2023屆四川省瀘州市江陽(yáng)區(qū)瀘州高中高三最后一卷生物試卷含解析

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng)1．考生要認(rèn)真填寫考場(chǎng)號(hào)和座位序號(hào)。2．試題所有答案必須填涂或書寫在答題卡上，在試卷上作答無效。第一部分必須用2B鉛筆作答；第二部分必須用黑色字跡的簽字筆作答。3．考試結(jié)束后，考生須將試卷和答題卡放在桌面上，待監(jiān)考員收回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．下列關(guān)于試管牛和克隆牛的敘述，錯(cuò)誤的是（）A．均需卵細(xì)胞參與 B．均需胚胎移植技術(shù)C．均需進(jìn)行胚胎體外培養(yǎng) D．均是無性生殖技術(shù)2．下列動(dòng)物細(xì)胞的生命活動(dòng)中，不是由單層膜的細(xì)胞器完成的是（）A．合成磷脂 B．對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分揀C．發(fā)出紡錘絲形成紡錘體 D．消化細(xì)胞自身產(chǎn)生的碎渣3．科學(xué)家從動(dòng)物的胰臟中分離到一類低分子量的蛋白質(zhì)（Ub），能對(duì)細(xì)胞中的異常蛋白（靶蛋白）貼上“標(biāo)簽”，被貼標(biāo)簽的靶蛋白隨即被蛋白酶水解，其過程如下圖所示，相關(guān)說法錯(cuò)誤的是（）（注：AMP為一磷酸腺苷）A．Ub為靶蛋白貼標(biāo)簽的過程需要消耗能量B．靶蛋白水解過程與人消化道內(nèi)蛋白質(zhì)水解過程不同C．Ub在維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)的過程中有重要作用D．Ub在靶蛋白水解過程中起到催化的作用4．下列關(guān)于性別決定的敘述，正確的是（）A．兩棲類屬于XY型性別決定方式B．生物的性別決定都取決于性染色體的組成C．在體細(xì)胞中性染色體上的基因都是成對(duì)存在的D．位于性染色體上的基因不一定與性別決定有關(guān)5．人棘狀毛囊角質(zhì)化是一種伴X染色體顯性遺傳病，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．女性患者的致病基因可以傳遞給兒子或女兒B．男性患者的致病基因可以傳遞給兒子或女兒C．女性患者與正常男性結(jié)婚可能生出正常女兒D．正常男性和正常女性結(jié)婚一般不會(huì)生出患病孩子6．將乳酸菌接種在充滿5%葡萄糖溶液的培養(yǎng)瓶中，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間。定時(shí)取樣并調(diào)查菌體密度。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A．乳酸菌分解葡萄糖釋放的能量大部分以熱能形式散失B．乳酸菌分解葡萄糖的過程屬于物質(zhì)氧化分解過程C．菌體內(nèi)NADPH和丙酮酸在酶的催化下轉(zhuǎn)化為乳酸D．因缺乏其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，瓶中乳酸菌不會(huì)大量增殖二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）2020年初，武漢出現(xiàn)了不明原因的肺炎，經(jīng)檢測(cè)是由一種新型冠狀病毒（NCP）引起的。科研人員正在加緊研制生產(chǎn)NCP的疫苗和探索相應(yīng)抗體的制備。回答有關(guān)的問題：（1）科研人員提出用康復(fù)者血清治療新冠型肺炎，是因?yàn)榭祻?fù)者血清中存在_______（填“抗原”或“抗體”），但該方法存在缺陷，如_______________（答出一點(diǎn)即可）。（2）針對(duì)血清治療存在的缺陷，研究者從治愈患者捐獻(xiàn)的血液中提取漿細(xì)胞，然后用_______誘導(dǎo)該細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞發(fā)生融合。幾經(jīng)努力，最終生產(chǎn)出單克隆抗體，此種方法生產(chǎn)的抗體具有______________________的優(yōu)點(diǎn)。（3）科研人員還設(shè)想將控制無限增殖的基因（記作X基因）轉(zhuǎn)入人的漿細(xì)胞，構(gòu)建出產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞系。用PCR技術(shù)擴(kuò)增X基因的前提是需要知道______。若在漿細(xì)胞中的染色體DNA上檢測(cè)到X基因，但該漿細(xì)胞死亡或不能增殖，則原因最可能是_______________________。8．（10分）擁有良好的生態(tài)環(huán)境是人類社會(huì)可持續(xù)發(fā)展的基礎(chǔ)。為保護(hù)環(huán)境，國(guó)家提倡建立生態(tài)農(nóng)場(chǎng)，以達(dá)到獲得最大生物產(chǎn)量和維護(hù)生態(tài)平衡相統(tǒng)一?；卮鹣铝杏嘘P(guān)知識(shí)：（l）生態(tài)農(nóng)場(chǎng)中生物之間的種間關(guān)系屬于_________水平上研究的問題。（2）如果在山地建設(shè)生態(tài)農(nóng)場(chǎng)，需要種植林木時(shí)，種植混交林比種植單一林好，因?yàn)檫@樣可以提高生態(tài)系統(tǒng)的_____________（填“抵抗力穩(wěn)定性”“恢復(fù)力穩(wěn)定性”或“抵抗力穩(wěn)定性和恢復(fù)力穩(wěn)定性”），原因是________。（3）生態(tài)農(nóng)場(chǎng)要定期除草，對(duì)于提高農(nóng)作物產(chǎn)量有很大的好處，是因?yàn)檫@樣可以調(diào)整能量流動(dòng)關(guān)系，使能量_______，同時(shí)比使用除草劑好，因?yàn)開_______。（4）“桑基魚塘”就是一種生態(tài)農(nóng)場(chǎng)的雛形，有同學(xué)認(rèn)為“魚塘泥肥?！钡牡览硎囚~塘泥中含有大量的有機(jī)物，可以被桑樹直接吸收利用，你認(rèn)為這種說法對(duì)嗎？_________，請(qǐng)簡(jiǎn)述理由_________。9．（10分）植物細(xì)胞壁中存在大量不能被豬消化的多聚糖類物質(zhì)，如半纖維素多聚糖、果膠質(zhì)（富含有半乳糖醛酸的多聚糖）等。研究人員通過基因工程、胚胎工程等技術(shù)培育出轉(zhuǎn)多聚糖酶基因（manA）豬，主要流程如下圖（neo為新霉素抗性基因）。（1）將該重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，經(jīng)培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)約有50%的細(xì)胞能正常表達(dá)目的基因產(chǎn)物，原因是_____________________________________________________________。通過①過程獲得的重組質(zhì)粒含有4.9kb個(gè)堿基對(duì)，其中manA基因含有1.8kb個(gè)堿基對(duì)。若用BamHⅠ和EcoRⅠ聯(lián)合酶切割其中一種重組質(zhì)粒，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段，若用上述聯(lián)合酶切割同等長(zhǎng)度的另一種重組質(zhì)粒，則可獲得__________kb長(zhǎng)度兩種的DNA片段。（2）圖2中，豬胎兒成纖維細(xì)胞一般選擇傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是__________________________________，豬的卵母細(xì)胞一般要培養(yǎng)到__________期。（3）在④過程的早期胚胎培養(yǎng)時(shí)，通常需要定期更換培養(yǎng)液，目的是______________________________________________，一般培養(yǎng)到__________階段，可向受體移植。（4）⑤過程前，通常需對(duì)受體母豬注射孕激素，對(duì)其進(jìn)行__________處理。10．（10分）基因打靶技術(shù)是建立在基因同源重組技術(shù)以及胚胎干細(xì)胞技術(shù)的基礎(chǔ)上而發(fā)展起來的一種分子生物學(xué)技術(shù)。請(qǐng)結(jié)合圖示回答下列有關(guān)問題：注：neor是新霉素抗性基因；tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。（1）將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到__________上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測(cè)序驗(yàn)證正確后，利用__________酶，將之線性化，以提高重組率。通過__________技術(shù)將打靶載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有機(jī)會(huì)發(fā)生同源重組。（3）為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入__________。最后還需要通過__________技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行__________保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到同種、__________的母鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后對(duì)受體母鼠進(jìn)行妊娠檢查，確保其生下嵌合體小鼠。這種嵌合體小鼠長(zhǎng)大后，體內(nèi)同時(shí)存在被“修飾”過的基因和未被“修飾”的基因。如果某些小鼠的__________（填“體細(xì)胞”或“生殖細(xì)胞”）恰巧被“修飾”過了，則它們的雜交后代中，就可能出現(xiàn)基因完全被“修飾”過的小鼠。11．（15分）滴灌施肥技術(shù)是在灌水的同時(shí)可以把肥料均勻地帶到作物根部，實(shí)現(xiàn)了水肥一體化管理。利用該技術(shù)，不僅能節(jié)省勞力，還可以提高肥料利用率，改善土壤環(huán)境狀況，實(shí)現(xiàn)豐產(chǎn)穩(wěn)產(chǎn)。請(qǐng)結(jié)合材料回答下列問題：（l）硝酸銨（NH4NO3）等無機(jī)鹽因在水中的溶解度____，經(jīng)常作為滴灌施肥技術(shù)的首選肥料。無機(jī)鹽在植物體內(nèi)主要以____的形式存在。將植物體烘干，然后點(diǎn)燃燒盡，最終得到的____就是無機(jī)鹽。（2）利用滴灌施肥技術(shù)時(shí)，肥料溶液濃度不宜過高，否則會(huì)造成植物根細(xì)胞____，從而造成“燒苗”現(xiàn)象。（3）滴灌可以保持土壤良好的水氣狀況，基本不破壞原有土壤結(jié)構(gòu)。一方面可以有效促進(jìn)土壤微生物作為____者將土壤中的有機(jī)物分解成無機(jī)物，其中的CO2可作為植物______的原料，其中的無機(jī)鹽則與水肥中的無機(jī)鹽一起以____的方式被植物根細(xì)胞吸收。另一方面可以有效避免植物根細(xì)胞____產(chǎn)生酒精，造成“爛根”。（4）在晴朗的夏日，采用該技術(shù)還可以有效降低“光合午休”，請(qǐng)解釋其中的原因：______________________________________________。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【解析】

試管動(dòng)物和克隆動(dòng)物的比較：試管動(dòng)物克隆動(dòng)物生殖方式有性生殖無性生殖技術(shù)手段體外受精、胚胎移植核移植技術(shù)、胚胎移植遺傳規(guī)律遵循不遵循【詳解】A、試管牛體外受精需要卵細(xì)胞的參與，克隆牛核移植技術(shù)需要去核的卵細(xì)胞，A正確；B、試管牛和克隆牛都需要胚胎移植，B正確；C、試管牛和克隆牛均需進(jìn)行胚胎體外培養(yǎng)，C正確；D、試管牛是經(jīng)過體外受精和胚胎移植產(chǎn)生的，屬于有性生殖，克隆牛是核移植技術(shù)、胚胎移植產(chǎn)生的，屬于無性生殖，D錯(cuò)誤。故選D。2、C【解析】

雙層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器：葉綠體、線粒體；單層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器：內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體、溶酶體、液泡；無膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器：核糖體、中心體?！驹斀狻緼、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中合成磷脂，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)是單層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，A錯(cuò)誤；B、高爾基體對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分揀，高爾基體是單層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，B錯(cuò)誤；C、中心體無膜結(jié)構(gòu)，能發(fā)出紡錘絲形成紡錘體，C正確；D、溶酶體消化細(xì)胞自身產(chǎn)生的碎渣，溶酶體是單層膜結(jié)構(gòu)的細(xì)胞器，D錯(cuò)誤。故選C?！军c(diǎn)睛】本題考查動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)的多種細(xì)胞器，意在考查對(duì)各種細(xì)胞器結(jié)構(gòu)和功能的掌握。3、D【解析】據(jù)圖可知，Ub與靶蛋白的結(jié)合過程需要消耗ATP，A項(xiàng)正確；靶蛋白水解過程需要消耗ATP，人消化道內(nèi)蛋白質(zhì)水解過程不需要消耗ATP，B項(xiàng)正確；細(xì)胞中的異常蛋白被水解有利于維持細(xì)胞內(nèi)部環(huán)境的相對(duì)穩(wěn)定，C項(xiàng)正確；Ub在靶蛋白水解過程中起到“標(biāo)簽”的作用，而不是催化作用，D項(xiàng)錯(cuò)誤。4、D【解析】

1.生物的性別決定類型一般是對(duì)雌雄異體的生物來說的，有的生物的性別決定是ZW型，有的是XY型。ZW型性別決定普遍存在于鱗翅目昆蟲、兩棲類、爬行類和鳥類之中，雌性個(gè)體的性染色體組成是ZW，雄性個(gè)體的性染色體組成是ZZ；XY型性別決定是所有哺乳類動(dòng)物、多數(shù)雌雄異株植物、昆蟲、某些魚類和兩棲類動(dòng)物的性別決定方式，雌性個(gè)體的性染色體組成是XX，雄性個(gè)體的性染色體組成是XY。2.位于性染色體上的基因在遺傳過程中總是與性別相關(guān)聯(lián)，稱為伴性遺傳。XY型性別決定生物的伴性遺傳類型有：X染色體隱性遺傳、X染色體顯性遺傳、Y染色體上的遺傳?！驹斀狻緼、某些兩棲類性別決定方式為ZW型，A錯(cuò)誤；B、蜜蜂的性別決定取決于染色體數(shù)目，無性染色體，B錯(cuò)誤；C、X非同源區(qū)段的基因，Y上無對(duì)應(yīng)的等位基因，基因不成對(duì)，C錯(cuò)誤；D、對(duì)雌雄異體的生物來說，生物的性別是由性染色體決定的，性染色體上的基因不都是與性別決定有關(guān)，例如果蠅X染色體上決定眼色的基因，D正確。故選D?！军c(diǎn)睛】對(duì)于性別決定和伴性遺傳、伴性遺傳的類型和特點(diǎn)的理解，把握知識(shí)的內(nèi)在聯(lián)系并形成知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力是本題考查的重點(diǎn)。5、B【解析】

1、棘狀毛囊角質(zhì)化是由位于X染色體上的顯性致病基因決定的一種遺傳病，其特點(diǎn)：（1）世代相傳；（2）男患者少于女患者；（3）男患者的母親和女兒都患病，女性正常個(gè)體的父親和兒子都正常。2、假設(shè)棘狀毛囊角質(zhì)化的致病基因是D，則基因型和性狀的關(guān)系：

XDXD

XDXd

XdXd

XDY

XdY

女性患者

女性患者

女性正常

男性患者

男性正?！驹斀狻緼、兒子和女兒的X染色體都可來自母親，因此女性患者的致病基因可以傳遞給兒子或女兒，A正確；B、男性患者的致病基因只傳遞給女兒，B錯(cuò)誤；C、女性患者（若為XDXd）與正常男性（XdY）結(jié)婚后可以生出XdXd正常的女兒，C正確；D、正常男性（XdY）和正常女性（XdXd）結(jié)婚，后代一般不會(huì)生出患病的孩子，D正確。故選B。6、C【解析】

乳酸菌分解葡萄糖的過程為細(xì)胞呼吸，屬于物質(zhì)不徹底氧化分解過程，氧化分解后能量大部分以熱能形式散失，另一部分能量?jī)?chǔ)存在ATP中。菌體內(nèi)NADH和丙酮酸在酶的催化下轉(zhuǎn)化為乳酸?！驹斀狻緼、乳酸菌分解葡萄糖釋放的能量中約69%的以熱能形式散失，A正確；B、乳酸菌分解葡萄糖的過程屬于不徹底氧化分解過程，B正確；C、NADPH是光合作用光反應(yīng)的產(chǎn)物，C錯(cuò)誤；D、菌體繁殖需要除C、H、O

外其他元素,用于合成蛋白質(zhì)、核酸等,培養(yǎng)瓶中僅含葡萄糖溶液沒法大量繁殖，D正確。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、抗體血清成分復(fù)雜，對(duì)于是否會(huì)引起其他問題還存在不確定性角度二：需要的血清數(shù)量比較大（血清抗體含量少）角度三：血清抗體純度低，特異性差滅活的病毒（聚乙二醇、PEG、離心、電激、振動(dòng)等均可）特異性強(qiáng)、靈敏度高、并可大量制備X基因的（一段）核苷酸序列X基因的插入破壞了漿細(xì)胞生命活動(dòng)必需的某些基因角度二：X基因沒有表達(dá)，所以不增殖【解析】

1、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。2、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體?！驹斀狻浚?）康復(fù)者的血清中含有抗新型冠狀病毒的抗體，因此有科研人員建議用康復(fù)者的血清來治療患者，但存在血清成分復(fù)雜，對(duì)于是否會(huì)引起其他問題還存在不確定性或需要的血清數(shù)量比較大或血清抗體純度低，特異性差等問題，該方法還存在一定的缺陷。（2）可以采用滅活的病毒或利用聚乙二醇等誘導(dǎo)將漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合。單克隆抗體與普通血清抗體相比較，最主要的優(yōu)點(diǎn)在于它的特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備。（3）若用PCR技術(shù)擴(kuò)增X基因，則需要用到熱穩(wěn)定DNA聚合酶，該方法能夠成功獲取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便合成引物，以便于擴(kuò)增X基因。若X基因的插入破壞了漿細(xì)胞生命活動(dòng)必需的某些基因，或者X基因?qū)霛{細(xì)胞后沒有表達(dá)，都可能導(dǎo)致在漿細(xì)胞中的染色體DNA上檢測(cè)到X基因，但該漿細(xì)胞死亡或不能增殖等現(xiàn)象?！军c(diǎn)睛】本題考查基因工程、單克隆抗體的制備等知識(shí)，要求考生識(shí)記基因的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)；識(shí)記單克隆抗體的制備過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。8、群落抵抗力穩(wěn)定性生物種類多，營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，抵抗力穩(wěn)定性高持續(xù)高效地流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠譁p少對(duì)環(huán)境的污染不對(duì)植物不能直接利用有機(jī)物，魚塘泥中的有機(jī)物被分解為無機(jī)物后，才能被桑樹吸收利用【解析】

1、生態(tài)系統(tǒng)所具有的保持或恢復(fù)自身結(jié)構(gòu)和功能相對(duì)穩(wěn)定的能力叫做生態(tài)系統(tǒng)的穩(wěn)定性，包括兩個(gè)方面，一是抵抗力穩(wěn)定性，二是恢復(fù)力穩(wěn)定性。2、研究生態(tài)系統(tǒng)的能量流動(dòng)，可以實(shí)現(xiàn)對(duì)能量的多級(jí)利用，大大提高能量的利用率，還可以幫助人們合理地調(diào)整生態(tài)系統(tǒng)中的能量流動(dòng)關(guān)系，使能量持續(xù)高效地流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠??！驹斀狻浚?）種間關(guān)系屬于群落水平上研究的問題。（2）種植林木時(shí)，應(yīng)種植混交林，這樣一方面可提高物種的豐富度，另一方面可以提高營(yíng)養(yǎng)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度，進(jìn)而提高生態(tài)系統(tǒng)的抵抗力穩(wěn)定性。（3）將農(nóng)作物中的雜草生態(tài)去除，可以調(diào)整能量流動(dòng)關(guān)系，使能量持續(xù)高效地流向?qū)θ祟愖钣幸娴牟糠郑蚁啾扔诔輨┏?，能減少對(duì)環(huán)境的污染。（4）植物不能直接利用有機(jī)物，魚塘泥中的有機(jī)物被分解為無機(jī)物后，才能被桑樹吸收利用，因此這種說法是錯(cuò)誤的?！军c(diǎn)睛】本題考查能量流動(dòng)的意義以及生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生分析問題和解決問題的能力。9、目的基因與質(zhì)粒結(jié)合時(shí)，存在正接和反接兩種重組質(zhì)粒3.5和1.4保持正常的二倍體核型減數(shù)第二次分裂中清除代謝廢物，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)桑椹胚或囊胚同期發(fā)情【解析】

分析題圖：①為基因表達(dá)載體的構(gòu)建、②為將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、③為體細(xì)胞核移植、④為早期胚胎培養(yǎng)、⑤為胚胎移植。【詳解】（1）將該重組質(zhì)粒成功導(dǎo)入受體細(xì)胞后，經(jīng)培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)約有50%的細(xì)胞能正常表達(dá)目的基因產(chǎn)物，原因是目的基因與質(zhì)粒結(jié)合時(shí)，存在正接和反接兩種重組質(zhì)粒。上述4.9kb的重組質(zhì)粒有兩種形式，若用BamHI和EcoRI聯(lián)合酶切其中一種，只能獲得1.7kb和3.2kb兩種DNA片段，說明右側(cè)BamHI和EcoRI之間的長(zhǎng)度為1.7；用聯(lián)合酶切同等長(zhǎng)度的另一種重組質(zhì)粒，則切割的是BamHI左側(cè)的位點(diǎn)，又因?yàn)閙anA基因含有1.8kb個(gè)堿基對(duì)，可獲得1.7+1.8=3.5kb和4.9-3.5=1.4kb兩種DNA片段。（2）豬胎兒成纖維細(xì)胞一般選擇傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是保持正常的二倍體核型。細(xì)胞在傳至10～50代時(shí)，增殖會(huì)逐漸緩慢，以至于完全停止，這時(shí)部分細(xì)胞的細(xì)胞核型可能會(huì)發(fā)生變化。在核移植時(shí)采集的卵母細(xì)胞，在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才進(jìn)行去核操作。（3）在早期胚胎培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，清除代謝廢物，補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。胚胎一般培養(yǎng)到桑椹胚或囊胚階段，可向受體移植。（4）胚胎移植前，通常需對(duì)受體母豬注射孕激素，使其能同期發(fā)情?！军c(diǎn)睛】解答本題的關(guān)鍵是掌握基因工程的相關(guān)知識(shí)、核移植技術(shù)和胚胎移植技術(shù)，并能夠分析和判斷圖中各個(gè)字母代表的過程的名稱，結(jié)合題目的提示分析答題。10、載體（或質(zhì)粒）限制顯微注射新霉素和丙氧鳥苷DNA分子雜交液氮（或冷凍）生理狀態(tài)相同（或經(jīng)同期發(fā)情處理）生殖細(xì)胞【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸?kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。【詳解】（1）分析題圖可知，將目的基因和與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的DNA片段都重組到載體（或質(zhì)粒）上，構(gòu)建打靶載體（基因表達(dá)載體）。（2）打靶載體測(cè)序驗(yàn)證正確后，利用限制酶，將之線性化，以提高重組率。通過顯微注射技術(shù)導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞，這樣打靶載體與細(xì)胞內(nèi)靶基因同源的區(qū)段就有幾率發(fā)生同源重組。（3）neor是新霉素抗性基因，tk基因的表達(dá)可以使無毒的丙氧鳥苷代謝為毒性物質(zhì)，導(dǎo)致細(xì)胞死亡，因此為了篩選發(fā)生同源重組的細(xì)胞，可在培養(yǎng)液中加入新霉素和丙氧鳥苷。最后還需要通過DNA分子雜交技術(shù)鑒定同源重組的細(xì)胞（去除靶基因），將這樣的細(xì)胞通過動(dòng)物細(xì)胞（或克?。┡囵B(yǎng)后，獲得大量打靶成功的細(xì)胞。其中，暫時(shí)不用的細(xì)胞進(jìn)行液氮（或冷凍）保存。（4）將打靶成功的細(xì)胞注射入小鼠囊胚，移植到