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文檔簡介
實驗九
乳酸發(fā)酵及成品中乳酸菌檢測實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!一、實驗?zāi)康膶W(xué)習(xí)了解乳酸發(fā)酵的基本原理學(xué)習(xí)了解酸乳的制作工藝方法學(xué)習(xí)掌握乳酸菌的檢測方法學(xué)習(xí)掌握活菌菌落計數(shù)法實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!二、實驗原理(一)乳酸發(fā)酵指糖經(jīng)無氧酵解而生成乳酸的發(fā)酵。菌種不同,代謝途徑不同,生成的產(chǎn)物有所不同。同型乳酸發(fā)酵:(經(jīng)EMP途徑)異型乳酸發(fā)酵:(經(jīng)HMP途徑)雙歧桿菌發(fā)酵:(經(jīng)HK途徑—磷酸己糖解酮酶途徑)實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!配料預(yù)熱、均質(zhì)殺菌冷卻、接種(分裝)發(fā)酵冷卻(攪拌)后熟發(fā)酵冷卻2酸奶制作工藝實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!(四)活菌菌落計數(shù)稀釋涂布法稀釋混合倒平板法實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!1、菌落的選擇(1)單個菌做一個菌落計(2)呈鏈狀生長的菌落之間無任何明顯界限,作為一個菌落計,如存在有幾條不同來源的鏈,則每條鏈均應(yīng)按一個菌落計算。(3)如片狀菌落不到平板一半,而另一半又分布均勻,則可以半個平板的菌落數(shù)乘2代表全平板的菌落數(shù)。實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!(2)如均大于300,則取最高稀釋度的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告(3)如均小于30,則以最低稀釋度的平均菌落數(shù)乘稀釋倍數(shù)報告(4)如菌落數(shù)有的大于300,有的又小于30,不在30~300之間,以最接近300或30的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報告(5)如所有稀釋度均無菌落生長,則應(yīng)按小于1乘以最低稀釋倍數(shù)報告。實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!菌落計數(shù)及報告形式例稀釋度及菌落數(shù)兩稀釋度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)CFU/ml報告方式CFU/ml10-110-210-31136516420--164001600022760295461.638000380032890271602.227100270004不可計4650513--513000510000527115--2702706000--<1×10<107不可計30512--3050031000實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!三、實驗材料鮮牛奶、白砂糖、市售酸奶培養(yǎng)皿、試管、移液管MRS培養(yǎng)基實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!四、實驗內(nèi)容及步驟(一)乳酸菌檢測1、樣品梯度稀釋(無菌操作、準(zhǔn)確度)2、混合倒平板3、培養(yǎng)4、統(tǒng)計計數(shù)實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!五、實驗結(jié)果實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!(二)酸乳的制作1、酸奶PK鮮牛奶酸奶出于牛奶而勝于牛奶主要區(qū)別:乳糖變化蛋白質(zhì)變化鈣、磷吸收微生物變化實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!(三)酸奶中的微生物保加利亞乳桿菌、嗜熱鏈球菌使用比例乳酸發(fā)酵類型二者間共生關(guān)系二者間拮抗關(guān)系實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!菌落計數(shù)和報告
到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時間,應(yīng)立即計數(shù)。如果不能立即計數(shù),應(yīng)將平板放置于0-4℃,但不得超過24h。實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!2、平板菌落數(shù)的選擇(1)選取菌落數(shù)在30~300之間的平板(SN標(biāo)準(zhǔn)商檢行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求為25~250個菌落),若有二個稀釋度均在30~300之間時,比值小于或等于2取平均數(shù),比值大于2則取稀釋度較低平板菌落數(shù)。實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!3、菌落數(shù)的報告1)菌落數(shù)在1~100時,按實有數(shù)字報告,如大于100時,則報告前面兩位有效數(shù)字,第三位數(shù)按四舍五入計算。2)固體檢樣以克(g)為單位報告,3)液體檢樣以毫升(ml)為單位報告,4)表面涂擦則以平方厘米(cm2)報告。
實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!(五)乳酸菌檢測乳酸菌特性——產(chǎn)乳酸乳酸+Ca2+——乳酸鈣(可溶性好)實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!MRS培養(yǎng)基:蛋白胨10克,牛肉膏10克,酵母提取物5克,磷酸氫二鉀2克,檸檬酸三胺2克,乙酸鈉5克,葡萄糖20克,吐溫801ml,MgSO4·7H2O0.58g,MnSO4·4H2O0.25g,瓊脂15克,水1000ml,pH6.2-6.4滅菌后冷卻至50℃,加20克碳酸鈣,搖勻后倒平板實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!(二)酸奶的制作1、配料糖5~8%2、加熱殺菌3、冷卻接種市售酸奶作發(fā)酵劑5~10%4、分裝5、發(fā)酵6、后熟7、品嘗實驗八乳酸發(fā)酵及乳酸菌檢測共26頁,您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!作業(yè)一、設(shè)計試驗對酸乳中乳酸菌進(jìn)行計數(shù)二、設(shè)計試驗自環(huán)境中分離產(chǎn)淀粉酶菌株
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