艾梅乙的實驗室診斷與溝通

關(guān)于艾梅乙的實驗室診斷與溝通第1頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六2梅毒梅毒是由蒼白（梅毒）螺旋體引起的慢性、系統(tǒng)性性傳播疾病。主要通過性途徑傳播，臨床上可表現(xiàn)為一期梅毒、二期梅毒、三期梅毒、潛伏（隱性）梅毒和先天梅毒（胎傳梅毒）等。是《中華人民共和國傳染病防治法》中，列為乙類防治管理的病種。第2頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六傳播途徑：性接觸是主要的傳染途徑。未經(jīng)治療的患者在感染后的1年內(nèi)最具有傳染性（顯性和隱性梅毒患者均是傳染源）。隨著病期的延長，傳染性越來越小。到感染后2年，通過性接觸一般無傳染性。母嬰傳播。在妊娠7周時，梅毒螺旋體即可通過胎盤傳染未經(jīng)治療者，雖已無性傳播，但妊娠時仍可再傳染胎兒,但病期越長傳染性越小。第3頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六診斷梅毒的診斷必須依靠流行病學(xué)病史、臨床癥狀及實驗檢查進行綜合分析。梅毒的實驗室檢查結(jié)果對診斷有決定性意義。第4頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六實驗室診斷1、暗視野檢查/鍍銀染色法2、非梅毒螺旋體抗原血清實驗（非特異性梅毒抗體，TRSUT、RPR）3、梅毒螺旋體抗原血清實驗（特異性梅毒抗體，TPPA、TPHA、

TP-ELISA）第5頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六暗視野顯微鏡檢查

：取患者的可疑皮損（如硬下疳、丘疹等），在暗視野顯微鏡下檢查，見到可運動的梅毒螺旋體，可作為梅毒的確診依據(jù)。暗視野下是非常小的纖細的發(fā)光體，長約6～14um,8～14個規(guī)則、緊密的螺旋。典型的運動方式：蛇形、伸縮式、螺旋式看到典型的TP的特征和運動方式的螺旋體便可判定為TP陽性。第6頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六暗視野檢查臨床意義：當標本陽性時，可確診梅毒。適用于早期梅毒（一二期）。陰性不能排除梅毒診斷。不適用于來自口腔的標本。暗視野顯微鏡檢查是能夠立即在獲得性或先天性梅毒的早期進行直接診斷的唯一標準。第7頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六非梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗（TRSUT）?梅毒螺旋體一旦感染人體，在3-4周產(chǎn)生抗類脂質(zhì)抗原的IgM和IgG的混合抗體（也叫反應(yīng)素）。?可做定量試驗，用于判斷療效、判斷病情活動程度、預(yù)后隨訪指標。(注意前滯現(xiàn)象，假陰性)?早期梅毒治療后血清低度下降4倍認為治療有效。?復(fù)發(fā)或再感染可陽轉(zhuǎn)或滴度升高。?有些疾病可導(dǎo)致生物學(xué)假陽性。技術(shù)、急性熱性病、結(jié)締組織病、SLE等，但一般滴度不會超過1:8，而且隨著原發(fā)疾病好轉(zhuǎn)，滴度可以自行下降。第8頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六梅毒螺旋體抗原血清學(xué)試驗

TPPA、

TP-ELISA以梅毒螺旋體特異蛋白為抗原，檢測梅毒患者血中特異性抗梅毒螺旋體抗原的抗體。感染梅毒螺旋體后，一旦梅毒螺旋體抗體試驗呈陽性，則患者幾乎終生陽性。TPPA、TPHA為梅毒確證試驗，其敏感性：一期76%，二期100%潛伏97%特異性100%，可有1%假陽性存在，如SLE。IgM抗體可作為梅毒早期診斷或胎傳梅毒診斷。第9頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六

我科室目前檢測梅毒主要為TP-ELISA進行篩查，陽性者進行TPPA和TRUST的補充試驗。

第10頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六TRUST滴度與治療效果治療成功：早期梅毒患者在治療后6個月內(nèi)癥狀消失，且滴度有至少4倍的下降。晚期梅毒或隱性梅毒在治療后12-24個月內(nèi)滴度有至少4倍的下降。治療失敗：治療后癥狀持續(xù)或重新出現(xiàn)；治療后RPR滴度反而上升了4倍或以上；RPR滴度較高（1:32或以上）且在六個月內(nèi)沒有達到4倍的下降?？姑范局委熓〉牟∪藨?yīng)考慮合并HIV感染及神經(jīng)梅毒的可能性。血清固定：經(jīng)正規(guī)治療后，梅毒患者RPR一般都會轉(zhuǎn)為陰性，但有1-3%的病人即使經(jīng)足量抗梅治療，滴度仍持續(xù)呈低滴度陽性，這種現(xiàn)象稱為血清固定，其原因尚不明了。血清固定患者的滴度重又上升則提示再次感染梅毒。第11頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六療后血清學(xué)隨訪方法:TRUST時間：第1年，每3個月檢查1次。第2年，每6個月檢查1次。第3年，最后1個月檢查。第12頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六胎傳梅毒實驗室診斷標準嬰兒可自母體獲得IgG，TPPA和ELISA等試驗均可呈假陽性。①暗視野檢查陽性。②非梅毒螺旋體抗原血清試驗持續(xù)陽性。③非梅毒螺旋體抗原血清抗體滴度是母親的4倍以上。④患兒早期IgM陽性。⑤隨訪18個月觀察。注應(yīng)取嬰兒靜脈血進行檢測，而不是臍帶血。第13頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六神經(jīng)梅毒的實驗室診斷梅毒患者出現(xiàn)神經(jīng)癥狀者，或者經(jīng)過驅(qū)梅治療無效者，應(yīng)作腦脊液檢查。這一檢查對神經(jīng)梅毒的診斷、治療及預(yù)后的判斷均有幫助。檢查項目應(yīng)包括：細胞計數(shù)、總蛋白測定、RPR及TPPA試驗等。①梅毒血清學(xué)試驗（TRUST、TPPA）陽性。②腦脊液異常（WBC計數(shù)≥10*10/L、蛋白>500mg/L）。③腦脊液VDRL（玻片法檢測IgM抗體實驗）試驗陽性。第14頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六我科梅毒的檢測為每周一三五，周一三五才抽血的要下個時間才能檢測。如臨床需要我科可進行快速金標檢測，對于陽性者需做TRSUT檢測，判定其是否為活動期梅毒，一般金標陽性者TP-ELISA基本為陽性，而梅毒抗體IgG為終身攜帶，其TPPA基本為陽性。對孕婦和新生兒母親為陽性者可按一下流程進行：第15頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六第16頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六第17頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六艾滋病人類免疫缺陷病毒（HIV），即艾滋?。ˋIDS，獲得性免疫缺陷綜合征）病毒，是造成人類免疫系統(tǒng)缺陷的一種病毒。1981年，人類免疫缺陷病毒在美國首次發(fā)現(xiàn)。它是一種感染人類免疫系統(tǒng)細胞的慢病毒，屬逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種。檢測：《全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范2015年修訂版》第18頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六逆轉(zhuǎn)錄病毒，其結(jié)構(gòu)上的多種特異蛋白質(zhì)作可為我們檢測的目標,如gp120,gp41,p17,p24等第19頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六HIV感染以后的血清學(xué)動態(tài)第20頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六HIV檢測1、樣本的采集和處理全血、血清、血漿、口腔黏膜滲出液、尿液以及干血斑樣品可用于HIV抗體檢測全血、血清、血漿可用于HIV抗原檢測抗凝全血可用于CD4+和CD8+淋巴細胞測定血漿可用于病毒載量、基因型、耐藥檢測淋巴細胞富集液、全血可用于HIV核酸定性定量、基因型檢測和HIV-1分離培養(yǎng)第21頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六2、樣本的保存未檢測標本：短期內(nèi)（1周）可放于2-8℃，一周以上應(yīng)存放于-20℃一下。用于核酸檢測的樣品4天內(nèi)檢測可放于4度，3月以內(nèi)放-20度，3月以上放-70度保存。檢測后標本:初篩有反應(yīng)及時進行補充試驗，樣本應(yīng)置于帶蓋試管內(nèi)，并標記唯一的編碼姓名種類和采集時間。篩查陰性標本按具體要求決定（2-8度冰箱保存7天后按醫(yī)療廢物處理）第22頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六HIV抗體檢測要點1、篩查試驗有反應(yīng)，須做補充試驗。補充試驗是通過檢測樣本中是否存在艾滋病病毒抗體、抗原或者核酸而確定艾滋病病毒感染的檢測方法。補充試驗包括抗體確證試驗（免疫印跡試驗，條帶/線性免疫試驗，特定條件下的替代檢測，免疫層析或免疫滲濾試驗）和核酸試驗（核酸定性和核酸定量試驗）。替代檢測包括三種酶聯(lián)免疫試驗、三種快速試驗或酶聯(lián)免疫加快速試驗。2、篩查試驗無反應(yīng)，不應(yīng)做補充試驗

第23頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六

結(jié)果報告篩查報告篩查試驗無反應(yīng)報告為“HIV抗體陰性”；篩查有反應(yīng)必須進行復(fù)檢，復(fù)檢兩次檢測均無反應(yīng)報告為“HIV抗體陰性“，復(fù)檢檢測均有反應(yīng)或一個有反應(yīng)一個無反應(yīng)需進行“補充試驗”；初篩報告為”HIV感染待確定”（09版為HIV抗體待復(fù)檢），不能出具陽性報告。HIV抗體篩查報告需由一名檢驗人員和一名審核者簽字。并同時報告院感保健科和臨床。第24頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六確證報告：由確證試驗室出具，我科為初篩實驗室，只能出具待確定的結(jié)果，送市疾控做確證試驗。

篩查有反應(yīng)須送疾控的標本送檢必須要有病人的身份證信息，基本信息（電話號碼、婚姻狀況等），并有我科蓋章簽字的復(fù)檢單，送檢標本須7日內(nèi)送檢。第25頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六關(guān)于HIV檢測弱陽性的問題婦產(chǎn)科出現(xiàn)過孕婦HIV檢測弱陽性的情況，雖考慮為孕婦特殊人群導(dǎo)致的假陽性，但依然應(yīng)該引起重視，遇到初篩弱陽性的情況，我科建議重新采血用兩種試劑進行復(fù)檢，若有任意一種有反應(yīng)，則須送市疾控進行確證試驗。弱陽性不排除初期感染抗體效價低的情況。HIV初篩無反應(yīng)不能排除窗口期的情況，尤其對于高危人群、有冶游史、職業(yè)暴露等情況，建議隔3個月、6個月、1年均進行隨訪檢測。第26頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六乙肝乙肝是由乙型肝炎病毒感染引起的，以肝臟炎性病變?yōu)橹?，并可引起多器官損害的一種疾病。少數(shù)晚期可轉(zhuǎn)化為肝硬化、肝癌。是我國當前流行最為廣泛、危害性最嚴重的一種疾病。乙肝病毒。是一種DNA病毒，屬于嗜肝DNA病毒科，HBV的抵抗力較強，對低溫、干燥、紫外線、一般濃度的化學(xué)消毒劑都能夠耐受，但65℃10小時、煮沸10分鐘或高壓蒸氣均可滅活HBV。含氯制劑、環(huán)氧乙烷、戊二醛、過氧乙酸和碘伏等也有較好的滅活效果。第27頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六傳播途徑1.血液傳播：血液傳播是乙肝傳播途徑中最常見的一種，比如輸血過程中被感染，但是隨著醫(yī)學(xué)的進步，此現(xiàn)象得以了有效控制，但是尚未杜絕。2.醫(yī)源性傳播：醫(yī)源性傳播也就是說在就醫(yī)的過程中被感染，目前多數(shù)存在的是微量注射或接種而引起的感染，因此要特別注意注射、接種、紋身等使用的各種醫(yī)療器具。3.母嬰傳播：患急性乙肝或攜帶乙肝表面抗原的母親可將乙肝病毒傳給新生兒，尤其攜帶乙肝表面抗原的母親為主要的感染類型。（值一提的是乙肝免疫球蛋白可以有效地抑制乙肝母嬰的傳播，有效率可達百分之九十以上。）4.性傳播：乙肝病毒的性傳播是性伙伴感染的重要途徑，這種傳播亦包括家庭夫妻之間的傳播。注：成年人感染乙肝病毒后，因為免疫系統(tǒng)比較完善，所以有可能及時清除乙肝病毒。第28頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六乙肝的檢測1、乙肝兩對半定量：為乙肝病毒表面抗原（HbsAg）抗-HBs（乙肝病毒表面抗體）HBeAg（乙肝病毒e抗原）抗HBe（乙肝病毒e抗體）抗-HBc（乙肝病毒核心抗體）2、乙肝DNA定量3、乙肝mRNA定量第29頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六淺談乙肝兩對半HBsAb是乙肝唯一有效的保護性抗體。高危人群HBsAb濃度值≥100mIU/ml，具有足夠的保護作用。HBsAg可提示存在乙肝病毒的感染。HBeAg提示乙肝復(fù)制活躍，傳染性強。HBeAb提示乙肝復(fù)制被抑制，可能好轉(zhuǎn)，傳染性弱。HBcAb提示感染過或接觸了乙肝病毒。第30頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六乙肝兩對半常見模式1、-----過去和現(xiàn)在均未感染HBV2、----+曾感染HBV，急性感染恢復(fù)期3、---++過去和現(xiàn)在均已感染過HBV4、-+---預(yù)防注射疫苗5、-+-++既往感染；急性HBV感染恢復(fù)期6、-+--+既往感染；急性HBV感染已恢復(fù)7、+---+急性HBV感染；慢性HBsAg攜帶者8、+--++急性HBV感染趨向恢復(fù)；慢性HBsAg

攜帶者，傳染性弱9、+-+-+急性或慢性，傳染性極強10、+----急性HBV感染早期，HBsAg攜帶者11、+-+--急性HBV感染早期，傳染性強12、--+++急性感染中期13、+-+++急性感染趨向恢復(fù)；慢性攜帶者14、+--+-急性感染趨向恢復(fù)15、---+-急性感染趨向恢復(fù)16、-+-+-HBV感染已恢復(fù)第31頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六乙肝DNA檢測，一般DNA定量>10的5次方表示病毒載量大，復(fù)制活躍，傳染性強。<10的2次方表示復(fù)制量低，傳染性低。乙肝mRNA檢測，由于乙肝病毒生活史復(fù)制過程必須生成mRNA,所以現(xiàn)在最新的研究表示，mRAN在提示乙肝病毒復(fù)制的過程優(yōu)于乙肝DNA和兩對半。但目前我科無法開展此項目。第32頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六討論大三陽肯定比小三陽嚴重？第一：如果“小三陽”DNA檢測呈陰性，肝功能、B超等均長期正常，說明病毒已不復(fù)制，無傳染性，所以無需隔離與治療。這種情況約占“小三陽”患者總數(shù)的60％~70％，如果一味追求轉(zhuǎn)陰而服用大量治療性中西藥物只會增加肝臟負擔(dān)，甚至招致不良后果。第二：“小三陽”還有一種表現(xiàn)為乙肝病毒DNA低水平復(fù)制（PCR檢測＜105），肝功能正?；蜉p度異常，稱為慢性乙肝病毒殘留期。這種情況約占“小三陽”患者總數(shù)的20％，目前國內(nèi)對此種患者最容易忽視。如果不積極治療，任其發(fā)展，可導(dǎo)致肝硬化、肝癌。第三：最嚴重的是乙肝病毒DNA高水平復(fù)制（PCR檢測＞105），肝功能不正常，稱為“e抗原陰性的慢性乙肝”。這種情況約占“小三陽”患者總數(shù)的10％，它的特點是病毒復(fù)制活躍，傳染性強，是由于乙肝病毒變異所致。這種“小三陽”反而比“三大陽”嚴重，其轉(zhuǎn)化為肝硬化、肝癌的幾率更高。第33頁，共38頁，2022年，5月20日，3點22分，星期六兩對半及HBV-DNA全陰就是沒有乙肝？在乙肝繼發(fā)的肝病及肝癌晚期情況中，因為肝細胞被破壞殆盡，乙肝病毒無容身之處，所以無法查到其抗體，同樣的，也無法檢測到乙肝病毒的DNA。依然不能排除乙肝病毒有變異的可能性和檢測方法的局限性。所以乙肝病人應(yīng)該定期復(fù)查乙