牛海綿狀腦病防治技術規(guī)范

180/180牛海綿狀腦病防治技術規(guī)范牛海綿狀腦?。˙ovineSpongiformEncephalopathy，BSE），俗稱瘋牛病，是由朊毒體（PrPSc）引起成年牛的漸進性神經(jīng)性致死性疫病。以埋伏期長、視聽觸三覺過敏、共濟失調(diào)和病死率高為特征。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報告的動物疫病，我國列為一類動物疫病。為預防、操縱和撲滅瘋牛病，依據(jù)《中華人民共和國動物防疫法》、《重大動物疫情應急條例》等法律法規(guī)，制定本規(guī)范。1.適用范圍本規(guī)范規(guī)定了瘋牛病的診斷、報告、處置、預防與操縱、風險分析和公共衛(wèi)生等技術措施。本規(guī)范適用于中華人民共和國境內(nèi)一切與瘋牛病防治活動有關的單位和個人。2.診斷2.1流行病學2.1.1污染癢病因子的肉骨粉及飼料。2.1.2消化道感染。2.1.3牛科和貓科動物易感。多發(fā)于4～6歲的牛，2歲以下罕見，6歲以上明顯減少。2.1.4一般為2～8年，平均為4～5年。2.1.5要緊發(fā)生于奶牛，發(fā)病率一般不超過3%，病死率100%。2.1.6該病無明顯的季節(jié)性，可常年發(fā)病。2.2臨床癥狀2.2.12.2.22.2.32.3病理變化2.3.12.3.22.4實驗室檢測2.4.12.4.2無診斷意義。2.4.3應在國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行。免疫組織化學（見GB/T19180）、免疫印跡、酶聯(lián)免疫吸附和組織病理學檢查（HE染色，見GB/T19180）。2.5結(jié)果判定2.5.1疑似病例病牛出現(xiàn)2.2項中的癥狀，特不是對觸摸、聲音和光照過度敏感，可初步判定為疑似瘋牛病病例。2.5.2經(jīng)2.4.3.疫情報告和確認3.1疑似疫情的報告任何單位和個人，發(fā)覺牛出現(xiàn)2.2的臨床癥狀的，應當立即向當?shù)孬F醫(yī)主管部門、動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)或者動物疫病預防操縱機構(gòu)報告。當?shù)乜h級動物疫病預防操縱機構(gòu)初步判定為瘋牛病疫情的，應在2小時內(nèi)報本地獸醫(yī)主管部門，并逐級上報至省級動物疫病預防操縱機構(gòu)。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)診斷為疑似瘋牛病疫情時，應立即報告省級獸醫(yī)主管部門和中國動物疫病預防操縱中心；省級獸醫(yī)主管部門應在1小時內(nèi)報省級人民政府和國務院獸醫(yī)主管部門。3.2確診疫情的報告國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診為瘋牛病疫情時，應立即通知疫情發(fā)生地省級動物疫病預防操縱機構(gòu)和獸醫(yī)主管部門，同時報中國動物疫病預防操縱中心和國務院獸醫(yī)主管部門。3.3疫情確認國務院獸醫(yī)主管部門依照國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診結(jié)果，確認瘋牛病疫情。4.疫情處置4.1疑似疫情處置4.1.1接到報告后，縣級獸醫(yī)主管部門應組織2名以上獸醫(yī)人員立即到現(xiàn)場進行調(diào)查核實。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)判定為疑似瘋牛病疫情的，在國家外來動物疫病研究中心指導下采集腦樣品（見附件1），并及時送國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行確診。4.1.2對發(fā)病場（戶）實施隔離、監(jiān)視，禁止易感動物、畜產(chǎn)品、飼料及有關物品移動，并對其內(nèi)、外環(huán)境進行嚴格消毒（見附件2）。必要時采取封鎖、撲殺等措施。4.2確診疫情處置疫情確診后，立即啟動相應級不的應急預案。4.2.14.2.1病牛所在的養(yǎng)殖場（戶）。4.2.1與風險牛/動物相關（見附件3）的養(yǎng)殖場（戶）。4.2.2疫情發(fā)生所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門劃定疫點和風險場后，報請同級人民政府對疫點和風險場實行封鎖。人民政府在接到報告后，應在24小時內(nèi)公布封鎖令。跨行政區(qū)域發(fā)生疫情時，由有關行政區(qū)域共同的上一級人民政府對疫點和風險場實行封鎖，或者由各有關行政區(qū)域的上一級人民政府共同對疫點和風險場實行封鎖。必要時，上級人民政府能夠責成下級人民政府對疫點和風險場實行封鎖。4.2.3對4.2.34.2.34.2.34.2.34.2.4限制牛、羊等反芻動物出入，確認風險牛/動物（見附件3），按4.2.34.2.5追蹤風險牛制成的各種產(chǎn)品（見附件3），并進行無害化處理（見附件4）。因食用肉骨粉而引起的瘋牛病疫情，應采取措施，查找肉骨粉流向，找出所有的潛在感染牛，參照4.2.44.2.6疫點內(nèi)最后一頭可疑牛撲殺，并按規(guī)定進行消毒和無害化處理，經(jīng)疫情發(fā)生所在地上級獸醫(yī)主管部門組織驗收合格后，由所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門向原公布封鎖令的人民政府申請解除封鎖，由該人民政府公布解除封鎖令，并通報毗鄰地區(qū)和有關部門，報上一級政府備案。5.預防與操縱5.1阻斷傳入提高防范意識，加強港口、機場檢疫。應從無瘋牛病國家進口活牛及相關產(chǎn)品，同時應提供無該病的檢疫證明。進口時經(jīng)進出境檢疫部門嚴格檢疫，活動物到達后必須進行隔離飼養(yǎng)，監(jiān)測無疫后方可混群。5.2飼養(yǎng)治理5.2.15.2.25.2.35.3監(jiān)測按國家監(jiān)測打算加強瘋牛病監(jiān)測。5.4檢疫在產(chǎn)地檢疫、屠宰檢疫工作中應加強瘋牛病檢疫。5.5宣傳培訓獸醫(yī)主管部門要加強瘋牛病防控知識宣傳，提高民眾的公共衛(wèi)生意識，爭取各行業(yè)和全社會的緊密合作，有效防范瘋牛病。6.風險分析建立瘋牛病風險評估機制。在發(fā)生瘋牛病疫情后，應依照流行病學調(diào)查結(jié)果及時開展風險評估，以制定更加詳細而有效的消滅打算。7.公共衛(wèi)生瘋牛病能夠通過消化道和醫(yī)源性途徑感染人，并引起死亡。采樣和檢測人員在進行相關活動時應采取必要的生物安全防護措施。附件1瘋牛病樣品采集與運送瘋牛病樣品可按冷凍保存或甲醛固定處理，然后送至國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行檢測。方法一：用于冷凍處理的牛腦樣品采集與運送（推舉）1專用采樣工具采集牛腦樣品的特點該工具為塑料制品，呈勺子形狀，前端帶有銳利的齒，便于切斷腦組織。這種采樣方式有著特不明顯的優(yōu)點，如使用簡單、節(jié)約成本、工作效率高、機動性強、采樣安全。2采樣物品預備數(shù)碼照相機（或數(shù)碼攝像機）、專用的采樣勺（一把勺子最多能夠采集三份樣品，牛腦采樣勺為藍色）、醫(yī)用剪刀（一把，長10cm左右）、一次性手套、橡膠檢查手套（即乳膠手套）、口罩、工作服、樣品杯（可向參考實驗室索?。⒂浱柟P、冰袋（至少3塊大號的冰袋）、大號的透明膠帶、帶蓋泡沫箱（有厚度，無破損，大小適中）、簽字筆或圓珠筆、采樣單、吸水紙等。3采樣步驟3.1假如有比較典型的瘋牛病疑似牛，則要拍照或攝像留下證據(jù)。每省至少要對20%的臨床疑似牛進行拍照或攝像，同時收集臨床疑似牛的其他材料如檔案等。采集臨床疑似牛時，采樣人員還需要通過問詢等方式弄清該病牛的其他情況，問詢內(nèi)容能夠包括飼養(yǎng)歷史、來源、流淌等情況。這些證據(jù)材料必須存檔和備份，運送樣品時一并寄送至檢測實驗室。3.2每次采樣至少有兩人在場，其中一人戴好一次性手套和橡膠檢查手套，另外一人專門登記和開啟樣品杯而不需要戴手套。通過查閱養(yǎng)殖檔案或者觀看牙齒檢查牛的年齡，大于3歲的牛（第二對永久門齒長出）才能夠采樣，但假如該動物為瘋牛病風險牛則沒有年齡限制。3.3在平坦地面倒置牛頭，即牛頭的兩角和鼻子靠地放置。同時，另外一人開始填寫采樣單，同時在樣品杯上標記上對應的樣品編號（以縣/市名+序號，如青島1號）。一個樣品杯只能裝一個腦樣品。3.4在枕骨大孔處用剪刀剪開腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。然后用一個手指伸入枕骨大孔中，沿著延腦（延髓）轉(zhuǎn)一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經(jīng)和血管，以便于腦組織順利挖出。3.5從延腦腹側(cè)（也即勺子從枕骨大孔的上面進入）將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以免損壞延腦組織。采樣勺插入的深度約為5～7cm，然后向上一扳勺子手柄，同時往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。盡量愛護好延腦“三叉口”處（腦閂部）的組織的完整性。3.6將腦組織放入編好號的樣品杯中，擰緊杯蓋，然后放置在盛有冰袋的泡沫箱中，用透明膠帶將泡沫箱的蓋子綁緊。采好的樣品必須在5小時之內(nèi)放入冰柜中冷凍，以防腐?。粯悠分辽僖鋬?4小時才能往瘋牛病檢測實驗室運送。3.7各地送來的樣品要先在省級動物疫病預防操縱機構(gòu)統(tǒng)一清理，假如沒有冷凍好的樣品，則必須重新放入冰柜中冷凍好，然后由省級動物疫病預防操縱機構(gòu)統(tǒng)一將樣品發(fā)送至檢測實驗室。4樣品運送預備好帶蓋的結(jié)實的泡沫箱，該泡沫箱必須無任何破損，同時大小適中（依照樣品的量來決定）。先在泡沫箱的底部鋪上一層吸水紙，之后放入冷凍好的樣品，然后在側(cè)面放入幾塊冷凍好的冰袋，最后在樣品的上面放入幾塊冷凍好的冰袋，蓋緊箱蓋。用大號的透明膠帶封好箱口，再橫向打好包，箱子不處用記號筆寫上“易碎勿壓”以及向上的“箭頭”等字樣，然后由省級動物疫病預防操縱機構(gòu)統(tǒng)一運送。打好包的樣品必須及時發(fā)送，并確保4天之內(nèi)運送至檢測實驗室。包裹最好通過航空途徑運送或由專人運送，并切記要注明“易碎勿壓”。切記在采樣單上寫明送樣人及其聯(lián)系方式，樣品檢測完后實驗室要出具檢驗報告并寄給送樣人。方法二：用于甲醛固定處理的牛腦樣品采集與運送1材料1.1數(shù)碼照相機（或數(shù)碼攝像機）、采樣單、復寫紙和圓珠筆或鉛筆1.2醫(yī)用膠布（用于捆裝有樣品的紗布，并在其上寫上樣品編號）1.3電動骨鋸或采樣勺、骨鉗、斧頭1.4解剖刀、剪刀、乳膠手套1.5紗布、棉線、密封塑料桶（容積許多于5000mL）1.6固定液：10%福爾馬林生理鹽水固定液（氯化鈉8.5g、水900mL、甲醛溶液100mL）2采樣步驟2.1假如有比較典型的BSE疑似牛，則要拍照或攝像留下證據(jù)。每省至少要對20%的臨床疑似牛進行拍照或攝像，同時收集臨床疑似牛的其他材料如檔案等。采集臨床疑似牛時，采樣人員還需要通過問詢等方式弄清該病牛的其他情況，問詢內(nèi)容能夠包括飼養(yǎng)歷史、來源、流淌等情況。這些證據(jù)材料必須存檔和備份，運送樣品時一并寄送至檢測實驗室。2.2填寫采樣單依照實際情況，按采樣單要求認真填寫。采樣地點相同的樣品能夠登記在同一張采樣單上。2.3取樣采樣前通過查閱養(yǎng)殖檔案或者觀看牙齒檢查牛的年齡，大于3歲的牛（第二對永久門齒長出）才能夠采樣，但假如該動物為瘋牛病風險牛則沒有年齡限制。2.3.1電鋸采樣法a.用電鋸沿兩牛角根部到枕骨大孔上邊緣的方向?qū)⑴ｏB腔打開。b.用手術刀將腦膜切開，骨鉗打開顱腔，然后把腦神經(jīng)和腦血管切斷。c.取出整個腦組織包括大腦、小腦和腦干（間腦、中腦、腦橋和延腦）；注意千萬不要把腦干損壞。d.將每頭牛的腦組織用紗布松松地裹住（紗布容易透水），千萬不能緊，一定要松，然后將寫有編號名稱的醫(yī)用膠布（用圓珠筆或鉛筆將編號寫在上面，編號：地名+序號+樣品類不名，如“青島市10號牛”）用棉線栓在紗布口處，注意不讓膠布脫落。處理好后放入10～20倍體積10%福爾馬林生理鹽水中固定一周。注意標簽編號與采樣單的編號相對應。e.用新的福爾馬林生理鹽水更換舊的固定液，密封在塑料桶中，桶外貼上桶中所有牛腦的編號，以便我們處理牛腦時不開桶蓋便可知桶中的牛腦情況。每個塑料桶可依照大小放置相應數(shù)量的牛腦。2.3.2采樣勺采集法a.預備專用的采樣勺（1～2把）、醫(yī)用剪刀（1把）、一次性手套、橡膠檢查手套（即乳膠手套）以及其他采樣用品如采樣單等。b.戴好一次性手套和橡膠檢查手套，專門登記的人員不需要戴手套。通過查閱養(yǎng)殖檔案或者觀看牙齒檢查牛的年齡，大于3歲的牛（第二對永久門齒長出）才能夠采樣，但假如該動物為瘋牛病風險牛則沒有年齡限制。c.在平坦地面倒置牛頭，即牛頭的兩角和鼻子靠地放置。d.在枕骨大孔處用剪刀剪開腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。然后用一個食指伸入枕骨大孔中，沿著延腦轉(zhuǎn)一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經(jīng)和血管，以便于延腦的取出。e.從延腦腹側(cè)（也即勺子從枕骨大孔的上面進入）將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以幸免損壞延腦組織。采樣勺插入的深度約為5～7cm，然后向上一扳勺子手柄，同時往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。f.其余步驟見2.3.1中的d和e。注：關于臨床疑似牛，采下腦后，從腦中線一分為二，一份用于甲醛固定，另一份用于-20℃3樣品的包裝與運送3.1單獨將采樣單郵寄給檢測實驗室，切不可與樣品一起郵寄，目的是防止采樣單被污染。3.2將固定好的牛腦放在幾個大的帶內(nèi)蓋的塑料桶中密封，注意每個牛腦都隨身帶有一個唯一的編號，桶外壁上也標明桶內(nèi)的所有牛腦編號。運送時桶里的固定液能夠僅保留適當?shù)牧勘憧?，適當?shù)牧渴且越]牛腦為準，但運送時必須更換固定液。3.3運輸時，將裝有樣品的塑料桶用木架子固定好，以防運輸途中顛倒。3.4在木架子不處加兩張不干膠標簽，一張注明樣品名稱、采樣單位與地址及聯(lián)系電話，另一張注明放置方向、小心、易碎和切勿倒置等字樣。3.5樣品由專人或經(jīng)航空運至檢測實驗室。附件2瘋牛病消毒技術1藥品選擇分析純氫氧化鈉含有效氯濃度超過2%的次氯酸鈉溶液，要求分析純2消毒方法2.12mol/L氫氧化鈉溶液浸泡或噴灑消毒1小時，適用于建筑物、木質(zhì)結(jié)構(gòu)、水泥表面、車輛和相關設施設備消毒。2.2含2%有效氯的次氯酸鈉溶液浸泡或噴灑消毒1小時，適用于建筑物、木質(zhì)結(jié)構(gòu)、水泥表面、車輛和相關設施設備消毒。2.3134～138℃2.4焚燒，適用于一切能夠焚燒的物品。3場地及設施消毒3.1金屬設施設備的消毒，可采取火焰、噴灑等方式消毒。3.2牛舍、車輛、屠宰加工、貯藏等場所，可采納消毒液清洗、噴灑等方式消毒。3.3養(yǎng)牛場的飼料、墊料、糞便等，可收集起來完全焚燒無害化處理。4飼養(yǎng)人員的物品消毒衣、帽、鞋等可能被污染的物品，均完全焚燒無害化處理。附件3瘋牛病風險牛/動物及產(chǎn)品的定義1瘋牛病風險牛/動物只要存在下列特征之一的牛/動物均為瘋牛病風險牛/動物。1.1與境外輸入性病例來源于同一國外養(yǎng)殖場的牛。1.2與確診病例在同一產(chǎn)仔季節(jié)出生并一起飼養(yǎng)的牛。1.3確診母牛在表現(xiàn)BSE癥狀之前的兩年內(nèi)所生的后代。1.4感染牛的生產(chǎn)母牛，包括代孕母牛。1.5其他反芻動物，包括生活在感染養(yǎng)殖場一段時刻并與BSE病例的污染物有接觸的綿羊、山羊、鹿、駱駝和麋鹿等。1.6注射過污染BSE因子產(chǎn)品（如疫苗）的動物。1.7若為飼料引起的瘋牛病病例，則同一批飼料飼喂的其他牛只均為風險牛。2瘋牛病風險產(chǎn)品的定義來源于風險牛，但未受到腦、頭顱、眼、脊髓、脊柱、扁桃體、小腸、脾等組織污染的下列產(chǎn)品，被認為是安全的。2.1牛奶及其制品。2.2生皮和熟皮。2.3精液和源自牛體內(nèi)采集與處理的胚胎，胚胎的采集與處理符合國際胚胎轉(zhuǎn)移協(xié)會的建議標準。2.4由皮張和皮革制造的凝膠和膠原。2.5油脂（不溶性雜質(zhì)的最大含量為0.15%）和由其制備的衍生產(chǎn)品；2.6磷酸二鈣制品（無蛋白或脂肪）。2.7血液和血液副產(chǎn)品，但這類產(chǎn)品需來自于屠宰前未曾往顱腔注入壓縮空氣或氣體，或未曾以搗毀顱腔的方式擊暈的牛。除此之外，源自于風險牛的其他牛產(chǎn)品均為風險牛產(chǎn)品。附件4瘋牛病無害化處理技術1無害化處理地點1.1關于少量牛只或牛產(chǎn)品，以就近原則選擇焚燒無害化處理地點，且要避開牧場。1.2關于大量牛只或牛產(chǎn)品，則需要在專門的焚燒廠進行焚燒無害化處理。1.3關于排泄物、污染或可能污染的飼料和墊料等物品，以就近原則選擇焚燒無害化處理地點，且要避開牧場。2方法2.1總的原則是完全焚燒。2.2牛只焚燒前，需要將其適當肢解，以便于焚燒完全。肢解時，注意做好生物安全防護。2.3關于少量牛只或牛產(chǎn)品的焚燒。先在焚燒地挖一個大小適當、深度適中的坑，下面架好干燥的木材，噴上柴油，然后將牛產(chǎn)品或內(nèi)臟和肢解的牛軀體組織塊放置在上面（排一層，不要堆積），再次噴上柴油，點火焚燒。2.4關于大量牛只的焚燒。撲殺完后先不要肢解牛只，而是運到焚燒廠之后進行肢解，然后再完全焚燒。運輸時要幸免污染環(huán)境，運輸工具要消毒完全。肢解場地要完全消毒。污染的物品要焚燒處理或消毒處理。2.5關于大量牛產(chǎn)品的焚燒。將牛產(chǎn)品安全運到焚燒廠進行完全焚燒處理。運輸時要幸免污染環(huán)境，運輸工具要消毒完全。2.6對排泄物、污染或可能污染的飼料和墊料等進行無害化處理時，方法同2.3。2.7關于污水，先用塑料桶或盆收集起來，依照體積多少加入適量氫氧化鈉固體，使其濃度至少達2mol/L。污水污染的表面，則能夠噴灑含2%有效氯的次氯酸鈉溶液作用1小時。污水處理完后應加入適量濃鹽酸使溶液達到中性，然后與其他處理完畢的物品一起填埋。非洲豬瘟防治技術規(guī)范非洲豬瘟（AfricanSwineFever，ASF），又稱非洲豬瘟疫、疣豬病，是由非洲豬瘟病毒感染引起的豬的一種急性、熱性、高度傳染性疾病，以高熱、網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)出血和高致死率為特征。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報告的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。為預防、操縱和撲滅非洲豬瘟，依據(jù)《中華人民共和國動物防疫法》、《重大動物疫情應急條例》等法律法規(guī)，制定本規(guī)范。1.適用范圍 本規(guī)范規(guī)定了非洲豬瘟的診斷、報告、處置、預防與操縱等技術措施。本規(guī)范適用于中華人民共和國境內(nèi)一切與非洲豬瘟防治活動有關的單位和個人。2.診斷2.1流行病學2.1.1病豬、康復豬和隱性感染豬為要緊傳染源。帶毒鈍緣軟蜱也是傳染源之一。2.1.2要緊通過接觸或采食被非洲豬瘟病毒（ASFV）污染的物品經(jīng)口傳染；短距離可經(jīng)空氣傳播；也可經(jīng)鈍緣軟蜱叮咬傳播。2.1.3家豬、野豬易感。家豬高度易感，且無明顯的品種、日齡和性不差異。歐亞野豬易感，但非洲野豬，特不是疣豬（Phacochoerusafricanus）和藪豬（Potamochoerusporcus）雖感染該病毒，但不表現(xiàn)臨床癥狀。2.1.4一般為15天。直接接觸感染的埋伏期為5～19天，鈍緣軟蜱叮咬感染的埋伏期一般不超過5天。2.1.5家豬發(fā)病率和病死率可高達100%。不同毒株致病性有所差異，強毒力毒株可導致豬在12～14天內(nèi)100%死亡，中等毒力毒株病死率一般為30%～50%，低毒力毒株僅可引起少量豬只死亡。2.1.6該病無明顯的季節(jié)性，可常年發(fā)病。2.2臨床癥狀2.2.12.2.2急性：體溫可高達422.2.3亞急性：臨床癥狀同急性，但癥狀較輕，病死率較低，持續(xù)時刻較長（約3周）。體溫波動無規(guī)律，常大于40.52.2.42.3病理變化漿膜表面充血、出血，腎臟、肺臟表面有出血點，心內(nèi)膜和心外膜有大量出血點，胃、腸道粘膜布滿性出血。膽囊、膀胱出血。肺臟腫大，切面流出泡沫性液體，氣管內(nèi)有血性泡沫樣粘液。脾臟腫大，變軟，呈黑色，表面有出血點，邊緣鈍圓，有時出現(xiàn)邊緣梗死。頜下淋巴結(jié)、腹腔淋巴結(jié)腫大，嚴峻出血。2.4實驗室檢測2.4.12.4.2應在省級動物疫病預防操縱機構(gòu)實驗室、國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行。酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）：用于檢測血清樣品中的病毒特異性抗體。間接免疫熒光抗體試驗（IFA）：檢測血清樣品，用于ASF感染豬確診。2.4.3應在國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行。病毒分離：能夠采集活豬全血樣品、病死豬的肝臟、脾臟、肺臟和心臟低溫下運送到具備BSL-3以上生物安全防護條件的實驗室進行病毒分離檢測。血細胞吸附試驗（HAD）：適宜該法檢測的樣品有，抗凝血（用肝素或EDTA作抗凝劑）、脾臟、扁桃體、腎臟、淋巴結(jié)。雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗（S-ELISA）：通過特異性單克隆抗體檢測樣品中的目的抗原。聚合酶鏈式反應（PCR）：可檢測和鑒定所有已知ASFV基因型，包括無血細胞吸附能力的病毒和低致病力的分離株，尤其適用于病毒失活的組織樣品檢測。2.5結(jié)果判定2.5.1符合流行病學特點，且至少符合2.2.1、2.2.2、2.2.3、2.2.4和2.3項之一，同時排除豬瘟2.5.2臨床可疑病例，且2.4.2項任一項血清學方法檢測陽性，可判定為疑似非洲豬瘟病例2.5.3疑似病例，且2.4.3項任一項病原學方法檢測陽性，可判定為確診非洲豬瘟病例3.疫情報告和確認3.1疑似疫情的報告任何單位和個人，發(fā)覺野豬異常死亡，家豬出現(xiàn)2.2的臨床癥狀的，應當立即向當?shù)孬F醫(yī)主管部門、動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)或者動物疫病預防操縱機構(gòu)報告。當?shù)乜h級動物疫病預防操縱機構(gòu)初步判定為非洲豬瘟疫情的，應在2小時內(nèi)報本地獸醫(yī)主管部門，并逐級上報至省級動物疫病預防操縱機構(gòu)。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)診斷為疑似非洲豬瘟疫情時，應立即報告省級獸醫(yī)主管部門和中國動物疫病預防操縱中心；省級獸醫(yī)主管部門應在1小時內(nèi)報省級人民政府和國務院獸醫(yī)主管部門。3.2確診疫情的報告國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診為非洲豬瘟疫情時，應立即通知疫情發(fā)生地省級動物疫病預防操縱機構(gòu)和獸醫(yī)主管部門，同時報中國動物疫病預防操縱中心和國務院獸醫(yī)主管部門。3.3疫情確認國務院獸醫(yī)主管部門依照國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診結(jié)果，確認非洲豬瘟疫情。4.疫情處置4.1疑似疫情處置4.1.1接到報告后，縣級獸醫(yī)主管部門應組織2名以上獸醫(yī)人員立即到現(xiàn)場進行調(diào)查核實。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)判定為疑似非洲豬瘟疫情的，及時采集樣品送國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行確診。4.1.2對發(fā)病場（戶）實施隔離、監(jiān)視，禁止易感動物、畜產(chǎn)品、飼料及有關物品移動，并對其內(nèi)、外環(huán)境進行嚴格消毒（見附件2）。必要時采取封鎖、撲殺等措施。4.2確診疫情處置疫情確診后，立即啟動相應級不的應急預案。4.2.14.2.1.14.4.劃定疫區(qū)、受威脅區(qū)時，應依照當?shù)靥烊黄琳希ㄈ绾恿鳌⑸矫}等）、人工屏障（道路、圍欄等）、野生動物棲息地存在情況，以及疫情溯源及跟蹤調(diào)查結(jié)果，綜合評估后劃定。4.2疫情發(fā)生所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門報請同級人民政府對疫區(qū)實行封鎖，人民政府在接到報告后，應在24小時內(nèi)公布封鎖令?？缧姓^(qū)域發(fā)生疫情時，由有關行政區(qū)域共同的上一級人民政府對疫區(qū)實行封鎖，或者由各有關行政區(qū)域的上一級人民政府共同對疫區(qū)實行封鎖。必要時，上級人民政府能夠責成下級人民政府對疫區(qū)實行封鎖。4.2.34.2.34.4.4.4.2.44.4.2.44.4.4.4.2.5對4.4.2.54.2.54.2.6應對疫區(qū)、受威脅區(qū)及周邊地區(qū)野豬分布狀況進行調(diào)查和監(jiān)測，并采取措施，幸免野豬與人工飼養(yǎng)的豬只（包括自養(yǎng)存活在野外的及家養(yǎng)育種野豬）接觸。當?shù)孬F醫(yī)部門與林業(yè)部門應定期相互通報有關信息。4.2.7應在疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)制定并實施鈍緣軟蜱操縱打算，查清蟲媒分布，并采取殺滅鈍緣軟蜱等蟲媒操縱措施。4.2.4.2.4.2.4.2.4.2.對疫情發(fā)生前21天內(nèi)以及采取隔離措施前，從疫點輸出的易感動物、相關產(chǎn)品、運輸車輛及緊密接觸人員的去向進行跟蹤調(diào)查，分析疫情擴散風險。必要時，對接觸的豬只進行隔離觀看，對相關產(chǎn)品進行消毒等無害化處理。4.2.對疫情發(fā)生前21天內(nèi)，引入疫點的所有易感動物、相關產(chǎn)品來源及運輸工具進行追溯性調(diào)查，分析疫情來源。必要時，對輸出地豬群或接觸豬群進行隔離觀看，對豬產(chǎn)品進行消毒等無害化處理。4.2.疫點和疫區(qū)內(nèi)最后一頭豬死亡或撲殺，并按規(guī)定進行消毒和無害化處理21天后，再設置10頭哨兵豬監(jiān)測21天，經(jīng)疫情發(fā)生所在地上級獸醫(yī)主管部門組織驗收合格后，由所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門向原公布封鎖令的人民政府申請解除封鎖，由該人民政府公布解除封鎖令，并通報毗鄰地區(qū)和有關部門，報上一級政府備案。4.解除封鎖后6個月內(nèi)，原疫區(qū)內(nèi)禁止養(yǎng)豬。4.2.對處理疫情的全過程必須做好完整詳實的記錄，并歸檔。記錄保存年限應符合國家規(guī)定要求。5.預防操縱5.1阻斷傳入各邊境地區(qū)要加強邊境地區(qū)防控，堅持內(nèi)防外堵，切實落實邊境巡查、消毒等各項防控措施。與曾發(fā)生和正在發(fā)生非洲豬瘟疫情的國家和地區(qū)接壤省份的相關縣市，邊境線50公里范圍內(nèi)禁止生豬養(yǎng)殖；國際空、海港所在都市的機場和港口周邊禁止生豬養(yǎng)殖。嚴格落實對來自非洲豬瘟國家和地區(qū)的動物、動物產(chǎn)品的禁止進口措施。5.2飼養(yǎng)治理5.2.15.2.25.2.35.3日常監(jiān)測各級動物疫病預防操縱機構(gòu)要緊密關注境外疫情，科學研判疫情態(tài)勢。充分發(fā)揮國家動物疫情測報體系的作用，按照國家動物疫病監(jiān)測打算，加強對非洲豬瘟的監(jiān)測。林業(yè)部門要開展邊境地區(qū)野豬和媒介昆蟲軟蜱的調(diào)查監(jiān)測，摸清底數(shù)，為非洲豬瘟風險評估提供依據(jù)。5.4檢疫監(jiān)管加強對國際航行運輸工具、國際郵件、出入境旅客攜帶物的檢疫，做好非法入境的來自疫區(qū)的豬、野豬及其產(chǎn)品的銷毀處理工作。引種檢疫工作時應加強非洲豬瘟檢疫。做好豬產(chǎn)地檢疫和屠宰檢疫工作，加強跨境調(diào)運豬及其產(chǎn)品的檢疫監(jiān)督。5.5宣傳培訓廣泛宣傳非洲豬瘟的防范知識和防控政策，增強進出境旅客、邊境地區(qū)群眾和相關從業(yè)人員的防范意識，營造群防群控的良好氛圍。加強基層治理和技術人員培訓，提高非洲豬瘟的診斷能力和水平，尤其是提高非洲豬瘟和豬瘟的鑒不診斷水平，及時發(fā)覺、報告和處置疑似疫情，消除疫情隱患。附件1樣品的采集、運輸與保存當懷疑有非洲豬瘟疫情發(fā)生時，應對豬群、野豬群以及與豬科相近的動物群屬采集以下樣品進行檢測：抗凝血（用肝素或乙二胺四乙酸（EDTA）作抗凝劑）、脾臟、扁桃體、腎臟和淋巴結(jié)。此外，還應采集蜱、虻等昆蟲蟲媒進行檢測。采集的樣品應在低和氣密封狀態(tài)下運輸?shù)綄嶒炇?。樣品的包裝和運輸應符合世界衛(wèi)生組織（WHO）和農(nóng)業(yè)部《高致病性動物病原微生物菌（毒）種或者樣本運輸包裝規(guī)范》的規(guī)定。1血液樣品1.1血液樣品采集后，加入含有EDTA或肝素抗凝劑的無菌試管中，可能時，每份血液樣品采集2管，每管采集5mL，以便為復檢預備充足的樣品。1.2對擬分離血清的血液樣品，室溫放置12～24h，收集血清，放入冰盒后低溫運輸至檢測實驗室。待檢血清到達實驗室后，20℃（短期）或-701.3對擬進行病毒分離或病原檢測的血液樣品，按規(guī)定包裝后低溫運輸至檢測實驗室，并于-70℃以下保存以保持病毒的感染性。-20℃以上保存時，病毒感染性專門快喪失，但2組織樣品2.1首選脾臟，其次為淋巴結(jié)。選取直徑約1cm的組織樣品，放入含100IU/mL青霉素和100μg/mL鏈霉素的PBS溶液中，或放入50%甘油PBS液中，4℃2.2為保持病毒的感染性，樣品到達實驗室后，立即放入-70℃3蜱3.1將收集的軟蜱放入有螺旋蓋的50mL樣品瓶/管中。樣品瓶/管中放入少量土壤，蓋內(nèi)襯以紗布，以便使空氣流通。3.2長期保存時，將盛蜱容器放在比較涼快的地點（20～25℃3.3為保持病毒的感染性，應將蜱放在-70℃（液氮、干冰或-703.4僅對蜱樣品進行形態(tài)學觀看時，能夠放入100%酒精中保存。這種情況下保存的樣品僅能用于PCR檢測。酒精中保存時，1.5mL帶螺旋蓋的塑料管，1份蜱9份酒精。附件2非洲豬瘟消毒技術1藥品種類最有效的消毒藥是10%苯及苯酚、去污劑、次氯酸、堿及戊二醛。堿類（氫氧化鈉、氫氧化鉀等）、氯化物和酚化合物適用于建筑物、木質(zhì)結(jié)構(gòu)、水泥表面、車輛和相關設施設備消毒。酒精和碘化物適用于人員消毒。2設備和必需品2.1清洗工具：掃帚、叉子、鏟子、鍬和沖洗用水管。2.2消毒工具：噴霧器、火焰噴射槍、消毒車輛、消毒容器等。2.2消毒劑：酚類、氯制劑類等合適的消毒劑。2.4防護裝備：防護服、口罩、膠靴、手套、護目鏡等。3疫點內(nèi)飼養(yǎng)圈舍清理、清洗和消毒3.1對圈舍內(nèi)外消毒后再行清理和清洗。3.2首先清理污物、糞便、飼料等。3.3對地面和各種用具等完全沖洗，并用水洗刷圈舍、車輛等，對所產(chǎn)生的污水進行無害化處理。3.4對金屬設施設備，可采取火焰、熏蒸等方式消毒。3.5對飼養(yǎng)圈舍、場地、車輛等采納消毒液噴灑的方式消毒。3.6飼養(yǎng)圈舍的飼料、墊料等作發(fā)酵或焚燒處理。3.7糞便等污物作化學處理后深埋、堆積密封或焚燒處理。4交通工具清洗消毒4.1出入疫點、疫區(qū)的交通要道設立臨時性消毒點，對出入人員、運輸工具及有關物品進行消毒。4.2疫區(qū)內(nèi)所有可能被污染的運載工具應嚴格消毒，車輛內(nèi)、外及所有角落和縫隙都要用消毒劑消毒后再用清水沖洗，不留死角。4.3車輛上的物品也要做好消毒。4.4從車輛上清理下來的垃圾和糞便要作無害化處理。5生豬交易市場消毒清洗5.1用消毒劑噴灑所有區(qū)域。5.2飼料和糞便等要化學處理后深埋、發(fā)酵或焚燒。6生豬屠宰、加工、儲藏等場所清洗消毒6.1所有生豬及其產(chǎn)品都要化學處理后深埋或焚燒。6.2圈舍、過道和舍外區(qū)域用消毒劑噴灑消毒后清洗。6.3所有設備、桌子、冰箱、地板、墻壁等用消毒劑噴灑消毒后沖洗潔凈。6.4所有衣服用消毒劑浸泡后清洗潔凈，其他物品都要用適當?shù)姆绞竭M行消毒。6.5以上所產(chǎn)生的污水要通過處理，達到環(huán)保排放標準。7消毒頻率疫點每天消毒3～5次連續(xù)7天，之后每天消毒1次，疫區(qū)內(nèi)疫點以外的區(qū)域每天消毒1次，持續(xù)消毒21天。癢病防治技術規(guī)范癢病（Scrapie）是由朊毒體（PrPSc）引起的自然發(fā)生于成年綿羊和山羊的漸進性神經(jīng)性致死性疫病。以埋伏期長、劇癢、中樞神經(jīng)系統(tǒng)變性、共濟失調(diào)和病死率高為特征。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報告的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。為預防、操縱和撲滅癢病，依據(jù)《中華人民共和國動物防疫法》、《重大動物疫情應急條例》等法律法規(guī)，制定本規(guī)范。1.適用范圍本規(guī)范規(guī)定了癢病的診斷、報告、處置、預防與操縱和公共衛(wèi)生等技術措施。本規(guī)范適用于中華人民共和國境內(nèi)一切與癢病防治活動有關的單位和個人。2.診斷2.1流行病學2.1.1要緊是自然發(fā)病的病羊，其次是污染癢病因子的草場、飼料、用具和分娩房。2.1.2要緊包括垂直傳播、水平傳播和醫(yī)源性傳播，其中由感染母羊垂直傳給羔羊是癢病的要緊感染途徑，而采食污染的草場是次要途徑。病羊身上的螨蟲可作為媒介傳播癢病。2.1.3綿羊和山羊是該病的自然宿主。多發(fā)于2～5歲的羊，5歲以上和18月齡以下一般不發(fā)病。不同品種、性不的羊均可感染癢病，但品種間的易感性因其朊蛋白基因的多態(tài)性而有明顯差異。純種羊較雜種羊易感。2.1.4綿羊的埋伏期一般為1～3年。山羊的埋伏期一般不超過1年。2.1.5發(fā)病率較高，可達5%～10%，甚至20%～40%。病死率為100%。2.1.6該病無明顯的季節(jié)性，可常年發(fā)病。2.2臨床癥狀病羊易驚、不安或凝視，戰(zhàn)栗，有時表現(xiàn)癲癇狀發(fā)作。頭高舉，行走時高舉步，頭、頸或腹部發(fā)生顫抖。時常出現(xiàn)搔癢，并啃咬皮膚，或在固定物體上（如墻角、樹根）摩擦頭部、股部、腹部和背部。病羊還時常反復跌倒，磨牙明顯，日漸消瘦，衰竭死亡。病程數(shù)周至數(shù)月。2.3病理變化2.3.12.3.22.4實驗室檢測2.4.1要緊是腦組織，其次為脾、扁桃體、回腸未端、咽后淋巴結(jié)和腸系膜淋巴結(jié)。2.4.2應在國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行。免疫組織化學（IHC，見GB/T22910）、免疫印跡（WB）、酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）和組織病理學檢查（HE染色，見GB/T22910）。2.5結(jié)果判定2.5.1病羊出現(xiàn)2.2中的癥狀，特不是出現(xiàn)瘙癢癥狀，可初步判定為疑似癢病病例。2.5.2經(jīng)2.4.2中兩種以上方法檢測均為陽性的疑似病例，可判定為確診癢病3.疫情報告和確認3.1疑似疫情的報告任何單位和個人，發(fā)覺羊出現(xiàn)2.2的臨床癥狀的，應當立即向當?shù)孬F醫(yī)主管部門、動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)或者動物疫病預防操縱機構(gòu)報告。當?shù)乜h級動物疫病預防操縱機構(gòu)初步判定為癢病疫情的，應在2小時內(nèi)報本地獸醫(yī)主管部門，并逐級上報至省級動物疫病預防操縱機構(gòu)。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)診斷為疑似癢病疫情時，應立即報告省級獸醫(yī)主管部門和中國動物疫病預防操縱中心；省級獸醫(yī)主管部門應在1小時內(nèi)報省級人民政府和國務院獸醫(yī)主管部門。3.2確診疫情的報告國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診為癢病疫情時，應立即通知疫情發(fā)生地省級動物疫病預防操縱機構(gòu)和獸醫(yī)主管部門，同時報中國動物疫病預防操縱中心和國務院獸醫(yī)主管部門。3.3疫情確認國務院獸醫(yī)主管部門依照國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診結(jié)果，確認癢病疫情。4.疫情處置4.1疑似疫情處置4.1.1接到報告后，縣級獸醫(yī)主管部門應組織2名以上獸醫(yī)人員立即到現(xiàn)場進行調(diào)查核實。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)判定為疑似癢病疫情的，在國家外來動物疫病研究中心指導下采集腦樣品（見附件1），并及時送國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行確診。4.1.2對發(fā)病場（戶）實施隔離、監(jiān)視，禁止易感動物、畜產(chǎn)品、飼料及有關物品移動，并對其內(nèi)、外環(huán)境進行嚴格消毒（見附件2）。必要時采取封鎖、撲殺等措施。4.2確診疫情處置疫情確診后，立即啟動相應級不的應急預案。4.2.14.2.1發(fā)病羊所在的養(yǎng)殖場（戶）為疫點。4.2.1一般不適合于癢病，但當疫病流行廣泛且發(fā)生地的地理界限清晰時，也能夠考慮劃定疫區(qū)。劃定疫區(qū)時，應依照當?shù)靥烊黄琳希ㄈ绾恿?、山脈等）、人工屏障（道路、圍欄等）、野生動物棲息地存在情況，以及疫情追蹤調(diào)查結(jié)果，來確定該區(qū)域范圍。4.2.1只要存在以下風險羊的場均為風險場：（1）與境外輸入性病例來源于同一國外養(yǎng)殖場的羊。（2）與感染動物來自同一母羊的羊。（3）與感染動物有同群飼養(yǎng)歷史的羊。（4）感染動物精液或卵細胞的受體羊。4.2.2疫情發(fā)生地所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門報請同級人民政府對疫點、疫區(qū)或（和）風險場實行封鎖。人民政府在接到報告后，應在24小時內(nèi)公布封鎖令?？缧姓^(qū)域發(fā)生疫情時，由有關行政區(qū)域共同的上一級人民政府對疫點、疫區(qū)或（和）風險場實行封鎖，或者由各有關行政區(qū)域的上一級人民政府共同對疫點、疫區(qū)或（和）風險場實行封鎖。必要時，上級人民政府能夠責成下級人民政府對疫點、疫區(qū)或（和）風險場實行封鎖。4.2.3對疫點4.2.34.2.34.2.34.2.34.2.34.2.4對疫區(qū)4.2.44.2.44.2.44.2.4.4風險羊（見4.2.1.3）按44.2.44.2.44.2.44.2.5對4.2.54.2.54.2.5.3確認風險羊，并按44.2.5.4對其他羊只進行每天監(jiān)視，一旦發(fā)覺可疑病羊，按44.2.54.2.6加強疫點、疫區(qū)和風險場周邊地區(qū)治理措施，幸免野生易感動物與人工飼養(yǎng)的羊群接觸。當?shù)孬F醫(yī)部門與林業(yè)部門應定期相互通報有關信息。4.2.7疫點內(nèi)最后一只可疑羊撲殺，并按規(guī)定進行消毒和無害化處理，疫區(qū)、風險場經(jīng)監(jiān)測沒有新發(fā)病例時，經(jīng)疫情發(fā)生所在地上級獸醫(yī)主管部門組織驗收合格后，由所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門向原公布封鎖令的人民政府申請解除封鎖，由該人民政府公布解除封鎖令，并通報毗鄰地區(qū)和有關部門，報上一級政府備案。5.預防操縱5.1阻斷傳入提高防范意識，加強港口、機場檢疫。應從無癢病國家進口活羊及相關產(chǎn)品，并應提供無該病的檢疫證明。進口動物應先隔離觀看，監(jiān)測無疫后方可混群。5.2飼養(yǎng)治理5.2.15.2.25.2.35.2.45.3監(jiān)測按國家監(jiān)測打算開展癢病監(jiān)測。5.4檢疫在產(chǎn)地檢疫、屠宰檢疫工作中應加強癢病檢疫。5.5宣傳培訓開展癢病防控知識宣傳，提高民眾的公共衛(wèi)生意識。6.公共衛(wèi)生癢病可能會通過消化道和醫(yī)源性途徑感染人并導致死亡。采樣和檢測人員在進行相關活動時應采取必要的防護措施。附件1癢病樣品采集與運送方法癢病樣品可按冷凍保存或甲醛固定處理，送國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行檢測。方法一：用于冷凍處理的癢病樣品采集與運送（推舉）1專用采樣工具采集羊腦樣品的特點該工具為塑料制品，呈勺子形狀，前端帶有銳利的齒，便于切斷腦組織。這種采樣方式有著特不明顯的優(yōu)點，如使用簡單、節(jié)約成本、工作效率高、機動性強、采樣安全。2采樣物品預備數(shù)碼照相機（或數(shù)碼攝像機）、專用的采樣勺（一把勺子最多能夠采集三份樣品，羊腦采樣勺為黃色）、醫(yī)用剪刀（一把，長10cm左右）、一次性手套、橡膠檢查手套（即乳膠手套）、口罩、工作服、樣品杯（可向參考實驗室索取）、記號筆、冰袋（至少3塊大號的冰袋）、大號的透明膠帶、帶蓋泡沫箱（有厚度，無破損，大小適中）、簽字筆或圓珠筆、采樣單、吸水紙等。3采樣步驟3.1假如有比較典型的癢病疑似羊，則要拍照或攝像留下證據(jù)。采集臨床疑似羊時，采樣人員還需要通過問詢等方式弄清該病羊的其他情況，問詢內(nèi)容能夠包括品種、飼養(yǎng)歷史、來源、流淌等情況。這些證據(jù)材料必須存檔和備份，運送樣品時一并寄送至檢測實驗室。3.2每次采樣至少有兩人在場，其中一人戴好一次性手套和橡膠檢查手套，另外一人專門登記和開啟樣品杯而不需要戴手套。通過查閱養(yǎng)殖檔案或者觀看牙齒檢查羊的年齡，大于18月齡的羊（第一對永久門齒長出）才能夠采樣，但假如該動物為癢病風險羊則沒有年齡限制。3.3在平坦地面倒置羊頭，即羊頭的兩角和鼻子靠地放置。同時，另外一人開始填寫采樣單，同時在樣品杯上標記上對應的樣品編號（以縣/市名+序號，如青島1號）。一個樣品杯只能裝一個腦樣品。3.4在枕骨大孔處用剪刀剪開腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。然后用一個手指伸入枕骨大孔中，沿著延腦（延髓）轉(zhuǎn)一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經(jīng)和血管，以便于腦組織順利挖出。3.5從延腦腹側(cè)（也即勺子從枕骨大孔的上面進入）將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以免損壞延腦組織。采樣時插入深度約為4cm，然后向上一扳勺子手柄，同時往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。盡量愛護好延腦“三叉口”處（腦閂部）的組織的完整性。3.6將腦組織放入編好號的樣品杯中，擰緊杯蓋，然后放置在盛有冰袋的泡沫箱中，用透明膠帶將泡沫箱的蓋子綁緊。采好的樣品必須在5小時之內(nèi)放入冰柜中冷凍上，以防腐??；樣品至少要冷凍24小時才能往瘋牛病檢測實驗室運送。3.7各地送來的樣品要先在省級動物疫病預防操縱中心統(tǒng)一清理，假如沒有冷凍好的樣品，則必須及時放入冰柜中冷凍，然后由省級動物疫病預防操縱機構(gòu)統(tǒng)一將樣品發(fā)送至檢測實驗室。3.8關于癢病風險羊時，還應采集羊的脾、扁桃體、回腸未端、咽后淋巴結(jié)和腸系膜淋巴結(jié)組織。4樣品運送預備好帶蓋的結(jié)實的泡沫箱，該泡沫箱必須無任何破損，同時大小適中（依照樣品的量來決定）。先在泡沫箱的底部鋪上一層吸水紙，之后放入冷凍好的樣品，然后在側(cè)面放入幾塊冷凍好的冰袋，最后在樣品的上面放入幾塊冷凍好的冰袋，蓋緊箱蓋。用大號的透明膠帶封好箱口，再橫向打好包，箱子不處用記號筆寫上“易碎勿壓”以及向上的“箭頭”等字樣，然后由省級動物疫病預防操縱機構(gòu)統(tǒng)一運送。打好包的樣品必須及時發(fā)送，并確保4天之內(nèi)運送至檢測實驗室。包裹最好通過航空途徑運送或由專人運送，并切記要注明“易碎勿壓”，在采樣單上寫明送樣人及其聯(lián)系方式，樣品檢測完后實驗室要出具檢驗報告并寄給送樣人。方法二：用于甲醛固定處理的癢病樣品采集與運送1材料1.1數(shù)碼照相機（或數(shù)碼攝像機）、采樣單、復寫紙和圓珠筆或鉛筆1.2醫(yī)用膠布（用于捆裝有樣品的紗布，并在其上寫上樣品編號）1.3電動骨鋸或采樣勺、骨鉗、斧頭1.4解剖刀、剪刀、乳膠手套1.5紗布、棉線、密封塑料桶（容積許多于5000mL）1.6固定液：10%福爾馬林生理鹽水固定液（氯化鈉8.5g、水900mL、甲醛溶液100mL）2采樣步驟2.1假如有比較典型的癢病疑似羊，則要拍照或攝像留下證據(jù)，同時收集臨床疑似羊的其他材料如檔案等。采集臨床疑似羊時，采樣人員還需要通過問詢等方式弄清該病羊的其他情況，問詢內(nèi)容能夠包括品種、飼養(yǎng)歷史、來源、流淌等情況。這些證據(jù)材料必須存檔和備份，運送樣品時一并寄送至檢測實驗室。2.2填寫采樣單依照實際情況，按采樣單要求認真填寫。采樣地點相同的樣品能夠登記在同一張采樣單上。2.3取樣通過查閱養(yǎng)殖檔案或者觀看牙齒檢查羊的年齡，大于18月齡的羊（第一對永久門齒長出）才能夠采樣，但假如該動物為癢病風險羊則沒有年齡限制。2.3.1電鋸采樣法a.用電鋸沿兩羊角根部到枕骨大孔上邊緣的方向?qū)⒀蝻B腔打開。b.用手術刀將腦膜切開，骨鉗打開顱腔，然后把腦神經(jīng)和腦血管切斷。c.取出整個腦組織包括大腦、小腦和腦干（間腦、中腦、腦橋和延腦）；注意千萬不要把腦干損壞。d.將每頭羊的腦組織用紗布松松地裹?。啿既菀淄杆?，千萬不能緊，一定要松，然后將寫有編號名稱的醫(yī)用膠布（用圓珠筆或鉛筆將編號寫在上面，編號：地名+序號+樣品類不名，如“青島市10號羊”）用棉線栓在紗布口處，注意不讓膠布脫落。處理好后放入10～20倍體積10%福爾馬林生理鹽水中固定一周。注意標簽編號與采樣單的編號相對應。e.用新的福爾馬林生理鹽水更換舊的固定液，密封在塑料桶中，桶外貼上桶中所有羊腦的編號，以便我們處理羊腦時不開桶蓋便可知桶中的羊腦情況。每個塑料桶可依照大小放置相應數(shù)量的羊腦。f.關于癢病風險羊時，還應采集羊的脾、扁桃體、回腸未端、咽后淋巴結(jié)和腸系膜淋巴結(jié)組織，并投入10%福爾馬林生理鹽水中固定一周。2.3.2采樣勺采集法a.預備專用的采樣勺（1～2把）、醫(yī)用剪刀（1把）、一次性手套、橡膠檢查手套（即乳膠手套）以及其他采樣用品如采樣單等。b.戴好一次性手套和橡膠檢查手套，專門登記的人員不需要戴手套。通過查閱養(yǎng)殖檔案或者觀看牙齒檢查羊的年齡。c.在平坦地面倒置羊頭，即羊頭的兩角和鼻子靠地放置。d.在枕骨大孔處用剪刀剪開腦硬膜，目的是便于插入采樣勺。然后用一個食指伸入枕骨大孔中，沿著延腦轉(zhuǎn)一周，目的是切斷延腦與頭骨之間相連的神經(jīng)和血管，以便于延腦的取出。e.從延腦腹側(cè)（也即勺子從枕骨大孔的上面進入）將采樣勺插入枕骨大孔中，插入時采樣勺要緊貼枕骨大孔的腔壁，以幸免損壞延腦組織。采樣勺插入的深度約為4cm，然后向上一扳勺子手柄，同時往外摳出腦組織和勺子，延腦便可完整取出。f.其余步驟見2.3.1中的d、e和f。注：關于臨床疑似羊，采下腦后，從腦中線一分為二，一份用于甲醛固定，另一份用于-20℃3樣品的包裝與運送3.1單獨將采樣單郵寄給檢測實驗室，切不可與樣品一起郵寄，目的是防止采樣單被污染。3.2將固定好的羊組織放在幾個大的帶內(nèi)蓋的塑料桶中密封，注意每組羊組織都隨身帶有一個唯一的編號，桶外壁上也標明桶內(nèi)的所有每組羊樣品編號。運送時桶里的固定液能夠僅保留適當?shù)牧勘憧?，適當?shù)牧渴且越]羊組織為準，但運送時必須更換固定液。3.3運輸時，將裝有樣品的塑料桶用木架子固定好，以防運輸途中顛倒。3.4在木架子不處加兩張不干膠標簽，一張注明樣品名稱、采樣單位與地址及聯(lián)系電話，另一張注明放置方向、小心、易碎和切勿倒置等字樣。3.5樣品由專人或經(jīng)航空運至檢測實驗室。附件2癢病消毒技術1藥品選擇分析純氫氧化鈉含有效氯濃度超過2%的次氯酸鈉溶液，要求分析純2消毒方法2.12mol/L氫氧化鈉溶液浸泡或噴灑消毒1小時，適用于建筑物、木質(zhì)結(jié)構(gòu)、水泥表面、車輛和相關設施設備消毒。2.2含2%有效氯的次氯酸鈉溶液浸泡或噴灑消毒1小時，適用于建筑物、木質(zhì)結(jié)構(gòu)、水泥表面、車輛和相關設施設備消毒。2.3134～138℃2.4焚燒，適用于一切能夠焚燒的物品。3場地及設施消毒3.1金屬設施設備的消毒，可采取火焰、噴灑等方式消毒。3.2羊舍、車輛、屠宰加工、貯藏等場所，可采納消毒液清洗、噴灑等方式消毒。3.3養(yǎng)羊場的飼料、墊料、糞便等，可收集起來完全焚燒無害化處理。3.4關于感染母羊的產(chǎn)羔房要重點消毒，將所有污染的物品包括表層土壤都要焚燒無害化處理。4飼養(yǎng)人員的物品消毒衣、帽、鞋等可能被污染的物品，均以完全焚燒無害化處理。5羊產(chǎn)品消毒假如羊產(chǎn)品存在污染的風險，應該完全焚燒無害化處理。附件3癢病無害化處理技術1無害化處理地點1.1關于少量羊只或羊產(chǎn)品，按就近原則選擇無害化處理地點，且要避開牧場。1.2關于大量羊只或羊產(chǎn)品，則需要在專門的焚燒廠進行焚燒無害化處理。1.3關于排泄物、污染或可能污染的飼料和墊料等物品，以就近原則選擇焚燒無害化處理地點，且要避開牧場。2方法2.1總的原則是完全焚燒。2.2羊只焚燒前，需要將其適當肢解，以便于焚燒完全。肢解時，注意做好生物安全防護。2.3關于少量羊只或羊產(chǎn)品的焚燒。先在焚燒地挖一個大小適當、深度適中的坑，下面架好干燥的木材，噴上柴油，然后將羊產(chǎn)品或內(nèi)臟和肢解的羊軀體組織塊放置在上面（排一層，不要堆積），再次噴上柴油，點火焚燒。2.4關于大量羊只的焚燒。撲殺完后先不要肢解羊只，而是運到焚燒廠之后進行肢解，然后再完全焚燒。運輸時要幸免污染環(huán)境，運輸工具要消毒完全。肢解的場地要考慮今后消毒是否方便和完全。污染的物品要焚燒處理或消毒處理。2.5關于大量羊產(chǎn)品的焚燒。將羊產(chǎn)品安全運到焚燒廠進行完全焚燒處理。運輸時要幸免污染環(huán)境，運輸工具要消毒完全。2.6對排泄物、污染或可能污染的飼料和墊料等進行無害化處理時，方法同2.3。2.7關于污水，先用塑料桶或盆收集起來，依照體積多少加入適量氫氧化鈉固體，使其濃度至少達2mol/L。污水污染的表面，則能夠噴灑含2%有效氯的次氯酸鈉溶液作用1小時。污水處理完后應加入適量濃鹽酸使溶液達到中性，然后與其他處理完畢的物品一起填埋。附件4風險羊產(chǎn)品的定義來源于風險羊，但未受到腦、頭顱、眼、脊髓、脊柱、扁桃體、小腸、胸腺、脾、腎上腺、胰、肝臟等組織污染的下列產(chǎn)品，被認為是安全的。1生皮和熟皮；2明膠；3由皮張和皮革制造的膠原；4油脂（不溶性雜質(zhì)的最大含量為0.15%）和由其制備的衍生產(chǎn)品；5磷酸二鈣制品（無蛋白或脂肪）；6羊毛或羊纖維。除此之外，源自于風險羊的其他羊產(chǎn)品均為風險羊產(chǎn)品。小反芻獸疫防治技術規(guī)范小反芻獸疫（PestedesPetitsRuminants，PPR）是由小反芻獸疫病毒（PPRV）引起的山羊和綿羊的急性接觸性傳染病。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報告的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。為預防、操縱和撲滅小反芻獸疫，依據(jù)《中華人民共和國動物防疫法》、《重大動物疫情應急條例》等法律法規(guī)，制定本規(guī)范。1.適用范圍 本規(guī)范規(guī)定了小反芻獸疫的診斷、報告、處置、預防與操縱等技術措施。本規(guī)范適用于中華人民共和國境內(nèi)一切與小反芻獸疫防治活動有關的單位和個人。2.診斷依據(jù)該病流行病學調(diào)查和臨床癥狀，結(jié)合實驗室診斷結(jié)果做出綜合判定。2.1流行病學2.1.1發(fā)病和帶毒羊是要緊傳染源。病畜的分泌物和排泄物也是傳染源。2.1.2要緊通過直接或間接接觸傳播，感染途徑以呼吸道為主。2.1.3山羊和綿羊是該病的自然宿主，山羊比綿羊更易感，臨床癥狀更嚴峻。巖羊、野山羊、盤羊、鬣羊、瞪羚羊、長角大羚羊、亞洲水牛、駱駝等可感染發(fā)病。白尾鹿在實驗條件下表現(xiàn)為亞臨床感染或嚴峻發(fā)病，能產(chǎn)生抗體。牛呈亞臨床感染，并能產(chǎn)生抗體。2.1.4一般為4～6天，最長可達21天。2.1.5易感羊群發(fā)病率通常達60%以上，病死率可達50%以上。2.1.6該病一年四季均可發(fā)生，但多雨季節(jié)和干燥嚴寒季節(jié)多發(fā)。2.2臨床癥狀山羊臨床癥狀比較典型，綿羊臨床癥狀一般較輕微。2.2.1突然發(fā)熱，第2～3天體溫可達40～422.2.22.2.32.2.42.3病理變化2.3.12.3.22.3.32.3.42.3.52.4實驗室檢測2.4.1無菌采集病羊眼棉試子、口棉拭子、鼻棉拭子和抗凝血，采集被撲殺或剛死亡病畜的脾、胸腺、腸系膜和支氣管淋巴結(jié)、腸黏膜、肺等組織，無菌采集全血，用常規(guī)方法分離血清。樣品采集后，置冰上冷藏盡快送至實驗室檢測。2.4.2應在省級動物疫病預防操縱機構(gòu)實驗室、國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行?？贵w檢測可采納病毒中和試驗、競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）檢測法和間接酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）抗體檢測法。2.4.3應在國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行。2.4.32.4.32.5結(jié)果判定2.5.1疑似山羊或綿羊出現(xiàn)急性發(fā)熱、腹瀉、口炎等癥狀，羊群發(fā)病率、病死率較高，傳播迅速，且出現(xiàn)肺尖肺炎病理變化，可判定為疑似小反芻獸疫病例。2.5.2確診未免疫小反芻獸疫疫苗的山羊或綿羊出現(xiàn)疑似病例，且2.4.2項任一項血清學方法檢測陽性，可判定為確診小反芻獸疫病例免疫小反芻獸疫疫苗的山羊或綿羊出現(xiàn)疑似病例，且2.4.3項任一項病原學方法檢測陽性，可判定為確診小反芻獸疫病例3.疫情報告和確認3.1疑似疫情的報告任何單位和個人，發(fā)覺符合3.2的臨床癥狀，發(fā)病率、病死率較高的山羊或綿羊疫情時，應當立即向當?shù)孬F醫(yī)主管部門、動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)或者動物疫病預防操縱機構(gòu)報告。當?shù)乜h級動物疫病預防操縱機構(gòu)初步判定為小反芻獸疫疫情的，應在2小時內(nèi)報本地獸醫(yī)主管部門，并逐級上報至省級動物疫病預防操縱機構(gòu)。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)診斷為疑似小反芻獸疫疫情時，應立即報告省級獸醫(yī)主管部門和中國動物疫病預防操縱中心；省級獸醫(yī)主管部門應在1小時內(nèi)報省級人民政府和國務院獸醫(yī)主管部門。3.2確診疫情的報告國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診為小反芻獸疫疫情時，應立即通知疫情發(fā)生地省級動物疫病預防操縱機構(gòu)和獸醫(yī)主管部門，同時報中國動物疫病預防操縱中心和國務院獸醫(yī)主管部門。3.3疫情確認國務院獸醫(yī)主管部門依照國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診結(jié)果，確認小反芻獸疫疫情。4.疫情處置4.1疑似疫情處置4.1.1接到報告后，縣級獸醫(yī)主管部門應組織2名以上獸醫(yī)人員立即到現(xiàn)場進行調(diào)查核實。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)判定為疑似小反芻獸疫疫情的，及時采集樣品送國家外來動物疫病研究中心或農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行確診。4.1.2對發(fā)病場（戶）實施隔離、監(jiān)視，禁止牛羊等反芻動物及其產(chǎn)品、飼料及有關物品移動，并對其內(nèi)、外環(huán)境進行嚴格消毒。必要時采取封鎖、撲殺等措施。4.2確診疫情處置疫情確診后，立即啟動相應級不的應急預案。4.2.14.2.1.1疫點。病畜所在的地點。4.2.1.2疫區(qū)。由疫點邊緣向外延伸3公里范圍的區(qū)域4.2.1.3受威脅區(qū)。由疫區(qū)邊緣向外延伸10公里的區(qū)域劃定疫區(qū)、受威脅區(qū)時，應依照當?shù)靥烊黄琳希ㄈ绾恿?、山脈等）、野生動物棲息地存在情況，以及疫情溯源及跟蹤調(diào)查結(jié)果，適當調(diào)整范圍。4.2.2疫情發(fā)生所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門報請同級人民政府對疫區(qū)實行封鎖，人民政府在接到報告后，應在24小時內(nèi)公布封鎖令?？缧姓^(qū)域發(fā)生疫情時，由有關行政區(qū)域共同的上一級人民政府對疫區(qū)實行封鎖，或者由各有關行政區(qū)域的上一級人民政府共同對疫區(qū)實行封鎖。必要時，上級人民政府能夠責成下級人民政府對疫區(qū)實行封鎖。4.2.3對疫點4.2.3.1撲殺疫點內(nèi)的所有山羊和綿羊，并對所有病死羊、被撲殺羊及羊鮮乳、羊肉等產(chǎn)品進行無害化處理（見GB165484.2.34.2.34.2.34.2.34.2.34.2.4對疫區(qū)4.2.4.14.2.4.24.2.4.34.2.4.44.2.4.54.2.4.6對易感羊群進行疫情監(jiān)測，如檢出病原學陽性樣品，不管臨床是否發(fā)病，應撲殺所有4.2.4.7對疫區(qū)內(nèi)其他羊只，在解除封鎖后，應在當?shù)貏游镄l(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)監(jiān)督下就近急4.2.4.84.2.5對4.2.54.2.54.2.54.2.6加強疫區(qū)、受威脅區(qū)及周邊地區(qū)野生易感動物分布狀況調(diào)查和發(fā)病情況監(jiān)測，并采取措施，幸免野生羊、鹿等與人工飼養(yǎng)的羊群接觸。當?shù)孬F醫(yī)部門與林業(yè)部門應定期相互通報有關信息。4.2.7對疫情發(fā)生前21天內(nèi)，所有引入疫點的易感動物、相關產(chǎn)品來源及運輸工具進行追溯性調(diào)查，分析疫情來源。必要時，對輸出地羊群或接觸羊群（風險羊群）進行隔離觀看，對羊乳和乳制品進行消毒處理。4.2.8對疫情發(fā)生前21天內(nèi)以及采取隔離措施前，從疫點輸出的易感動物、相關產(chǎn)品、運輸車輛及緊密接觸人員的去向進行跟蹤調(diào)查，分析疫情擴散風險。必要時，對風險羊群進行隔離觀看。4.2.9疫點內(nèi)最后一只羊死亡或撲殺，并按規(guī)定進行消毒和無害化處理后至少21天，疫區(qū)、受威脅區(qū)經(jīng)監(jiān)測沒有新發(fā)病例時，經(jīng)疫情發(fā)生所在地上級獸醫(yī)主管部門組織驗收合格后，由所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門向原公布封鎖令的人民政府申請解除封鎖，由該人民政府公布解除封鎖令，并通報毗鄰地區(qū)和有關部門，報上一級政府備案。5.預防操縱5.1飼養(yǎng)治理5.1.15.1.25.1.35.2監(jiān)測各級動物疫病預防操縱機構(gòu)應當按照國家動物疫病監(jiān)測打算要求開展小反芻獸疫監(jiān)測工作。5.3免疫必要時，經(jīng)農(nóng)業(yè)部批準，能夠采取免疫措施。5.3.15.3.2曾5.4檢疫引種檢疫工作時應加強小反芻獸疫檢疫。做好羊產(chǎn)地檢疫和屠宰檢疫工作，加強跨境調(diào)運羊及其產(chǎn)品的建議監(jiān)督。5.5邊境防控各邊境地區(qū)要加強邊境地區(qū)防控，堅持內(nèi)防外堵，切實落實邊境巡查、消毒等各項防控措施。與曾發(fā)生和正在發(fā)生小反芻獸疫疫情的國家和地區(qū)接壤省份的相關縣市，應當加強對羊只的治理，防止疫情傳入。禁止過境放牧、過境寄養(yǎng)，以及活羊及其產(chǎn)品的互市交易。加強對邊境地區(qū)的疫情監(jiān)視和監(jiān)測，及時分析疫情動態(tài)。5.6宣傳培訓廣泛宣傳小反芻獸疫的防范知識和防控政策。加強基層治理和技術人員培訓，提高小反芻獸疫的診斷能力和水平，及時發(fā)覺、報告和處置疑似疫情，消除疫情隱患。附件1小反芻獸疫消毒技術1藥品種類堿類（碳酸鈉、氫氧化鈉）、氯化物和酚化合物適用于建筑物、木質(zhì)結(jié)構(gòu)、水泥表面、車輛和相關設施設備消毒。檸檬酸、酒精和碘化物適用于人員消毒。2場地及設施消毒2.1消毒前的預備2.1.1消毒前必須清除有機物、污物、糞便、飼料、墊料等；2.1.2選擇合適的消毒藥品；2.1.3備有噴霧器、火焰噴射槍、消毒車輛、消毒防護用具（如口罩、手套、防護靴等）、消毒容器等。2.2消毒方法2.2.1金屬設施設備的消毒，可采取火焰、熏蒸和沖洗等方式消毒；2.2.2羊舍、車輛、屠宰加工、貯藏等場所，可采納消毒液清洗、噴灑等方式消毒；2.2.3養(yǎng)羊場的飼料、墊料、糞便等，可采取堆積發(fā)酵或焚燒等方式處理；2.2.4疫區(qū)范圍內(nèi)辦公、飼養(yǎng)人員的宿舍、公共食堂等場所，可采納噴灑的方式消毒。3人員及物品消毒3.1飼養(yǎng)、治理等人員可采取淋浴消毒；3.2衣、帽、鞋等可能被污染的物品，可采取消毒液浸泡、高壓滅菌等方式消毒。4羊絨及羊毛消毒能夠采納下列程序之一滅活病毒：4.1在18℃儲存4周，4℃儲存4個月，或4.2在一密封容器中用甲醛熏蒸消毒至少24小時。具體方法：將高錳酸鉀放入容器（不可為塑料或乙烯材料）中，再加入商品福爾馬林進行消毒，比例為每立方米加53mL福爾馬林和35g高錳酸鉀；4.3工業(yè)洗滌，包括浸入水、肥皂水、蘇打水或碳酸鉀等一系列溶液中水??；4.4用熟石灰或硫酸鈉進行化學脫毛；4.5浸泡在60～70℃5羊皮消毒5.1在含有2％碳酸鈉的海鹽中腌制至少28天；5.2在一密閉空間內(nèi)用甲醛熏蒸消毒至少24小時，具體方法參考4.2。6羊乳消毒采納下列程序之一滅活病毒：6.1兩次高溫瞬時巴氏消毒法6.2高溫瞬時巴氏消毒法與其它物理處理方法結(jié)合使用，如在pH6的環(huán)境中維持至少1小時；6.3超高溫巴氏消毒法結(jié)合物理方法。牛傳染性胸膜肺炎防治技術規(guī)范牛傳染性胸膜肺炎（ContagiousBovinePleuropneumonia，CBPP）又稱牛肺疫，是由絲狀支原體絲狀亞種SC型(MycoplasmamycodiessubspmycodiesSC，MmmSC)引起的牛的一種烈性傳染病。世界動物衛(wèi)生組織（OIE）將其列為必須報告的動物疫病，我國將其列為一類動物疫病。為預防、操縱和撲滅牛傳染性胸膜肺炎，依據(jù)《中華人民共和國動物防疫法》、《重大動物疫情應急條例》等法律法規(guī)，制定本規(guī)范。1.適用范圍 本規(guī)范規(guī)定了牛傳染性胸膜肺炎的診斷、報告、處置、預防與操縱等技術措施。本規(guī)范適用于中華人民共和國境內(nèi)一切與牛傳染性胸膜肺炎防治活動有關的單位和個人。2.診斷2.1流行病學2.1.1病牛和帶菌牛是要緊傳染源。2.1.2病菌要緊通過呼吸道傳播，健康牛通常因吸入帶有病原體的氣體或飛沫而感染。2.1.3在自然條件下，該病僅感染牛屬反芻動物，以黃牛、奶牛、牦牛、朝鮮犏牛最易感，水牛易感性較差。2.1.4該病平均埋伏期為1～4周，短的7天，長者達數(shù)月。2.1.5實驗條件下急性爆發(fā)病例死亡率高達60%，田間其死亡率較低，但首次爆發(fā)地區(qū)該病死亡率較高。此外，該病的發(fā)病率和死亡率與牛的品種及易感性不同有關。奶牛和犏牛以及部分黃牛發(fā)病率高，病死率也高。2.1.6該病發(fā)生無明顯的季節(jié)性。2.2臨床癥狀2.2.1超急性型：臨床癥狀上表現(xiàn)為急性型的加重2.2.2急性型：疾病早期表現(xiàn)為胸膜炎導致的重癥肺炎，較難與其它呼吸道疾病區(qū)分。病畜因中等程度發(fā)燒表現(xiàn)為呆滯、厭食、不規(guī)則反芻。通常伴有輕咳或干咳。有時體溫會升高到40～42℃2.2.3亞急性型：癥狀與急性型相似，但稍有緩和，病程稍長。病牛食欲不振，產(chǎn)奶量逐漸減少，體溫升高，呼吸加快，短咳，常有便秘和腹瀉。當體溫升高到402.2.42.3病理變化要緊病變位于胸腔和肺臟，病變通常是單側(cè)發(fā)生。被侵害的胸腔含有大量的清亮的棕黃色的液體，其中包含著一些纖維素碎片。在胸腔和肺臟表面出現(xiàn)干酪樣沉積物。不同時期炎性病變導致的琥珀色液體的分散而使肺臟呈現(xiàn)出紅色、灰白色，黃色肝變樣，這也是炎性損傷不同程度的一種表現(xiàn)。肺臟出現(xiàn)特有的大理石樣外觀，有時伴隨胸腔和胸壁粘連。在慢性和長期病例中肺臟還發(fā)生壞死，壞死灶直徑在1～10厘米之間。另外，關于呼吸道疾病，侵害犢?？蓪е聺B出性腹膜炎、關節(jié)炎、粘液囊炎、腕骨和跗骨的蛋白性關節(jié)炎。偶有頸下淋巴結(jié)腫大。2.4實驗室檢測應在農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行。2.4.12.4.2補體結(jié)合試驗、競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。2.4.3絲狀支原體絲狀亞種SC型分離與鑒定、聚合酶鏈式反應。2.5結(jié)果判定2.5.1符合流行病學特點，且至少符合2.2.1、2.2.2、2.2.3、2.2.4和2.3項之一，同時排除牛支原體、巴氏桿菌和牛結(jié)核病，可初步判定為臨床懷疑牛傳染性胸膜肺炎2.5.2臨床懷疑病例，且2.4.2項中任一項血清學方法檢測陽性，可判定為疑似牛傳染性胸膜肺炎2.5.3疑似病例，且2.4.3項任一項病原學方法檢測陽性，可判定為確診牛傳染性胸膜肺炎3.疫情報告和確認3.1疑似疫情的報告任何單位和個人，發(fā)覺牛出現(xiàn)2.2的臨床癥狀的，應當立即向當?shù)孬F醫(yī)主管部門、動物衛(wèi)生監(jiān)督機構(gòu)或者動物疫病預防操縱機構(gòu)報告。當?shù)乜h級動物疫病預防操縱機構(gòu)初步判定為牛傳染性胸膜肺炎疫情的，應在2小時內(nèi)報本地獸醫(yī)主管部門，并逐級上報至省級動物疫病預防操縱機構(gòu)。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)診斷為疑似牛傳染性胸膜肺炎疫情時，應立即報告省級獸醫(yī)主管部門和中國動物疫病預防操縱中心；省級獸醫(yī)主管部門應在1小時內(nèi)報省級人民政府和國務院獸醫(yī)主管部門。3.2確診疫情的報告農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診為牛傳染性胸膜肺炎疫情時，應立即通知疫情發(fā)生地省級動物疫病預防操縱機構(gòu)和獸醫(yī)主管部門，同時報中國動物疫病預防操縱中心和國務院獸醫(yī)主管部門。3.3疫情確認國務院獸醫(yī)主管部門依照農(nóng)業(yè)部指定實驗室確診結(jié)果，確認牛傳染性胸膜肺炎疫情。4.疫情處置4.1臨床懷疑疫情處置4.1.1接到報告后，縣級獸醫(yī)主管部門應組織2名以上獸醫(yī)人員立即到現(xiàn)場進行調(diào)查核實。省級動物疫病預防操縱機構(gòu)判定為疑似牛傳染性胸膜肺炎疫情的，及時采集樣品（見附件1）送農(nóng)業(yè)部指定實驗室進行確診。4.1.2對發(fā)病場（戶）實施隔離、監(jiān)視，禁止易感動物、畜產(chǎn)品、飼料及有關物品移動，并對其內(nèi)、外環(huán)境進行嚴格消毒（見附件2）。4.2疑似疫情處置按照4.1處理，必要時采取封鎖、撲殺等措施。4.3確診疫情處置疫情確診后，立即啟動相應級不的應急預案。4.3.14.3.1.1疫點：病牛所在的地點。4.3.1.2疫區(qū)：4.3.1.3受威脅區(qū)：劃定疫區(qū)、受威脅區(qū)時，應依照當?shù)靥烊黄琳希ㄈ绾恿鳌⑸矫}等）、人工屏障（道路、圍欄等）存在情況，以及疫情溯源及跟蹤調(diào)查結(jié)果，綜合評估后劃定。4.3.2疫情發(fā)生所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門報請同級人民政府對疫區(qū)實行封鎖，人民政府在接到報告后，應在24小時內(nèi)公布封鎖令?？缧姓^(qū)域發(fā)生疫情時，由有關行政區(qū)域共同的上一級人民政府對疫區(qū)實行封鎖，或者由各有關行政區(qū)域的上一級人民政府共同對疫區(qū)實行封鎖。必要時，上級人民政府能夠責成下級人民政府對疫區(qū)實行封鎖。4.3.3對疫點4.3.3.1撲殺并銷毀疫點內(nèi)的所有牛，并對所有病死牛、被撲殺牛及制品按國家規(guī)定標準進行無害化處理（見GB165484.3.3.2對排泄物、被污染或可能被污染飼料和墊料、污水等按規(guī)定進行無害化處理（見GB165484.3.3.34.3.3.44.3.4對疫區(qū)4.3.44.3.4.2必要時，撲殺疫區(qū)內(nèi)所有易感動物，并按規(guī)定進行無害化處理（見GB165484.3.44.3.44.3.4.54.3.5對4.3.5.14.3.5.24.3.64.3.6.14.3.6.24.3.6.34.3.7對疫情發(fā)生前180天內(nèi)以及采取隔離措施前，從疫點輸出的易感動物、相關產(chǎn)品、運輸車輛及緊密接觸人員的去向進行跟蹤調(diào)查，分析疫情擴散風險。必要時，對接觸牛群進行隔離觀看。4.3.8對疫情發(fā)生前180天內(nèi)，所有引入疫點的易感動物、相關產(chǎn)品來源及運輸工具進行追溯性調(diào)查，分析疫情來源。必要時，對輸出地牛群或接觸牛群進行隔離觀看，對飼料和墊草進行消毒處理。4.3.9疫點和疫區(qū)內(nèi)最后一頭牛死亡或撲殺，并按規(guī)定進行消毒和無害化處理3個月后，再設置崗哨動物至少監(jiān)測3個月，經(jīng)疫情發(fā)生所在地上級獸醫(yī)主管部門組織驗收合格后，由所在地縣級以上獸醫(yī)主管部門向原公布封鎖令的人民政府申請解除封鎖，由該人民政府公布解除封鎖令，并通報毗鄰地區(qū)和有關部門，報上一級政府備案。4.3.10對處理疫情的全過程必須做好完整詳實的記錄，并歸檔。5.預防操縱5.1飼養(yǎng)治理易感動物飼養(yǎng)、生產(chǎn)、經(jīng)營等場所必須符合《動物防疫條件審查方法》規(guī)定的動物防疫條件，建立并實施嚴格的衛(wèi)生消毒制度。5.2日常監(jiān)測動物疫病預防操縱機構(gòu)應當加強牛傳染性胸膜肺炎監(jiān)測工作，及時發(fā)覺臨床可疑病例。5.3檢疫在開展產(chǎn)地檢疫、屠宰檢疫、引種檢疫工作中應加強牛傳染性胸膜肺炎檢疫。5.4邊境防控邊境地區(qū)應采取有效措施，防止疫情傳入。5.5宣傳培訓獸醫(yī)主管部門要加強牛傳染性胸膜肺炎防控知識宣傳，提高民眾的公共衛(wèi)生意識，爭取各行業(yè)和全社會的緊密合作，有效防范牛傳染性胸膜肺炎。附件1樣品的采集、運輸與保存當懷疑有牛傳染性胸膜肺炎發(fā)生時，應對牛群采集以下樣品進行檢測：抗凝血（用肝素或乙二胺四乙酸（EDTA）作抗凝劑）、鼻拭子或鼻分泌物、支氣管肺泡灌洗液或氣管灌洗液、胸腔積液、肺臟病變組織、肺臟支氣管淋巴結(jié)，有關節(jié)炎的關節(jié)滑液。肺臟樣品要在有病變組織和正常組織的分界面上從病變部位采集。1血液樣品1.1血液樣品采集后，加入含有EDTA或肝素抗凝劑的無菌試管中，可能時，每份血液樣品采集2管，每管采集5ml，以便為復檢預備充足的樣品。1.2對擬分離血清的血液樣品，室溫放置12～24小時，收集血清，放入冰盒后低溫運輸至檢測實驗室。待檢血清到達實驗室后，-20℃（短期）或-701.3特異性抗體能在4℃2組織樣品2.1首選胸腔積液，其次為病變肺臟組織。選取直徑約5cm的組織樣品或至少10mL胸腔積液，加入含500IU/mL青霉素和0.25%鏈霉素的PBS溶液后，4℃保存運輸。也能夠在含50%甘油的PBS溶液中42.2對擬進行病原分離或病原檢測的樣品，按規(guī)定包裝后低溫運輸至檢測實驗室。樣品必需低溫保存。4℃可保存幾天，冷凍或-25附件2牛傳染性胸膜肺炎消毒技術1藥品種類最有效的消毒藥是3%石碳酸或20%～30%的熱草木灰水進行消毒。堿類（氫氧化鈉、氫氧化鉀等）、氯化物和酚化合物適用于建筑物、木質(zhì)結(jié)構(gòu)、水泥表面、車輛和相關設施設備消毒。酒精和碘化物適用于人員消毒。2設備和必需品2.1清洗工具：掃帚、叉子、鏟子、鍬和沖洗用水管。2.2消毒工具：噴霧器、火焰噴射槍、消毒車輛、消毒容器等。2.3消毒劑：酚類、氯制劑類等合適的消毒劑。2.4防護裝備：防護服、口罩、膠靴、手套、護目鏡等。3疫點內(nèi)飼養(yǎng)圈舍清理、清洗和消毒3.1對圈舍內(nèi)外消毒后再行清理和清洗。3.2首先清理污物、糞便、飼料等。3.3對地面和各種用具等完全沖洗，并用水洗刷圈舍、車輛等，對所產(chǎn)生的污水進行無害化處理。3.4對金屬設施設備，可采取火焰、熏蒸等方式消毒。3.5對飼養(yǎng)圈舍、場地、車輛等采納消毒液噴灑的方式消毒。3.6飼養(yǎng)圈舍的飼料、墊料等作發(fā)酵或焚燒處理。3.7糞便等污物作化學處理后深埋、堆積密封或焚燒處理。4交通工具清洗消毒4.1出入疫點、疫區(qū)的交通要道設立臨時性消毒點，對出入人員、運輸工具及有關物品進行消毒。4.2疫區(qū)內(nèi)所有可能被污染的運載工具應嚴格消毒，車輛內(nèi)、外及所有角落和縫隙都要用消毒劑消毒后再用清水沖洗，不留死角。4.3車輛上的物品也要做好消毒。4.4從車輛上清理下來的垃圾和糞便要作無害化處理。5牲畜市場消毒清洗5.1用消毒劑噴灑所有區(qū)域。5.2飼料和糞便等要化學處理后深埋、發(fā)酵或焚燒。6屠宰加工、儲藏等場所的清洗消毒6.1所有牲畜及其產(chǎn)品都要化學處理后深埋或焚燒。6.2圈舍、過道和舍外區(qū)域用消毒劑噴灑消毒后清洗。6.3所有設備、桌子、冰箱、地板、墻壁等用消毒劑噴灑消毒后沖洗潔凈。6.4所有衣服用消毒劑浸泡后清洗潔凈，其他物品都要用適當?shù)姆绞竭M行消毒。6.5以上所產(chǎn)生的污水要通過處理,達到環(huán)保排放標準。7消毒頻率疫點每天消毒1次連續(xù)1