癌胚抗原課件

CEA檢測技術(shù)的研究腫瘤標(biāo)志物癌胚抗原04展望01癌胚抗原簡介02癌胚抗原的臨床意義03癌胚抗原的檢測技術(shù)TransitionPage過渡頁04展望01清晰的內(nèi)容設(shè)定02癌胚抗原的臨床意義03癌胚抗原的檢測技術(shù)01清晰的內(nèi)容設(shè)定01癌胚抗原簡介TransitionPage過渡頁04展望01癌胚抗原簡介02巧妙的母版設(shè)計(jì)03癌胚抗原的檢測技術(shù)0102癌胚抗原的臨床意義濃度CEA動(dòng)態(tài)檢測02臨床意義是一種廣譜的腫瘤標(biāo)志物，與消化系腫瘤有關(guān)，也見于非消化系腫瘤和非腫瘤性疾病，為低器官特異性腫瘤標(biāo)志物與腫瘤分化程度有關(guān)，分化程度差者濃度低，分化程度高則濃度高，化療或放療腫瘤細(xì)胞壞死或損傷使CEA釋放，可提高陽性率?？勺鳛楣烙?jì)預(yù)后、復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移和考核治療效果的依據(jù)之一02臨床意義

結(jié)腸癌患者70%～90%顯示CEA高度陽性，血清CEA水平變化與結(jié)腸癌Duke分期密切相關(guān)其他消化道腫瘤也可檢測到CEA陽性，如：大腸癌患者可達(dá)65%-75%的陽性腸道炎癥、腎功不全、結(jié)腸息肉、肝硬化、慢性肝炎、閉鎖性黃疸等也可導(dǎo)致CEA水平增高妊娠、大量吸煙也可引起CEA水平增高總之：CEA并非一種癌的特異性抗原，而是癌的一種相關(guān)抗原，缺少特異性，不能作為腫瘤的篩選指標(biāo)，而是用于腫瘤患者的監(jiān)測，療效的判斷TransitionPage過渡頁04展望01癌胚抗原簡介02癌胚抗原的臨床意義03簡單的展示思路0103癌胚抗原的檢測技術(shù)癌胚抗原目前臨床上用來檢測CEA濃度的主要方法酶聯(lián)免疫吸附測定熒光免疫測定放射免疫測定電化學(xué)發(fā)光免疫測定安培免疫測定免疫金標(biāo)技術(shù)間接法雙抗體夾心法競爭結(jié)合法熒光偏振免疫測定時(shí)間分辨熒光免疫測定酶聯(lián)熒光免疫測定核素分析的高靈敏度結(jié)合抗原-抗體反應(yīng)的高特異性靈敏的化學(xué)發(fā)光分析特異的免疫測定電化學(xué)信號(hào)的變化膠體金為標(biāo)記物03檢測技術(shù)03檢測技術(shù)時(shí)間分辨熒光免疫測定主要原理時(shí)間分辨熒光免疫測定（TRFIA）是一種新型的免疫分析技術(shù)，與一般的免疫熒光法不同，它所采用的示蹤劑是鑭系稀土元素銪(Eu)將鑭系元素銪（Eu）螯合物作熒光標(biāo)記物，利用這類熒光物質(zhì)有長熒光壽命的特點(diǎn)，延長熒光測量時(shí)間，待短壽命的自然本底熒光完全衰退后再行測定，所得信號(hào)完全為長壽命鑭系螯合物的熒光，從而有效地消除非特異性本底熒光的干擾，最大限度的提高了測定方法的特異性和靈敏度。03檢測技術(shù)時(shí)間分辨熒光免疫測定檢測步驟抗原與包被的抗體發(fā)生特異性結(jié)合游離的用鑭系元素標(biāo)記的抗體與抗原發(fā)生特異性的結(jié)合用時(shí)間分辨技術(shù)測量熒光12

303檢測技術(shù)時(shí)間分辨熒光免疫測定檢測步驟在包被孔中有抗體被包被在孔的內(nèi)表面，加入血清后，震蕩使抗原抗體完全結(jié)合，洗滌并甩干在包被孔中加入游離的用鑭系元素標(biāo)記的抗體，此抗體與已經(jīng)結(jié)合在孔表面上的抗原相結(jié)合，這樣鑭系元素就通過一個(gè)“雙抗夾心”化合物被固定在包被孔的表面，被固定的鑭系元素的量與抗原的量成一定的比例關(guān)系，洗滌除去未反應(yīng)的游離的標(biāo)記抗體熒光的強(qiáng)弱與鑭系元素的量成正比，因此與抗原的量也呈正比，這樣可以測出血清中癌胚抗原的含量03檢測技術(shù)液流熒光技術(shù)主要原理①編碼微球：用不同配比的兩種紅色分類熒光染料將直徑為5.6μm的聚苯乙烯微球染成不同熒光色，從而獲得多達(dá)100種熒光編碼的微球。②共價(jià)交聯(lián)：將針對不同待測物的抗體分子或基因探針以共價(jià)交聯(lián)的方式結(jié)合到特定的編碼微球上，每個(gè)編碼微球都對應(yīng)相應(yīng)的檢測項(xiàng)目。③結(jié)合反應(yīng)：將針對不同待測物的熒光編碼微球混合，加入待測物質(zhì)或待檢的基因擴(kuò)增片斷，形成復(fù)合物再與標(biāo)記的熒光素發(fā)生結(jié)合反應(yīng)。④激光分析：微球在流動(dòng)的鞘液帶動(dòng)下單列依次通過紅綠兩束激光，紅激光用以判定微球的熒光編碼，綠激光用以測定微球上報(bào)告分子的熒光強(qiáng)度。在檢測孔中加入25μl樣品稀釋液，分別加入標(biāo)準(zhǔn)品及檢測標(biāo)本10μI，充分混勻1依次加入針對不同待測物的抗體編碼微球10μl，充分混勻，37℃5min避光反應(yīng)2依次加入PE標(biāo)記的抗體25μl，充分混勻，37℃60min避光反應(yīng)3每孔加入終止液100μl，混勻上機(jī)檢測4液流熒光技術(shù)檢測方法檢測結(jié)果由機(jī)器自動(dòng)從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出503檢測技術(shù)多功能技術(shù)平臺(tái)▲主要通過可偶聯(lián)的熒光編碼微球與兩束激光檢測來對被測物進(jìn)行定性和定量分析▲通量大，可對多種目的同時(shí)分析，大大提高工作效率▲液相環(huán)境更有利于保持生物電分子的天然構(gòu)象，也更有利于反應(yīng)進(jìn)行03檢測技術(shù)液流熒光技術(shù)檢測優(yōu)點(diǎn)▲靈敏度特異度、準(zhǔn)確度好，只需要微量樣本即可進(jìn)行檢測CEA檢測技術(shù)的發(fā)展從最初單純單純用于結(jié)直腸癌的診斷到目前與多個(gè)腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合檢測利用癌胚抗原的許多生物學(xué)特性提高腫瘤的診斷率,并結(jié)合其它標(biāo)記物聯(lián)合診斷,在腫瘤治療中發(fā)揮重要的作用從傳統(tǒng)的熒光、