ABO血型鑒定操作規(guī)程

ABO血型定型 編號(hào):□□□□/J04-2016操作規(guī)程 版號(hào)；2016—A版第0次修改目的;為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確，格外訂本規(guī)程。ABO血型鑒定相關(guān)科室的全體工作人員.職責(zé)；3。1科主任負(fù)責(zé)本規(guī)程的培訓(xùn)，考核及督促實(shí)施。,為實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性負(fù)責(zé)。4.原理AB抗原，將血分為A型、B型、OAB型四種?？衫眉t細(xì)胞凝集試驗(yàn)、經(jīng)過正、反定型準(zhǔn)確鑒定ABO血型.正定型是用已知抗A和B分型血清來測(cè)定紅細(xì)胞表面有無ABAB型紅細(xì)A或抗B.反定型中使用O細(xì)胞是為了AB以外的不規(guī)則抗體.5，試劑5。1抗-AB分型血清。5.2～5％、B、O、試劑紅細(xì)胞。試劑的質(zhì)量控制；每個(gè)工作日在實(shí)驗(yàn)開頭前，對(duì)試劑進(jìn)行外觀檢查,包括；有效期、有無滲漏等，試劑紅細(xì)胞無明顯溶血.--按《血型試劑確認(rèn)操作規(guī)程》進(jìn)行特異性驗(yàn)證。中.工作程序：71正定型：取潔凈小試管2支，分別標(biāo)記“抗AB",分別滴AB試劑1滴于試管底部,再分別加入受檢者2％～5％紅細(xì)17。23A

BC

O”,C C2A、BO2%~5%17。33400/15（1000/1觀察細(xì)胞扣有無凝集或溶血現(xiàn)象。觀察結(jié)果時(shí)既要看有無凝集,也要著重凝集強(qiáng)度，這將有助于亞型等的發(fā)覺。血型 正定型抗A 抗B

反定型A B OC C CA+-—+-B—++-—O-—++-AB++-——見者有以下情況；分型血清效價(jià)太低，親和力不強(qiáng)。紅細(xì)胞懸液濃度過高或過低,抗原抗體比例不適當(dāng)（出現(xiàn)前帶或后帶現(xiàn)象，使反應(yīng)不明顯誤判為陰性反應(yīng)。受檢者紅細(xì)胞表面抗原位過少或抗原性減弱等.,常引起紅細(xì)胞呈緡錢狀排列。AB。各種原因引起的紅細(xì)胞溶血，誤判為不凝集。由細(xì)菌污染或遺傳因素引起,多凝集和全凝集，往往是正反定型不符的原因。血清中有ABO血型系統(tǒng)以外抗體,如Ｉ（冷抗體）等,常干擾定型。觀察細(xì)胞扣時(shí)手法不當(dāng),未發(fā)覺弱凝集。如發(fā)覺ABO(必需用試管法果，就能夠解決問題，對(duì)一些疑難問題必需進(jìn)一步鑒定。相關(guān)文件?中國輸血技術(shù)操作規(guī)程??臨床輸血技術(shù)更規(guī)范??青海省醫(yī)療機(jī)構(gòu)輸血科(血庫)標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)驗(yàn)收評(píng)審細(xì)則?10。4記錄血型試劑質(zhì)量控制記錄。血型檢定及結(jié)果登記.2016。4。5Rh血型鑒定 編號(hào)：□□□□/J04—2016操作規(guī)程 版號(hào)；2016-A版第0次修改1.目的;為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確，特制訂本規(guī)程。2Rh3.職責(zé)3。1確性負(fù)責(zé).4。原理Rh血型系統(tǒng)主要有五種抗血清,即抗D，抗Cc,抗E，抗e.用五種抗Rh分型血清來檢查紅細(xì)胞抗原。在臨床輸血中，一般只做D抗原的鑒定,凡被檢紅細(xì)胞和抗—D血清凝集著為Rh陽性，不凝集者為Rh5D6。試劑的質(zhì)量控制：每個(gè)工作日在實(shí)驗(yàn)開頭前，對(duì)試劑進(jìn)行外觀檢查,包括：有效期、有無滲漏等；對(duì)所有的抗-D血清按《血型試劑確認(rèn)操作規(guī)程》進(jìn)行特異性驗(yàn)證。.7.工作程序：7.11D”,加抗-D試劑12％~51--HNZYSXK-G-1 編號(hào)：□□□□/J04-2016/15秒（1000轉(zhuǎn)/1分鐘)離心，肉眼觀察細(xì)胞扣，依據(jù)凝集情況推斷結(jié)果.8。1結(jié)果推斷：凝集者為Rh（D）陽性,不凝集者再次檢測(cè)，再次檢陰性。8.2凝集強(qiáng)度的推斷依據(jù)《血型試劑確認(rèn)操作規(guī)程》9.著重事項(xiàng)：9.1后帶現(xiàn)象，出現(xiàn)假陰性結(jié)果。9。2試劑或被檢血清和紅細(xì)胞的比例要適當(dāng)，否則會(huì)漏檢陽性結(jié)果。9.31010。110.210。3（血庫）標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)驗(yàn)收評(píng)審細(xì)則?11不規(guī)則抗體篩選實(shí)驗(yàn) 編號(hào)：□□□□/J04—2016操作規(guī)程 版號(hào);2016—A版第0次修改目的：為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確，特制訂本規(guī)程。范圍：適宜輸血科（血庫)全體工作人員.職責(zé)3。2科室工作人員熟悉把握原理及操作。原理紅細(xì)胞血型抗體除了抗A，抗B外，可能含有潛在的其他不規(guī)則反應(yīng)性之間有著直接的關(guān)系?？贵w主要分為IgMIgGIgM抗35.7nm，在鹽水介質(zhì)中能直接相連相應(yīng)的紅細(xì)胞，使之發(fā)生肉眼可見的凝集反應(yīng)，IgG抗體長度大于24nm，在鹽水介質(zhì)中不3人份根本含蓋常見抗原的O鹽水介質(zhì)、凝聚胺介質(zhì)或抗人球蛋白介質(zhì)等）只要血清中存在常見的IgM和IgG在不同的介質(zhì)中就會(huì)和篩選細(xì)胞發(fā)生凝集。5。儀器、材料與試劑5。1凝聚胺試劑5.2篩選細(xì)胞試劑的質(zhì)量控制：--溶血，在有效期內(nèi)；同時(shí)記錄試劑廠家和批號(hào).工作程序及結(jié)果推斷：7。1取試管3支，分別標(biāo)記“1”、“2”、“3”、各管加患者血清21、2、31滴，混勻。以3400轉(zhuǎn)∕離心15(10001）。7。2觀察結(jié)果，3號(hào)管中有1管以上陽性者，為抗體篩選實(shí)驗(yàn)陽性，IgM7.331gM374在聚凝按介質(zhì)中，3管中有11gG7。532檢血清中不存在不規(guī)則抗體。相關(guān)文件。9。1《中國輸血技術(shù)操作規(guī)范》9.2《臨床輸血技術(shù)規(guī)范》9。3《青海省醫(yī)療機(jī)構(gòu)輸血科（血庫)標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)驗(yàn)收評(píng)審細(xì)則》記記錄10。1交叉配血實(shí)驗(yàn) 編號(hào)：□□□□/J04-2016操作規(guī)程 版號(hào)；2016—A版第0次修改1。目的；為確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確，保證安全輸血，特制訂本規(guī)程。2（血庫）全體工作人員。職責(zé):科主任負(fù)責(zé)本規(guī)程的培訓(xùn)、考核及督促實(shí)施.確性負(fù)責(zé)?？剖夜ぷ魅藛T熟悉把握原理及操作。4原理4。1介質(zhì)法檢測(cè)IgM類不規(guī)則血型抗體引起的交叉配血實(shí)驗(yàn)不合,用凝聚IgG42促進(jìn)紅細(xì)胞之間相互接近，引起的紅細(xì)胞產(chǎn)生非特異性的凝集反應(yīng).假若是由特異性抗原抗體反應(yīng)引起的凝集，則會(huì)在加入再懸液時(shí)散開.5.材料與試劑5.2抗A.抗B5。32—5％A。B.O5。4抗—D6。試劑的質(zhì)量控制；聚凝胺實(shí)驗(yàn)經(jīng)過中，加入重懸液之前如無凝集時(shí),將陽性對(duì)比血清代替待檢血清按7.3效。工作程序；7。1住院號(hào),血型等內(nèi)容無誤，方可進(jìn)行配血。依據(jù)《ABO血型定型操作規(guī)程》，《Rh血型定型操作規(guī)程》進(jìn)行ABO）Rh鹽水介質(zhì)配血。1取試管2支，分別標(biāo)記“主側(cè)”、“次側(cè)”,“主測(cè)"管加患者血清2滴，獻(xiàn)血者2—5％紅細(xì)胞懸液1滴；“次側(cè)”管加獻(xiàn)血者血清22—51滴,以3400/離心15(1500轉(zhuǎn)/1），以肉眼觀察細(xì)胞扣,有無凝集或溶血現(xiàn)象。7.3.2主次管凝集或溶血的要查找原因。733再將原主次管繼續(xù)進(jìn)行凝聚胺介質(zhì)法配血。凝聚胺介質(zhì)配血7。41各管加LIM0。7ml（14）2勻后3400rpm離心15秒,棄取上清液,不要瀝干，輕搖觀察由凝聚胺引起的紅細(xì)胞凝集。7.42有凝集時(shí)各加入2滴垂懸液輕搖看結(jié)果：由凝聚胺引起的非特異性紅細(xì)胞凝集應(yīng)在1集,反應(yīng)則不會(huì)徹底散開。7.4。3凝聚胺介質(zhì)配血陽性者，疑似由IgG抗體造成，需進(jìn)一步抗體鑒定。著重事項(xiàng)8。1若紅細(xì)胞中含有較多血清或血漿則需用鹽水洗滌細(xì)胞一次.82若加凝聚按試劑后未見紅細(xì)胞凝集需重做,可能是患者使用肝素類藥物中和聚凝胺所致，需多加1滴poiybrene（凝聚胺)試劑以中和肝素。8。3血，如鹽水介質(zhì)配血結(jié)果為陽性，則勿需進(jìn)行凝聚胺配血。8.437水浴箱中15分鐘，然后再離心。以防未徹底析出的纖維蛋白影響推斷結(jié)果。結(jié)果推斷：凝集強(qiáng)度的推斷依據(jù)?血型試劑確認(rèn)操作規(guī)程?相關(guān)文件?中國輸血技術(shù)操作規(guī)程??臨床輸血技術(shù)范圍?10。3（血庫）標(biāo)準(zhǔn)化建設(shè)驗(yàn)收評(píng)審細(xì)則?10.411記錄11。1血液入庫、管理 編號(hào)：□□□□/J04—2016操作規(guī)程 版號(hào)；2016-A版第0次修改一、血液領(lǐng)取、接收、入庫、核對(duì)、賬目登記（一）醫(yī)院臨床用血均須由所在行政區(qū)域衛(wèi)生行政部門指定的血站提供，不得自行采集異體血液.（二）到血站取血時(shí)，醫(yī)務(wù)人員須持單位蓋章的取血介紹信（須注明血型、血液品種、數(shù)量、規(guī)格及取血人姓名)前往、專車運(yùn)送、專人保管、用冷鏈設(shè)施貯存.（三）輸血科（血庫)接到血站血液入庫前要認(rèn)真核對(duì)驗(yàn)收，認(rèn)真檢查每袋血液是否有溶血、重度乳糜、破損、污染等情況。核對(duì)項(xiàng)目包括：規(guī)格、數(shù)量、運(yùn)輸條件、物理外觀、血袋密閉及包裝是否合格、標(biāo)簽填寫是否清晰齊全（供血機(jī)構(gòu)名稱及其許可證號(hào)、獻(xiàn)血編號(hào)或條形碼、血型、血液品種、容量、采血日期和時(shí)間或制備日期和時(shí)間，失效日期及時(shí)間、儲(chǔ)存條件）。（四）記錄交接時(shí)間和運(yùn)輸溫度或狀態(tài)，紅細(xì)胞2~10℃、血即符合要求。（五）每袋血液的血型、品種、規(guī)格、數(shù)量及完整的獻(xiàn)血編號(hào).二、血液的儲(chǔ)存及庫存管理（一）（二）血液的保存設(shè)備應(yīng)運(yùn)行可靠，溫度均衡，有報(bào)警裝置.（三）2錄血液儲(chǔ)存的溫度.專用冰箱不同層內(nèi)或不同專用冰箱內(nèi)，并有明顯的標(biāo)識(shí)。（五）別豎直放置，不得混放，以利觀察血液外觀,并與冰箱內(nèi)壁保持肯定的距離。（六）全血和紅細(xì)胞須儲(chǔ)存在2℃～6℃之間,血漿和冷沉淀凝血因子應(yīng)儲(chǔ)存在≤-18℃.血小板原則上在最短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行發(fā)放輸注，20～24℃專用血小板振蕩保存箱。（七）應(yīng)依據(jù)臨床需求制定用血規(guī)劃,保證肯定血液的庫存，既能滿足臨床常規(guī)用量的供應(yīng)，又能最大限度控制血液的過期報(bào)廢。（八）效期，以防止不必要的浪費(fèi).（九）分不能使用。（十）每日上班時(shí)間值班人員之間交接以下內(nèi)容并建立交接記錄：盤點(diǎn)血液的實(shí)際庫存和賬目庫存，做到帳物相符;當(dāng)日的發(fā)血情況；設(shè)備的運(yùn)行狀況；（十一） 每月與血站進(jìn)行所有血液品種的出入庫賬目核對(duì),核對(duì)無誤后，上報(bào)科主任、院領(lǐng)導(dǎo)、財(cái)務(wù)科。（十二） 當(dāng)儲(chǔ)血冰箱的溫度自動(dòng)控制記錄和報(bào)警裝置發(fā)出報(bào)警信號(hào)時(shí)，要立刻檢查原因,及時(shí)解決并記錄。（十三） 儲(chǔ)血冰箱內(nèi)嚴(yán)禁存放其它物品。血型相關(guān)試劑質(zhì)量控制 編號(hào)：□□□□/J04—2016操作規(guī)程 版號(hào);2016-A版第0次修改介質(zhì)試劑盒在領(lǐng)入輸血科（血庫）的使用前進(jìn)行試劑質(zhì)量控制，若相關(guān)實(shí)驗(yàn)經(jīng)過中試劑存在疑似效價(jià)降低等質(zhì)量問題時(shí)需再次進(jìn)行質(zhì)量控制。一、外觀檢查：每次領(lǐng)入的血型相關(guān)試劑都須進(jìn)行外觀檢查，包括：有效期、有無滲漏等，試劑紅細(xì)胞無明顯溶血.二、抗—A、抗—B、抗-D抗—AB抗-B抗—DAOABO抗—AB抗-B抗—DAOABORhD陽性細(xì)胞RhD陰性細(xì)胞胞胞4+-—-4+—4+-（二）效價(jià)測(cè)定：1A取1013……11050ul250ul2%～5A3400/153、抗-B、抗-D4、結(jié)果判定:肉眼觀察凝集為1+的最高稀釋度，出現(xiàn)凝集的最高稀釋度的效價(jià)是實(shí)驗(yàn)的結(jié)果.紅細(xì)胞凝集強(qiáng)度判讀標(biāo)準(zhǔn)凝集強(qiáng)度4+3+2+1+±0H

結(jié)果一個(gè)牢固的大凝塊,背景清晰數(shù)個(gè)牢固的凝塊，背景清晰中等大小的凝塊加小凝塊，背景清晰小凝塊，背景較渾濁細(xì)胞有微小的凝集，背景紅色渾濁陰性,紅細(xì)胞呈游離狀態(tài)，無凝集現(xiàn)象溶血,有游離血紅蛋白(三）抗-A、抗-B—A-B50ul，再吸取1050ul，置于血清滴記錄開頭出現(xiàn)凝集的時(shí)間,≤1532mm2者為合格。ABO四、聚凝胺介質(zhì)試劑盒：用已知IgG-D和已知Rh（D）陽性O(shè)型紅細(xì)胞依據(jù)《交叉配血試驗(yàn)》聚凝胺介質(zhì)操作方式進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果陽性為合格。輸血反應(yīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)編號(hào)：□□□□/J04—2016操作規(guī)程 版號(hào)；2016—A版第0次修改首先核對(duì)《臨床輸血申請(qǐng)單驗(yàn)記錄和報(bào)告單，核對(duì)受血者及供血者ABORh（D）血型。血漿顏色。ABORh（D）血型、交叉配血試驗(yàn)(包括鹽水介質(zhì)和聚凝胺介質(zhì)，并進(jìn)行抗體篩選實(shí)驗(yàn)，如發(fā)覺格外抗體，做進(jìn)一步鑒定。三、對(duì)新采集的受血者血樣進(jìn)行直接抗人球蛋白試驗(yàn)。漿游離血紅蛋白含量、血漿結(jié)合珠蛋白.五、盡早檢測(cè)血常規(guī)、尿常規(guī)及尿血紅蛋白。5～7七、如懷疑細(xì)菌污染性輸血反應(yīng),無菌操作抽取血袋中血液做細(xì)菌學(xué)檢驗(yàn)。血樣采集與送檢、 編號(hào)：□□□□/J04-2016交接核對(duì)操作規(guī)程 版號(hào)；2016—A版第0次修改一、血樣采集與送檢（一）確定輸血后，醫(yī)護(hù)人員盡早持《臨床輸血申請(qǐng)單》和貼（血樣標(biāo)簽的內(nèi)容至少包括“受血者姓名、科室、床號(hào)、住院號(hào)及采樣日期和時(shí)間。采集的血樣應(yīng)滿足以下要求：1、采集的血樣要能夠恰當(dāng)?shù)胤从呈苎弋?dāng)前的免疫學(xué)狀態(tài)。324受血者需要繼續(xù)輸注紅細(xì)胞,再次申請(qǐng)輸血時(shí),應(yīng)該重新采集一份血樣進(jìn)行交叉協(xié)作試驗(yàn)。2、若受血者已用肝素治療，應(yīng)在《臨床輸血申請(qǐng)單的其它事項(xiàng)"一欄中注明；3、右旋醣酐等中高分子藥物可干擾配血，應(yīng)在藥物輸注前采集血樣備用。（二）申請(qǐng)單》于預(yù)定輸血日期前送交輸血科（血庫)備血。（三）請(qǐng)單》內(nèi)容，如發(fā)覺存在“血樣八不收”之一者應(yīng)退回,由采樣護(hù)士重新采樣、標(biāo)識(shí)并及時(shí)送檢.血樣八不收內(nèi)容：1、血樣無標(biāo)簽不收；2、標(biāo)識(shí)不全及字跡不清晰不收；3、血樣、申請(qǐng)單所填項(xiàng)目不符不收；43mL5、血樣被稀釋不收；6、；7、非醫(yī)護(hù)人員送標(biāo)本不收;8、血樣被污染不收。（四）經(jīng)核對(duì)符合要求的在《交叉配血血樣交接及其處理記錄》中記錄，并由交接雙方進(jìn)行逐項(xiàng)核對(duì)后簽字.二、血液交接（一）輸血科（血庫)配血合格后，由臨床醫(yī)護(hù)人員持患者病歷到輸血科(血庫）取血；（二）（血庫（血庫）人員嚴(yán)格執(zhí)行“三查、二對(duì)、二確認(rèn)、八不發(fā)”的要求，核對(duì)無誤后，發(fā)配血人員及取血人員共同簽字后取血。四、輸血、輸血反應(yīng)處理及信息反饋（一）（血庫15~20分鐘即可輸注。放置時(shí)間不能過長；（二）取回的血應(yīng)盡快輸用，不得自行儲(chǔ)存.輸用前將血袋內(nèi)的血液輕輕混勻，避開劇烈震蕩。血液內(nèi)不得加入任何藥物，如需稀釋只能用靜脈注射生理鹽水；（三）血液為格外制品，一經(jīng)出庫不能退回輸血科（血庫）。如不能立刻輸注，應(yīng)及時(shí)送輸血科（血庫）代為保存，不能保存在臨床科室；（四）輸血前，由兩名醫(yī)護(hù)人員核對(duì)《交叉配血報(bào)告單》及血袋標(biāo)簽各項(xiàng)內(nèi)容,檢查血袋有無破損滲漏，血液顏色是否正常。準(zhǔn)確無誤方可輸血;（五）者姓名、性別、年齡、住院號(hào)、科室、床號(hào)、血型等，確認(rèn)與配血報(bào)告相符。假若患者處于昏迷、意識(shí)模糊或語言障礙時(shí),輸血報(bào)告單不上的標(biāo)識(shí)（假若有時(shí)）；（六）再次核對(duì)血液后，兩名醫(yī)護(hù)人員簽字，遵照醫(yī)囑,將血液輕輕混勻后,嚴(yán)格依據(jù)無菌操作技術(shù)將血液用檢查合格、符合標(biāo)準(zhǔn)的輸血器進(jìn)行輸血；（七）注。連續(xù)輸用不同供血者的血液時(shí),前一袋血輸盡后，用靜脈注射生理鹽水沖洗輸血器，再接下一袋血繼續(xù)輸注；（八）1520據(jù)病情和年齡調(diào)整輸注速度，并嚴(yán)密觀察受血者有無輸血不良反應(yīng)，如出現(xiàn)異樣情況應(yīng)及時(shí)處理：血液發(fā)放、交接 編號(hào)：□□□□/J04—2016操作規(guī)程 版號(hào);2016-A版第0次修改（一）無破損、封口嚴(yán)密、無溶血、無凝塊、無污染或其它變質(zhì)現(xiàn)象，交叉配血無禁忌,認(rèn)真查看失效日期。（二）由醫(yī)護(hù)人員持患者病歷到輸血科(血庫）取血。發(fā)血者與取血者必需共同執(zhí)行“三查、二對(duì)、二確認(rèn)、八不發(fā)”的內(nèi)容，核對(duì)完成無誤后，配發(fā)血人員及取血人員共同簽字后將血液發(fā)出。三查：查血樣、查血袋、查《臨床輸血申請(qǐng)單》和《交叉配血報(bào)告單》；血型；二對(duì)血袋獻(xiàn)血碼、血型、血品種、血量、采血日期及時(shí)間（或制備日期和時(shí)間）、失效日期及時(shí)間；二確認(rèn)：確認(rèn)受血患者、供血者血型與《交叉配血報(bào)告單》上的血型是否相符；確認(rèn)交叉配血試驗(yàn)結(jié)果;八不發(fā)：(1）標(biāo)簽明顯破損、字跡不清；（2）血袋有破損、漏血；（3)血液中有明顯凝塊；（4)血漿呈重度乳糜或暗灰色;未搖動(dòng)時(shí)血漿層與紅細(xì)胞的界面不清或交界面上出現(xiàn)溶血；紅細(xì)胞層呈紫紅色;過期或其它須查證