0tt–t0n=————————3.322(logNt－logN0)微生物在在確定培養(yǎng)條件下的的代時(shí)（倍增時(shí)時(shí)間）Vibrionatriegens柱胞魚腥腥藻桃褐腐病病菌巢狀組囊囊藻比生長(zhǎng)速速率（m）：在確確定培養(yǎng)養(yǎng)條件下下，在微微生物指指數(shù)生長(zhǎng)長(zhǎng)期，單單位生物物量單位位時(shí)間內(nèi)內(nèi)的增加加量為常常數(shù)，或或細(xì)胞瞬瞬時(shí)增長(zhǎng)長(zhǎng)量與此此時(shí)細(xì)胞胞量的比比值是一一個(gè)常數(shù)數(shù)，表征征各種微微生物的的生長(zhǎng)速速率：dN/dt＝＝mN（m的單位：：mg/mg·h＝h-）lnNt-lnN0＝m(tt－t0)logNt-logN0＝m(tt－t0)/2.303μ＝(logNt－logN0)×2.303/(tt－t0)比生長(zhǎng)速速率（m）的計(jì)算算∵G=（tt-t0）／3.322（logNt－logN0）m＝（logNt－logN0）×2.303/（tt－t0）∴G＝2.303／3.322mG＝0.693／m在指數(shù)生生長(zhǎng)期，，比生長(zhǎng)長(zhǎng)速率達(dá)達(dá)到最大大且穩(wěn)定定；代時(shí)時(shí)（倍增增時(shí)間））最短且且穩(wěn)定；；某種微生物物的比生長(zhǎng)長(zhǎng)速率或代代時(shí)，決定定于生長(zhǎng)的的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)環(huán)境條件，，是可以控控制的；代時(shí)或倍增時(shí)間間與比生長(zhǎng)速速率的換算關(guān)系穩(wěn)定期持續(xù)時(shí)間的的延長(zhǎng)生長(zhǎng)到達(dá)穩(wěn)穩(wěn)定期后，，營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)質(zhì)濃度降低低程度、有有毒代謝廢廢物的積累累量、環(huán)境境惡化程度度決定穩(wěn)定定期的長(zhǎng)短短；在發(fā)酵工業(yè)業(yè)中，生產(chǎn)產(chǎn)次級(jí)代謝謝產(chǎn)物需要要盡量延長(zhǎng)長(zhǎng)穩(wěn)定期，，以便達(dá)到到最高發(fā)