高三生物《生物技術(shù)實(shí)踐》專題卷：微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用

4/4微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用1．日前微博傳言細(xì)菌比馬桶按鈕多。如圖,央視和北京衛(wèi)視通過實(shí)驗(yàn)展示調(diào)查結(jié)果。答復(fù)以下相關(guān)問題：〔1〕該實(shí)驗(yàn)需制備培養(yǎng)基,培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、__________________?！?〕據(jù)圖,兩電視臺均采用________法接種,該方法需要________〔多項(xiàng)選擇〕。A．接種環(huán)B．酒精燈C．移液管D．涂布器E．無菌水〔3〕通過觀察菌落的________,可知屏幕和馬桶按鈕都存在多種微生物。兩電視臺實(shí)驗(yàn)操作均正確且完全一致,但報道結(jié)果截然不同,你認(rèn)為原因是：______________________?！?〕按圖操作取樣面積,實(shí)驗(yàn)員測定某屏幕的細(xì)菌數(shù)量,將10mL菌懸液進(jìn)行梯度稀釋,分別取0．1mL稀釋倍數(shù)為102的樣品液接種到三個培養(yǎng)基上,培養(yǎng)一段時間后,統(tǒng)計菌落數(shù)分別為48、50、52,那么該屏幕的細(xì)菌數(shù)為________個/cm2。該實(shí)驗(yàn)對照組該如何設(shè)置______________________?！敬鸢浮俊?〕氮源和無機(jī)鹽〔2〕稀釋涂布平板BCDE〔3〕形態(tài)、大小的取樣和馬桶按鈕的取樣都不相同〔4〕2×104取培養(yǎng)基涂布0．1mL無菌水進(jìn)行培養(yǎng)2．Ag/TiO2作為一種常見的半導(dǎo)體光催化劑,在可見光照射下不僅可殺滅飲用水中的細(xì)菌等微生物,降解水中的有機(jī)化合物,還能循環(huán)利用,因此被廣泛使用。某研究小組制備了Ag/TiO2空心微球,現(xiàn)欲探究不同載銀量的Ag/TiO2空心微球的殺菌性能?！?〕培養(yǎng)大腸桿菌：制備適宜大腸桿菌生長的培養(yǎng)基,將培養(yǎng)基等置于_______中滅菌20min；在無菌環(huán)境中倒平板,待平板冷凝后,將平板倒置,是為了_________和防止培養(yǎng)基水分過度蒸發(fā)。將大腸桿菌制備成菌懸液,別離純化?！?〕殺菌性能檢測：挑取菌落制成菌懸液,用______〔工具〕接種于無菌平板外表,使其均勻生長,布滿平板；用浸透了______的小濾紙片〔實(shí)驗(yàn)組〕和浸透了______的小濾紙片〔空白對照〕,分別放在涂好菌的平板的不同位置；將平板置于恒溫箱中培養(yǎng)一段時間,觀察記錄濾紙片周圍的________。〔3〕測定飲用水所含的大腸桿菌數(shù)目,還有一種特別的方法：將己知體積的飲用水過濾后,將_______放在參加____________的培養(yǎng)基上〔大腸桿菌菌落呈黑色〕,根據(jù)黑色菌落的數(shù)目,可計算出水樣中大腸桿菌的數(shù)量?！敬鸢浮俊?〕高壓蒸汽滅菌鍋防止皿蓋上的冷凝水滴落,污染培養(yǎng)基〔2〕涂布器不同載銀量的Ag/TiO2空心微球懸濁液無菌水抑菌圈〔透明圈〕大小〔直徑〕〔3〕濾膜伊紅美藍(lán)3．資料說明：培養(yǎng)液pH≤4．5時,酵母菌的代謝活動會逐漸受到抑制,甚至停止；耐酸性酵母菌能在pH≤3．5的環(huán)境下繼續(xù)表現(xiàn)出較強(qiáng)的發(fā)酵能力,適宜作為白酒發(fā)酵的生產(chǎn)菌種。為選育適合白酒生產(chǎn)的耐酸性強(qiáng)的酵母菌,研究者進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn),請答復(fù)以下有關(guān)問題：〔1〕河南杜康老酒制酒工藝中,在接種活菌前,清蒸稻皮的目的是___________。隨著發(fā)酵的進(jìn)行,酒窖中培養(yǎng)液的pH會逐漸下降,原因是______________________。〔2〕取窖底泥,溶于10mL無菌水中,再取1mL上清液接入一定量的麥芽汁培養(yǎng)基中,其目的是___________。在此過程中先振蕩搖勻,并通氣培養(yǎng)的目的是______________________?！?〕用稀釋涂布平板法進(jìn)行純化培養(yǎng)統(tǒng)計的細(xì)菌數(shù)量往往較實(shí)際值偏小的原因是___________。通過培養(yǎng)選育得到了三個耐酸性較強(qiáng)的酵母菌菌株,特點(diǎn)如下表。菌株甲菌株乙菌株丙菌株特點(diǎn)pH≤3．5時,生長代謝正常、優(yōu)于其他常規(guī)菌種pH≤3．5時,生長代謝正常,pH為4—6時生長不正常pH為2．5—6時,生長代謝正常、優(yōu)于其他常規(guī)菌種依據(jù)菌株特點(diǎn),研究者認(rèn)為_____________菌株更適合作為白酒發(fā)酵菌株,理由是___________________?！敬鸢浮俊?〕去除雜菌〔或滅菌〕細(xì)胞呼吸產(chǎn)生CO2,可形成碳酸；代謝過程還產(chǎn)生了其他酸性物質(zhì)〔2〕擴(kuò)大培養(yǎng)〔或使酵母菌大量繁殖〕使酵母菌進(jìn)行有氧呼吸,大量繁殖〔3〕當(dāng)兩個或多個細(xì)胞連在一起時,平板上觀察到的只是一個菌落丙丙菌株對pH的耐受范圍更大〔發(fā)酵初期pH近中性,丙菌株適合此環(huán)境,更易于形成優(yōu)勢菌群；發(fā)酵后期pH逐漸降低,丙菌株依然能正常生長〕4.〔2019新課標(biāo)Ⅰ卷,37〕某些土壤細(xì)菌可將尿素分解成CO2和NH3,供植物吸收和利用。答復(fù)以下問題：〔1〕有些細(xì)菌能分解尿素,有些細(xì)菌那么不能,原因是前者能產(chǎn)生_______________________。能分解尿素的細(xì)菌不能以尿素的分解產(chǎn)物CO2作為碳源,原因是________________________,但可用葡萄糖作為碳源,進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)的葡萄糖的主要作用是________________________〔答出兩點(diǎn)即可〕?！?〕為了篩選可分解尿素的細(xì)菌,在配制培養(yǎng)基時,應(yīng)選擇____________________〔填“尿素〞“NH4NO3〞或“尿素＋NH4NO3〞〕作為氮源,不選擇其他兩組的原因是_____________________?！?〕用來篩選分解尿素細(xì)菌的培養(yǎng)基含有KH2PO4和Na2HPO4,其作用有___________________〔答出兩點(diǎn)即可〕?！敬鸢浮俊?〕脲酶 分解尿素的細(xì)菌是異養(yǎng)型生物,不能利用CO2來合成有機(jī)物 為細(xì)胞生物生命活動提供能量,為其他有機(jī)物的合成提供原料〔2〕尿素 其他兩組都含有NH4NO3,能分解尿素的細(xì)菌和不能分解尿素的細(xì)菌都能利用NH4NO3,不能起到篩選作用〔3〕為細(xì)菌生長提供無機(jī)營養(yǎng),作為緩沖劑保持細(xì)胞生長過程中pH穩(wěn)定5．自然界中有許許多多的微生物,假設(shè)能進(jìn)行合理的篩選、培養(yǎng)和運(yùn)用,那么這些微生物能給人類帶來一定的經(jīng)濟(jì)效益。答復(fù)以下相關(guān)問題：〔1〕實(shí)驗(yàn)室中培養(yǎng)微生物要用到培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中參加常用凝固劑______后,制成_________培養(yǎng)基,它是實(shí)驗(yàn)室中最常用的培養(yǎng)基之一。下表是1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菅養(yǎng)配方；其中①②分別表示_______________________。培養(yǎng)基組成成分提供的主要營養(yǎng)牛肉膏(5g)碳源、氮源、磷酸鹽和①蛋白胨〔10g)碳源、②和維生素NaC1(5g)③H2O(定容至1000mL)氫元素、氧元素〔2〕實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物時,獲得純潔培養(yǎng)物的關(guān)鍵是_______________________?！?〕微生物接種的方法很多,最常用的是平板劃線法和_______________。以下圖是平板劃線操作的其中兩個步驟,圖甲的操作是將接種環(huán)放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅；圖乙的操作是將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中,沽取一環(huán)菌液。從圖甲至圖乙的操作過程中,還需進(jìn)行的操作步驟是_________________________________________________________________?！?〕統(tǒng)計菌液中活菌的數(shù)目時。假設(shè)采用統(tǒng)計菌落數(shù)的方法,那么統(tǒng)計結(jié)果往往偏_______；假設(shè)采用顯微鏡直接計數(shù)的方法,那么統(tǒng)計結(jié)果往往偏___________?！敬鸢浮俊?〕瓊脂固體維生素,氮源〔2〕防止外來雜菌的入侵〔3〕稀釋涂布平板法在火焰旁冷卻接種環(huán),并翻開盛有菌液的試管的棉塞,接著將試管口通過火焰?！?〕低〔小〕高〔大〕6．答復(fù)有關(guān)微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用的問題：〔1〕在配制從土壤中篩選纖維素分解菌的培養(yǎng)基時,需參加5g____粉作為碳源,培養(yǎng)基應(yīng)用_______法滅菌,待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時,在_________附近倒平板?！?〕培養(yǎng)分解纖維素的細(xì)菌時,在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是___________________________?！?〕假設(shè)要統(tǒng)計土壤樣品中纖維素分解菌的數(shù)目,宜采用_________法接種。一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為104的培養(yǎng)液中測得平板上菌落數(shù)的平均值為24．6,那么每毫升樣品中的活菌數(shù)是〔所用稀釋液的體積為0．2mL〕__________________?！?〕實(shí)驗(yàn)中使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_________處理后才能丟棄,以防止微生物的擴(kuò)散。【答案】〔1〕纖維素高壓蒸汽滅菌酒精燈火焰〔2〕將未接種的培養(yǎng)基在適宜條件下放置適宜的時間,觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生〔3〕稀釋涂布平板1．23×106〔4〕滅菌7．富集培養(yǎng)是微生物學(xué)中的最強(qiáng)有力的技術(shù)手段之一。主要是利用不同微生物生命活動特點(diǎn)的不同,制定環(huán)境條件,使僅適應(yīng)該條件的微生物旺盛生長,從而使其數(shù)量大大增加。以下圖描述了采用富集方法從土壤中別離能降解酚類化合物對羥基苯甲酸的微生物的實(shí)驗(yàn)過程。請分析答復(fù)以下問題?！?〕①→③重復(fù)培養(yǎng)的目的是_____________________________________________?！?〕假設(shè)實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng),由此推測“目的菌〞的代謝類型是______________；振蕩培養(yǎng)的另一個目的是_______________________?！?〕⑤的菌落中大局部是降解_______________微生物。設(shè)置⑥的目的是________________?！?〕⑤→⑥采用單細(xì)胞挑取法,將所選菌種接種到⑥的培養(yǎng)基中,在此操作過程中如何防止雜菌污染〔至少寫出兩點(diǎn)〕。_____________________________________________________?！?〕假設(shè)研究“目的菌〞的群體生長規(guī)律,將單個菌落進(jìn)行液體培養(yǎng),可采用____________的方法進(jìn)行計數(shù)。假設(shè)以血細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)法統(tǒng)計“目的菌〞的數(shù)量,以一個大方格〔體積為0．1mm3〕有25個中方格的計數(shù)板為例進(jìn)行計算,設(shè)五個中方格中總菌數(shù)為B,菌液稀釋倍數(shù)為C,那么原菌液的菌群密度為__________個/mL?！?〕實(shí)驗(yàn)結(jié)束時,使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進(jìn)行滅菌處理后,才能倒掉,以免________________；滅菌是指________________________________________?！敬鸢浮俊?〕擴(kuò)大培養(yǎng)〔使分解對羥基苯甲酸微生物的比例增高〕〔2〕異養(yǎng)需氧型讓目的菌充分利用培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì)〔3〕對羥基苯甲酸對照作用〔4〕接種過程在火焰旁邊進(jìn)行,接種前灼燒接種環(huán),翻開試管后試管口在酒精燈上灼燒,培養(yǎng)皿翻開時,在酒精燈旁翻開一個縫隙等等〔5〕定期取樣50000B?C〔6〕污染環(huán)境或感染操作者用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子8．〔2019全國Ⅱ卷,37〕在生產(chǎn)、生活和科研實(shí)踐中,經(jīng)常通過消毒和滅菌來防止雜菌的污染。答復(fù)以下問題：〔1〕在實(shí)驗(yàn)室中,玻璃和金屬材質(zhì)的實(shí)驗(yàn)器具_(dá)_______〔填“可以〞或“不可以〞〕放入干熱滅菌箱中進(jìn)行干熱滅菌?！?〕牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高溫瞬時消毒法,與煮沸消毒法相比,這兩種方法的優(yōu)點(diǎn)是________。〔3〕密閉空間內(nèi)的空氣可采用紫外線照射消毒,其原因是紫外線能________,在照射前,適量噴灑_________,可強(qiáng)化消毒效果?！?〕水廠供給的自來水通常是經(jīng)過________〔填“氯氣〞“乙醇〞或“高錳酸鉀〞〕消毒的。〔5〕某同學(xué)在使用高壓蒸汽滅菌鍋時,假設(shè)壓力到達(dá)設(shè)定要求,而鍋內(nèi)并沒有到達(dá)相應(yīng)溫度,最可能的原因是__________________________?！敬鸢浮俊?〕可以〔2〕在到達(dá)消毒目的的同時,營養(yǎng)物質(zhì)損失較少〔3〕破壞DNA結(jié)構(gòu)消毒液〔4〕氯氣〔5〕未將鍋內(nèi)冷空氣排盡9．〔2019全國Ⅰ卷,37〕將馬鈴薯去皮切塊,加水煮沸一定時間,過濾得到馬鈴薯浸出液。在馬鈴薯浸出液中參加一定量蔗糖和瓊脂,用水定容后滅菌,得到M培養(yǎng)基。答復(fù)以下問題：〔1〕M培養(yǎng)基假設(shè)用于真菌的篩選,那么培養(yǎng)基中應(yīng)參加鏈霉素以抑制_______的生長,參加了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于____________培養(yǎng)基。〔2〕M培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì),營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有__________〔答出兩點(diǎn)即可〕。氮源進(jìn)入細(xì)胞后,可參與合成的生物大分子有______〔答出兩點(diǎn)即可〕?！?〕假設(shè)在M培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖,接種土壤濾液并培養(yǎng),平板上長出菌落后可通過參加顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。參加的顯色劑是____________,該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是_____________?！?〕甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量,在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計的偏落數(shù)分別是110、140和149,取平均值133；乙同學(xué)涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和176,取平均值124。有人認(rèn)為這兩位同學(xué)的結(jié)果中,乙同學(xué)的結(jié)果可信度低,其原因是____________?！敬鸢浮俊?〕細(xì)菌選擇〔2〕碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸〔3〕碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色,產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解,形成透明圈〔4〕乙同學(xué)的結(jié)果中,1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊,結(jié)果的重復(fù)性差10.〔2019江蘇卷,31〕酵母的蛋白質(zhì)含量可達(dá)自身干重的一半,可作為飼料蛋白的來源。有些酵母可以