合成肽疫苗課件

第三節(jié)合成肽疫苗（Syntheticpeptidevaccine）定義：根據(jù)有效免疫原的氨基酸序列而設(shè)計(jì)與合成的多肽疫苗。

1.1合成肽疫苗的概述合成肽疫苗是一種僅含免疫決定簇組分的小肽,即用人工方法按天然蛋白質(zhì)的氨基酸順序合成保護(hù)性短肽,與載體連接后加佐劑所制成的疫苗,是最為理想的安全新型疫苗,也是目前研制預(yù)防和控制感染性疾病和惡性腫瘤的新型疫苗的主要方向之一.1.2疫苗的發(fā)展簡(jiǎn)史

早在18世紀(jì)末期,英國(guó)人EewardJenner首先用牛痘材料接種兒童來(lái)預(yù)防天花,獲得成功,這就是人類(lèi)歷史上第一個(gè)生物制品———牛痘疫苗的問(wèn)世。從此,人們開(kāi)始運(yùn)用疫苗來(lái)預(yù)防或治療許多種疾病。傳統(tǒng)疫苗是將病原微生物通過(guò)物理的或化學(xué)的方法滅活或?qū)⑵涠玖p弱,以及天然的弱毒微生物而制備成的,即所謂的第一代疫苗。隨著分子生物學(xué)的研究進(jìn)展,人們又開(kāi)發(fā)出第二代疫苗,即分子水平的疫苗。但是它們都存在著一定的生物危害性和遺傳變異等影響疫苗使用的問(wèn)題。隨著免疫學(xué)的深入研究,人們認(rèn)識(shí)到抗原引起機(jī)體的免疫反應(yīng)必須有免疫原性和保護(hù)性的特異性抗原決定簇參與其中。1.3合成肽疫苗的構(gòu)建

合成肽疫苗能克服常規(guī)疫苗的缺點(diǎn)，很早就被認(rèn)為是動(dòng)物傳染病預(yù)防用的終極疫苗。然而多年的研究結(jié)果表明，合成肽疫苗免疫動(dòng)物后所起的免疫保護(hù)作用并沒(méi)有象人們當(dāng)初設(shè)想的那樣理想，同時(shí)證明了構(gòu)建的合成肽疫苗的抗原性及其免疫原性要受到其自身組成及宿主免疫系統(tǒng)等多種因素的影響。在誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫的過(guò)程中，單一的中和抗原表位是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，增加中和抗原表位的數(shù)目和引入細(xì)胞抗原表位將起到必不可少的輔助協(xié)同作用。若想提高合成肽疫苗的免疫效果，在搞清合成肽疫苗的免疫機(jī)理并在如何利用有限的抗原表位誘導(dǎo)強(qiáng)有力的免疫保護(hù)作用等方面需要做進(jìn)一步深入地研究。1.4合成肽疫苗的分子組成合成肽疫苗分子是由多個(gè)B細(xì)胞抗原表位和T細(xì)胞抗原表位共同組成的，大多需與一個(gè)載體骨架分子相耦聯(lián)。1.5合成肽疫苗免疫效果不佳的原因（1）疫苗缺乏足夠的免疫原性，很難如蛋白質(zhì)抗原那樣誘導(dǎo)集體的多種免疫反應(yīng)；（2）B細(xì)胞和T細(xì)胞抗原表位很難發(fā)揮協(xié)同作用；（3）缺乏足夠多的B細(xì)胞抗原表位的刺激。攜帶有單個(gè)抗原表位的合成肽疫苗對(duì)于不易變異的DNA病毒來(lái)說(shuō)是可行的，如犬細(xì)小病毒合成肽疫苗，即含有一個(gè)相對(duì)保守的B細(xì)胞抗原表位的合成肽疫苗可完全保護(hù)動(dòng)物。但對(duì)許多其它病毒，特別是RNA病毒如FMDV，人工設(shè)計(jì)的合成肽疫苗的中和抗原位點(diǎn)A的作用僅占50%，而FMDV存在誘導(dǎo)特異性中和抗體產(chǎn)生的多個(gè)不連續(xù)抗原位點(diǎn);毒株間的VPI環(huán)高度可變，變異毒株易于逃避機(jī)體正常免疫監(jiān)視，從而導(dǎo)致易感動(dòng)物的感染發(fā)病。如果這些免疫監(jiān)視是建立在抗多個(gè)不連續(xù)抗原位點(diǎn)（多個(gè)B細(xì)胞表位）抗體上，那么這些變異株的逃逸現(xiàn)象就可能大大減少。這就可能解釋為什么滅活病毒疫苗能夠誘導(dǎo)完全保護(hù)，因?yàn)橥暾牟《玖Ｗ涌赏瑫r(shí)暴露兩個(gè)或兩個(gè)以上誘導(dǎo)中和抗體的抗原位點(diǎn)，一般說(shuō)來(lái)，變異株的抗原位點(diǎn)全部發(fā)生變異的可能性較低，因此，病毒粒子不能逃逸免疫監(jiān)視而使感染終止發(fā)生，關(guān)于這一點(diǎn)可以通過(guò)HIV-1病毒觀察到類(lèi)似的抗不連續(xù)抗原位點(diǎn)的中和抗體反應(yīng)現(xiàn)象。1.6解決合成肽疫苗的免疫效果問(wèn)題的策略為解決合成肽疫苗的免疫效果問(wèn)題，對(duì)T細(xì)胞組分進(jìn)行了大量的研究，即應(yīng)用兩種表位的串聯(lián)和組合的方式，如應(yīng)用口蹄疫病毒VPI上第140-160位（B細(xì)胞表位）和第200-213位氨基酸殘基（T細(xì)胞表位）串聯(lián)，或再與第140-160位氨基酸殘基相串聯(lián)，甚至在非結(jié)構(gòu)蛋白（3ABC）上試圖尋找一個(gè)或幾個(gè)共同存在的Th抗原表位與B細(xì)胞表位發(fā)生協(xié)同作用。1.7乙型肝炎病毒（HBV）疫苗1.7.1乙型肝炎病毒

（HEPATITISBVIRUS）形態(tài)結(jié)構(gòu)：乙肝患者血清中發(fā)現(xiàn)3種相關(guān)顆粒小球形顆粒：HBsAg

不含核酸管形顆粒：小球形顆粒串連成大球形顆粒：為完整的病毒顆粒，具傳染性（DANE顆粒）:DNA、逆轉(zhuǎn)錄酶HBVHBV的形態(tài)結(jié)構(gòu)大球形顆粒（Dane顆粒）小球形顆粒管型顆粒HBV的小球形顆粒HBV的管形顆粒Dane顆粒HBV的抗原組成表面抗原HBsAg核心抗原HBcAg

e抗原HBeAg表面抗原HBsAg（1）存在三種顆粒之中（2）是HBV感染的主要標(biāo)志（3）分亞型（a,d/y,w/r,adr）（4）產(chǎn)生抗-HBs，具有免疫保護(hù)作用，使疫苗接種成功HBcAgHBcAg主要存在于HBV感染的肝細(xì)胞內(nèi)或DANE顆粒核心HBeAg中。一般血清學(xué)方法檢測(cè)不到HBcAg，而只能檢測(cè)到抗-HBc抗-HBc抗HBc-IgM：是HBV近期感染或慢性感染者病毒活動(dòng)的標(biāo)志,病毒在復(fù)制，持續(xù)時(shí)間：6～18個(gè)月抗HBc-IgG：凡“有過(guò)”HBV感染者