螺旋霉素的發(fā)酵工

螺旋霉素的發(fā)酵工藝

——制藥與環(huán)境工程系四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系簡(jiǎn)介工藝流程生產(chǎn)過程致謝概述目錄簡(jiǎn)介四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系螺旋霉素，本品為白色或微黃色粉末，微有味；微吸濕；易溶于乙醇、丙醇、丙酮和甲醇，難溶于水。本品具有強(qiáng)大的體內(nèi)抗菌作用和抗菌后效應(yīng)（PAE），能夠增強(qiáng)吞噬細(xì)胞的吞噬作用，廣泛分布于體內(nèi)。本品在組織細(xì)胞內(nèi)濃度較紅霉素高，而副作用小于紅霉素。本品可用于治療由革蘭陽(yáng)性菌和某些革蘭陰性菌引起的耳、鼻、喉和呼吸道感染。四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

藥理作用

四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系乙酰螺旋霉素為螺旋霉素的乙?；苌?，屬16元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類。本品對(duì)金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿性鏈球菌、糞腸球菌等革蘭陽(yáng)性球菌具良好抗菌作用。對(duì)李斯特菌屬、卡他莫拉菌、淋病奈瑟菌、胎兒彎曲菌、流感嗜血桿菌、嗜肺軍團(tuán)菌、百日咳桿菌、擬桿菌屬、產(chǎn)氣莢膜桿菌、痤瘡丙酸桿菌、消化球菌和消化鏈球菌以及衣原體屬、支原體屬、弓形體、隱孢子蟲等亦具抑制作用。腸道革蘭陰性桿菌通常耐藥。作用機(jī)制為乙酰螺旋霉素與敏感微生物的核糖體50S亞單位結(jié)合，抑制依賴于RNA的蛋白質(zhì)合成而發(fā)揮抑菌作用。作用機(jī)制、抗菌譜與紅霉素相似，抗肺組織菌作用與紅霉素相似或略遜，但比其具有更長(zhǎng)的抗生素后效應(yīng)（PAE）。與紅霉素有交叉耐藥。臨床并未顯示特別優(yōu)于紅霉素之處。

動(dòng)力學(xué)四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

螺旋霉素耐酸，口服吸收好，經(jīng)胃腸道吸收后脫乙?；D(zhuǎn)變?yōu)槁菪顾囟鹂咕饔谩蝿┛诜?小時(shí)達(dá)血藥峰濃度1mg/L。本品在體內(nèi)分布廣泛，在膽汁、尿液、膿液、支氣管分泌物、肺組織及前列腺中的濃度一般較血濃度高，本品不能透過血-腦脊液屏障。平均血消除半衰期約為4～8小時(shí)。多次給藥后體內(nèi)有蓄積作用。本品主要經(jīng)糞便排泄，12小時(shí)經(jīng)尿排泄量約為給藥量的5%～15%，其中大部分為代謝產(chǎn)物，膽汁中濃度可達(dá)血濃度的15～40倍。

適應(yīng)癥

四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

本品主要適用于對(duì)葡萄球菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌、腦膜炎球青霉素菌、淋球菌、白喉?xiàng)U菌、支原體、梅毒螺旋體等敏感菌所致的扁桃體炎、支氣管炎、肺炎、咽炎、中耳炎、皮膚和軟組織感染、乳腺炎、膽囊炎、猩紅熱、牙科和眼科感染、慢性支氣管炎急性發(fā)作、非淋菌性尿道炎，亦可用于隱孢子蟲病、或作為治療妊娠期婦女弓形體病的選用藥物。適用于敏感菌引起的下列各種感染：1.呼吸道感染：咽炎、支氣管炎、肺炎、鼻炎、鼻竇炎、扁桃體炎、蜂窩組織炎、耳炎、頰口部感染等。2.泌尿系統(tǒng)感染：衣原體感染、前列腺感染等。3.骨科：骨髓炎等。4.寄生蟲感染：弓形體病、隱孢子蟲病。5.其它：皮膚軟組織感染。用法用量

四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系口服：1.成人：常用量一日6片(每片75萬(wàn)單位)分2～3次服用；重癥感染患者劑量可遵醫(yī)囑增加到一日8片。2.兒童：依照體重，遵醫(yī)囑服用。本品受胃酸影響輕,飯后服.本品與其他大環(huán)內(nèi)酯類有較密切的交叉耐藥性。1.本品不影響氨茶堿等藥物的體內(nèi)代謝。2.在接受麥角衍生物類藥物的患者中，同時(shí)使用某些大環(huán)內(nèi)酯類曾出現(xiàn)麥角中毒，目前尚無麥角與乙酰螺旋霉素相互作用的報(bào)道，但理論上仍存在這一可能性，因此乙酰螺旋霉素與麥角不宜同時(shí)服用。

不良反應(yīng)

四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

病人對(duì)本品耐受性良好，不良反應(yīng)主要為腹痛、惡心、嘔吐等胃腸道反應(yīng)螺旋霉素，常發(fā)生于大劑量用藥時(shí)，程度大多輕微，停藥后可自行消失。變態(tài)反應(yīng)極少，主要為藥疹。未發(fā)現(xiàn)肝、腎功能損害及血、尿常規(guī)異常。

藥物禁忌

四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

對(duì)本品、紅霉素及其他大環(huán)內(nèi)酯類過敏的患者禁用。本品可透入胎盤，故螺旋霉素在孕婦中應(yīng)用需充分權(quán)衡利弊后決定是否應(yīng)用。尚無資料顯示螺旋霉素是否經(jīng)乳汁排泄，但由于許多大環(huán)內(nèi)酯類藥物可經(jīng)乳汁排泄，故哺乳期婦女宜慎用本品，如必須應(yīng)用時(shí)應(yīng)暫停哺乳。并對(duì)6個(gè)月以內(nèi)小兒患者的療效及安全性尚未確定。

發(fā)酵工藝流程四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系菌種甘油冷凍管 ↓

解凍一級(jí)搖瓶培養(yǎng) ↓26~28℃，培養(yǎng)約24h二級(jí)搖瓶培養(yǎng) ↓26~28℃，培養(yǎng)約24h一級(jí)種子罐培養(yǎng) ↓26~28℃，培養(yǎng)約24h二級(jí)種子罐培養(yǎng) ↓26~28℃，培養(yǎng)約24h發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng) ↓25~27℃，培養(yǎng)約100h發(fā)酵液放罐生產(chǎn)過程四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

（1）菌種（2）種子和發(fā)酵培養(yǎng)基（3）一級(jí)搖瓶菌絲的制備（4）二級(jí)搖瓶菌絲的制備（5）一級(jí)種子罐的菌種培養(yǎng)（6）二級(jí)種子罐的菌種培養(yǎng)（7）三級(jí)種子罐的菌種培養(yǎng)四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

（1）菌種

工業(yè)生產(chǎn)使用的螺旋霉素生產(chǎn)菌是螺旋霉素的鏈霉菌經(jīng)過多次誘變后獲得的高產(chǎn)菌株。菌種保藏采用菌絲體制備成甘油管，在冷凍條件下低溫保存，保存期為6個(gè)月（2）種子和發(fā)酵培養(yǎng)基 在配制培養(yǎng)基的過程中要求確保各種成分齊全、稱量準(zhǔn)確無誤，每組培養(yǎng)基都要做到徹底滅菌，以保證嚴(yán)格的純種培養(yǎng)。（3）一級(jí)搖瓶菌絲的制備 將保存的冷凍管取出，放置在室溫或37℃恒溫室化凍后，在無菌條件下吸冷凍液接入有75ml的培養(yǎng)基的一級(jí)搖瓶，27℃振蕩培養(yǎng)24h。菌絲要求鏡檢粗壯、呈團(tuán)狀、顏色深、無空泡、無雜菌。一級(jí)種夜應(yīng)做肉湯培養(yǎng)，以檢查有無雜菌四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

（4）二級(jí)搖瓶菌絲的制備 將長(zhǎng)好的一級(jí)搖瓶菌絲在無菌條件先吸接入有75ml的二級(jí)搖瓶中，27℃振蕩培養(yǎng)24h，得二級(jí)搖瓶菌絲。在無菌條件下以6~8h瓶并成一排，倒入滅菌的接種瓶中，裝好已滅菌的接種針頭備用。操作的同時(shí)，要將剩余的種液約1ml都如肉湯作無菌試驗(yàn)。離開無菌室后，進(jìn)罐菌絲必須鏡檢，要求菌絲量多、網(wǎng)狀、染色中等、無雜菌、允許有少量空泡。（5）一級(jí)種子罐的菌種培養(yǎng) 將培養(yǎng)好的二級(jí)搖瓶菌絲在無菌條件下接入已滅菌的一級(jí)種子罐培養(yǎng)基中，在26℃~28℃溫度下培養(yǎng)24h，在確保菌絲體檢驗(yàn)合格和無雜菌的情況下轉(zhuǎn)入下級(jí)培養(yǎng)或降溫保壓。四川化工職業(yè)技術(shù)學(xué)院制藥與環(huán)境工程系

（6）二級(jí)種子罐的菌種培養(yǎng)

在培養(yǎng)好的一級(jí)種子罐菌種在無菌條件下接入已滅菌的二級(jí)種子罐培養(yǎng)基中，在26℃~28℃溫度下培養(yǎng)24h，在確保菌絲體檢驗(yàn)合格和無雜菌的情況