2023學(xué)年甘肅省隴南市徽縣第三中學(xué)高三下學(xué)期第一次聯(lián)考生物試卷含答案解析

2023學(xué)年高考生物模擬測(cè)試卷注意事項(xiàng)1．考試結(jié)束后，請(qǐng)將本試卷和答題卡一并交回．2．答題前，請(qǐng)務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)用0．5毫米黑色墨水的簽字筆填寫在試卷及答題卡的規(guī)定位置．3．請(qǐng)認(rèn)真核對(duì)監(jiān)考員在答題卡上所粘貼的條形碼上的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)與本人是否相符．4．作答選擇題，必須用2B鉛筆將答題卡上對(duì)應(yīng)選項(xiàng)的方框涂滿、涂黑；如需改動(dòng)，請(qǐng)用橡皮擦干凈后，再選涂其他答案．作答非選擇題，必須用05毫米黑色墨水的簽字筆在答題卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律無效．5．如需作圖，須用2B鉛筆繪、寫清楚，線條、符號(hào)等須加黑、加粗．一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1．下列關(guān)于“模擬孟德爾雜交實(shí)驗(yàn)”的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．既有模擬一對(duì)純合親本雜交產(chǎn)生F1，又有模擬F1自交產(chǎn)生F2B．既有模擬等位基因的分離，又有模擬非等位基因的自由組合C．既有模擬產(chǎn)生的配子類型，又有模擬雌、雄配子的受精作用D．既有模擬F2的基因型及比例，又有模擬F2的表現(xiàn)型及比例2．下列關(guān)于細(xì)胞結(jié)構(gòu)與其功能相適應(yīng)特征的敘述中，不正確的是（）A．蛋白質(zhì)合成旺盛的細(xì)胞中核糖體較多B．代謝強(qiáng)度不同的細(xì)胞中線粒體數(shù)目有差異C．合成胰蛋白酶的胰島細(xì)胞中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)達(dá)D．?dāng)y帶氧氣的哺乳動(dòng)物成熟紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核3．制備單克隆抗體過程中，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要先分離出單個(gè)細(xì)胞，然后再進(jìn)行培養(yǎng)和篩選。這樣做的目的是（）A．為了避免微生物污染B．保證獲得細(xì)胞的遺傳背景相同C．為了使細(xì)胞周期一致D．保證細(xì)胞得到充足的營養(yǎng)4．我國古代勞動(dòng)人民積累了豐富農(nóng)業(yè)生產(chǎn)經(jīng)驗(yàn)，至今仍在實(shí)踐中應(yīng)用。下列敘述與植物激素作用有直接關(guān)系的是（）A．“種麥得時(shí)，無不善……早種則蟲而有節(jié)；晚種則穗小而少實(shí)”（《汜勝之書》）B．“凡嫁接矮果及花，用好黃泥曬干，篩過，以小便浸之……則根生”（《種藝必用》）C．“桑眼動(dòng)時(shí)……闊八步一行，行內(nèi)相去四步一樹，相對(duì)栽之”（《士農(nóng)必用》）D．“肥田之法，種綠豆最佳，小豆，紅豆次之”（《齊明要術(shù)》）5．下列關(guān)于基因的描述，正確的是（）A．基因中蘊(yùn)含著遺傳信息，且具備表達(dá)的能力 B．不同的基因控制合成的蛋白質(zhì)一定不同C．基因總是伴隨著染色體從親代傳遞給子代 D．兩條同源染色體上的基因數(shù)相同6．某純種紫花頂生豌豆與純種白花腋生豌豆雜交，由于某種基因型的花粉敗育，F(xiàn)2的四種表現(xiàn)型比例為5：3：3：l，根據(jù)題目所給條件，下列敘述不正確的是（）A．兩對(duì)相對(duì)性狀遵循自由組合定律 B．兩對(duì)相對(duì)性狀的顯隱性都不能判斷C．F1測(cè)交后代只能表現(xiàn)出3種表現(xiàn)型 D．親本均僅存在一對(duì)隱性基因7．漿細(xì)胞的代謝過程中不會(huì)發(fā)生的是A．酶和底物的特異性結(jié)合 B．有機(jī)物的合成和分解C．染色體DNA的復(fù)制 D．ATP和ADP的轉(zhuǎn)化8．（10分）生物鐘是指生物體生命活動(dòng)的內(nèi)在節(jié)律性。哺乳動(dòng)物的生物鐘包括腦部的中樞生物鐘和周圍器官中的外周生物鐘。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，分別敲除兩組正常小鼠肝臟和胰腺中的外周生物鐘基因，小鼠分別表現(xiàn)出低血糖和糖尿病癥狀。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是A．參與中樞生物鐘調(diào)節(jié)的神經(jīng)中樞位于下丘腦B．肝臟和胰腺細(xì)胞中不存在中樞生物鐘基因C．低血糖出現(xiàn)的原因可能是肝糖原分解受阻D．敲除胰腺中的外周生物鐘基因可能影響了胰島素的分泌二、非選擇題9．（10分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對(duì)人體沒有影響。我國科學(xué)家欲獲得高效表達(dá)蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關(guān)研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細(xì)胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細(xì)胞中表達(dá)效率很低，研究者推測(cè)不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物（引物B和C中都替換了一個(gè)堿基），并按圖2方式依次進(jìn)行4次PCR擴(kuò)增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點(diǎn)的_________技術(shù)。②圖2所示的4次PCR應(yīng)該分別如何選擇圖1中所示的引物？請(qǐng)?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進(jìn)一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測(cè)并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。為檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，比較_________的大小，以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時(shí)常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點(diǎn)是_________。10．（14分）皮膚作為人體最大的器官擁有達(dá)1.8m2的表面積，其主要功能是作為物理屏障，保護(hù)機(jī)體免受外來生物或有毒物質(zhì)的侵害。同時(shí)，皮膚也是人體與外界環(huán)境接觸的部位，因此常駐有各類微生物，包括細(xì)菌、真菌等，可通過微生物培養(yǎng)技術(shù)了解我們的皮膚表面的微生物分布情況?；卮鹣铝袉栴}：（1）微生物培養(yǎng)利用的培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源、___________。由于不同種類的微生物的菌落特征表現(xiàn)不同，因此可以利用____________________培養(yǎng)基來培養(yǎng)、觀察菌落特征，對(duì)微生物進(jìn)行初步的鑒定和分類。（2）有同學(xué)通過制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基來培養(yǎng)附著在皮膚表面的細(xì)菌。制備該培養(yǎng)基的操作步驟是計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。倒平板時(shí)需要在酒精燈火焰旁操作，待平板冷卻凝固后，還需要將平板_________。為了確定培養(yǎng)基滅菌效果是否達(dá)到要求，可隨機(jī)取若干_______________，在適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察該培養(yǎng)基是否出現(xiàn)了菌落，若沒有出現(xiàn)，則證明培養(yǎng)基的滅菌效果達(dá)到了要求。（3）采集并制備樣液，并將樣液接種到培養(yǎng)基的平板上培養(yǎng)。采用的接種方法有_________和______________，若采用前者，則操作中接種環(huán)在使用前要在酒精燈火焰上先灼燒，其目的是_________________，第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的末端開始，其目的是______________。11．（14分）將某植物的葉肉細(xì)胞鏈于適宜沮度和充足的14CO2條件下，先給予一段時(shí)間光照，然后再停止光照，檢測(cè)整個(gè)過程葉肉細(xì)胞的葉綠體中放射性C3濃度的變化情況，結(jié)果如下圖.回答下列問題。（1）葉肉細(xì)胞以14CO2為原料，生成C3的場(chǎng)所是____。圖中a~b段放射性C3濃度基本不變，原因是____。（2）圖示結(jié)果顯示，停止光照后的b～c時(shí)間段內(nèi)，葉肉細(xì)胞中放射性C3的濃度并沒有上升，原因是____。（3）某實(shí)驗(yàn)小組對(duì)葉肉細(xì)胞交替進(jìn)行光照和黑暗處理（先光照后黑暗，每次光照與黑暗處理的時(shí)間相同；各組光照強(qiáng)度和處理的總時(shí)間也相同），隨著光照和黑暗交替頻率的增加，推測(cè)葉肉細(xì)胞光合作用中CO2的同化總量最可能____（填增加或減少或不變），原因是____。12．回答下列關(guān)于基因工程的相關(guān)問題：（1）獲取目的基因及目的基因和運(yùn)載體結(jié)合的過程需要用到的工具酶有________________。質(zhì)粒DNA分子上有特殊的___________，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）獲得目的基因后，利用PCR技術(shù)將該基因擴(kuò)增時(shí)，需要添加的有機(jī)物質(zhì)除了模板、原料外，還應(yīng)加入___________。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是________________。（3）基因工程技術(shù)中，科學(xué)家可以從基因文庫中獲取目的基因，基因文庫包括基因組文庫和cDNA文庫，后者比較小，原因是_________________________________________。（4）若要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄和翻譯，采用的檢測(cè)方法分別是________________。（5）基因治療是指把_______導(dǎo)入病人體內(nèi)，使該基因的表達(dá)產(chǎn)物發(fā)揮功能，從而達(dá)到治療疾病的目的，這是治療遺傳病的最有效的手段。

2023學(xué)年模擬測(cè)試卷參考答案（含詳細(xì)解析）（含詳細(xì)解析）一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、A【答案解析】

模擬孟德爾雜交實(shí)驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖牵?.通過一對(duì)相對(duì)性狀雜交的模擬實(shí)驗(yàn)，認(rèn)識(shí)等位基因在形成配子時(shí)要相互分離，認(rèn)識(shí)受精作用時(shí)雌、雄配子的結(jié)合是隨機(jī)的。2.通過兩對(duì)相對(duì)性狀雜交的模擬實(shí)驗(yàn)，探究自由組合定律。【題目詳解】A、由于孟德爾遺傳定律的實(shí)質(zhì)是產(chǎn)生配子時(shí)等位基因分離，非同源染色體上非等位基因的自由組合，故實(shí)驗(yàn)中模擬了F1自交產(chǎn)生F2（既包括了一對(duì)相對(duì)性狀的實(shí)驗(yàn)也包含了兩對(duì)相對(duì)性狀的實(shí)驗(yàn)），A錯(cuò)誤；B、根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康目芍?，?shí)驗(yàn)中既有模擬等位基因的分離，又有模擬非等位基因的自由組合，B正確；C、實(shí)驗(yàn)中既讓學(xué)生模擬產(chǎn)生的配子類型體會(huì)分離和自由組合定律，又模擬受精作用過程中雌、雄配子的隨機(jī)結(jié)合，C正確；D、實(shí)驗(yàn)中既有模擬F2的基因型及比例的出現(xiàn)過程，又模擬F2的表現(xiàn)型及比例的出現(xiàn)過程，D正確。故選A。2、C【答案解析】

細(xì)胞的大小、結(jié)構(gòu)、功能各不相同，主要與細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞器的種類和數(shù)量多少有關(guān)，正確理解各細(xì)胞器的功能，在此基礎(chǔ)上解答此題?！绢}目詳解】核糖體是合成蛋白質(zhì)的場(chǎng)所，因此蛋白質(zhì)合成旺盛的細(xì)胞中核糖體較多，A正確；線粒體是有氧呼吸的主要場(chǎng)所，細(xì)胞代謝需要的能量主要由線粒體提供，因此代謝強(qiáng)度不同的細(xì)胞中線粒體數(shù)目有差異，B正確；胰蛋白酶是由胰腺細(xì)胞合成的，而不是由胰島細(xì)胞合成的，胰島細(xì)胞合成并分泌胰島素或胰高血糖素，C錯(cuò)誤；哺乳動(dòng)物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核和眾多的細(xì)胞器，D正確；因此選C?！敬鸢更c(diǎn)睛】準(zhǔn)確識(shí)記各類細(xì)胞的功能及各種細(xì)胞器的功能是解題的關(guān)鍵。3、B【答案解析】

將已免疫的小鼠的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，獲得能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞的過程中至少要進(jìn)行兩次篩選，一次是通過選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，另一次是通過專一抗體檢測(cè)篩選出能分泌特定抗體的雜交瘤細(xì)胞?！绢}目詳解】由于小鼠生活過程中存在多種抗原感染，所以小鼠體內(nèi)存在多種B淋巴細(xì)胞，從小鼠體內(nèi)獲取的經(jīng)過免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，會(huì)形成多種雜交瘤細(xì)胞，同時(shí)也存在未融合的細(xì)胞和同種細(xì)胞的融合體，將這些細(xì)胞放在特定的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，可篩選出雜交瘤細(xì)胞，但這些雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生的抗體是多種，為了篩選到能產(chǎn)生單一抗體的細(xì)胞群，可將上述雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，由于每個(gè)小孔內(nèi)只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞，所以可篩選到產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，即兩次篩選的目的是保證獲得細(xì)胞的遺傳背景相同。篩選的目的不是避免微生物污染，也不是使細(xì)胞周期一致和保證細(xì)胞得到充足的營養(yǎng)，綜上分析，B正確，ACD錯(cuò)誤。故選B。4、B【答案解析】

植物激素包括生長素、赤霉素、細(xì)胞分裂素、脫落酸和乙烯等，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上有很多應(yīng)用，其中生長素可以促進(jìn)細(xì)胞伸長從而使得植物生長，赤霉素與它具有協(xié)同作用，通過各文中涉及到的現(xiàn)象分析原理是本題的解題關(guān)鍵?！绢}目詳解】A、該句中提到種麥的時(shí)節(jié)不易過早和過晚，主要是與溫度和光照影響麥子的生長有關(guān)，A錯(cuò)誤；B、人的尿液中含有微量的生長素，用“小便浸之則根生”則是應(yīng)用了生長素促進(jìn)根生長的作用，B正確；C、該句中提到了種植桑樹要求“闊八步一行，行內(nèi)相去四步一樹”，是反應(yīng)了合理密植的原理，體現(xiàn)了植物對(duì)光照的利用率的問題，與植物激素?zé)o關(guān)，C錯(cuò)誤；D、植物輪替種植，先種大豆是利用了豆科植物固氮的作用增加土壤肥力，與植物激素?zé)o關(guān)，D錯(cuò)誤；故選B。5、A【答案解析】

基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，是控制生物性狀的遺傳物質(zhì)的功能單位和結(jié)構(gòu)單位，DNA和基因的基本組成單位都是脫氧核苷酸?！绢}目詳解】A、遺傳信息就蘊(yùn)含在基因的堿基排列順序之中，基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，故具備表達(dá)的能力，只是不一定能表達(dá)，A正確；B、因?yàn)槊艽a子具有簡并性，不同的密碼子可能決定同一種氨基酸，故不同的基因控制合成的蛋白質(zhì)可能相同，B錯(cuò)誤；C、細(xì)胞核中的基因基因可以伴隨著染色體從親代傳遞給子代，但細(xì)胞質(zhì)中的基因并不是伴隨著染色體從親代傳遞給子代的，C錯(cuò)誤；D、兩條同源染色體上的基因數(shù)不一定相同，如X與Y染色體上的基因數(shù)就不同，D錯(cuò)誤。故選A?！敬鸢更c(diǎn)睛】解答此題要求考生識(shí)記基因的概念，明確基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段，并結(jié)合基因的選擇性表達(dá)分析作答。6、C【答案解析】

某純種紫花頂生豌豆與純種白花腋生豌豆雜交，由于某種基因型的花粉敗育，F(xiàn)2的四種表現(xiàn)型比例為5：3：3：l，說明兩對(duì)等位基因遵循自由組合定律，假設(shè)兩對(duì)相對(duì)性狀分別由A/a和B/b控制，則可以進(jìn)一步推知，F(xiàn)1為AaBb，基因型為AB的花粉不育，所以親本只能為AAbb×aaBB?！绢}目詳解】A、由分析可知，F(xiàn)2的表現(xiàn)型為9:3:3:1的變式，兩對(duì)相對(duì)性狀的遺傳遵循自由組合定律，A正確；B、由分析可知，兩對(duì)相對(duì)性狀的顯隱性無法根據(jù)題目所給條件作出判斷，B正確；C、F1測(cè)交有2種情況，當(dāng)F1作為父本測(cè)交時(shí)，后代只有3種表現(xiàn)型；當(dāng)F1作為母本測(cè)交時(shí)，后代有4種表現(xiàn)型，C錯(cuò)誤；D、由分析可知，如果F1為AaBb，基因型為AB的花粉不育，所以親本只能為AAbb×aaBB，D正確。故選C。7、C【答案解析】

漿細(xì)胞為高度分化的細(xì)胞，不再分裂，能合成并分泌抗體。能進(jìn)行細(xì)胞呼吸，合成ATP?！绢}目詳解】漿細(xì)胞中能進(jìn)行多種酶促反應(yīng)，能發(fā)生酶和底物的特異性結(jié)合，如轉(zhuǎn)錄過程中RNA聚合酶可與DNA特異性結(jié)合，A不符合題意；漿細(xì)胞中存在有機(jī)物的合成和分解，如抗體的合成、細(xì)胞呼吸可分解有機(jī)物等，B不符合題意；染色體復(fù)制發(fā)生在細(xì)胞分裂的間期，而漿細(xì)胞為高度分化的細(xì)胞，不能進(jìn)行分裂，故沒有染色體DNA的復(fù)制過程，C符合題意；漿細(xì)胞中的ATP和ADP可以相互轉(zhuǎn)化，保證細(xì)胞代謝所需能量的供應(yīng)，D不符合題意。故選C。【答案點(diǎn)睛】本題綜合考查細(xì)胞代謝、細(xì)胞增殖、ATP等知識(shí)，要求考生識(shí)記細(xì)胞中酶的作用；識(shí)記ATP和ADP相互轉(zhuǎn)化的過程；識(shí)記細(xì)胞呼吸的具體過程及細(xì)胞分裂等知識(shí)，能結(jié)合所需的知識(shí)準(zhǔn)確判斷各選項(xiàng)。8、B【答案解析】

1、胰島素通過促進(jìn)葡萄糖進(jìn)入肝臟、肌肉、脂肪等組織細(xì)胞，并且在這些細(xì)胞中合成糖元、氧化分解或者轉(zhuǎn)化成脂肪；另一方面又能夠抑制肝糖元的分解和非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖從而降低血糖濃度。2、血糖含量升高時(shí)，胰島素分泌增多，促進(jìn)葡萄糖進(jìn)入肝臟、肌肉、脂肪等組織細(xì)胞，并且在這些細(xì)胞中合成糖元、氧化分解或者轉(zhuǎn)化成脂肪；另一方面又能夠抑制肝糖元的分解和非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖。從而降低血糖。血糖含量降低時(shí)，胰高血糖素含量升高，促進(jìn)肝糖元分解，促進(jìn)非糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化為葡萄糖?！绢}目詳解】A、下丘腦是生物節(jié)律的調(diào)節(jié)中樞，A正確；B、肝臟和胰腺細(xì)胞中存在中樞生物鐘基因，只是基因的選擇性表達(dá)，B錯(cuò)誤；C、肝糖原分解受阻，血糖來源減少，可能出現(xiàn)低血糖，C正確；D、由題可知，敲除胰腺中的外周生物鐘基因小鼠患糖尿病，胰島素分泌可能減少，D正確；故選：B。二、非選擇題9、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會(huì)造成基因污染；有效成分純度較高【答案解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術(shù)刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結(jié)果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點(diǎn)：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補(bǔ)的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個(gè)DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運(yùn)輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個(gè)限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單的、獨(dú)立于細(xì)菌擬核DNA之外，并具有自我復(fù)制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學(xué)合成法。3、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復(fù)制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結(jié)合到互補(bǔ)DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補(bǔ)鏈的合成。第二步：基因表達(dá)載體的構(gòu)建1、目的：使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動(dòng)子+終止子+標(biāo)記基因（1）啟動(dòng)子：是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，能驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標(biāo)記基因的作用：是為了鑒定受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來．常用的標(biāo)記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞：采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞：最常用的方法是顯微注射技術(shù)．此方法的受體細(xì)胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞：原核生物作為受體細(xì)胞的原因是繁殖快、多為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，最常用的原核細(xì)胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細(xì)胞，使其成為感受態(tài)細(xì)胞，再將重組表達(dá)載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合，在一定的溫度下促進(jìn)感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細(xì)胞導(dǎo)入受體細(xì)胞后，篩選含有基因表達(dá)載體受體細(xì)胞的依據(jù)是標(biāo)記基因是否表達(dá)。第四步：目的基因的檢測(cè)和表達(dá)1、首先要檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術(shù)。2、其次還要檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標(biāo)記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原——抗體雜交。4、有時(shí)還需進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?！绢}目詳解】（1）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細(xì)胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導(dǎo)入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術(shù)后獲得了新的基因，這是一種定點(diǎn)的基因突變技術(shù)。②與研究者推測(cè)不同生物對(duì)密碼子具有不同的偏好，因而設(shè)計(jì)了與蛋白A基因結(jié)合的兩對(duì)引物（引物B和C中都替換了一個(gè)堿基），因此4次PCR應(yīng)該分別選擇如圖所示的引物如下表所示：引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√（3）根據(jù)實(shí)驗(yàn)中的對(duì)照原則，若要比較新蛋白A的表達(dá)效率是否提高，則需設(shè)置三組實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)變量的處理分別為：僅含新蛋白質(zhì)A的重組質(zhì)粒，僅含蛋白A的重組質(zhì)粒和空白對(duì)照（僅含空質(zhì)粒，以排除空質(zhì)?？赡墚a(chǎn)生的影響）。因此，將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）分別導(dǎo)入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用抗原——抗體雜交方法檢測(cè)并比較三組受體菌蛋白A的表達(dá)產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達(dá)效率是否提高。由于蛋白A（或新蛋白A）具有抗菌作用，所以為檢測(cè)表達(dá)產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達(dá)產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，比較抑菌圈的大小，以確定表達(dá)產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時(shí)常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，是因?yàn)榈鞍譇基因的發(fā)酵產(chǎn)物對(duì)人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會(huì)造成基因污染；有效成分純度較高?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題主要考查基因工程、PCR技術(shù)等相關(guān)知識(shí)，考生需要理解和記憶相關(guān)知識(shí)，并學(xué)會(huì)應(yīng)用所學(xué)知識(shí)正確答題。10、氮源固體倒置滅菌后的空白培養(yǎng)基平板劃線法稀釋涂布平板法殺滅接種環(huán)上的微生物使微生物數(shù)目能夠隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，以達(dá)到分離的效果【答案解析】

1、微生物培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長對(duì)pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．對(duì)異養(yǎng)微生物來說，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時(shí)并不是起單一方面的作用。2、微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落?！绢}目詳解】（1）培養(yǎng)基中一般都含有水、無機(jī)鹽、碳源、氮源。根據(jù)題中信息，觀察的是菌落特征，由此確定所利用的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基。（2）為了防止培養(yǎng)皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基造成污染，應(yīng)將平板倒置。隨機(jī)取若干滅菌后的空白培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，若一段時(shí)間后出現(xiàn)了菌落，則培養(yǎng)基滅菌不合格。（3）樣液接種時(shí)通常有平板劃線法和稀釋涂布平板法，在平板劃線法的操作中，接種環(huán)在使用前要先灼燒，其目的是殺滅接種環(huán)上的微生物，第二次及其后的劃線都要從上一次劃線的末端開始，其目的是使微生物量能夠隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，以達(dá)到分離的效果?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題主要考查微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)，要求考生能夠掌握微生物分離與純化的方法，能夠根據(jù)培養(yǎng)基的配方確定培養(yǎng)的類型，結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題。11、葉綠體基質(zhì)固定生成的速率與還原的速率相等葉綠體基質(zhì)中還有光反應(yīng)產(chǎn)生的ATP和[H]，還能維持較短時(shí)間的還原反應(yīng)增加光反應(yīng)產(chǎn)生的ATP和[H]能及時(shí)利用和再生【答案解析】

光合作用分為兩個(gè)階段進(jìn)行，在這兩個(gè)階段中，第一階段是直接需要光的稱為光反應(yīng)，第二階段不需要光直接參加，是二氧化碳轉(zhuǎn)變?yōu)樘堑姆催^程稱為暗反應(yīng)。光合作用在葉綠體中進(jìn)行，光反應(yīng)的場(chǎng)所位于類囊體膜，暗反應(yīng)的場(chǎng)所在葉綠體基質(zhì)。光反應(yīng)的發(fā)生需要葉綠體類囊體膜上的色素、酶參與?！绢}目詳解】（1）14CO2與C5在葉綠體基質(zhì)中生成C3。圖中a~b段放射性C3濃度基本不變，原因是固定生成的速率與還原的速率相等。（2）