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文檔簡(jiǎn)介

隱孢于蟲

(CryptosporidiumTyzzer,1907

)是一種寄生于宿主消化道的球蟲類寄生蟲。最早由Tyzzer在小鼠胃腺上皮細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)并命名。1976年后,才證實(shí)本蟲可以感染人體。隱孢子蟲是一種呈世界性分布的,能引起人和動(dòng)物腹瀉的,重要的機(jī)會(huì)性致病原蟲。已被公認(rèn)為最重要的人類腹瀉的腸道病原體之一。由本蟲引起的隱孢子蟲病(cryptosporidiasis)是一種人獸共患病。

種類繁多至少21種。微小隱孢子蟲(C.parvum)引起腹瀉,機(jī)會(huì)致病,與艾滋病有關(guān)。一、形態(tài)

卵囊呈圓形或橢圓形,直徑3~6m,囊壁稍厚且光滑,無色,成熟卵囊內(nèi)含4個(gè)裸露的子孢子和由顆粒物組成的殘留體(residualbody),子孢子為月牙形,大小約1.5×0.75m,無孢子囊,核1個(gè),位于蟲體后部。生活史要點(diǎn)①隱孢子蟲生活史簡(jiǎn)單,有裂體增殖、配子生殖和孢子增殖,均在同一宿主體內(nèi)進(jìn)行,稱為內(nèi)生階段。②人和多種家畜(牛、羊、貓、犬、兔等)均可受染。③寄生在宿主小腸上皮細(xì)胞膜與胞質(zhì)間形成的納蟲空泡內(nèi),嚴(yán)重時(shí)可擴(kuò)散到整個(gè)消化道。

④感染階段為卵囊。卵囊有薄壁和厚壁兩種類型。厚壁卵囊隨宿主糞便排出時(shí),即有感染性,為感染階段,有傳播作用;薄壁卵囊內(nèi)子孢子在腸腔逸出,直接侵入腸上皮細(xì)胞,引起宿主體內(nèi)重復(fù)感染。⑤感染途徑為被卵囊污染的水源和食物經(jīng)口而感染三、致病1.致病機(jī)制

①隱孢子蟲寄生在腸黏膜,使腸絨毛萎縮,變短變粗,或融合、移位和脫落;多種粘膜酶減少;腸上皮細(xì)胞出現(xiàn)老化和損落速度加快現(xiàn)象。②破壞腸絨毛的正常功能特別是對(duì)脂肪和糖類的吸收功能障礙,導(dǎo)致患者持久腹瀉。③為機(jī)會(huì)性致病原蟲。在免疫功能低下或受損患者,隱孢子蟲發(fā)育、繁殖迅速,患者發(fā)病急,腹瀉程度嚴(yán)重,常表現(xiàn)為霍亂樣水瀉,患者甚至死亡。四、實(shí)驗(yàn)診斷1.病原體檢查從病人糞便、膽汁、痰液或支氣管灌洗液等標(biāo)本中查得本蟲卵囊即可確診。標(biāo)本可以是新鮮的,也可以經(jīng)甲醛固定。經(jīng)濃縮后的標(biāo)本在相差顯微鏡下觀察卵囊為明亮的雙折光的圓形小體內(nèi)含子孢子和深色的顆粒狀的殘留體。由于未染色的卵囊無色透明,且易與標(biāo)本中的非特異性顆粒相混淆,故需采用染色方法檢查卵囊。3)金胺酚-改良抗酸染色法用本法可克服上述染色法的缺點(diǎn)。本法先用金胺酚染色后,再用改良抗酸染色法復(fù)染。用光學(xué)顯微鏡觀察,卵囊同抗酸染色所見,但非特異性顆粒被染成藍(lán)黑色,兩者顏色截然不同,極易鑒別,使檢出率和準(zhǔn)確性大大提高。2.免疫學(xué)診斷方法有熒光標(biāo)記單克隆抗體法和酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)病人糞便卵囊或血清抗體。此二法均有市售試劑盒。兩者均有高度的特性和敏感性。

3.分子生物學(xué)方法可用核酸探針或PCR檢測(cè)糞便中的卵囊。近年新發(fā)展了用生物素等標(biāo)記的核酸探針結(jié)合PCR法檢測(cè)糞便標(biāo)本中卵囊,可檢出最底為0.1pg的隱孢子蟲DNA,相當(dāng)于每克糞便中含有5個(gè)卵囊。分子生物學(xué)方法的敏感性和特異性都很高,特別適用于大樣本中少量卵囊的檢查。

五.流行(1)傳染源:病人、帶蟲者及病畜。(2)傳播途徑:卵囊污染食物、水源,經(jīng)口感染。(3)易感者:人對(duì)隱孢子蟲普遍易感,免疫功能低下或缺陷者尤易感染。

感染率0.38%~15.21%,0.92%~97%不等。

六.防治(1)治療病人、帶蟲者和病畜。常用藥物有大蒜素、巴龍霉素、螺旋霉素等。(2)加強(qiáng)人畜糞便管理,防止病人和病畜糞便中的卵囊污染水源和食物。(3)注意個(gè)人飲食、飲水衛(wèi)生,提倡喝開水;避免與病人、病畜接觸。(4)保護(hù)免疫功能低下的人群,增強(qiáng)免疫力。艾滋病合并卡氏肺孢子蟲感染一例

患者男性,40歲,河北人,已婚,京津高速路某收費(fèi)站負(fù)責(zé)人。主訴:發(fā)熱、咳嗽4天,氣短、呼吸困難一天。于1993年6月4日收住人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科。查體:

體溫38℃,脈搏128次/分,呼吸42次/分,血壓100/70mmHg。神志清楚,發(fā)育正常,營(yíng)養(yǎng)差。急性病容,呼吸困難,口唇紫紺,皮膚未見黃染及皮疹。全身未觸及腫大的淋巴結(jié)。頸部無抵抗。雙下肺叩診呈濁音,聽診可聞及濕羅音。心律齊,未聞及心臟雜音。腹軟,未觸及肝、脾。抗HIV抗體檢查:ELISA法,陽(yáng)性;蛋白印跡確認(rèn)(報(bào)告結(jié)果后10小時(shí)患者死亡)。尸體解剖主要發(fā)現(xiàn):①兩肺彌漫性實(shí)變,間質(zhì)性肺炎,大部分肺泡腔內(nèi)充滿泡沫狀蛋白性滲出物,銀染色顯示大量卡氏肺孢子蟲;②肺門淋巴結(jié)可見酪樣壞死,少量類上皮細(xì)胞和郎罕氏巨細(xì)胞。③兩腎上腺可見核內(nèi)巨細(xì)胞包含體。病理最后診斷:艾滋病患者,繼發(fā)肺卡氏肺孢子蟲病,肺門淋巴結(jié)結(jié)核,巨細(xì)胞病毒感染,因卡氏肺孢子蟲性肺炎導(dǎo)致呼吸、循環(huán)衰竭死亡。1909

年Chagas在枯氏錐蟲感染的實(shí)驗(yàn)豚鼠肺印片中發(fā)現(xiàn).1912年Delanoe夫婦在大鼠肺部發(fā)現(xiàn)并定名為卡氏肺孢子蟲.(Pneumocystiscarinii)卡氏肺孢子蟲病(pneumocystosis)◆◆屬孢子蟲綱,16srRNA序列分析,不典型真菌,位于子囊菌和擔(dān)子菌之間.世界各地均有分布,一般認(rèn)為經(jīng)空氣傳播?!簟簟簟舯静榘滩』颊叱R姴l(fā)癥和主要致死原因之一.1952年Vanek和Jirovec在患有間質(zhì)性肺炎的死亡病兒肺滲出液中查到該蟲體(卡氏肺孢子蟲肺炎Pneumocystiscariniipneumonia,PCP)主要寄生在人或哺乳動(dòng)物的肺泡、肺泡上皮細(xì)胞或肺泡間隙中.可引起間質(zhì)性漿細(xì)胞性肺炎。一、形態(tài)

滋養(yǎng)體、包囊前期和包囊。

1、滋養(yǎng)體外形:在姬氏染色標(biāo)本中,滋養(yǎng)體呈多態(tài)形。2、滋養(yǎng)體大小:小滋養(yǎng)體1~1.5μm,大滋養(yǎng)體2~8μm。3、滋養(yǎng)體細(xì)胞結(jié)構(gòu):細(xì)胞核1個(gè),深紫色;細(xì)胞質(zhì)淡藍(lán)色。線粒體、核糖體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及空泡、糖原。

4、包囊前期:3~5μm,形態(tài)多變。

5、包囊形態(tài):形狀:呈圓形或橢圓形,包囊細(xì)胞結(jié)構(gòu):經(jīng)姬氏染色的標(biāo)本,胞質(zhì)為淺藍(lán)色,胞核為深紫色。囊壁不著色,透明似暈圈狀或環(huán)狀,成熟包囊內(nèi)含有8個(gè)香蕉形囊內(nèi)小體(intracystic

bodies),各有1個(gè)核。大小:直徑為4~6μm,包囊,內(nèi)有8個(gè)囊內(nèi)小體,Giemsa染色三、致病

健康人感染本蟲多數(shù)為隱性感染,無癥狀,當(dāng)宿主免疫力低下時(shí),處于潛伏狀態(tài)的本蟲即進(jìn)行大量繁殖,并在肺組織內(nèi)擴(kuò)散導(dǎo)致間質(zhì)性漿細(xì)胞性肺炎。肺組織的泡沫狀滲出物為肺泡內(nèi)蛋白性滲出伴脫落變性的肺泡細(xì)胞,少量巨噬細(xì)胞、蟲體的滋養(yǎng)體和包囊等??ㄊ戏捂咦酉x感染隱性感染臨床表現(xiàn):間質(zhì)性肺炎.①嬰兒型(流行型):早產(chǎn)兒、體質(zhì)虛弱和營(yíng)養(yǎng)不良的嬰兒②成人型(散發(fā)型):先天性免疫缺陷病、艾滋病、惡性腫瘤或長(zhǎng)期使用免疫抑制劑等病人◆◆PCP是艾滋病病人最常見的并發(fā)癥,在美國(guó)有60%~80%艾滋病人合并PCP(兒童高于成人)。AIDS中PCP臨床起病隱匿,常為潛在性,進(jìn)展較為緩慢,從發(fā)病到呼吸功能不全大約需要數(shù)周。主要癥狀有發(fā)燒、干咳、呼吸困難和紫鉗,最終發(fā)展為彌漫性兩肺肺炎。重癥患者如診斷不及時(shí),2~6周內(nèi)死亡,病死率極高。有的病程短促,可于發(fā)病后4~8天內(nèi)死亡。AIDS患者PCP的臨床表現(xiàn)◆◆◆◆◆PathogenesisPCP來源于潛伏感染的再次激活

肺孢子蟲進(jìn)入健康人體

長(zhǎng)期潛伏于氣管、支氣管或肺泡腔內(nèi)(隱性感染)

病原體開始繁殖,產(chǎn)生大量滋養(yǎng)體和包囊(宿主免疫力低下時(shí))

肺組織內(nèi)迅速擴(kuò)散導(dǎo)致PCP宿主對(duì)肺孢子蟲感染的防御以細(xì)胞免疫為主,其中T細(xì)胞起很大作用

CD+4細(xì)胞通過細(xì)胞因子激活肺胞巨噬細(xì)胞

肺胞巨噬細(xì)胞吞噬滋養(yǎng)體和包囊

HIV感染者因CD+4細(xì)胞功能低下而增加了PCP的發(fā)病危險(xiǎn)。(CD+4細(xì)胞<200/ul,就可能發(fā)生PCP。)四、診斷(一)病原學(xué)診斷可收集痰液或支氣管分泌物涂片鏡檢,但陽(yáng)性率很低,應(yīng)用支氣管沖洗術(shù)可提高檢出率。也可進(jìn)行經(jīng)皮穿刺肺活檢、支氣管鏡肺活檢或開胸肺活檢,這些方法雖可靠,但損傷大。

A:3cystsinbronchoalveolarmaterial,Giemsastain;theroundedcysts(size4to7μm)contain6to8intracysticbodies,whosenucleiarestainedbyGiemsa;thewallsofthecystsarenotstained;notethepresenceofseveralsmaller,isolatedtrophozoites.

B:cystsinlungtissue,silverstain;thewallsofthecystsarestainedblack;theintracysticbodiesarenotvisiblewiththisstain;babywhodiedwithpneumoniainCalifornia.

支氣管分泌物涂片,顯示包囊,甲笨胺藍(lán)染色

(二)免疫學(xué)診斷

常用方法為IFA、ELISA或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。但由于大多數(shù)正常人都曾有過肺孢子蟲隱性感染,血清中都有特異性抗體存在,故檢測(cè)血清抗體的方法一般不用于肺孢子蟲病的診斷。近年來,DNA探針、rDNA探針和PCR技術(shù)等已試用于肺孢子蟲病診斷,顯示有較高的敏感性和特異性。血清學(xué)診斷(Serologicaldiagnosis)▼▼分子生物學(xué)診斷(Moleculardiagnosis)PCR及DNA探針技術(shù)應(yīng)用于檢測(cè)肺孢子蟲病的診斷常用方法:免疫熒光法、免疫組織化學(xué)法及ELIAS等。五、卡氏肺孢子蟲的流行本病呈世界性分布,一般認(rèn)為包囊經(jīng)空氣傳播是該蟲的傳播途徑。在正常人群中血清流行病學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn),有1%~10%呈隱性感染。血

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