大鼠側(cè)腦室穿刺給藥方法課件

大鼠側(cè)腦室穿刺給藥方法李嘉翔

中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院心內(nèi)科科研型研究生PartI:

Introduction側(cè)腦室置管穿刺給藥是神經(jīng)生物學(xué)研究中常用的實(shí)驗(yàn)手段，多用于觀察目的核團(tuán)或腦區(qū)對(duì)某些藥物刺激的反應(yīng)。PartII:

Theadvantage將藥物直接注入腦內(nèi)可以直接作用于在體狀態(tài)下感興趣的神經(jīng)元及膠質(zhì)細(xì)胞，比其他給藥途徑更直接，得出的結(jié)果較體外實(shí)驗(yàn)，如細(xì)胞培養(yǎng)等更接近生理狀態(tài)下的反應(yīng)。針道損傷破壞了血腦屏障的完整性，使血細(xì)胞及血中的各種免疫因子進(jìn)入腦，干擾了神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞周圍的微環(huán)境，背離了使結(jié)果接近正常生理狀態(tài)反應(yīng)的初衷。PartIv:Thesolution目前國(guó)際上公認(rèn)的腦內(nèi)給藥方法為：在立體定位儀的引導(dǎo)下，將一合適直徑和長(zhǎng)度的帶內(nèi)芯的管道埋置于需要的位置，用牙托粉將管道的外露部分固定于顱骨表面。術(shù)后5到10天，手術(shù)應(yīng)激已經(jīng)基本消失，血腦屏障基本恢復(fù)。此時(shí)，可以在動(dòng)物清醒狀態(tài)下把內(nèi)芯抽出，將一內(nèi)針插入管道達(dá)目的部位注射給藥后將內(nèi)針抽出，再插入內(nèi)芯封閉管道以再次給藥。此法基本避免了應(yīng)激及血液因素的干擾，可以得到比較可信的結(jié)果。Partv:MaterialsandMethods實(shí)驗(yàn)器材1.套管系統(tǒng)：在SD大鼠上進(jìn)行側(cè)腦室置管給藥使用的外管，相配套的內(nèi)芯和內(nèi)針均購(gòu)自深圳市瑞沃德生命科技有限公司。并用該公司配套的PE管給藥。2.管道系統(tǒng)的直徑和長(zhǎng)度的選擇：應(yīng)根據(jù)需注射的腦區(qū)的坐標(biāo)進(jìn)行選擇。手術(shù)步驟1.用10%的水合氯醛麻醉大鼠（SD，250-350克），使動(dòng)物呈俯臥姿勢(shì)，將大鼠頭部固定于腦立體定位儀上，門齒桿-3.3mm，三個(gè)標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)是否固定成功，鼻對(duì)正中，頭部不動(dòng)，提尾不掉。

2.頭頂皮膚剃毛，消毒，在頭部正中做一長(zhǎng)約0.5-1cm切口，分開頭骨上附著的骨膜及肌肉，撕開顱頂筋膜，以棉球蘸少量雙氧水涂擦顱骨表面，清楚暴露前囟點(diǎn)，并用墨水標(biāo)記。6.將牙托粉粉劑和水劑按比例混合調(diào)勻后涂到導(dǎo)管周圍，等待牙托粉完全凝固。7.縫合大鼠頭皮切口，保證頭皮完整，同時(shí)更好地固定導(dǎo)管。8.術(shù)畢，單籠飼養(yǎng)