第七章-芳香胺類藥物的分析-PPT幻燈片

基本要求

一、掌握芳胺類、苯乙胺類藥物的鑒別和含量測定的基本原理與方法。二、熟悉芳氧丙醇胺類藥物鑒別和含量測定的基本原理與方法。三、了解氨基醚衍生物類藥物鑒別和含量測定的基本原理與方法。2022/10/231芳香胺類藥物的分析第一節(jié)芳胺類藥物的分析芳胺類藥物分為兩類芳伯氨基未被取代芳伯氨基被?；?、對(duì)氨基苯甲酸酯類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物2022/10/232芳香胺類藥物的分析苯佐卡因鹽酸普魯卡因2022/10/233芳香胺類藥物的分析二、酰胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物2022/10/236芳香胺類藥物的分析對(duì)乙酰氨基酚（撲熱息痛）醋氨苯砜2022/10/237芳香胺類藥物的分析鹽酸布比卡因鹽酸利多卡因2022/10/238芳香胺類藥物的分析

1.水解后顯芳伯氨基特性：分子結(jié)構(gòu)中含有芳酰氨基，酸水解后顯芳伯氨基的特性反應(yīng)。

注意空間位阻的影響。

2.水解產(chǎn)物易酯化：對(duì)乙酰基酚和醋氨苯砜，酸水解生成醋酸，在硫酸中與乙醇反應(yīng)，發(fā)出醋酸乙酯香味。

（二）主要化學(xué)性質(zhì)2022/10/239芳香胺類藥物的分析3.酚羥基特性：對(duì)乙?；佑杏坞x酚羥基，可與FeCl3發(fā)生顯色反應(yīng)，可相互區(qū)別。4.弱堿性：利多卡因和布比卡因烴胺側(cè)鏈有叔胺氮，顯堿性，可與生物堿沉淀劑發(fā)生沉淀反應(yīng)，可相互區(qū)別。5.與金屬離子發(fā)生沉淀反應(yīng)：利多卡因和布比卡因酰氨基上氮可與Cu2+,Co2+生成有色配位化合物沉淀。2022/10/2310芳香胺類藥物的分析三、鑒別試驗(yàn)（一）重氮化-偶合反應(yīng)

分子結(jié)構(gòu)中含有芳伯氨基或潛在芳伯氨基的藥物，均可發(fā)生此反應(yīng)。Ar-NH2HClNaNO2重氮鹽OH--萘酚橙黃~猩紅色2022/10/2311芳香胺類藥物的分析

直接反應(yīng)：苯佐卡因、鹽酸普魯卡因、鹽酸普魯卡因胺間接反應(yīng)：對(duì)乙酰氨基酚、醋氨苯砜

利多卡因和布比卡因由于空間位阻很難發(fā)生此反應(yīng)。2022/10/2312芳香胺類藥物的分析

丁卡因雖無芳伯氨基，但可與NaNO2反應(yīng)生成N－亞硝基化合物的乳白色沉淀。

2022/10/2313芳香胺類藥物的分析2022/10/2314芳香胺類藥物的分析2022/10/2315芳香胺類藥物的分析（二）與三氯化鐵反應(yīng)對(duì)乙酰氨基酚+FeCl3藍(lán)紫色化合物2022/10/2316芳香胺類藥物的分析2.羥肟酸鐵鹽反應(yīng)

基于普魯卡因胺分子中的芳酰胺結(jié)構(gòu)。P117，布洛芬與鐵鹽的反應(yīng)2022/10/2317芳香胺類藥物的分析與銅和鈷離子反應(yīng)：

利多卡因與硫酸銅生成藍(lán)紫色配位化合物；與氯化鈷生成亮綠色沉淀。（三）與金屬離子反應(yīng)2022/10/2318芳香胺類藥物的分析2022/10/2319芳香胺類藥物的分析鹽酸普魯卡因的鑒別

(四)水解產(chǎn)物反應(yīng)鹽酸普魯卡因+NaOH普魯卡因油狀物對(duì)氨基苯甲酸鈉+二乙氨基乙醇（使?jié)駶櫟募t色石蕊試紙變蘭色）對(duì)氨基苯甲酸鈉+HCl對(duì)氨基苯甲酸（白色）2022/10/2320芳香胺類藥物的分析2022/10/2321芳香胺類藥物的分析(五)制備衍生物測熔點(diǎn)三硝基苯酚衍生物的制備：利多卡因和布比卡因2022/10/2322芳香胺類藥物的分析(六)紫外特征吸收光譜法

1.在λmax處測定供試液的百分吸收系數(shù)。

例如：對(duì)乙酰基酚在0.4%NaOH中于λmax=240nm;E1%1cm=715在HCl(0.1nol/L)-甲醇（1：99）于λmax=249nm;E1%1cm=8802.在規(guī)定的濃度測定λmax

例如：醋氨苯砜5μg/ml;λmax=256nm;284nm

再例如：鹽酸普魯卡因胺5μg/ml;水，λmax=280nm(七)紅外吸收光譜法2022/10/2323芳香胺類藥物的分析（一）對(duì)乙酰氨基酚中的特殊雜質(zhì)檢查

1.乙醇溶液的澄清度與顏色：因其生產(chǎn)工藝用鐵粉作還原劑，可能帶入，致使乙醇溶液產(chǎn)生混濁，中間體對(duì)氨基酚易氧化產(chǎn)生有色化物，在乙醇溶液中顯橙紅色或棕色。

四、特殊雜質(zhì)檢查檢查方法：配制0.1g/ml本品乙醇溶液，溶液應(yīng)澄清，無色；如顯混濁，與1號(hào)濁度標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更濃；如顯色，與棕紅色2號(hào)或橙紅色2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)液比較，不得更深。2022/10/2324芳香胺類藥物的分析2.有關(guān)物質(zhì)檢查：Ch.P是以對(duì)氯苯乙酰胺為對(duì)照品，采用TLC法中的雜質(zhì)對(duì)照品法。3.對(duì)氨基酚檢查：利用對(duì)氨基酚在堿性條件下可與亞硝基鐵氰化鈉生成藍(lán)色配位化合物，采用比色法。2022/10/2325芳香胺類藥物的分析(二)鹽酸普魯卡因注射液中對(duì)氨基苯甲酸的檢查為什么要檢查？怎樣檢查？采用TLC法中的雜質(zhì)對(duì)照品法進(jìn)行檢查。2022/10/2326芳香胺類藥物的分析（一）亞硝酸鈉滴定法

Ar-NH2;Ar-NHCOR;Ar-NO2均可采用此法

Ch.P中的苯佐卡因；鹽酸普魯卡因和鹽酸普魯卡因胺及其制劑可直接采用本法；醋氨苯砜及注射液水解后用本法。五、含量測定2022/10/2327芳香胺類藥物的分析2022/10/2328芳香胺類藥物的分析1.原理：Ar-NHCOR+H2OAr-NH2+RCOOHH+Ar-NH2+NaNO2+2HClAr-N2+Cl-+NaCl+2H2O2022/10/2329芳香胺類藥物的分析測定主要條件：(1)加KBr（2g）增加反應(yīng)速度重氮化的反應(yīng)歷程為：NaNO2+HClHNO2+NaClHNO2+HClNOCl+H2OKHCl2022/10/2330芳香胺類藥物的分析2022/10/2331芳香胺類藥物的分析KBr+HClHBr+KClHNO2+HBrNOBr+H2OKKBr∵

KHBr比KHCl大300倍∴生成NOBr量大得多∴加快反應(yīng)速度2022/10/2332芳香胺類藥物的分析

(2)加過量HCl加速反應(yīng)：

①重氮化速度加快；

②重氮鹽在酸性介質(zhì)中穩(wěn)定；

③防止生成氨基偶氮化合物。

Ar-N2+Cl-+H2N-Ar

Ar-N=N-NH-Ar+HCl

一般摩爾比為Ar-NH2:HCl=1:2.5~6。2022/10/2333芳香胺類藥物的分析(3)室溫條件下滴定:溫度高反應(yīng)速度快；每升高10℃加快2.5倍太高,可使Ar-N2+Cl-+H2OAr-OH+N2+HCl(4)滴定管尖端插入液面下滴定2022/10/2334芳香胺類藥物的分析

3.指示終點(diǎn)的方法

(1)永停滴定法

溶液檢流計(jì)

終點(diǎn)前：

無過量無電流

HNO2

終點(diǎn)時(shí)：有過量有電流（使指針偏離零

HNO2永停在某一位置）

(2)外指示劑法

用KI-淀粉指示劑指示終點(diǎn)的原理：

2NaO2+2KI+4HCl

2NO+I2+2KCl+2NaCl+2H2OGVVR1R2+V2022/10/2335芳香胺類藥物的分析(二）非水溶液滴定法

基于鹽酸丁卡因、鹽酸利多卡因和鹽酸布比卡因側(cè)鏈?zhǔn)灏返诘味}酸丁卡因時(shí)，因其在冰醋酸中堿性弱，加醋酐可增加其堿性。2(CH3CO)2O(CH3CO)3O++CH3COO-相當(dāng)于［B]HCl+Hg(Ac)2[B]HAc+HgCl2[B]HAc+HClO4[B]HClO4+HAc2022/10/2336芳香胺類藥物的分析

1.對(duì)乙酰基酚原料的含量測定在0.4%NaOH介質(zhì)中；257nm

D%＝［E1%1cm]樣／［E1%1cm]標(biāo)×100％；E1%1cm＝715

2.對(duì)乙?；悠艹龆葴y定（測定條件同上）1片＋稀HCl24ml+H2O至1000ml，30min后，精密量取5ml，+0.4%NaOH10ml+H2O至50ml，λ257nm測定A。W×1／1000×5／100×100＝C（g/100ml)

W(g)=200×C;C=A/715∴溶出度＝W／標(biāo)示量×100％＞80％為合格（三）分光光度法2022/10/2337芳香胺類藥物的分析（四）比色法鹽酸普魯卡因+1,2-萘醌-4-磺酸鈉pH4-9棕紅色化合物，max482nm處測定A2022/10/2338芳香胺類藥物的分析（五）鹽酸普魯卡因胺的快速熒光測定λex400nm（激發(fā)波長）、λem485nm（發(fā)射波長）處測定熒光強(qiáng)度，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量。鹽酸普魯卡因胺+熒胺pH7.5熒光物2022/10/2339芳香胺類藥物的分析此法主要用于鹽酸普魯卡因注射液的測定。因該注射液中常含有降解產(chǎn)物對(duì)氨基苯甲酸；以苯甲酸為內(nèi)標(biāo)同時(shí)測定兩者的含量，該法簡單準(zhǔn)確。

色譜條件：色譜柱為μBondapakC18300mm×4mm

流動(dòng)相為甲醇－1％HAc(40:60);UV檢測器250nm.

（六）HPLC法2022/10/2340芳香胺類藥物的分析第二節(jié)苯乙胺類藥物的分析一、苯乙胺類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要化學(xué)性質(zhì)（一）基本結(jié)構(gòu)與典型藥物*2022/10/2341芳香胺類藥物的分析常見的苯乙胺類藥物2022/10/2342芳香胺類藥物的分析2022/10/2343芳香胺類藥物的分析2022/10/2344芳香胺類藥物的分析2022/10/2345芳香胺類藥物的分析

（二）主要化學(xué)性質(zhì)

1.弱堿性本類藥物結(jié)構(gòu)中有烴氨基側(cè)鏈，為仲胺氮顯弱堿性。

2.酚羥基特性本類藥物結(jié)構(gòu)中有酚羥基，可與FeCl3絡(luò)合顯色;加堿堿化則發(fā)生氧化。

3.光學(xué)活性多數(shù)藥物結(jié)構(gòu)中有手性碳原子，具有旋光性。2022/10/2346芳香胺類藥物的分析二、鑒別試驗(yàn)(一)與三氯化鐵反應(yīng)Ar-OH＋FeCl3絡(luò)合顯色＋堿液紫紅色2022/10/2347芳香胺類藥物的分析。

(二）甲醛－硫酸反應(yīng)

在此試劑中形成醌式結(jié)構(gòu)而顯色。

藥物

三氯化鐵

甲醛－硫酸

腎上腺素0.1mol/LHCl顯綠色,甲氨試液顯紅－紫紅紅色重酒石酸去甲腎上腺素綠色,加NaCO3試液顯紫色－紅色淡紅色鹽酸去氧腎上腺素紫色玫瑰紅橙紅棕紅鹽酸異丙腎上腺素深綠色,加5％NaCO3試液顯藍(lán)紫色－紅色棕色暗紫色2022/10/2348芳香胺類藥物的分析(三）氧化反應(yīng)

本類藥物具有Ar-OH，易被氧化劑I2,H2O2,K3Fe(CN)6氧化而顯色，例如：腎上腺素在中性或酸性條件下，被I2,H2O2

氧化后，生成腎上腺素紅；鹽酸異丙腎上腺素在酸性條件下，被I2氧化，生成異丙腎上腺素紅。2022/10/2349芳香胺類藥物的分析(四）紫外特征吸收與紅外吸收光譜例如：

鹽酸異丙腎上腺素0.05mg/mlλmax=280nmA=0.50這一類藥物均可采用紅外吸收光譜進(jìn)行鑒別2022/10/2350芳香胺類藥物的分析(五）與亞硝基鐵氰化鈉(Rimini試驗(yàn)）是鑒別脂肪伯氨基的特殊反應(yīng)；可用于重酒石酸間羥胺鑒別。D＋亞硝基鐵氰化鈉＋丙酮＋Na2CO3紅紫色P147，對(duì)乙酰氨基酚中特殊雜質(zhì)對(duì)氨基酚的檢查2022/10/2351芳香胺類藥物的分析(六)雙縮脲反應(yīng)

是鑒別芳環(huán)氨基醇的特殊反應(yīng)；可用于鹽酸麻黃堿，鹽酸偽麻黃堿鑒別：D＋CuSO4+NaOH顯藍(lán)紫色＋乙醚，醚層(紫紅色)水層(藍(lán)色)2022/10/2352芳香胺類藥物的分析酮體檢查

本類藥物在生產(chǎn)過程中多采用酮體氫化制得，若氫化不完全，易引入酮體雜質(zhì)。

采用UV法檢查：

利用酮體在310nm有吸收，本類藥物無吸收。例如：腎上腺素本項(xiàng)檢查配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.05

鹽酸去氧腎上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.02鹽酸異丙腎上腺素配2.0mg/mlλ=310nmA＜0.15

三、特殊雜質(zhì)檢查2022/10/2353芳香胺類藥物的分析

(一)非水溶液滴定法

本類藥物的原料藥多采用此法。本法重點(diǎn)將在第八章討論。

1.重酒石酸去甲腎上腺素的測定

相當(dāng)于［B］的有機(jī)酸鹽可直接滴定。

2.鹽酸克侖特羅的測定

相當(dāng)于［B］的HX酸鹽不能直接滴定，需加Hg(Ac)2處理后滴定。

3.硫酸沙丁胺醇的測定

相當(dāng)于［B］的H2SO4鹽可直接滴定,也可處理后滴定。四、含量測定2022/10/2354芳香胺類藥物的分析(二)溴量法本類藥物重酒石酸間羥胺、鹽酸去氧腎上腺素及其注射液用此法?；驹恚?022/10/2355芳香胺類藥物的分析(三)比色法

利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的Ar-OH與Fe3＋絡(luò)合顯色，進(jìn)行比色測定；也可利用藥物分子結(jié)構(gòu)中的Ar-NH2重氮化偶合顯色，進(jìn)行比色。2022/10/2356芳香胺類藥物的分析例如：鹽酸克倫特羅栓的含量測定

上述偶合劑可與HNO2顯色，干擾比色測定，可先加氨基磺酸銨分解過量的HNO2。HNO2＋2H2NSO3NH42N2+(NH4)2SO4+H2SO4+H2O2022/10/2357芳香胺類藥物的分析

(四)提取酸堿滴定法硫酸苯丙胺的含量測定：［B］H2SO4+NaOH+NaCl乙醚提取［B］+H2SO4蒸去乙醚NaOH標(biāo)準(zhǔn)液滴定終點(diǎn)2022/10/2358芳香胺類藥物的分析(五)熒光分光光度法腎上腺素測定：λex410nm、λem520nm處測定熒光強(qiáng)度，對(duì)照法定量。腎上腺素+I2

腎上腺紅一定條件下N-甲基-3,5,6-三羥基吲哚2022/10/2359芳香胺類藥物的分析(六)HPLC法

例一、重酒石酸去甲腎上腺素注射液的測定采用HPLC-UV法；用外標(biāo)一點(diǎn)法進(jìn)行定量測定。

例二、血漿中兒茶酚胺類（腎上腺素類）藥物的測定采用HPLC-EChD法；用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行定量測定。2022/10/2360芳香胺類藥物的分析第三節(jié)芳氧丙醇類藥物的分析一、藥物結(jié)構(gòu)與主要理化學(xué)性質(zhì)2022/10/2361芳香胺類藥物的分析2022/10/2362芳香胺類藥物的分析

氧烯洛爾化學(xué)名為

1-鄰烯丙氧基苯氧基-3-異丙氨基-2-丙醇.本品為白色結(jié)晶粉末,乙醇、丙酮中易溶；異密、氯仿中略溶；水中微溶。

鹽酸卡替洛爾化學(xué)名為5-[3-[1,1-二甲基乙基)氨基-2-羥丙氧基］-3,4-二氫-2(1H)-喹諾酮鹽酸鹽。本品為白色結(jié)晶粉末,水中溶解，甲醇中略溶，乙醇中極微溶解，乙醚中幾乎不溶；在冰醋酸中極微極微溶解2022/10/2363芳香胺類藥物的分析

(一)化學(xué)鑒別反應(yīng)

1.沉淀反應(yīng)利用其堿性與生物堿沉淀劑生成沉淀鹽酸卡替洛爾＋硫氰酸鉻銨試液淡紅色

2.氧化反應(yīng)

利用側(cè)鏈的不飽和雙鍵可被高錳酸鉀氧化氧烯洛爾＋KMnO4MnO2(棕色沉淀)

(二)紫外分光譜鑒別法

鹽酸卡替洛爾：8μg/ml,λmax=215nm;252nm氧烯洛爾：40μg/ml,λmax=275nm二、鑒別試驗(yàn)2022/10/2364芳香胺類藥物的分析三、鹽酸卡替洛爾中有關(guān)物質(zhì)檢查本品采用TLC法中的高低濃度對(duì)照法2022/10/2365芳香胺類藥物的分析四、含量測定

（一）非水溶液定法

鹽酸卡替洛爾，氧烯洛爾原料可采用此法鹽酸卡替洛爾［B]HCl+HClO4[B]HClO4+HCl

用電位法指示終點(diǎn),HCl不干擾，無需加醋酸汞處理。2022/10/2366芳香胺類藥物的分析

（二）紫外分光光度法

本法主要用于制劑分析。例如鹽酸卡替洛爾注射液采用本法。采用對(duì)照品比較法：

CX=AX/AR×CR

標(biāo)示量％＝CX×D/V取ml×規(guī)格ml/標(biāo)示量×100％2022/10/2367芳香胺類藥物的分析（三）HPLC法

應(yīng)用示例：人血漿中樣烯絡(luò)爾及其異構(gòu)體的測定

色譜條件：預(yù)柱為十八烷基硅膠柱；分析柱為手性O(shè)D－R柱(C18固定相上涂漬3,5-二甲本氨基甲酸酯纖維素，作為手性劑);流動(dòng)相為NaClO4(0.4mol/L)-乙腈(70:30)的磷酸緩沖液；檢測器：237nm

樣品預(yù)處理：血漿樣品用醋酸