肝炎病毒核酸檢測及臨床診療最新進(jìn)展演示文稿

肝炎病毒核酸檢測及臨床診療最新進(jìn)展演示文稿第一頁，共二十四頁。（優(yōu)選）肝炎病毒核酸檢測及臨床診療最新進(jìn)展第二頁，共二十四頁。目錄Part1肝病PCR檢測國內(nèi)外需求及現(xiàn)狀Part2肝病PCR檢測最新解決方案Part3肝病PCR檢測的發(fā)展趨勢第三頁，共二十四頁。國際需求2008年美國肝病協(xié)會CHB防治指南：持久消除HBV是乙肝的治療終點(diǎn)，HBVDNA病毒載量盡可能小于或等于10IU/ml。第四頁，共二十四頁。國際需求歐洲肝病研究學(xué)會EASL2010年指南指出：將HBVDNA病毒載量盡可能控制在10-15IU/ml，能有效防止疾病的復(fù)發(fā)。歐洲肝病研究學(xué)會EASL2011指南指出：丙肝患者治療的目標(biāo)需HCVRNA病毒載量低于50IU/ml。第五頁，共二十四頁。（一）核苷(酸)類似物治療慢性乙肝路線圖

治療第12周評估原發(fā)性治療失敗HBV-DNA水平較基線水平下降幅度<1log/ml開始治療HBV-DNA基線水平監(jiān)測病毒學(xué)完全應(yīng)答HBV-DNA<60IU/ml繼續(xù)治療監(jiān)測HBV-DNA/6個月病毒學(xué)部分應(yīng)答HBV-DNA:60~2000IU/ml增加藥物治療監(jiān)測HBV-DNA/3個月病毒學(xué)不充分應(yīng)答HBV-DNA>2000IU/ml增加/更換有效的藥物治療監(jiān)測HBV-DNA/6個月治療第24周評估抗病毒療效的早期預(yù)測因子60IU/ml如何檢測？國際治療路線*由美國坦福大學(xué)醫(yī)學(xué)中心Keeffe教授（專家組）提供第六頁，共二十四頁。國內(nèi)行業(yè)指導(dǎo)原則國家SFDA技術(shù)審評中心“863”課題《HBVDNA定量試劑技術(shù)審評指導(dǎo)原則》中指出：HBVDNA建議最低檢測限應(yīng)≤30IU/mL。DNA提取純化方法不建議采用煮沸法進(jìn)行DNA提取。第七頁，共二十四頁。國內(nèi)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)標(biāo)全程參與！核酸上樣量≥20ul！第八頁，共二十四頁。國內(nèi)現(xiàn)狀加熱煮沸高速離心過柱吸附

陳舊的技術(shù)繁瑣的過程第九頁，共二十四頁。國內(nèi)現(xiàn)狀國內(nèi)HBVDNA檢測方法多為煮沸法，試劑靈敏度均為500IU/ml或1000IU/ml。國內(nèi)大部分HCVRNA檢測方法多為柱提法，試劑靈敏度≥1000IU/ml。令人揪心的性能第十頁，共二十四頁。專家呼吁五種乙型肝炎病毒核酸熒光定量檢測試劑盒的比較,中華傳染病雜志，2009年第3期——吳星,黃維金,周誠,莊輝等(中國藥品生物制品檢定所,北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部)國家“十一五”科技重大專項(xiàng)“乙型和丙型病毒性肝炎診斷及臨床監(jiān)測的研究”——魯鳳民教授北京大學(xué)肝炎試劑研究中心專家呼吁：高精度，超敏感的核酸診斷試劑的開發(fā)是目前肝炎診療中的關(guān)鍵步驟！第十一頁，共二十四頁。何去何從面對當(dāng)前肝病毒核酸檢測技術(shù)的現(xiàn)狀，我們真沒有辦法了嗎？第十二頁，共二十四頁。解決方案Part1肝病PCR檢測國內(nèi)外需求及現(xiàn)狀Part2肝病PCR檢測最新解決方案Part3肝病PCR檢測的發(fā)展趨勢第十三頁，共二十四頁。臨床核酸提取技術(shù)的發(fā)展：煮沸法酚氯仿法旋轉(zhuǎn)離心柱法玻璃粉吸附法二氧化硅吸附法磁珠法國內(nèi)主流方法國際主流方法核酸檢測發(fā)展要求第十四頁，共二十四頁。核酸檢測發(fā)展要求高精度高品質(zhì)高科技第十五頁，共二十四頁。磁珠法技術(shù)磁珠（電子顯微鏡）磁珠分離器磁珠法----核酸診斷領(lǐng)域新方向。第十六頁，共二十四頁。技術(shù)原理DNA磁珠與DNA的結(jié)合----通過超順磁性顆粒富集核酸，實(shí)現(xiàn)樣品高純度、高靈敏度的檢測。原理第十七頁，共二十四頁。技術(shù)性能磁珠法提取核酸效率高，純度高，特異性好。采用最新一代的磁珠提取核酸技術(shù)，無需加熱、無需高速離心、靈敏度極高，能夠很好的滿足臨床診療的需求?？垢蓴_能力強(qiáng)，能勝任高血脂、強(qiáng)溶血以及藥物治療標(biāo)本的檢測，是臨床疾病檢測的有力手段。極易實(shí)現(xiàn)自動化。第十八頁，共二十四頁。

靈敏度可達(dá)10IU/ml，是國產(chǎn)主流試劑的50-100倍；準(zhǔn)確定量線性范圍為20IU/ml～2.0×109IU/ml

可檢測HBVA、B、C、D、E、F、G、H共8個基因型。設(shè)置了監(jiān)控內(nèi)標(biāo)IC,有效避免假陰性。設(shè)置內(nèi)參比熒光ROX，定量更準(zhǔn)確。以湖南圣湘乙肝磁珠法為例臨床驗(yàn)證和對比第十九頁，共二十四頁。臨床驗(yàn)證和對比以湖南圣湘乙肝磁珠法為例*9例定值在12~50IU/ml之間圣湘磁珠法技術(shù)在靈敏度方面存在明顯優(yōu)勢，與進(jìn)口試劑具有很好的一致性，能夠很好的勝任臨床藥物療效的觀察和治療終點(diǎn)的確定。Sansure-HBV：圣湘HBV磁珠法Roche-HBV：羅氏

AmpliPrep-CobasTaqManHBVTestX-HBV：國內(nèi)一家上市公司的HBV產(chǎn)品（濃縮煮沸法）第二十頁，共二十四頁。發(fā)展趨勢Part1肝病PCR檢測國內(nèi)外需求及現(xiàn)狀Part2肝病PCR檢測最新解決方案Part3肝病PCR檢測的發(fā)展趨勢第二十一頁，共二十四頁。發(fā)展趨勢（25×33+288÷3）×15=？簡單化的要求第二十二頁，共二十四頁。發(fā)展趨勢

一步法技術(shù)：最簡便的PCR技術(shù)一步操作即可實(shí)現(xiàn)核酸提取。第二十三頁