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文檔簡介
藥科大學(xué)生物制藥工藝學(xué)期末試卷(B卷)一、填空題(每空0.5分,共30分)1多糖構(gòu)效關(guān)系研究還不夠完善,但目前的研究已表明,多糖的活性與其高級(jí)結(jié)構(gòu)、分支度及其側(cè)鏈、分子量以及多糖中的取代基有關(guān)。2、利用產(chǎn)氨短桿菌發(fā)酵法生產(chǎn)肌苷酸,第一步是用誘變育種的方法篩選缺乏SAMP合成酶的腺嘌呤缺陷型菌株,在發(fā)酵培養(yǎng)基中提供亞適量的腺嘌呤;另外,改變細(xì)胞膜對(duì)5′-IMP的透性,選育Mn2+不敏感的變異株。3、溶質(zhì)通過色譜柱時(shí)造成的峰加寬效應(yīng)包括分子擴(kuò)散、渦流擴(kuò)散、流動(dòng)相中傳質(zhì)阻力、固定相中傳質(zhì)阻力。4、在采用多緩沖陰離子交換劑作固定相的離子交換聚焦色譜過程中,當(dāng)柱中某位點(diǎn)之pH值下降到蛋白質(zhì)組分PI(等電點(diǎn))值以下時(shí),它因帶正電荷而下移,如果柱中有兩種蛋白組分,pI值較大(高)者會(huì)超過另一組分,移動(dòng)至柱下部pH較高的位點(diǎn)進(jìn)行聚焦(交換)。5、親和層析洗脫方法有非專一性洗脫,特殊洗脫,專一性洗脫。6、晶體的質(zhì)量主要是指晶體的大小、形狀和純度,其中影響晶體大小的主要因素有過飽和度,溫度,攪拌速度,晶種。7、常用的吸附劑有活性炭、硅膠和白陶土等。8、在萃取過程中被提取的溶液稱為料液,其中欲提取的物質(zhì)稱溶質(zhì),而用以進(jìn)行萃取的溶劑稱為萃取劑。達(dá)到萃取平衡后,大部分溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到萃取劑中,這種含有溶質(zhì)的萃取劑溶液稱為萃取液,而被萃取出溶質(zhì)以后的料液稱為萃余液。9、從細(xì)胞培養(yǎng)液中提取有效組分時(shí),往往需要除去細(xì)胞及蛋白質(zhì),常用的除去細(xì)胞及蛋白質(zhì)的方法有加入凝聚劑,加入絮凝劑,變性沉淀,等電點(diǎn)沉淀等。10、影響絮凝效果的主要因素有絮凝劑的分子量,絮凝劑的用量,溶液pH值,攪拌速度和時(shí)間。11、色譜介質(zhì)按分離機(jī)理分為反相色譜、正相色譜、離子交換色譜、凝膠過濾色譜,親和色譜。12、基因治療中常用的非病毒載體有裸露DNA、基因縫合線法、脂質(zhì)體載體和哺乳動(dòng)物人工染色體。13、四環(huán)類抗生素是一類以四并苯(萘并萘)為母核的一族抗生素;鏈霉素是氨基糖苷類抗生素;紅霉素是分子內(nèi)含有14元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類抗生素;寫出青霉素的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式。14、請(qǐng)列舉應(yīng)用基因藥物來治療腫瘤的幾種方案:導(dǎo)入抑癌基因或細(xì)胞因子、自殺基因、抑制血管生成、反義藥物、導(dǎo)入MHCI類抗原基因、導(dǎo)入MDRI基因等方法。二、名詞解釋(每小題3分,共30分)1、酶促半合成人胰島素:以豬胰島素為原料,利用胰蛋白酶的轉(zhuǎn)酰胺作用(1分)將豬胰島素B鏈之30位丙氨酸轉(zhuǎn)化(1分)為蘇氨酸即得人胰島素(1分)。2、親和膜:結(jié)合親和技術(shù)和膜分離技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),利用親和配基修飾的微濾膜(2分)為親和吸附介質(zhì),純化目標(biāo)蛋白質(zhì)(1分)。3、全排阻:當(dāng)具有一定分子量分布的高聚物溶液從柱中通過時(shí),較大的分子完全不能進(jìn)入顆粒內(nèi)部,只能從顆粒間隙流過,稱“全排阻”(2分)。其流經(jīng)體積最小,等于外水體積V0(1分)。4、類分離:將分子量極為懸殊的兩類物質(zhì)分開(2分),如蛋白質(zhì)與鹽類(1分),稱作類分離或組分離.選擇凝膠時(shí),應(yīng)使樣品中大分子組的分子量大于其排阻限,而小分子組的分子量小于滲入限。大分子的分配系數(shù)K=0,小分子的K=1。5、基因藥物:基因藥物geneticmedicine,核酸類藥物,以遺傳物質(zhì)DNA、RNA為治療物質(zhì)基礎(chǔ)的藥物(2分),如核酸疫苗、反義藥物(1分)。6、容量因子:在色譜過程中,溶質(zhì)在固定相中的總摩爾數(shù)與流動(dòng)相中總摩爾數(shù)之比(2分),容量因子越大該組分的保留能力越強(qiáng),越難洗脫。(1分)7、等密度離心法:在離心力作用下,不同密度的多組分顆粒在梯度介質(zhì)中“向上”或“向下”移動(dòng),(1分)當(dāng)移動(dòng)至其密度與介質(zhì)密度相等的位置便不再移動(dòng),形成靜止區(qū)帶,即“達(dá)到”離心平衡,各組分根據(jù)密度不同而分離。(2分)8、超濾技術(shù):超過濾(簡稱超濾)是一項(xiàng)分子級(jí)膜分離手段,(1分)以具有一定孔徑的膜為分離介質(zhì),(1分)以壓力差為推動(dòng)力將不同分子量的物質(zhì)進(jìn)行選擇性分離的方法。(1分)9、超臨界流體萃?。撼R界流體(supercriticalfluid,簡稱SCF)萃取技術(shù),又稱壓力流體萃取、超臨界氣體萃取、臨界溶劑萃取等,是利用處于臨界壓力和臨界溫度以上(2分)的一些溶劑流體所具有特異增加物質(zhì)溶解能力來進(jìn)行分離純化的技術(shù)。(1分)10、生物制品:生物制品(biologicalproduct)是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微生物、細(xì)胞及各種動(dòng)物和人源的組織和液體等生物材料制備(2分),用于人類疾病預(yù)防、治療和診斷的藥品(1分)。三、單項(xiàng)選擇題(每小題1分,共20分)1、下面表達(dá)系統(tǒng)為原核表達(dá)系統(tǒng)的是(A)A.E.coliB.畢赤酵母C.昆蟲細(xì)胞D.動(dòng)物細(xì)胞、2、下列藥物哪些是基因藥物(B)A.基因工程藥物B.遺傳物質(zhì)DNA為物質(zhì)基礎(chǔ)制造的藥物C.天然生物藥物D.半合成生物藥物3、肽合成中,由于順序合成的需要,必須對(duì)暫不參加反應(yīng)的基團(tuán)加以保護(hù)。在多肽的固相合成中,常用的氨保護(hù)基是(A)A.FmocB.BzC.TosD.甲醇4、蛋白質(zhì)類物質(zhì)分離純化往往是多步驟的,其前期處理手段多采用下列哪類的方法。(B)A.分辨率高B.負(fù)載量大C.操作簡便D.價(jià)廉5、當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時(shí),蛋白質(zhì)溶解度(C)A.增大B.減小C.先增大,后減小D.先減小,后增大6、鹽析常數(shù)Ks是生物大分子的特征常數(shù),它與下列哪種因素關(guān)系密切。(B)A.鹽濃度B.鹽種類C.溶質(zhì)濃度D介質(zhì)pH7、網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質(zhì),一般用下列哪種溶液洗脫。(D)A.水B.高鹽C.低pHD.高pH8、用鈉型陽離子交換樹脂處理氨基酸時(shí),吸附量很低,這是因?yàn)椋–)A.選錯(cuò)樹脂B.離子競爭C.偶極排斥D.解離低9、凝膠層析中,有時(shí)小分子溶質(zhì)的Kd<1,其原因是(A)A.水合作用B.凝膠吸附C.柱床過長D.流速過低10、“類似物容易吸附類似物”的原則,一般非極性吸附劑適宜于從下列何種溶劑中吸附非極性物質(zhì)。(A)A.極性溶劑B.非極性溶劑C.三氯甲烷D.溶劑11、親和層析的洗脫過程中,在流動(dòng)相中減去配基的洗脫方法稱作(D)A.陰性洗脫B.劇烈洗脫C.正洗脫D.負(fù)洗脫12、在萃取液用量相同的條件下,下列哪種萃取方式的理論收率最高(C)A.單級(jí)萃取B.三級(jí)錯(cuò)流萃取C.三級(jí)逆流萃取D.二級(jí)逆流萃取13、超聲波法破碎細(xì)胞的主要原理是(B)A.研磨作用B.空穴的形成C.脫水D.機(jī)械碰撞14、在離心分離過程中,若離心機(jī)的轉(zhuǎn)速為4000轉(zhuǎn)/分種,離心半徑為10厘米,則相對(duì)離心力為(A)A.1789(g)B.4000(g)C.8000(g)D.2000(g)15、在超濾過程中,主要的推動(dòng)力是(C)A.濃度差B.電勢(shì)差C.壓力D.重力16、環(huán)孢菌素A是微生物產(chǎn)生的(B)A.HMG-CoA還原酶抑制劑B.免疫抑制劑C.氨基糖苷類抗生素D.大環(huán)內(nèi)酯類抗生素17、選用110樹脂分離純化鏈霉素,交換時(shí)pH應(yīng)為(C)A.2~4B.4~6C.6~8D.12~1418、用大腸桿菌作宿主表達(dá)重組DNA藥物,缺點(diǎn)是(C)A.蛋白質(zhì)表達(dá)量低B.生長慢C.產(chǎn)物無糖基修飾D.難以獲得工程菌19、克拉維酸是微生物產(chǎn)生的(B)A.HMG-CoA還原酶抑制劑B.β-內(nèi)酰氨酶抑制劑C.氨基糖苷類抗生素D.大環(huán)內(nèi)酯類抗生素20、如果用大腸桿菌作為宿主細(xì)胞,蛋白表達(dá)部位為周質(zhì),下面哪種細(xì)胞破碎的方法最佳?(C)A.勻漿法B.超聲波法C.滲透壓休克法D.凍融法四、論述題(共20分)1、由下圖,利用給出的兩種離子交換劑(E1,E2)分離3種蛋白質(zhì)(P1、P2、P3),用箭頭流程圖表示(并指出E1,E2的類型)。(6分)答案:A:去血紅蛋白(1分)B:乙醇(1分)C:氯仿(1分)D:丙酮(1分E:熱變性(1分)F:60-70°C(1分)G洗脫(1分)3、青霉素為弱酸性抗生素,在水溶液中穩(wěn)定性較差,且其穩(wěn)定性隨溫度上升而下降,請(qǐng)寫出將該抗生素從發(fā)酵液中分離制備的方法,寫出選擇依據(jù)、主要工藝及操作要點(diǎn):(7分)答:青霉素游離酸易溶于醇類、醚類
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