HPLC測定去痛片中咖啡因含量

化與工學(xué)藥物分析驗報告實驗題目：

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實驗題目：法測去痛片中啡因含量一、實目的1.掌握固體樣品的處理方法。2.掌握高效液相色譜儀的工作原理及操作。3.利用外標(biāo)法計算待測組分含量。二、實原理咖啡因(Caffeine)又稱咖啡堿，是一種白色生物堿，名“，2，3-三甲基黃嘌呤”，其結(jié)構(gòu)為HNOHO，通常得自咖啡和茶，在藥品中主1842要作為溫和興奮劑及治療特定的頭痛病。分離原理：試樣溶于流動相后，進(jìn)入色譜柱固定相中，有機(jī)溶劑分子會被吸附在非極性固定相表面的烷基集團(tuán)上而溶質(zhì)分子在流動相中被溶劑化并與吸附在固定相表面上弱極性溶劑分子進(jìn)行置換而構(gòu)成溶質(zhì)在固定相和流動相中的分配平衡。當(dāng)達(dá)到平衡時，服從下式：K=Cm式中K是分配系數(shù)，質(zhì)在固定相和流動相中的濃度。由于試樣組分在固定相和流動相之間的作用存在差異被測組分在兩相中的分配系數(shù)K的不同而得到分離。在反相色譜中極性大的組分先流出，極性小的組分后流出。實驗采用外標(biāo)法，分別測定標(biāo)準(zhǔn)品溶液及供試品溶液，根據(jù)公式：A/C=A/CXX其中A為供試品的峰面積，C為供試品的濃度，A為標(biāo)準(zhǔn)品的峰面積，C為XXS標(biāo)準(zhǔn)品的濃度，帶入相關(guān)數(shù)據(jù)，即可求得待測組分含量。三、儀條件儀器型號LC-2130,色譜柱柱檢測波長275nm,流動相：甲醇18水=:，流速：,進(jìn)樣量：μL。四、操過程

X=SX=S1.取去痛片20片，精密稱定為，研細(xì)，取上述細(xì)粉0.8889g置于50mL容量瓶中加甲醇20mL超聲，使咖啡因溶解，繼續(xù)加甲醇至刻度，過濾，精密量取續(xù)濾液2mL置于容量瓶中，定容至刻度。2.打開高效液相色譜儀，設(shè)置相關(guān)儀器參數(shù)，待基線平穩(wěn)后，開始進(jìn)樣，記錄峰面積。3.關(guān)閉儀器，根據(jù)公式計算待測組分含量。五、實數(shù)據(jù)記錄及理A2305863X

，A=2283809，=g/mLSAA代入公式：得：C=μg/mL，計算標(biāo)示量：XS標(biāo)示量%=

D平12500.4972x×100%=×=103.26%W標(biāo)示量0.035六、實討論1.本實驗所采用的色譜柱為C色譜柱，屬于反相色譜，在反相鍵合相色譜18中，鍵合固定相的極性小于流動相的極性，適于分離非極性、極性、或離子性化合物，其應(yīng)用范圍比正相更廣泛。2.實驗過程中，在供試品與標(biāo)準(zhǔn)品之間取樣時一定要用甲醇清洗微量進(jìn)樣器，以確保樣品不被污染。3.本實驗采用高效液相色譜法，具有分離速度快，靈敏度高，操作簡