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生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室xxxQQ:xxxxxxxxxx電話:xxxxxxxxxxx血糖測定(葡萄糖氧化酶-過氧化物酶法)及腎上腺素對血糖濃度的影響,尿糖檢測實驗課安排二、注射腎上腺素三、30min(尿糖檢測)四、注射后取血五、血糖檢測一、注射前取血實驗內(nèi)容:測定血糖濃度,觀察腎上腺素對血糖濃度的影響半定量測量尿糖實驗要求:掌握葡萄糖氧化酶測定血糖的方法、原理、測定操作、正常參考值、臨床意義熟悉尿糖測定及意義腎上腺素是腎上腺髓質(zhì)分泌的一種兒茶酚胺類激素,主要在應(yīng)激狀態(tài)下發(fā)揮升高血糖的作用。腎上腺素機制cAMP肝、肌細胞的膜受體血中的腎上腺素磷酸化酶葡萄糖乳酸肝糖原糖酵解乳酸循環(huán)級聯(lián)激活受刺激結(jié)合促進肌糖原分解糖代謝紊亂高血糖低血糖>6.9<3.03.89-6.11檢測1.臨床醫(yī)生:作為疾病診斷依據(jù)、指導(dǎo)用藥以及判斷升糖藥或降糖藥的療效2.糖尿病患者:監(jiān)控自身血糖及尿糖變化,調(diào)節(jié)飲食、運動、就醫(yī)等生活規(guī)律。>腎糖閾8.96-10.08單位:mmol/L尿糖正常血糖病理性病理性生理性生理性生理性長期饑餓、劇烈運動后病理性胰島β細胞增生、胰島β細胞瘤、胰高血糖素分泌不足、嚴重肝病患者生理性餐后、情緒緊張時,腎上腺素分泌增加、注射葡萄糖病理性糖尿病、內(nèi)分泌腺功能障礙、顱內(nèi)壓增高、嚴重脫水臨床上重要的糖代謝紊亂也主要是血糖濃度過高(高血糖癥)和過低(低血糖癥)。血糖測定方法葡萄糖氧化酶法廣泛使用,特異性強、價廉、操作簡單福林-吳憲法鄰甲苯胺法己糖激酶法超微量還原鐵氰化鉀法第一步:第二步:Trinder反應(yīng)H2O2

+苯酚+4-氨基安替比林H2O

+醌亞胺

+O2紅色氧化縮合37oC505nm比色測定37oC葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸+H2O2氧化葡萄糖氧化酶法原理葡萄糖氧化酶(GOD)辣根過氧化物酶(POD)正確抓兔耳緣靜脈皮下注射1.注射時,把兔子皮膚提起來,在褶皺處,豎著進針1.5-2cm。2.注射完后等一會再把針頭拔出。輕按注射部位。30min后再采血。錯誤抓兔血糖檢測結(jié)果記錄1.葡萄糖氧化酶試紙法(干化學(xué)法):特異性強,臨床常用。檢測原理是葡萄糖氧化酶法。2.班氏定性試驗:價廉,操作簡單,比較常用,但易受尿中還原性物質(zhì)干擾。尿糖測定14班氏定性試驗原理:根據(jù)沉淀顯色的深淺,對尿糖作半定量檢測。(CHOH)nCH2OH++4OH-(CHOH)nCH2OH++H2O2CuOHH2O+黃色堿性葡萄糖葡萄糖酸紅色COOH2CuOHCHO2Cu2+Cu2O煮沸分解操作步驟A尿2滴B尿2滴再煮沸5min班氏劑20滴班氏劑20滴煮沸5min待完全沉淀到管底后(10min),對比判斷標準判定結(jié)果。尿糖結(jié)果判斷標準尿糖檢測結(jié)果記錄下一次實驗牛血清白蛋白的分離、純化及鑒定尿糖:指尿中的葡萄糖。重吸收原尿尿糖血液葡萄糖腎糖閾:尿中開始出現(xiàn)葡萄糖時最低

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