IPT的臨床應(yīng)用和報告解讀學(xué)習(xí)培訓(xùn)課件

NIPT的臨床應(yīng)用和報告解讀NIPT開展規(guī)范解讀案例分享目錄Contents020301NIPT介紹01NIPT技術(shù)介紹孕婦外周血胎兒游離DNA的發(fā)現(xiàn)PresenceoffetalDNAinmaternalplasmaand

serumLo,Y.M.;Corbetta,N.;Chamberlain,P.F.;Rai,V.;Sargent,I.L.;Redman,C.W.;Wainscoat,J.S.Lancet1997350(9076):

485-4871997年，香港中文大學(xué)的盧煜明教授等在《柳葉刀》(Lancet)上，報道了在懷有男胎孕婦的外周血中檢測到了Y染色體的存在，從而證明了孕婦外周血中存在來自胎兒的游離DNA。盧煜明獲2021

年科學(xué)突破獎生命科學(xué)獎無創(chuàng)產(chǎn)前檢測之父孕婦外周血中胎兒游離DNA來源和特點KristinE.Webb,BS,RDMS1.DetectionofFetalAneuploidyUsingCell-FreeDNA:ALiteratureReview胎兒cffDNA的來源：孕婦外周血含有cffDNA幾乎全部來源于胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞孕婦外周血中cffDNA含量約在5-30%胎兒cffDNA的基本特點：DNA片段較小，大小一般位于150-200bp之間，平均長度為166bp左右懷孕第4周即可檢出，8周后含量上升并穩(wěn)定（7周建立胎兒胎盤循環(huán)）分娩后短時間內(nèi)消失，平均半衰期為16min，分娩后2h就無法檢胎兒游離DNA：cell-free

fetal

DNA(cffDNA)出，再次妊娠不影響檢測存在個體差異NIPT:

Non-Invasive

PrenatalTesting無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測抽取母體血液和分離游離DNA對游離DNA進行測序通過生物信息學(xué)分析評估胎兒患21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征的風(fēng)險NIPT：孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前篩查，俗稱無創(chuàng)產(chǎn)前基因檢測，是應(yīng)用高通量基因測序技術(shù)檢測孕期母體外周血中胎兒游離DNA片段，以評估胎兒常見染色體非整倍體異常風(fēng)險。根據(jù)目前技術(shù)發(fā)展水平，NIPT的目標(biāo)疾病為3種常見胎兒染色體非整倍體異常，即21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征。檢測適宜孕周：12+0～22+6周。02NIPT開展規(guī)范解讀NIPT項目開展規(guī)范NIPT項目開展機構(gòu)/人員要求采血從事NIPT專業(yè)技術(shù)人員：經(jīng)省級衛(wèi)生行政部門批準(zhǔn)，取得從事產(chǎn)前篩查/診斷的《母嬰保健技術(shù)考核合格證書》備案采血本院檢測或與第三方檢測機構(gòu)合作產(chǎn)前診斷機構(gòu)（分子遺傳資質(zhì)）產(chǎn)前篩查機構(gòu)產(chǎn)前診斷機構(gòu)（無分子遺傳資質(zhì)）其余機構(gòu)或個人不得開展孕婦外周血胎兒游離DNA采血、實驗室檢測、相關(guān)臨床技術(shù)等服務(wù)。未經(jīng)備案不得開展孕婦外周血胎兒游離DNA采血、實驗室檢測、相關(guān)臨床技術(shù)等服務(wù)。簽訂合作協(xié)議NIPT違規(guī)開展處罰案例NIPT違規(guī)開展處罰案例NIPT違規(guī)開展處罰案例合法合規(guī)開展NIPTNIPT是一項好的技術(shù)更須合法合規(guī)開展避免醫(yī)療糾紛目標(biāo)疾病/適宜時間適用/慎用/不適用人群檢測前咨詢及知情同意檢測信息采集/標(biāo)本采集/檢測/報告發(fā)放檢測后咨詢/妊娠結(jié)局隨訪檢測前咨詢及知情同意

適用人群1、血清學(xué)篩查顯示胎兒常見染色體非整倍體風(fēng)險值介于高風(fēng)險切割值與1/1000之間的孕婦。2、有介入性產(chǎn)前診斷禁忌證者（如先兆流產(chǎn)、發(fā)熱、出血傾向、慢性病原體感染活動期、孕婦Rh陰性血型等）。3、孕20+6周以上，錯過血清學(xué)篩查最佳時間，但要求評估21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征風(fēng)險者。孕婦在充分知情同意情況下，可選擇孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前檢測。慎用人群1、早、中孕期產(chǎn)前篩查高風(fēng)險。2、預(yù)產(chǎn)期年齡≥35歲。3、重度肥胖（體重指數(shù)>40）。4、通過體外受精—胚胎移植方式受孕。5、有染色體異常胎兒分娩史，但除外夫婦染色體異常的情形。6、雙胎及多胎妊娠。7、醫(yī)師認(rèn)為可能影響結(jié)果準(zhǔn)確性的其他情形。有下列情形的孕婦進行檢測時，檢測準(zhǔn)確性有一定程度下降，檢出效果尚不明確；或按有關(guān)規(guī)定應(yīng)建議其進行產(chǎn)前診斷的情形。在充分告知并知情同意的前提下仍自愿要求進行檢測的孕婦，可選擇孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前檢測。檢測前咨詢及知情同意不適用人群1、孕周＜12+0周。2、夫婦一方有明確染色體異常。3、1年內(nèi)接受過異體輸血、移植手術(shù)、異體細(xì)胞治療等。4、胎兒超聲檢查提示有結(jié)構(gòu)異常須進行產(chǎn)前診斷。5、有基因遺傳病家族史或提示胎兒罹患基因病高風(fēng)險。6、孕期合并惡性腫瘤。7、醫(yī)師認(rèn)為有明顯影響結(jié)果準(zhǔn)確性的其他情形。檢測前咨詢及知情同意有下列情形的孕婦進行檢測時，可能嚴(yán)重影響結(jié)果準(zhǔn)確性。豫衛(wèi)辦[2018]84號文，相關(guān)機構(gòu)和人員不得對“不適用人群”進行孕婦外周血胎兒游離DNA采血與檢測。檢測前咨詢及知情同意對符合適用人群情形并自愿進行檢測的，或符合慎用人群情形但在充分告知并知情同意的前提下仍自愿要求進行檢測的孕婦，醫(yī)師應(yīng)當(dāng)對孕婦本人及其家屬詳細(xì)告知該檢測的目標(biāo)疾病、目的、意義、準(zhǔn)確率、局限性、風(fēng)險以及其他篩查與診斷方案，與孕婦本人或其家屬簽署知情同意書并填寫申請單。檢出率T21檢出率不低于95%T18檢出率不低于85%T13檢出率不低于70%假陽性率T21、T18、T13的復(fù)合假陽性率不高于0.5%檢測失敗率由于凝血、溶血、DNA質(zhì)量控制不合格等標(biāo)本原因造成的檢測失敗率不超過5%146958例孕婦NIPT篩查結(jié)果真陽性

假陽性假陰性 靈敏度（檢出率）特異性陽性預(yù)測值陰性預(yù)測值檢測前咨詢及知情同意NIPT不能評估胎兒神經(jīng)管缺陷風(fēng)險！對未接受中孕期血清學(xué)篩查直接選擇孕婦外周血胎兒游離DNA產(chǎn)前檢測的孕婦，應(yīng)當(dāng)在中孕期進行胎兒神經(jīng)管缺陷風(fēng)險評估。檢測后咨詢及報告解讀010203低風(fēng)險建議定期進行常規(guī)產(chǎn)前檢查高風(fēng)險遺傳咨詢，轉(zhuǎn)診至產(chǎn)前診斷機構(gòu)進行產(chǎn)前診斷低風(fēng)險，但存在影像學(xué)檢查異常遺傳咨詢，轉(zhuǎn)診至產(chǎn)前診斷機構(gòu)進行產(chǎn)前診斷90%100%妊娠結(jié)局隨訪1、隨訪率2、隨訪內(nèi)容低風(fēng)險孕婦 高風(fēng)險孕婦隨訪應(yīng)至少至分娩后12周，有條件的可隨訪至分娩后1年。后期流產(chǎn)、引產(chǎn)、早產(chǎn)或足月產(chǎn)、死產(chǎn)、死胎等妊娠結(jié)局，是否為21三體綜合征、18三體綜合征、13三體綜合征患兒，有條件的可將后期流產(chǎn)、死胎的遺傳學(xué)診斷納入妊娠結(jié)局隨訪內(nèi)容。03病例分享案例1

——NIPT低風(fēng)險，超聲提示異常，產(chǎn)前診斷為唐氏兒張芹,等.

無創(chuàng)產(chǎn)前檢測胎兒染色體非整倍體假陰性兩例[J].中華醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)雜志,

2017,034(006):884-887.孕婦27歲，G1P0，孕18周血清學(xué)篩查：21三體高風(fēng)險（1/55）NIPT：低風(fēng)險孕24周B超檢查：胎兒鼻骨發(fā)育不全、左腎竇分離產(chǎn)前診斷臍血穿刺：胎兒染色體核型分析為易位型21三體無創(chuàng)低風(fēng)險不代表胎兒一定沒問題！后續(xù)超聲異常要做產(chǎn)前診斷，避免漏診！案例2

——NIPT提示性染色體異常，產(chǎn)前診斷胎兒為15號染色體異常孕婦，36歲，G2P1，NT

2mm/CRL66mmNIPT：提示性染色體異常可能產(chǎn)前診斷羊水穿刺：胎兒染色體核型分析為未見異常（46,XN），基因芯片檢測到胎兒15q13.3區(qū)段存在432.5kb重復(fù)孕婦基因芯片結(jié)果：

45,X[36%]/46,XX[64%]嵌合型攜帶者，15q13.3區(qū)段存在432.5kb重復(fù)無創(chuàng)高風(fēng)險不代表胎兒一定有問題！也可能是孕婦本人的染色體異常導(dǎo)致！NIPT高風(fēng)險一定要做產(chǎn)前診斷，避免誤診！案例3

——NIPT提示16號染色體異常，胎盤的問題孕婦，28歲NIPT：提示16號染色體異常產(chǎn)前診斷羊水穿刺：胎兒染色體核型分析、基因芯片未見異常孕32周B超：胎兒嚴(yán)重宮內(nèi)生長受限，小于同孕齡4個標(biāo)準(zhǔn)差引產(chǎn)，經(jīng)基因芯片檢查，胎盤為16三體無創(chuàng)高風(fēng)險不代表胎兒一定有問題！也可能是胎盤的染色體異常導(dǎo)致胎兒嚴(yán)重FGR！NIPT高風(fēng)險一定要做產(chǎn)前診斷，并持續(xù)超聲隨訪，避免誤診/漏診！案例4

——NIPT低風(fēng)險，產(chǎn)前診斷為18三體綜合征北京協(xié)和醫(yī)院病例唐篩低風(fēng)險超聲提示異常NIPT低風(fēng)險產(chǎn)前診斷為18三體綜合征引產(chǎn)胎盤染色體為正常--摘自北京協(xié)和醫(yī)院蔣宇林搖椅足北京協(xié)和醫(yī)院NIPT假陽性病例無創(chuàng)高風(fēng)險不代表胎兒一定有問題！NIPT高風(fēng)險一定要做產(chǎn)前診斷，避免誤診！--摘自北京協(xié)和醫(yī)院蔣宇林造成NIPT假陽性或假陰性的原因胎兒游離DNA含量低孕周過早、孕婦體重過重、IVF-ET妊娠、雙胎母體染色體CNV改變母體染色體異常、母體CNV異常、母體染色體嵌合胎兒/胎盤染色體不一致局限性胎盤嵌合、胎盤正常但胎兒異常外源性或特殊游離DNA干擾雙胎之一停育、外源性輸血、淋巴細(xì)胞免疫治療、母體腫瘤、母體免疫系統(tǒng)疾病其他原因測序深度、數(shù)據(jù)分析、人為錯誤NIPT只是一種篩查方法，存在假陽性和假陰性，不能以NIPT