家禽免疫學(xué)基礎(chǔ)

家禽免疫學(xué)基礎(chǔ)家禽免疫學(xué)基礎(chǔ)家禽免疫學(xué)基礎(chǔ)V:1.0精細整理，僅供參考家禽免疫學(xué)基礎(chǔ)日期：20xx年X月家禽免疫學(xué)基礎(chǔ)廖明確張春紅丘鶴英馮元璋辛朝安編著第一章禽類的免疫系統(tǒng)一、禽類的免疫器官（一）中樞免疫器官脊椎動物的免疫系統(tǒng)按結(jié)構(gòu)和功能分為體液免疫和細胞免疫兩部分。前者負責(zé)產(chǎn)生特異性抗體，后者參與細胞介導(dǎo)的細胞毒反應(yīng)和遲發(fā)型超敏反應(yīng)。禽類主要通過法氏囊和胸腺分別調(diào)控這兩種免疫過程。1．法氏囊又叫腔上囊，是禽類特有的淋巴器官，位于泄殖腔背側(cè)，有管道與之相連，性成熟后逐漸萎縮退化。法氏囊是B細胞發(fā)育和分化的主要場所，也是免疫球蛋白基因分化及基礎(chǔ)抗體庫形成和擴展所必需的。從法氏囊向其他淋巴器官運送的淋巴細胞群叫后法氏囊細胞，它包括成熟的B細胞(能對特異的啟動信號作出免疫應(yīng)答)和后法氏囊干細胞(構(gòu)成法氏囊退化B細胞庫自我更新的基礎(chǔ))。它們對維持機體終生的體液免疫功能很重要。若疾病或人為原因破壞了法氏囊，就會引起不同程度的B細胞缺陷，以及血清IgG、lgA水平的顯著下降和體液免疫的嚴重抑制。破壞越早，危害越大。但細胞免疫功能不會因此受很大影響。法氏囊除擔(dān)負中樞免疫器官任務(wù)外，還兼有外周免疫器官的功能(禽的擦肛免疫即基于此原理)，并且，隨著法氏囊中淋巴細胞群的成熟及轉(zhuǎn)移，該功能越發(fā)主要和明顯。2．胸腺禽類的胸腺貼近頸靜脈，呈多葉排列，彼此分開。每個腺葉又分為若干獨立的小葉。小葉內(nèi)有界限不清的髓質(zhì)和皮質(zhì)，血胸腺屏障僅存在于皮質(zhì)區(qū)。淋巴干細胞在胸腺內(nèi)環(huán)境及其激素的作用下增殖分化為成熟的T細胞，然后遷至其他(主會是外周)免疫器官的胸腺依賴區(qū)定居，參與細胞免疫反應(yīng)。雛禽胸腺也具有外周淋巴器官的功能，表現(xiàn)為出殼后，一些后法氏囊細胞被轉(zhuǎn)移到胸腺(約占7％)，產(chǎn)生漿細胞和生發(fā)中心，這時經(jīng)免疫接種，胸腺內(nèi)會產(chǎn)生特異的抗體生成細胞。若早期破壞胸腺，就會引起循環(huán)T細胞顯著減少及功能缺陷，并使細胞免疫反應(yīng)不能建立，B細胞功能也受影響。3．骨髓禽類的骨髓一方面為胸腺和法氏囊提供淋巴干細胞，另一方面接受一些從法氏囊轉(zhuǎn)來的后法氏囊干細胞。但它是否如哺乳動物一樣也是T細胞分化成熟的另一場所，尚未證實，不過很有可能，因為骨髓在禽的一生中，尤其是法氏囊和胸腺退化后，是淋巴細胞自我更新的成年型干細胞的主要來源。(二)外周免疫器官外周免疫器官是免疫細胞定居和進行免疫應(yīng)答的場所。它與中樞免疫器官的差別在于來源不同，出現(xiàn)較晚，且終生存在，切除后對免疫器官影響較小。脾臟：禽類的脾臟分為紅髓和白髓兩部分。前者是生成和貯存紅細胞的地方。后者則由致密的淋巴組織構(gòu)成，包括環(huán)血管淋巴組織(PALT，主要含T細胞)和環(huán)橢圓體淋巴組織(PELT，為法氏囊依賴區(qū)，主要含小淋巴細胞、漿細胞、巨噬細胞及受抗原刺激后形成的生發(fā)中心等)，禽類的脾較小，貯血作用不大，主要是參與免疫應(yīng)答，形成針對血液中抗原的抗體。淋巴結(jié)：除水禽在頸胸和腰有兩對淋巴結(jié)外，大多數(shù)禽類無此結(jié)構(gòu)，其功能由體內(nèi)廣泛分布的環(huán)繞在器官周圍的無被膜淋巴組織集結(jié)代替。集結(jié)內(nèi)含小淋巴細胞，以及受抗原刺激后形成的生發(fā)中心。它負責(zé)過濾處理來自淋巴液的抗原。腸道淋巴組織：禽類的腸道淋巴組織包括法氏囊(中樞免疫器官)、粘膜的彌散性淋巴浸潤、盲腸扁桃腺、Meckel氏憩室和Peyer氏淋巴集結(jié)。盲腸扁桃腺是雛禽出殼后，經(jīng)腸道抗原刺激而產(chǎn)生的，它構(gòu)成腸道大部分集群式淋巴組織，被認為是法氏囊退化后接替其外周免疫功能的淋巴器官。雛雞的Meckel氏憩室和Peyer氏集結(jié)分別位于回、盲腸交界處，以及回腸遠側(cè)，主要對腸道抗原進行吸收處理，并產(chǎn)生大量漿細胞。壁旁淋巴細胞：雞的眼旁和壁旁區(qū)有幾處淋巴組織集結(jié)，其中以間質(zhì)內(nèi)浸潤了大量漿細胞的外分泌性哈德氏腺(即副淚腺)最為重要，它負責(zé)眼眶、壁和上呼吸道的局部免疫。二、免疫細胞凡參與免疫應(yīng)答或與之有關(guān)的細胞統(tǒng)稱免疫細胞，包括淋巴細胞(T、B、K、NK、N細胞等)、單核吞噬細胞以及粒細胞等。T細胞和B細胞：這兩種細胞能接受抗原刺激增生分化，引起特異性免疫應(yīng)答，產(chǎn)生淋巴因子或抗體，所以又稱為免疫活性細胞。它們來源于骨髓（胚胎期則為卵黃囊和肝）的多能干細胞，分別在胸腺(T細胞)和法氏囊(B細胞)分化成熟，之后被轉(zhuǎn)運到其他(主要是外周)免疫器官的相應(yīng)依賴區(qū)定居，再至全身發(fā)揮作用。T細胞壽命比B細胞長，可在淋巴系統(tǒng)再循環(huán)。T、B細胞的主要差別體現(xiàn)在膜表面結(jié)構(gòu)或成分(即表面標志)上(見表)。T細胞有很多亞類，如TH細胞(輔助性T細胞)、TS細胞(抑制性T細胞)和TC細胞(細胞毒性T細胞)等。它們共同構(gòu)成T細腦的實際功能，即細胞免疫與免疫調(diào)節(jié)。禽類B細胞也有不同亞類，但尚未深入研究。禽類B細胞主要參與體液免疫，產(chǎn)生特異性抗體。禽類T細胞和B細胞部分表面標志表面標志T細胞B細胞表面受體綿羊紅細胞(E)受體+-抗原受體+(CT3/TCR復(fù)合物或其他)-(SIgM,SIgG,SigA,SigE*,SigD*)IgGFC受體-/+（TS細胞）+補體受體-+有絲分裂原受體植物血凝素(PHA)+-刀豆蛋白A(ConA)+--+CT1,CT2,CT3,CT4,CT5CT8,CLA,B-F,B-L**同種異體蛋白(Th-1,Ly-4,TA等)CB1,CB2,CB3,CB4,CB5B-F,B-L同種異體蛋白(Bu-1,BA等)*禽類免疫球蛋白SigE和SigD尚未完全證實，但已發(fā)現(xiàn)類似物存在。**僅致敏的T細胞上有B-L表面抗原。單核吞噬細胞：它包括單核細胞和巨噬細胞。前者在血循環(huán)中短暫停留后，進入全身多種組織器官，分化成熟為巨噬細胞。巨噬細胞有極強的內(nèi)吞作用，含豐富而完善的溶酶體，以及免疫球蛋白Fc片段受體和補體表面受體，并能分泌單核因子和某些非特異性酶，被認為是機體中除T、B細胞外，第三類必需的免疫細胞。它對抗原的攝入、處理和遞呈是大多數(shù)免疫反應(yīng)(如抗細菌、抗寄生蟲和真菌、抗腫瘤免疫)的前提。一旦缺乏，很容易導(dǎo)致免疫不應(yīng)答或麻痹，巨噬細胞還負責(zé)清理機體自身衰老死亡的細胞及病理產(chǎn)物，并參與免疫調(diào)節(jié)過程。但必需指出，巨噬細胞可以成為IB-DV、lLTV、NDV、MDV等病原的靶細胞，為其復(fù)制和傳播提供場所。一些特異性自身免疫病(如變應(yīng)性腦脊髓炎)的發(fā)生也與之有關(guān)。粒細胞與血小板：禽類的血液粒細胞、肥大細胞和血小板也以不同方式參與免疫反應(yīng)。例如禽異嗜性白細胞，(相當(dāng)于嗜中性白細胞)。嗜堿性白細胞及肥大細胞在炎癥反應(yīng)中有很大作用。而血小板則是禽主要的血循環(huán)吞噬細胞，其吞噬速度快，不依賴補體。三、禽類的主要組織相容性系統(tǒng)能引起機體快而強的排斥應(yīng)答的抗原系統(tǒng)稱為主要組織相容性系統(tǒng)(MHS)。它實際上是細胞表面一些代表著個體特異性的組織抗原。在不同個體間進行組織或器官移植時，若供、受體雙方細胞上或體液中該抗原的特異性相同，說明二者彼此接受，移植就會成功，反之，則發(fā)生移植排斥或移植物抗宿主反應(yīng)。在染色體上，負責(zé)編碼MHS的一群緊密連鎖的基因叫作主要組織相容性復(fù)合體(MHC)，禽類的MHC又叫B復(fù)合物。除負責(zé)機體組織相容性外，MHC還與免疫應(yīng)答及某些遺傳病密切相關(guān)，例如，控制機體免疫應(yīng)答能力和調(diào)節(jié)功能的免疫應(yīng)答基因(Ir基因)就在MHC內(nèi)，其編碼的免疫相關(guān)抗原(Ia抗原)，是免疫細胞識別“自己”與“非己”成分的主要依據(jù)。已知雞MHC上有3個位點，即B-F、B-L和B-G，其基因分別編碼Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ類抗原，B-F(Ⅰ類)抗原分布于幾乎所有有核細胞的膜上，其中，在紅細胞膜上的大量表達為禽類所獨有。這類抗原在移植排斥反應(yīng)中起重要作用。并制約著細胞毒性T細胞(Tc)的識別功能，也就是說致敏的Tc必須在識別I類抗原的前提下才能產(chǎn)生殺傷靶細胞的效應(yīng)。B-L(Ⅱ類)抗原僅表達在一些免疫細胞(B細胞、活化的T細胞、單核吞噬細胞等)表面。Ⅱ類抗原與免疫應(yīng)答及免疫調(diào)節(jié)有關(guān)。因為不但Ir基因在此編碼抗原，而且T細胞、B細胞和巨噬細胞相互作用時，均需識別相同的Ⅱ類抗原。B-G(Ⅲ類)抗原存在于紅細胞或成紅細胞表面，哺乳動物中沒有同類物質(zhì)。它是否為有核紅細胞特有結(jié)構(gòu)及功能如何尚待研究。對家禽MHC的研究不但有利于建立免疫調(diào)控及組織器官移植的動物模型，而且對鑒定家禽系譜，培育抗病品種非常有利。更主要的是有助于我們理解免疫功能的本質(zhì)(即識別“自己”與“非己”)，以及這種遺傳制約作用對生物在進化過程中獲得最有效的生活機制的必要性。四、禽類的補體系統(tǒng)補體系統(tǒng)是動物血清中正常存在的一組與免疫有關(guān)，并且有酶活性的球蛋白。它包括參與補體激活的各種成分，及調(diào)控該過程的滅活和抑制因子等。補體系統(tǒng)的激活呈典型的連鎖方式，即各成分依次活化，不可或缺。激活途徑包括經(jīng)典(CCP)和旁路(ACP)兩種。禽類的ACP途徑已經(jīng)證實，即在B因子和Mg++參與下，ACP激活劑(如酵母多糖、脂多糖等)激活C3，產(chǎn)生使細胞膜穿孔的膜攻擊復(fù)合物(MAC)。由于尚未在禽類血液中發(fā)現(xiàn)P、H和I三種因子(均為哺乳動物ACP中的重要調(diào)節(jié)成分)，也不知道有哪些分子參與了禽MAC的形成(哺乳動物的MAC是由C5-C9構(gòu)成的多分子復(fù)合物)，所以禽ACP的詳細反應(yīng)過程還無法描述。禽類是否存在CCP途徑一直有爭議，因為一些實驗(如間接補體結(jié)合反應(yīng))表明禽類抗體與抗原結(jié)合后不能再結(jié)合補體。而抗體依賴性是哺乳動物CCP的特征之一，并決定了CCP在識別激活物及活化C3的方式上與ACP的本質(zhì)區(qū)別。但近年的研究表明，雞血中存在C1q(哺乳動物CCP途徑的啟動成分)的類似物。另外，雞血清具有Ca++依賴性靶細胞溶解反應(yīng)，CCP激活物(如抗體包被的靶細胞等)也能激活雞的C3，這一切似乎都說明禽存在CCP途徑。由于找不到C4和C2(哺乳動物CCP中與C1連鎖反應(yīng)的成分)的類似物，B因子又參與了這一“禽的CCP”途徑(B因子在哺乳動物中只參與ACP途徑)，所以有人推測禽的B因子和C3分別兼有C2和C4的功能。禽類補體系統(tǒng)的調(diào)節(jié)可能是通過補體成分自身衰變及體液中的某些滅活和抑制因子的作用。補體系統(tǒng)是機體免疫系統(tǒng)中一個受嚴格控制的重要組成部分，它的功能包括溶菌、殺菌、細胞毒作用；增強細胞吞噬效果(調(diào)理作用)；中和及溶解病毒作用；炎癥介質(zhì)作用以及免疫粘附等。其含量的波動或成分的缺增將直接影響機體免疫功能，并導(dǎo)致多種疾病發(fā)生。第二章禽類的免疫球蛋白免疫球蛋白(Immunoglobulin，Ig)是具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的一類球蛋白。它在機體的免疫應(yīng)答過程中占有重要地位。因此，這一章我們專門來談?wù)勄蓊惷庖咔虻鞍椎奶攸c。一、基本結(jié)構(gòu)與哺乳動物一樣，禽類的免疫球蛋白單體也呈Y形，由4條肽鏈組成；其中1對較長，分子量較大，稱為重鏈(H鏈)。另1對較短，分子量較小，稱為輕鏈(L鏈)。兩條重鏈之間，以及兩條輕鏈的C端(羧基端)與相對的重鏈之間都以二硫鍵相連。在近N端(氨基端)處，輕鏈的1/2和重鏈的1/4或1/5這兩段的氨基酸排列順序隨抗體特異性不同而異。，稱為可變區(qū)(V區(qū))，其余部分則稱為穩(wěn)定區(qū)(C區(qū))。重鏈和輕鏈內(nèi)，每110個氨基酸殘基構(gòu)成1個球形結(jié)構(gòu)的亞單位，即功能區(qū)。每個功能區(qū)提供1個活性部位或行使1種或多種生理功能。輕鏈有兩個功能區(qū)(VL和CL)。重鏈除VH區(qū)外，還包括3—4個功能區(qū)，如CH1、CH2、CH3和CH4(僅存在于IgM)等，其中CHl和CH2之間存在1個絞鏈區(qū)，可作為Ig分子兩個抗原結(jié)合臂與不同距離的抗原決定簇吻合時旋轉(zhuǎn)的支軸。絞鏈區(qū)富含大量脯氨酸和二硫鍵。使肽鏈不易形成а-螺旋，呈伸展狀態(tài)，因而對蛋白酶處理很敏感。各類免疫球蛋白的重鏈和輕鏈的結(jié)構(gòu)及抗原性有所不同，據(jù)此可將重鏈分為IgG-γ鏈、IgM-μ鏈、IgAα鏈、IgDδ鏈和IgEε鏈等，可將輕鏈分為κ和λ兩型。禽類Ig的輕鏈大多為λ型，且N端不封閉。IgG經(jīng)木瓜蛋白酶水解，可獲得兩個相同的Fab段(含輕鏈和重鏈N端的l/2)。以及1個Fc段(含重鏈C端的1/2)。Fab段具有識別抗原和結(jié)合功能，F(xiàn)c段則表現(xiàn)免疫球蛋白的生物效應(yīng)(如激活補體、結(jié)合細胞等)。二、各類免疫球蛋白的理化特性及功能禽類已確證的免疫球蛋白有3種，即IgG、IgM和IgA。目前，有些間接證據(jù)表明，禽體內(nèi)很可能還存在IgD和IgE的類似物。IgG：禽類IgG(也有人稱為IgY)是單體免疫球蛋白，分子量為165—180千道爾頓，沉降系數(shù)為7s。其重鏈比哺乳動物的重10千道爾頓(約1功能區(qū))。這個附加的殘基是否代表除VH、CH1、CH2和CH3外的另1個新的功能區(qū)，目前還有爭議。有學(xué)者認為，它可能像人的IgG3一樣只是一段延長了的絞鏈區(qū)。因為禽類IgG與人IgG有一些相似特征：對蛋白酶消化的敏感性增加，易于凝集，重鏈多出大約1個功能區(qū)的重量。除分子量大外，禽類IgG的理化特性還表現(xiàn)在：(1)含糖量高達％(約為人IgG的兩倍)；(2)在無分散劑的中性緩沖液中，用—L2-巰基乙醇可以釋放出輕鏈；(3)免疫沉淀反應(yīng)依賴高鹽濃度時，在NaCl或生理鹽水中免疫沉淀反應(yīng)最強)；(4)在大于L的NaCl溶液中，易凝聚出平均分子量為560千道爾頓的多聚體；(5)與抗原形成的免疫復(fù)合物不能結(jié)合豚鼠補體。禽類血清中IgG濃度(5—7mg/ml)比人的少，但含量遠高于其他免疫球蛋白。它廣泛分布于血清、組織液和淋巴液中，并能通過卵泡膜進入卵黃，為雛禽提供母源抗體保護。IgG在體內(nèi)含量大、分布廣、維持時間長，是機體抗感染免疫的主要力量。另外，它還參與抗腫瘤、抗寄生蟲等多種免疫過程，以及某些變態(tài)反應(yīng)。IgM：總的來講，禽類IgM與哺乳動物相似，．其分子量在各類免疫球蛋白中最大，達到880—990千道爾頓，沉降系數(shù)為17s，含糖量約7％。它能在無分散劑的中性緩沖液中發(fā)生部分解離，并與抗原在L的NaCl溶液中發(fā)生最明顯的沉淀反應(yīng)。IgM以五聚體形式存在，主要分布于血管中，它在血清中的含量僅次于IgG(1-2mg/ml)。IgM的調(diào)理、殺菌和凝集作用均強于IgG，但產(chǎn)生時間早，半衰期較短，作用范圍窄，所以主要在感染早期起先鋒免疫作用。IgM也與某些自身免疫病有關(guān)。IgA：禽類IgA在所有粘膜表面的分泌物中都有相當(dāng)高的濃度，尤其是膽汁mg/ml)和腸道m(xù)l)，但在血清中的含量較低ml)。它在膽汁和腸道中的沉降系數(shù)為7—16s，分子量為350—900千道爾頓(類似于人的IgA2)。禽類IgA主要是分泌型的SIgA，它常以多聚體(雙體)方式存在。由于有J鏈的連結(jié)和分泌片的保護，所以SIgA能抵抗蛋白酶的消化，在粘膜表面保持較長時間的免疫活性，。成為機體粘膜局部(尤其是呼吸道和消化道)免疫的主要力量。近年來，免疫學(xué)家們越來越重視粘膜局部免疫的作用，及其與全身免疫的配合協(xié)調(diào)。他們發(fā)現(xiàn)使用氣霧、口服飲水等免疫不但節(jié)省人力物力，而且可刺激局部粘膜大量SIgA對抵抗來自呼吸道和消化道的感染很有效。有實驗表明，在雞新城疫和雞傳染性支氣管炎的免疫預(yù)防中，僅靠血清中的大量循環(huán)抗體，效果往往并不確切，若配合使用弱毒苗進行氣溶膠免疫，使呼吸道局部產(chǎn)生高水平的SlgA，則雞群抵抗相應(yīng)病毒感染的能力會大大增強。此外，SlgA在抗寄生蟲免疫中也有一定作用。其他免疫球蛋白：人的免疫球蛋白中還包括IgE和IgD，前者參與過敏反應(yīng)，后者與IgM均是成熟B細胞膜表面的重要淋巴細胞受體，可能參與B細胞應(yīng)答和成熟。實驗表明，禽類可能也存在IgE和IgD的類似物，且功能與人的基本相同。三、免疫球蛋白的生物效應(yīng)免疫球蛋白的生物效應(yīng)主要由Fc段表現(xiàn)，它包括：(1)抗體與相應(yīng)抗原特異結(jié)合后，在體內(nèi)誘發(fā)一系列生理或病理反應(yīng)。(2)結(jié)合了抗原的Ig分子在空間構(gòu)型上發(fā)生改變，從而暴露出補體結(jié)合位點，為活化補體創(chuàng)造了條件。(3)結(jié)合了靶細胞或抗原的Ig分子可進一步結(jié)合不同的細胞(如巨噬細胞、K細胞、肥大細胞等)，在免疫應(yīng)答中發(fā)揮調(diào)理作用和抗體依賴性細胞介導(dǎo)的細胞毒性作用(ADCC)等。(4)由于母源IgG可通過卵黃直接補充，所以雛禽在出殼后3—5天內(nèi)始終保持較高的IgG水平，直到7日齡左右才開始下降，20—22日齡后才基本檢測不到。這就使雛禽在自身免疫系統(tǒng)健全以前，也可以得到有效保護。(5)Ig分子的不同結(jié)構(gòu)部分均有特異的抗原性(獨特型、輕鏈型等)，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的能力。四、抗體產(chǎn)生的規(guī)律禽類各種免疫球蛋白在種系進化和個體發(fā)育過程中出現(xiàn)的時間是不同的。實驗表明，在12日齡胚的法氏囊中，所有干細胞已開始表達細胞表面IgM。而IgG+和IgA+的B細胞則分別在14日齡和16日齡胚的法氏囊中才能檢到。因此，最終從外周淋巴器官表達的免疫球蛋白類型的順序為IgMIgGIgA。另外，在初次免疫應(yīng)答和再次免疫應(yīng)答中，抗體產(chǎn)生也有一定的規(guī)律?？乖趺夂?，經(jīng)較長(1-3周)潛伏期，首先在血液中出現(xiàn)的是IgM，然后是IgG.IgG出現(xiàn)時，分化產(chǎn)生IgM的漿細胞減少，會抑制IgM的合成.這個階段，抗體量少，效價低，維持時間短。當(dāng)再次以同樣抗原免疫后，由于記憶細胞迅速增殖分化，所以潛伏期明顯縮短。同時，抗體(主要是IgG)濃度和效價大幅度上升，與抗原的親合力迅速增強(對禽來講，甚至可接近哺乳動物的高效值)，其維持時間也較長。另外，再次應(yīng)答后抗體異質(zhì)性明顯，比初次應(yīng)答的抗體有更多的交叉反應(yīng)。第三章禽類的細胞因子近十幾年，免疫學(xué)家們對細胞因子(Cytokines)的研究始終非?；钴S。細胞因子是由各種免疫活性細胞分泌的一些具有生物活性的可溶性蛋白質(zhì)，它們通過調(diào)節(jié)細胞的生長和活化，在機體免疫應(yīng)答過程中扮演著重要角色。研究細胞因子不僅有助于我們深入了解免疫調(diào)控和效應(yīng)機制，而且為進一步開發(fā)新的免疫治療藥物和免疫佐劑奠定了基礎(chǔ)。在人醫(yī)方面，白細胞介素—2(1L2)及α-干擾素(IFN-α)等已用于臨床治療，其中IFN-α甚至一躍成為世界銷量最大的30種藥品之一，年銷售額達數(shù)億美元。目前，人們對禽類細胞因子的認識和應(yīng)用遠遠滯后于哺乳動物，但隨著養(yǎng)禽業(yè)的迅猛發(fā)展和科學(xué)家們的努力，這項空白正逐漸被填補上。一、基本特征1.雖然產(chǎn)生細胞因子的免疫活性細胞多種多樣，但都必須在特異性或非特異性刺激物的作用下活化后，才能分泌細胞因子。特異性刺激物主要指抗原和某些專一性細胞活化物質(zhì)。非特異性刺激物質(zhì)包括植物血凝素(PHA)、刀豆素、(ConA)、商陸有絲分裂素(PWA)和細菌脂多糖(LPS)等。2.禽類細胞因子主要是一組具有免疫活性的分泌性低分子糖蛋白，它們不同于免疫球蛋白(Ig)，其區(qū)別在于：(1)種類多，結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)各異；(2)分子量小，且大小平均(4—60千道爾頓)；(3)分泌量小，分離提純難度大；(4)生物活性的發(fā)揮不依賴抗原的存在，而是直接作用于各自的靶細胞；(5)在局部免疫中發(fā)揮很大作用。3.大多數(shù)細胞因子可以在體內(nèi)或補體外用人工方法誘導(dǎo)產(chǎn)生，但由于無交叉反應(yīng)性，以及禽類自身的生理特點，因此用來定量哺乳動物細胞因子的方法一般不能直接套用于禽類。4.細胞因子的生物活性很強，10-10─10-5mol即可檢測到明顯活性。其作用形式多為非特異的，并且不受主要組織相容性復(fù)合體(MHG)的限制。5.禽類各種細胞因子的體外誘生時間及半衰期略有差異，一般誘生6─8小時后可在培養(yǎng)液中檢測到，20—72小時產(chǎn)量達到高峰。二、種類及主要生物活性禽類細胞因子包括淋巴細胞因子(LymPhokines)、單核因子(Monokines)，以及干擾素(IFN)等等。其中在白細胞之間相互作用的淋巴因子和單核因子又統(tǒng)稱為白細胞介素(IL)。細胞因子各組分通過相互促誘生、相互調(diào)節(jié)受體表達、相互制約功能以及相互協(xié)同作用等方式緊密聯(lián)系，共同構(gòu)成一個特殊的網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)，這對維持機體免疫系統(tǒng)的平衡及功能的正常發(fā)揮有著重要意義。(一)白細胞介素-1(IL-1)IL-1是一種主要由巨噬細胞活化后分泌的單核因子，分子量約為15千道爾頓。其他諸如樹突狀細胞、朗罕氏細胞、成纖維細胞、內(nèi)皮細胞、角質(zhì)細胞和脾細胞等也可以產(chǎn)生IL-1。IL-1具有廣泛的種間交叉反應(yīng)，例如雞IL-1可激活鼠胸腺細胞對ConA的應(yīng)答。目前，測定禽IL-1活性的方法主要是在低濃度有絲分裂原(如LPS)的協(xié)同下，用巨噬細胞培養(yǎng)上清液刺激胸腺淋巴細胞，檢測其增殖情況。但這種實驗的結(jié)果往往重復(fù)性較差。IL-1的主要功能是作為T細胞活化信號參與免疫調(diào)節(jié)過程，所以它曾被稱為淋巴細胞活化因子(LAF)。在它的誘導(dǎo)下，輔助性T細胞(TH細胞)迅速增殖，并分泌IL-2和IFN-α。同時，B細胞的分化成熟受到促進，單核細胞及自然殺傷細胞(NK細胞)的活性也明顯提高。另外，IL-1本身對某些腫瘤細胞有直接的細胞毒性作用，可參與抗腫瘤免疫。IL-1還能介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，促使多種細胞產(chǎn)生前列腺素(PGE)等。(二)白細胞介素-2(IL-2)TH細胞在有絲分裂原或抗原的刺激以及IL-1的作用下產(chǎn)生IL-2，同時也表達IL-2受體。分泌的IL-2與IL-2受體結(jié)合，使TH完全活化，并不斷增殖，進入免疫應(yīng)答的效應(yīng)階段或分化為記憶性T細胞。通過凝膠過濾等分析發(fā)現(xiàn)，經(jīng)ConA刺激的雞脾細胞培養(yǎng)液中有兩個蛋白質(zhì)峰與IL-2活性有關(guān)，其分子量分別為9—千道爾頓和—千道爾頓(后者可能是較小形式的聚合體)。若在還原條件下，則可得到1條13千道爾頓的多肽，這與人的IL-2相似，但不同于小鼠IL-2。禽IL-2的疏水性低，不能與瓊脂糖結(jié)合，因止可利用苯基瓊脂糖柱初步純化。另外，禽IL-2還具有較嚴格的種間特異性。檢測IL-2活性的方法通常是觀察靶細胞(如T淋巴母細胞)在無有絲分裂原的條件—下，受IL-2刺激而增殖的程度。實驗表明，對待檢的IL-2預(yù)先進行苯基瓊脂糖柱層析、紅細胞吸附和透析等處理，去除IFN-γ、ConA及一些小分子抑制物等雜質(zhì)后，再與經(jīng)過密度梯度離心純化的靶細胞作用，可以有效提高實驗精度，比較準確地定量IL-2活性。但需注意的是禽IL-2的穩(wěn)定性差，半衰期比哺乳動物短，其誘導(dǎo)產(chǎn)量以及檢測活性時靶細胞的增殖都在培養(yǎng)后24小時左右達到高峰，之后很快下降，所以要及時收獲和觀察。另外，ConA對禽IL-2的分泌誘導(dǎo)效果較好。IL-2的舊稱是T細胞生長因子(TCGF)，可見其主要作用在于促進T細胞(尤其是Tc和TH細胞)的分化增殖，是維持T細胞生長的必需因子。IL-2能夠提高NK細胞、Tc細胞和K細胞的活性，對IFN-γ有明顯的促進作用。此外，它還參與B細胞、巨噬細胞的話化，以及促IL-1誘生等過程。(三)干擾素(IFN)禽類干擾素具有相對的種屬特異性，它按照抗原特異性和分子結(jié)構(gòu)可分為三型，即IFN-α、IFN-β和IFN-γ。IFN-α與IFN-β分別來源于受病毒和誘導(dǎo)劑作用下的白細胞及成纖維細胞，而IFN-γ則在抗原和分裂原的作用下由免疫系統(tǒng)中幾乎所有的細胞產(chǎn)生，其中以T淋巴細胞為主，因此IFN-γ又稱為免疫干擾素。不同類型干擾素的理化性質(zhì)有所差異。例如IFN-α和IFN-β在的環(huán)境中較穩(wěn)定，而IFN-γ則相反。另外，IFN-γ的分子量為17—36千道爾頓，比IFN-α或IFN-β都大。三者的糖基化位點也相同。禽干擾素的測定方法與哺乳動物相似，也是檢查其在體外抑制病毒復(fù)制的能力。一般使用F系新城疫病毒(NDV—F系)作為誘生劑，攻擊病毒為水泡性口膜炎病毒（VSV）、誘生細胞可以是脾細胞或血細胞，測定細胞則用相應(yīng)的禽胚制備。禽干擾素具有高效、廣譜的抗病毒作用，可抑制包括NDV、IBV、HVTV、MDV、IBDV和ILTV等多種禽病毒的繁殖。它還有抗寄生蟲（如柔嫩艾美爾球蟲）活性和免疫調(diào)節(jié)功能。IFN-γ相對于IFN-α和IFN-β來講，免疫調(diào)節(jié)功能最強。例如，它能加強MHCⅠ、Ⅱ類抗原的表達，提高T細胞、NK細胞和巨噬細胞的細胞毒作用，并與IL-1、IL-2相互協(xié)調(diào)，共同參與免疫應(yīng)答調(diào)控等等。至于禽干擾素在禽抗腫瘤免疫中的作用，有待通過更多的實驗來說明。(四)其他細胞因子已發(fā)現(xiàn)禽也有轉(zhuǎn)移因子(TF)，它是一種脾臟白細胞提取物，可透析。其轉(zhuǎn)移的遲發(fā)性超敏反應(yīng)具有抗原特異性。目前，已成功地用雞源TF轉(zhuǎn)移了對柔嫩艾美爾球蟲（Eimeriatenella）的免疫保護力。另一種經(jīng)確證的禽細胞因子是巨噬細胞移動抑制因子(MIF)，脾細胞、胸腺細胞和法氏囊細胞活化后均可產(chǎn)生MIF。禽的MIF有種特異性，雞、火雞、鵝之間不能交叉反應(yīng)。MIF可抑制巨噬細胞隨機移動。這有利于后者停留并聚集在炎癥發(fā)生部位，增強吞噬殺菌作用。類似的可影響禽免疫細胞移動的因子還包括嗜酸性粒細胞移動因子(EMF)、單核細胞趨化因子(MCF)、淋巴細胞移動抑制因子(LMIF)、骨髓單核細胞生長因子(MGF)、β-轉(zhuǎn)化生長因子(TGF-β)、白細胞介素6(IL-6)、α-腫瘤壞死因子(TNF-α)，以及血小板抑制因子(TIF)等等。還有一種由吞噬細胞分化的可溶性抑制因子需要提一下，它的分子量小于千道爾頓，能與耐受原結(jié)合或被MHC抗血清中和。它的生物活性表現(xiàn)為通過抑制IL-2的分泌，參與IL-2的調(diào)節(jié)。第四章免疫應(yīng)答免疫應(yīng)答包括非特異性和特異性兩大類。二者的差異主要在于非特異性免疫應(yīng)答是先天形成，它對抗原無特異區(qū)別作用，也沒有記憶和再次反應(yīng)，而特異性免疫應(yīng)答則由后天獲得，主要針對特異性抗原，反應(yīng)有記憶性。一、特異性免疫應(yīng)答特異性免疫從效應(yīng)特點上大體可區(qū)分為細胞免疫和體液免疫兩種表現(xiàn)形式。但這兩種概念不能絕對化。因為針對同一抗原的侵人，免疫應(yīng)答的形式不是單一的，它涉及到各種免疫細胞及活性因子，所以只是從免疫效應(yīng)特點上表現(xiàn)出以某一種應(yīng)答為主而已。(一)細胞免疫應(yīng)答狹義而言，細胞免疫僅指由T細胞介導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答。其特征是通過致敏淋巴細胞傳遞，并出現(xiàn)以單核細胞浸潤為主的炎癥反應(yīng)或特異性的細胞毒作用。因此，它在局部免疫中占有重要地位。引起細胞免疫的抗原是胸腺依賴性抗原(TD抗原)，涉及的T細胞主要是CD4+亞群的輔助性T細胞(TH細胞)和CD3+亞群的細胞毒性T細胞(TC或CTL細胞)。1．反應(yīng)過程以巨噬細胞為主的抗原遞呈細胞捕獲抗原物質(zhì)后，一方面對其加工處理，濃集抗原決定簇于細胞表面；另一方面釋放出白細胞介素1(IL-1)。在自身主要組織相容性復(fù)合體(MHC)Ⅱ類抗原(參見第一章)的制約下，抗原特異性TH細胞識別并接受相應(yīng)的抗原決定簇(第一信號)和IL-l(第二信號)的刺激，活化成為淋巴母細胞。致敏后的TH細胞在表面產(chǎn)生白細胞介素2(IL-2)受體，同時合成并分泌IL-2。IL-2與受體的結(jié)合使TH細胞克隆不斷擴大，直至完全活化，進入效應(yīng)階段。另有一部分則分化為記憶抗原信息的記憶性T細胞(TM細胞)。它們可以在體內(nèi)長期循環(huán)，參與再次型細胞免疫反應(yīng)。2．效應(yīng)機理細胞免疫應(yīng)答的效應(yīng)階段主要表現(xiàn)為炎癥反應(yīng)及細胞毒作用。在炎癥反應(yīng)中，被激活的TH細胞(屬CD4+T細胞亞群)除了分泌大量IL-2外，還釋放出多種細胞因子。已證實的家禽細胞因子包括巨噬細胞移動因子(MIF)、γ-干擾素(IFN-γ)、轉(zhuǎn)移因子(TF)、單核細胞趨化因子(MCF)、淋巴細胞移動抑制因子(LMIF)、骨髓單核細胞生長因子(Myelomonocyticgrowthfactor，MGF)、β-轉(zhuǎn)化生長因子(Transforminggrowthfactor-β，TGF-β)、白細胞介素6(IL-6)、α-腫瘤壞死因子(TNF-α)等等(參見第三章)。這些因子以非特異的方式作用于周圍各種靶細胞，表達多種生物功能。例如，使大量巨噬細胞向感染局部移動，聚集并激活，以充分發(fā)揮其吞噬殺傷抗原的能力(MIF、MCF等)；刺激非致敏淋巴細胞分裂增殖和母細胞化(IL-l、IL-2、MCF等)；干擾病毒及腫瘤細胞復(fù)制(IFN-γ、TNF-α等)；促進傷口痊愈(IL-6等)。參與細胞毒作用的主要是Tc細胞(屬CD3+T細胞亞群)。其非活化的前體細胞接受特異性抗原刺激后，在腦膜上表達IL-2受體。并與來自活化的TH細胞分泌的IL-2結(jié)合，最終使該前體細胞分化成具有連續(xù)性殺傷功能的效應(yīng)Tc細胞。與TH細胞不同，Tc細胞識別靶細胞是受MHCI類抗原限制的。它一旦吸附于靶細胞上，就會造成后者胞膜的不可逆損害，導(dǎo)致靶細胞死亡，并釋放胞內(nèi)的寄生物，如細菌、病毒、真菌和寄生蟲等，供吞噬細胞消滅。之后，完整無損的Tc細胞與行將裂解的靶細胞脫離，繼續(xù)攻擊其他相應(yīng)的靶細胞。近期研究表明，雞體內(nèi)有另外一個T細胞亞群也發(fā)揮著細胞毒性作用，這就是T細胞(CD4和CD3均屬于T細胞)。它在雞體內(nèi)的含量遠遠高于人和小鼠。成熟的T細胞不表達CD4、CD3和CD23等表面抗原，在生產(chǎn)細胞因子方面，意義也不大。其激活依賴于CD4+T細胞分泌的IL-2。目前，對這種細胞的功能和抗原遞呈機制正在深入研究。3．免疫效應(yīng)細胞免疫應(yīng)答是機體抵抗侵入細胞內(nèi)的某些病毒、細菌和寄生蟲的重要免疫手段。有關(guān)這方面的報道已涉及MDV、REV、ILTV、、IBV、多殺性巴氏桿菌、衣原體、柔嫩艾美爾球蟲等多種家禽病原體。另外，細胞免疫應(yīng)答也是家禽免疫監(jiān)視及抗腫瘤(如馬立克氏病)免疫的重要機制。從機理上看，細胞免疫反應(yīng)實際上是一種細胞傷害作用，其特異性有一定局限。所以發(fā)揮作用時，往往也會引起感染局部正常組織細胞的不同程度損傷。一旦損傷嚴重，就可導(dǎo)致遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)及某些自身免疫病的發(fā)生。目前，有些品系的雞已成為研究人類自身免疫病的重要動物模型。’(二)體液免疫應(yīng)答體液免疫是B細胞介導(dǎo)的一種特異免疫應(yīng)答。由于其效應(yīng)物質(zhì)是體液特異性抗體，所以可通過血清進行傳遞。胸腺依賴性(TD)抗原和非胸腺依賴性(TI)抗原均能引起體液免疫。1．反應(yīng)過程對TD抗原來說，抗原被巨噬細胞捕獲，加工及遞呈給TH細胞的過程與細胞免疫應(yīng)答相同。之后，在MHCⅡ類抗原的制約下，活化的TH細胞進一步將抗原信息傳遞給帶有大量表面免疫球蛋白(SIg，即抗原受體)的B細胞，使其致敏。同時，由巨噬細胞、TH分泌的IL-1、B細胞生長因子(BCGF)、B細胞分化因子(BCDF)、IL-2等細胞因子以及被激活的補體C3作用于已致敏的B細胞，進一步促進其分化。禽類B細胞像人的一樣，也能夠直接處理一些TD抗原，并將它傳遞給已致敏的TH細胞。在該T細胞的幫助下，B細胞得以分化和產(chǎn)生抗體。這種抗原遞呈方式的特點是：(1)T-B細胞的相互識別受MHCⅡ類抗原限制；(2)攜帶抗原信息的B細胞不能直接激活靜止的T細胞。另外，T細胞的抗原受體與TD抗原載體結(jié)合形式的抗原復(fù)合物可通過巨噬細胞遞呈給B細胞，誘導(dǎo)B細胞活化。TI抗原具有多個相同的、重復(fù)排列的抗原決定簇。這一特殊結(jié)構(gòu)使它能與帶相應(yīng)抗原受體的B細胞牢固結(jié)合，并直接激活該B細胞，而無需臣噬細胞和TH細胞的協(xié)助。受TD抗原刺激的B細胞經(jīng)過增殖分化，除一部分發(fā)展成記憶性B細胞(BM細胞)參與再次型免疫反應(yīng)外，大多變?yōu)槟芊置谔禺愋钥贵w的漿細胞，最先產(chǎn)生的抗體是IgM。若抗原量足夠，則進一步產(chǎn)IgG、IgA等型抗體(參見第二章)。TI抗原激活的B細胞不產(chǎn)生BM細胞，它分化為漿細胞后，只釋放IgM型抗體。2．免疫效應(yīng)體液免疫應(yīng)答的基礎(chǔ)是產(chǎn)生循環(huán)抗體。其效應(yīng)形式不但多種多樣，而且與細胞免疫應(yīng)答存在某些交叉。若從直接效應(yīng)看，包括抗體對病毒的中和作用，對細菌由凝集制動作用，對霉形體的生長抑制作用，以及抗毒素的中和毒素作用等等。若從間接效應(yīng)看，則主要表現(xiàn)為免疫調(diào)理作用。例如，抗體可以充當(dāng)調(diào)理素來幫助有FC受體的吞噬細胞與抗原抗體復(fù)合物粘附。這對于消滅一些毒力較強的細菌抗原(如葡萄球菌等)很有好處。又比如，抗原抗體復(fù)合物在激活補體系統(tǒng)時(參見第一章)可與補體成分C3結(jié)合，這就使帶C3受體的吞噬細胞更容易攝取該抗原。另外，我們還要特別強調(diào)一下抗體依賴細胞介導(dǎo)的細胞毒作用(ADCC)。因為它不但在機體防御機能上占有重要地位，而且充分體現(xiàn)了細胞免疫與體液免疫相輔相成，密不可分的關(guān)系。禽類ADCC的可能機制是：帶有FC片段受體的效應(yīng)細胞通過結(jié)合靶細胞表面的抗原抗體復(fù)合物而直接裂解靶細胞。引起禽ADCC的抗體主要是IgG，與之相應(yīng)的效應(yīng)細胞為殺傷細胞(K細胞)。有人從感染了RSV的鵪鶉中發(fā)現(xiàn)IgM也可以產(chǎn)生ADCC作用，但其效應(yīng)細胞還不清楚。ADCC的效應(yīng)細胞(含K細胞)都有一個特點，那就是既不屬于T細胸或B細胞，又無吞噬和粘附作用。ADCC破壞靶細胞的效率很高，所需抗體量極少，且反應(yīng)有一定特異性，所以它主要在機體不能正常啟動補體系統(tǒng)，或因靶細胞過大，被抗體封閉時發(fā)揮作用。實踐證明，ADCC無論在禽或人的體內(nèi)，都是抗病毒傳染、抗腫瘤和抗寄生蟲免疫的一個重要手段。當(dāng)然。除了上述正向免疫應(yīng)答外，也會發(fā)生抗體致敏的靶細胞與對應(yīng)抗原作用所引起的免疫病理效應(yīng)(如Ⅱ、Ⅲ型變態(tài)反應(yīng))。3．再次型反應(yīng)與免疫記憶TD抗原在初次免疫應(yīng)答中可以刺激成熟的T細胞和B細胞分別產(chǎn)生TM和BM細胞。它們不但保留有對抗原(包括載體和半抗原)的記憶，而且都是長壽的，可以再循環(huán)。當(dāng)該抗原再次進入機體后，引起的體液免疫和細胞免疫與初次反應(yīng)略有不同，表現(xiàn)為：(1)免疫效應(yīng)出現(xiàn)前的潛伏期顯著縮短；(2)抗體水平迅速升高至初次反應(yīng)的幾倍到幾十倍，而且維持時間較長；(3)抗體類型以IgG為主，IgM則很少。而且因為IgG壽命短，所以再次反應(yīng)間隔時間越長，越傾向于只產(chǎn)IgG；(4)Tc細胞的數(shù)量明顯增加，其殺傷靶細胞的效應(yīng)也更強。由此可以看出，掌握家禽對不同抗原(疫苗)免疫應(yīng)答的規(guī)律是制訂完善有效的免疫程序的關(guān)鍵。二、非特異性免疫應(yīng)答提到免疫，大多數(shù)人首先想到的是循環(huán)抗體。有的書上甚至說免疫應(yīng)答主要指抗原誘導(dǎo)的特異性免疫應(yīng)答。其實，這種觀點是比較片面的。因為病原感染時首先遇到的是宿主的各種非特異性防御機制，而特異性免疫要在感染后若干時間才開始出現(xiàn)。另外，免疫系統(tǒng)最大的部分是那些對疾病起非特異障作用的器官，它們發(fā)揮作用快，涉及范圍廣，是特異性免疫的基礎(chǔ)。已有證據(jù)表明，特異性免疫系統(tǒng)在非特異性免疫成分，如巨噬細胞、補體、細胞因子等的配合下，可以提高有效免疫功能1-l000倍。非特異性免疫應(yīng)答包括組織結(jié)構(gòu)、細胞及體液等一系列十分復(fù)雜的因素。(一)種屬免疫這種免疫是動物種屬對病原感染所固有的天然抵抗力，而不是通過接觸病原引起。例如，傳染性支氣管炎病毒（IBV）可以感染雞，但對鴨卻不適應(yīng)。種屬免疫的機理包括兩方面，一是病原不能吸附和進入非宿主細胞，二是非宿主的代謝不適于病原寄生。例如在家禽的高體溫環(huán)境中，炭疽桿菌難以生存。值得注意的是在不同種類的家禽之間，種屬免疫有較大的相對性。其典型的例子是雞減蛋綜合征(EDS—76)病毒。它的自然宿主為鴨和野鴨。1974年以前，在雞群中還缺乏抗這種病毒的抗體。后來不知什么原因，使該病毒適應(yīng)了雞。目前，它不僅可以通過雞垂直或水平傳播，而且嚴重影響肉用種雞和褐殼蛋雞的產(chǎn)蛋量及蛋殼質(zhì)量，甚至已發(fā)展成為養(yǎng)禽業(yè)中引起產(chǎn)蛋損失的一個主要原因。(二)屏障作用1.外部屏障健康完整的皮膚是抵抗病原侵入機體的天然強大防線。其上皮角質(zhì)有機械阻擋作用，一些腺體分泌物（多為低濃度有機酸）也有殺菌、抗病毒和霉菌的化學(xué)屏障作用。一旦由于某些原因(啄癖、禽痘、飼養(yǎng)場地有尖銳利物等)使皮膚的完整性遭到破壞(即使是肉眼看不見的損傷)，這種屏障作用就會喪失。粘膜是機體內(nèi)最大的免疫器官，有著十分重要的免疫組織結(jié)構(gòu)和功能。一方面，它通過產(chǎn)生特殊的pH環(huán)境(如胃酸和膽汁)，分泌保護性粘液以及纖毛的有規(guī)律運動等方式，在外界環(huán)境與機體(尤其是消化、呼吸、生殖器官)之間構(gòu)成一道非特異性防御屏障。另一方面，它又是機體局部免疫的重要場所。分泌型IgA(SIgA)(參見第二章)在這方面發(fā)揮著重要作用。SIgA具有很強的粘附抗原特性，能夠中和病毒，凝集細菌，免疫排除，從而有效地防止或限制粘膜表面吸附和吸收抗原，并可以捕獲粘膜上皮細胞內(nèi)的病原體。SIgA還能中和細菌毒素以及發(fā)揮調(diào)理作用，促進巨噬細胞吞噬和消除病原。部分SIgA(占血清IgA的1％)甚至進入血液，參與全身免疫。由于血清的IgA很少能夠到達粘膜，所以全身性循環(huán)抗體在局部免疫中的保護作用很有限。因此，充分利用粘膜免疫系統(tǒng)在體內(nèi)分布廣泛的特點，根據(jù)局部抗原刺激比全身感染或注射更能有效地激發(fā)機體粘膜產(chǎn)生SIgA的原理，通過口服、滴眼滴鼻、氣霧等免疫手段，提高局部粘膜免疫能力，對防治家禽疾病是非常有意義的。目前，針對新城疫的口服免疫已在臨床上取得良好效果。專家們認為粘膜疫苗將是未來疫苗發(fā)展的方向。家禽的卵也有自已特殊的外部保護層，即卵殼。但在嚴重污染或發(fā)生破損時，沙門氏菌和大腸桿菌等病原會“破殼”而入，須小心防備。機體另一道無形的外部屏障是體內(nèi)正常菌群。它們在某一特定棲居所(主要是消化道)定居繁殖，種類(多為革蘭氏陰性菌)與數(shù)量基本穩(wěn)定。這些菌群對許多致病菌有拮抗作用，包括競爭性占據(jù)靶器官，阻止后者的定植和擴增，以及產(chǎn)生某些化學(xué)物質(zhì)(如大腸菌素等)，直接抑制病原菌的生長。此外，它們還對刺激免疫器官的建成有重要意義。一些養(yǎng)禽場用抗生素而導(dǎo)致疾病越來越多的重要原因就是破壞了機體正常菌群的生活。值得注意的是如果在應(yīng)激條件下（寒冷、疾病等），有些原本正常的菌群可能會突變?yōu)橹虏【?，?dǎo)致發(fā)病。(如大腸桿菌病)。2．內(nèi)部屏障對于重要的中樞器官大腦、胸腺等，機體專門有一套內(nèi)部屏障體系進行防衛(wèi)，即血腦屏障和血胸屏障。它們由毛細血管壁及包在外面的膠質(zhì)膜構(gòu)成，專門對進入腦組織、腦脊液和胸腺的血液進行“過濾”，防止病原體侵入。因為這種屏障作用是隨個體發(fā)育過程逐步完善成熟的，所以它不能有效地保護雛禽，這就為禽傳染性腦脊髓炎病毒等提供了可乘之機。盡管禽類也通過血胎屏障保護卵不受病原的侵害，僅由于禽蛋的形成和產(chǎn)出與哺乳動物胎生方式截然不同，所以該屏障機制遠沒有哺乳動物的精細和完善。一個成熟的卵予從進入輸卵管到形成完整的蛋排出體外，需經(jīng)過受精、包裹蛋白、形成內(nèi)外殼膜與蛋殼等多個步驟。其中任何一個環(huán)節(jié)出了問題，就會產(chǎn)生不健康的蛋。例如母禽日糧中鈣磷比例失調(diào)以及鋅、錳、維生素D等元素缺乏，將導(dǎo)致軟殼、薄殼蛋產(chǎn)生；若母禽服用磺胺類藥物則引起蛋白稀薄。這類不健康的蛋在形成和產(chǎn)出過程中極易受病原污染。當(dāng)然，對禽蛋最大的威脅還是來自于潛伏在母禽卵巢、輸卵管以及公禽生殖器中的病原，如新城疫病毒、傳染性支氣管炎病毒、禽傳染性胞脊髓炎病毒、包涵體肝炎病毒、減蛋綜合征-76病毒、病毒性關(guān)節(jié)炎病毒、禽白血病病毒、霉形體、沙門氏菌和大腸桿菌等等，它們可以隨著蛋的形成而直接進入卵黃或蛋白。受感染的胚不但很難孵化和存活，而且由于禽蛋除供食用外，還有相當(dāng)一部分用來制備疫苗和蛋黃液，所以由此造成的病原水平傳播危害更大。(三)炎癥反應(yīng)一旦病原體突破外部屏障侵入體內(nèi)，就會在局部表現(xiàn)出炎癥反應(yīng)，如血管擴張。、血流減緩、大量吞噬細胞聚集等。其中血液和組織中各種固定的或游走的吞噬細胞對病原異物的圍殲是炎癥反應(yīng)的主要方式。其參與的細胞成分包括吞噬細胞、禽異嗜性白細胞、肥大細胞和血小扳等(參見第一章)。這些吞噬細胞不但可以直接吞噬、消化病原異物，而且能夠進一步將加工后的抗原信息再傳遞給T細胞和B細胞，引發(fā)特異性免疫應(yīng)答。除吞噬作用外，在炎癥區(qū)還積聚著大量體液防御因素，如細胞崩解后釋放出的細胞素、溶茵酶等抗感染物質(zhì)，以及一些糖酵解產(chǎn)生的有機酸(尤其是乳酸)，它們均有利于殺滅病原體并抑制其擴散。由于炎癥反應(yīng)是無病原特異性的，所以在消除病原異物的同時，也常造成周圍健康組織的損傷。另外，某些不能被完全吞噬的病原菌(如禽結(jié)核桿菌)還能以吞噬細胞為“庇護所”，躲過體液中殺菌物質(zhì)的作用，并隨之散布到機體其他部位，導(dǎo)致感染擴散。更有些病毒，如腺病毒、傳染性喉氣管炎病毒、呼腸孤病毒、傳染性法氏囊病病毒和新城疫病毒等，能在雞巨噬細胞中復(fù)制，引起巨噬細胞形態(tài)、活性和功能的改變。這些現(xiàn)象說明非特異性免疫應(yīng)答的清除作用是比較原始和有限的，它必須與更高層次的特異性免疫應(yīng)答協(xié)同，才能構(gòu)成完整的機體免疫防護體系。(四)其他因素構(gòu)成非特異性免疫應(yīng)答的因素還包括補體系統(tǒng)(參見第一章)、細胞因子(例如干擾素等，參見第三章)、組織與體液中的非特異性病原抑制物(主要是一些粘液蛋白、粘液多糖)以及一些特殊的細胞成分(如NK細胞和K細胞，它們不屬于T細胞、B細胞或單核吞噬細胞)。NK細胞不依賴抗體，也不需要免疫接種就有殺傷某些腫瘤細胞的能力，因而在抗腫瘤免疫監(jiān)視(如抗馬立克氏病病毒誘導(dǎo)的惡性腫瘤)方面扮演著重要角色。K細胞則主要參與ADCC作用。三、禽類免疫應(yīng)答的影響因素禽類特異性和非特異性免疫應(yīng)答水平受多方面的制約。了解一些這方面的知識，將有助于我們在平時飼養(yǎng)過程中避免或減少各種人為及客觀因素對禽體正常免疫功能的損害。(一)機體方面的因素禽的種類、品系、個體、年齡、抗體水平等因素對免疫應(yīng)答效果有顯著影響。例如，褐殼蛋雞比白殼蛋雞對EDS-76病毒更敏感，而雞傳染性貧血因子對肉雞的危害更大。IBDV主要侵害雛雞，MDV則在成雞體內(nèi)引起明顯病變。這些都說明，家禽養(yǎng)殖業(yè)主必須根據(jù)本場禽群的特點(品種、來源、抗體水平等)，制訂合理的飼養(yǎng)、用藥和免疫計劃，切忌生搬硬套書本上或他人的經(jīng)驗。(二)環(huán)境方面的因素溫度、濕度和應(yīng)激(如免疫接種、限飼)等環(huán)境條件的改變，對禽免疫力有較大影響。例如，寒冷能使呼吸道粘膜的抵抗力降低，所以冬春季常發(fā)生傳染性支氣管炎、新城疫、傳染性喉氣管炎、霉形體病和傳染性鼻炎等呼吸道疾病；雨季濕度大，是真菌病、霉菌病暴發(fā)的敏感時期；夏季高溫時，禽舍過擠，通風(fēng)不良易造成熱休克(禽由于體溫高，被羽且無汗腺，所以很怕熱)。而免疫注射過程中轟趕禽群又常引起驚嚇等異常反應(yīng)。這些應(yīng)激情況均會降低免疫機能，．并給各種病原(如大腸桿菌)’以可乘之機。(三)營養(yǎng)方面的因素現(xiàn)代養(yǎng)禽業(yè)正朝著大規(guī)模集約化方向發(fā)展，因此，在飼養(yǎng)環(huán)境相對穩(wěn)定的情況—嚴，營養(yǎng)水平的高低及營養(yǎng)成分全面與否將直接影響禽群的整體免疫力。例如，調(diào)料中缺乏維生B6、葉酸等會減少抗體的產(chǎn)生。某些基礎(chǔ)氨基酸濃度的改變也會影響抗體滴度和淋巴細胞數(shù)量。在重視營養(yǎng)搭配的同時，必須注意飼料成分的質(zhì)量。最近發(fā)現(xiàn)廣東的幾起家禽因食用含氟量過高的飼料而導(dǎo)致中毒的病例，就為我們敲響了警鐘。(四)其他因素抗原結(jié)構(gòu)性質(zhì)及免疫方法也對禽類免疫應(yīng)答有影響。一般異源性強的抗原易誘導(dǎo)體液免疫，而與自身組織近源的抗原易誘導(dǎo)細胞免疫。另外TI抗原和TD抗原在體內(nèi)引起免疫應(yīng)答的過程不同。顆粒性抗原或可溶性抗原以及抗原決定簇的結(jié)構(gòu)數(shù)量也都直接決定著免疫應(yīng)答的啟動和效果。在免疫方法上，口服、滴眼／滴鼻、氣霧、注射的用途各不相同，前三種主要引起局部免疫，后一種則主要激發(fā)全身免疫。此外，免疫次數(shù)、間隔時間、劑量、是否加佐劑等也直接影響免疫效果，需按實際情況進行調(diào)整。第五章禽類的抗感染免疫家禽免疫系統(tǒng)的一項主要功能就是阻止外界病原微生物的侵入、定植及擴散。團此了解機體針對不同病原的抗感染免疫反應(yīng)特點，對于我們搞好家禽傳染病的防治非常重要。一、抗病毒感染免疫由于目前尚未找到很實用的抗病毒藥物，所以利用家禽自身免疫機制強化其功能，仍是抵抗家禽病毒感染的最有效手段。機體在阻止外界病原(包括病感、細菌、真菌和寄生蟲)侵入時，設(shè)置的第一道防線就是非特異性外部和內(nèi)部免疫屏障。例如，皮膚、粘膜的機械阻擋與排除作用；局部分泌液的抗菌作用；正常菌群的拮抗作用，以及血腦、血胸腺屏障的過濾作用等等。而對于少部分“漏網(wǎng)之魚”，機體則啟動另一道防線，包括特異性免疫應(yīng)答和某些非特異性免疫因子，如補體、IFN、NK細胞、K細胞等進行清除。限于篇幅，這里只重點介紹后一道防線在抗家禽病毒感染中的機制與作用。首先來看一下抗體，它是體液免疫應(yīng)答中不可替代的主要角色，即使是在細胞免疫應(yīng)答中也活躍著它的身影，如抗體依賴細胞介導(dǎo)的細胞毒作(ADCC)。抗體的作用方式包括：(1)結(jié)合病毒表面抗原，阻斷其吸附和穿入宿主細胞，并使病毒粒子叢集、凝聚，易于吞噬細胞的捕捉。這種中和作用可以被補體強化。例如，激活補體后，免疫血清對IBV的中和效果明顯增強。(2)通過ADCC作用殺傷攜帶病毒抗原(如MDV)的靶細胞，或是在補體的協(xié)助下誘發(fā)感染細胞的溶解。對于那些必須通過血流抵達靶細胞的病毒，如IBDV等，血清中的循環(huán)抗體是主要的防御力量。有人發(fā)現(xiàn)切除了法氏囊的免疫抑制雞在感染禽傳染性腦脊髓炎病毒48小時后，通過被動輸入相應(yīng)抗體仍可獲得堅強的保護。但是循環(huán)抗體并不是萬能的，它對局部感染的病毒或已進入細胞內(nèi)的寄生的病毒作用不大。例如，在高滴度的ND母源抗體保護下雛雞可以抵抗NDV的全身感染，卻難以避免來自呼吸道的NDV侵襲。同樣，減蛋綜合征-76(EDS-76)病毒也能夠順利地通過自然途徑感染已攜帶高滴度全身性中和抗體的雞。而對傳染性喉氣管炎(ILT)病毒這類主要引起細胞免疫反應(yīng)的病毒，其血清抗體效價與雞群免疫狀態(tài)之間的相關(guān)性更差。這不但表現(xiàn)在切除了法氏囊或環(huán)磷酰胺處理過的雞，在不能產(chǎn)生體液免疫應(yīng)答的情況下，經(jīng)ILTV免疫后仍能誘發(fā)完全免疫力，而且表現(xiàn)在用雞胚絨毛尿囊膜進行該病毒滴定時，即使卵黃囊內(nèi)帶有相應(yīng)抗體也不會產(chǎn)生干擾。上述事例表明，血清中某種抗體的產(chǎn)生和滴度高低與家禽抗相應(yīng)病毒感染的能力之間并不存在正相關(guān)的關(guān)系。尤其當(dāng)靶器官是病毒的入侵門戶時，局部體液及細胞免疫顯得更為重要。近年來對家禽呼吸道病毒病免疫機制的研究成果就充分說明了這一點。例如，實驗發(fā)現(xiàn)用ND弱毒疫苗滴鼻接種的雞可抵抗4天后進行的強毒攻擊。也就是說在能夠檢出血清抗體之前，機體就產(chǎn)生了對NDV的抵抗力。如果用該疫苗進行氣溶膠免疫，則呼吸道粘膜局部產(chǎn)生的抗體(主要是SIgA)比經(jīng)非腸道免疫誘發(fā)的抗體(主要是IgG)對ND強毒的抵抗要更有效。另外，局部抗體在使禽痘病毒、禽腺病毒、禽I型副粘病毒、ILTV等病毒感染局限化方面，也發(fā)揮著重要作用。當(dāng)然，在介紹體液免疫應(yīng)答的作用時，決不能忽視細胞免疫應(yīng)答的存在。實際上，由了病毒基因在感染細胞表面編碼出新的特異性抗原決定簇，所以這些細胞容易被機體的免疫系統(tǒng)識別和消滅。這一過程主要就是依靠細胞免疫來完成。對IBV初次或再次免疫時發(fā)現(xiàn)，不管使用油乳劑滅活苗或是弱毒活苗，細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)都在HI抗體形成前出現(xiàn)，且病雞的康復(fù)及抵抗力的形成均與之有直接聯(lián)系。而對于某些禽流感病毒的毒株來講，細胞免疫的效應(yīng)在抗感染過程中明顯優(yōu)于體液抗體效應(yīng)。此外，有些病毒，如禽白血病病毒、肉瘤病毒、腺病毒、呼腸孤病毒、ILTV、IBDV等，可以在巨噬細胞中復(fù)制并引起其活性和形態(tài)的變化，出現(xiàn)典型的細胞病變或吞噬功能改變。對這類病毒及其感染的細胞，也主要依靠細胞免疫功能將其清除。細胞免疫的作用方式主要有：(1)抗原致敏的細胞毒性T細胞(TC細胞)特異性地識別并殺死病毒和感染細胞；(2)致敏的TH細胞釋放IFN等細胞因子，直接破壞或抑制病毒生長，增強巨噬細胞吞噬活性；(3)ADCC作用；(4)激活NK細胞，提高殺毒效率。細胞免疫在發(fā)揮效應(yīng)時，具有相對的非特異性。例如，采自雞痘免疫雞的巨噬細胞對NDV的抗病毒效應(yīng)顯著增加，甚至還能防止雞白痢沙門氏菌的胞內(nèi)增殖。一般來說，抗體在病毒初次感染的恢復(fù)中起的作用不大，但對防止病毒再感染卻很有效。那么，在抗病毒感染時還有哪些防御因子呢主要包括IFN、補體和一些非特異性免疫效應(yīng)細胞等。IFN在抗病毒感染機制中出現(xiàn)早、作用快、廣譜、能夠有效地抑制病毒復(fù)制，幫助細胞建立抗病毒狀態(tài)。雖然體外實驗已表明NDV、IBV、IBDV、ILTV、HVTV等可誘生干擾素，但家禽干擾素對各病毒的抑制程度有差異，其機理以及干擾素在禽類免疫系統(tǒng)中的地位尚有待進一步研究。參與抗病毒感染的非特異性免疫效應(yīng)細胞主要有3種，即巨噬細胞、NK細胞和K細胞。巨噬細胞是一個“多面手”，它不僅具有非特異性吞噬消化異物的能力，而且還有助于特異性免疫的產(chǎn)生及調(diào)控。同時在特異性免疫的調(diào)動下(如抗體的調(diào)理作用)，巨噬細胞可以高效殺傷病毒感染的靶細胞并分泌出多種生物活性物質(zhì)，如酶、干擾素、淋巴因子等。NK細胞在防御病毒感染時是不可缺少的成分。它主要存在于脾臟。當(dāng)病毒感染時，NK細胞的活性明顯增高，其機理可能是病毒感染誘生了干擾素，而干擾素能激活NK細胞功能。目前的研究表明，NK細胞在抗MDV等家禽腫瘤病毒的感染上很有意義。K細胞主要通過ADCC作用殺傷有核靶細胞，其在病毒感染后的活性增加與NK細胞是平行的，但殺傷靶細跑時不依賴抗體。對家禽K細胞的研究主要集中在抗腫瘤免疫方面。有關(guān)家禽的補體系統(tǒng)可參見第一章。二、抗細菌感染免疫抗體(抗毒素)在家禽的抗細胞外細菌感染免疫過程中發(fā)揮著重要作用。它一方面可以直接中和并失活細菌分泌的外毒素以及一些有致病作用的酶，另一方面能夠結(jié)合細菌表面的抗原成分（如鞭毛、莢膜=內(nèi)毒素等），使菌體失去抗吞噬能力。同時，通過形成抗原抗體復(fù)合物提高吞噬細胞的吞噬消化活性，并激活補體系統(tǒng)發(fā)揮更大的溶菌和調(diào)理功能。另外，分布在粘膜表面（主要是消化道和呼吸道）的特異性SIgA具有獨特的多聚性、電荷、廣泛糖基化以及對蛋白水解作用的抗性，能夠直接抑制病原菌粘附于粘膜上皮細胞，使其凝聚，有利于吞噬細胞和淋巴細胞發(fā)揮作用。參與家禽抗細胞感染(包括細胞外和細胞內(nèi))過程的細胞成分主要是一些吞噬細胞(如禽異嗜性白細胞、單核巨噬細膽、血小板—等)，它們的胞內(nèi)含有溶酶體，腦膜上大多帶有免疫球蛋白Fc片段的受體和補體成分C3的受體，因此可接受抗體和補體的免疫調(diào)理作用(血小板的吞噬作用與補體無關(guān))。當(dāng)吞噬細胞捕獲病原，內(nèi)吞形成吞噬小體后，溶酶體就會與之溶合，并釋放酸性磷酸酶、β-葡萄糖醛、溶菌酶和非特異性酯酶等成分將異物消化。若菌體顆粒較大，不能完全吞入細胞時，溶酶體會被主動釋放到細胞外發(fā)揮作用。但如此一來，也會不可避免地造成炎癥病灶周圍正常組織的損傷。在這些吞噬細胞中，血小板主要在血循環(huán)系統(tǒng)中發(fā)揮作用，而異嗜性白細胞則主要出現(xiàn)于感染早期和急性炎癥中，隨著病程的延長，臣噬細胞將取代其優(yōu)勢地位。有些細胞內(nèi)感染的細菌、如分枝桿菌、沙門氏菌、李氏桿菌等，能夠抵抗吞噬細胞的殺菌作用，長期在吞噬細胞內(nèi)寄居，以逃避抗體和其他體液因子或藥物的殺滅作用，并可隨細胞的游走而擴散。對這類細菌主要依靠細胞免疫來防御，其作用機制主要涉及兩萬面：(1)受細菌抗原致敏的CD4+(TH)細胞釋放出多種淋巴因子，武裝或活化巨噬細胞，增強它對胞內(nèi)寄生菌的消除能力；(2)活化的CD8+(TC)細胞對靶細胞的直接殺傷效應(yīng)。三、抗寄生蟲和真菌感染免疫家禽的寄生蟲和哺乳動物的寄生蟲一樣，在復(fù)雜的生活史中會盡量把自己變?yōu)樗拗鹘M織的一部分，使機體免疫系統(tǒng)不能良好地對其進行識別和驅(qū)逐。寄生蟲的結(jié)構(gòu)雖然比細菌、病毒等微生物要復(fù)雜，抗原組成也多種多樣，但其免疫原性大多很弱，臨床上表現(xiàn)為帶蟲免疫和不完全免疫。尤其將蟲體乳劑或組織抽提物接種禽體后，往往不能產(chǎn)生足夠的保護性抗體。研究發(fā)現(xiàn)，只有寄生蟲在寄生過程的某一階段才會出現(xiàn)能刺激機體產(chǎn)生保護性免疫的抗原(即功能性抗原)。例如，雞球蟲的功能性抗原在發(fā)育的第二代裂殖生殖階段才出現(xiàn)。但這并不是說機體對寄生蟲不具有免疫反應(yīng)。實際上，由于寄生蟲在整個寄生過程中與宿主保持一種連續(xù)的相應(yīng)關(guān)系，所以寄生蟲會不斷產(chǎn)生抗原，機體也不斷產(chǎn)生相應(yīng)的免疫應(yīng)答。這種應(yīng)答可能表現(xiàn)為：(1)對再感染的同類寄生蟲呈完全或部分抵抗，使其不能正常寄生和發(fā)育；(2)使幼蟲的發(fā)育限制在一定階段；(3)使蟲體變小，壽命縮短；(4)降低寄生蟲繁殖力；(5)影響蟲卵或幼蟲的生活力。家禽抗真菌感染的免疫反應(yīng)也不強烈，其主要原因是真菌的抗原性較弱，且感染部位多限于皮膚粘膜等處。所以局部細胞免疫在抗真菌感染中起主要作用。已證實雞腹腔巨噬細胞對白色念珠菌有較強的吞噬活性。第六章禽類的抗腫瘤免疫家禽的腫瘤性疾病可大致分為病毒性和非病毒性兩類。前者包括由DNA病毒引起的馬立克氏病和RNA病毒引起的白血病、肉瘤及相關(guān)腫瘤病、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病等。非病毒性腫瘤則涉及卵巢腺癌、肝細胞癌、神經(jīng)纖維瘤等等，其中大多病因尚未明確。近20多年來，家禽腫瘤病(尤其是病毒性)的研究日益受到人們重視。這一方面是因為一些病毒病（如MD）在生產(chǎn)上具有重大的經(jīng)濟意義，另一方面則因為家禽腫瘤病是包括人類癌癥在內(nèi)的多種動物腫瘤病的良好實驗?zāi)Ｐ?。下面，將以病毒性腫瘤病為主，介紹家禽抗腫瘤免疫的特點和作用機制。一、禽類的腫瘤抗原腫瘤細胞與正常細胞的區(qū)別在于前者的功能和抗原性發(fā)生了改變。細胞在癌變過程中出現(xiàn)的新抗原物質(zhì)稱為腫瘤抗原。它主要包括以下幾種：(一)腫瘤特異性抗原(TSA)這類抗原只存在于某種癌變細胞表面，而在相應(yīng)的正常細胞以及感染了致癌病毒的非腫瘤細胞或其他種類的腫瘤細胞表面則找不到。用這種抗原免疫動物后，可排斥腫瘤細胞的移植，所以它又被稱為腫瘤特異性移植抗原(TSTA)。由病毒誘發(fā)的TSA雖然是通過病毒基因編碼的，但它不同于病毒本身的抗原。其特點表現(xiàn)為同一種病毒引起的腫瘤，不管它的組織來源或動物種類如何，也不管腫瘤的病理形態(tài)、種系如何，該TSA均相同，且局有較強的抗原性，能被宿主的免疫系統(tǒng)識別為“異己”抗原，并誘發(fā)特異性免疫應(yīng)答。雞馬立克氏病腫瘤相關(guān)表面抗原(MATSA)以及勞斯肉瘤病毒(RSV)轉(zhuǎn)化細胞表頂?shù)膅-gp85抗原就是典型的例子。除病毒外，化學(xué)(致癌劑)或物理因素(紫外線、X射線)也可以誘發(fā)TSA。但這類TSA的抗原性較弱，并且同一理化因素作用于不同動物或同一個體的不同部位時，形成的腫瘤各異，其TSA也互不相同，很少出現(xiàn)交叉反應(yīng)。而一些未知誘因的“自發(fā)”腫瘤且然具有TSA，但性質(zhì)較復(fù)雜，因為它們有的類似病毒誘發(fā)的TSA，具有共同抗原決定簇，有的卻與理化因素誘發(fā)的腫溜相似，具有各自獨特的抗原性。(二)腫瘤相關(guān)抗原(TAA)這類抗原并非腫瘸細胞所特有，它在正常細胞上也存在，當(dāng)細胞癌變時，其含量會明顯增加，所以TAA表現(xiàn)出的只是量的變化，而無嚴格的腫瘤特異性。TAA的典型代表是胚胎性抗原。它們在胚胎發(fā)育階段大量產(chǎn)生，而胚胎后期則受基因的阻遏作用，合成減少，出生后逐漸消失或僅留微量。當(dāng)細胞癌變時，該阻遏作用被消除，使此類抗原有機會重新大量表達于腫瘤細胞表面或分泌到血中。由于宿主對之早已形成免疫耐受，所以不會產(chǎn)生針對該抗原的免疫應(yīng)答反應(yīng)(但它在異種動物體內(nèi)仍具有很強的免疫原性，可制備診斷用的特異性抗血清)。家禽的胚胎性抗原包括雞胚胎抗原(CFA)、鶉胚胎抗原(QFA)、雞胚紅細胞抗原(chFRBC)和雞甲胎蛋白（C-AFP）等。其中CFA是雞造血系統(tǒng)分化發(fā)育的標志，它至少有13個抗原決定簇，可分為紅細胞相關(guān)（EA）和淋巴細胞相關(guān)（LA）兩類。對于新生雞外周紅細胞、法氏囊和胸腺淋巴細胞以及腹腔巨噬細胞來講，每一獨立細胞系擁有獨特的CFA決定簇組合，CFA在成禽中的異常表達與禽成髓細胞性白血病（AM）、雞成紅細胞增多癥（AE）、成淋巴細胞腫瘤、馬立克氏?。∕D）等多種禽腫瘤病有關(guān)。有證據(jù)表明，CFA能被許多禽致瘤病毒用于介導(dǎo)病理變化。雞甲胎蛋白（C-AFP）的表達與各種原因誘發(fā)的肝臟腫瘤有關(guān)。它具有免疫抑制作用（如抑制NK細胞活性等）。在胚胎期，C-AFP可阻止針對表達胚胎抗原的細胞的自身免疫反應(yīng)發(fā)生，因而對胚胎有益。但腫瘤細胞合成它后，則會損害宿主的抗腫瘤免疫機制。明顯的例子見于家禽惡性勞斯肉瘤過程。這時，C-AFP可誘導(dǎo)NK抑制細胞產(chǎn)生。而正常情況下，該細胞只在胚胎和幼體時出現(xiàn)，以保護正常胚胎細胞免受NK細胞損害，在成年禽體內(nèi)則缺乏。(三)腫瘤的病毒抗原有些致瘤病毒(如MDV、禽白血?。饬霾《救骸⒕W(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒群等)可以在癌變細胞內(nèi)形成完整病毒，所以不但能從該瘤細胞上檢出TSA和病毒囊膜抗原，而且在細胞內(nèi)也可查出病毒核酸抗原。二、禽類抗腫瘤的免疫效應(yīng)機制家禽抗腫瘤的免疫反應(yīng)與其他哺乳類動物一樣，不外乎非特異性和特異性兩種。非特異性反應(yīng)主要表現(xiàn)在腫瘤局部的炎癥反應(yīng)以及年齡抵抗力和遺傳抵抗力上，特別是遺傳抵抗力對家禽很重要。已有試驗表朋，MDV感染后能否引起嚴重的免疫抑制與雞的遺傳敏感性密切相關(guān)。由于MD的抵抗力并不依賴于那些控制生產(chǎn)性狀的遺傳因素，因此有豐富的異質(zhì)可作為在商品雞群中進行抗病力選育的根據(jù)。抗性等位基因的頻率也可因人工選擇而增加。國外有人成功地選育并維持了幾個對MD有遺傳抵抗力的雞的品系，他們發(fā)現(xiàn)這些雞受疫苗保護的程度比易感雞更大。在抗腫瘤的特異性免疫應(yīng)答中，細胞免疫比體液免疫顯得更為重要。但對于病毒引起的腫瘤病，機體的免疫應(yīng)答實際上包括抗病毒和抗腫瘤兩部分。以MD免疫為例，首先是通過體液和細胞免疫應(yīng)答控制MDV活性，限制其復(fù)制，降低病毒感染水平和細胞轉(zhuǎn)化的發(fā)生率。第二步才是直接破壞轉(zhuǎn)化的瘤細胞。由此可見，體液免疫對構(gòu)成完善的防腫瘤機制是必不可少的。有關(guān)抗病毒感染免疫的知識可參見第五章。這里主要介紹機體的抗腫瘤免疫作用。(一)巨噬細胞的作用當(dāng)腫瘤組織周圍有明顯的巨噬細胞浸潤時，腫瘤擴散轉(zhuǎn)移的發(fā)生率較低，預(yù)后也較好?？梢娋奘杉毎诳咕植磕[瘤和防止腫瘤細胞轉(zhuǎn)移上有重要意義。巨噬細胞的抗瘤機制包括：(1)直接識別和破壞具有某種共同化學(xué)特性的腫瘤細胞；(2)將溶酶體內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到腫瘤細胞內(nèi)；(3)通過FC受體參與釋放針對腫瘤細胞的腫瘤細胞壞死因子(TNF-α)；(4)由腫瘤抗原致敏的T細胞釋放一些淋巴因子(MAF、SMAF等)介導(dǎo)巨噬細胞發(fā)揮抗原特異的細胞毒作用。(二)NK細胞的作用NK細胞與巨噬細胞一樣，都處于機體抗腫瘤的第一道防線上。它不需要抗體和補體的輔助以及抗原的刺激，就能獨立溶解和殺傷各種腫瘤細胞。特別是在腫瘤細胞持續(xù)感染某些帶囊膜的病毒時。NK細胞發(fā)揮作用比T細胞早；抗瘤譜較廣，能抗同系、同種或異種腫瘤細胞，尤其對淋巴瘤和白血病細胞最有效，但抗實體瘤作用較差。NK細胞的殺傷機制主要在于它能直接通過表面受體結(jié)合并殺傷瘤細胞和致瘤病毒感染細胞。另外，NK細胞還能釋放一些細胞因子，如IFN、IL-1、IL-2等，它們（尤其是IFN-γ）反過來又進一步加強了NK細胞的活性。NK細胞也有FC受體，可參與ADCC作用。但這種方式在其抗瘤機制中占的比重較少。一般認為，NK細胞在腫瘤發(fā)生早期，瘤細胞數(shù)量少時，作用最大。(三)細腦毒性T細胞(Tc細胞)的作用Tc細胞可以通過其抗原受體識別并結(jié)合瘤細胞上的特異性抗原，殺傷細胞。另外，Tc細胞分泌的一些細胞因子(如IL-2、IFN-γ、MAF、SMAF)均有助于巨噬細胞、NK細胞等成分共同發(fā)揮抗瘤作用。Tc細胞對抗原性較強的腫瘤作用較好，如MD、禽勞斯肉瘤等。(四)K細胞的作用主要通過ADCC方式發(fā)揮效應(yīng)。(五)抗體及補體的作用抗體(IgA和IgM)與瘤細胞結(jié)合后，在補體參與下，能使細胞溶解穿孔。這已在勞斯肉瘤的體外試驗中得到證實。另外，通過調(diào)理、ADCC及修飾瘤細胞表面結(jié)構(gòu)、干擾其粘附特性等作用，也可達到一定抗瘤效果。但總的說來，抗體與補體不是抗腫瘤的主要因素。三、腫瘤的免疫逃逸機制機體的免疫功能雖然很強大，但在對付腫瘤性疾病時卻往往顯得“力不從心”。有時對抗原性弱、數(shù)量少的瘤細胞甚至還有促進生長的作用。這是因為腫瘤能通過獨特而復(fù)雜的免疫逃逸機制阻礙和抑制機體免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用。(一)免疫抑制作用這是禽類腫瘤躲避免疫打擊的重要手段。一些致瘤病毒通過直接侵害免疫器官而引起免疫抑制。如MDV的感染導(dǎo)致淋巴細胞惡性轉(zhuǎn)化后造成初級、次級抗體反應(yīng)和細胞介導(dǎo)免疫應(yīng)答的抑制。而禽白血病病毒(ALV)的B和C亞型在巨噬細胞內(nèi)的復(fù)制，也降低了IgG、IgA和IgM的免疫應(yīng)答活性及細胞免疫功能。另外，MDV、RSV等致瘤病毒的“慣用手法”還包括誘導(dǎo)抑制性巨噬細胞、抑制性T細胞、NK抑制細胞等免疫抑制細胞產(chǎn)生，以及釋放某些可溶性免疫抑制因子(巨噬細胞抑制因子、C-AFP等)。免疫抑制作用在保護腫瘤的同時，也會造成家禽對其他病原易感性增加。據(jù)報道，感染了網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病毒(REV)的小雞在接種NDV和ILTV疫苗后，不僅反應(yīng)嚴重，而且產(chǎn)生的免疫滴度和保護力明顯低于正常雞。(二)免疫耐受作用腫瘤抗原是弱抗原，當(dāng)它的數(shù)量少時(如腫瘤早期)可誘導(dǎo)抑制性T細胞產(chǎn)生，從而抑制殺瘤效應(yīng)細胞及輔助性T細胞功能，阻礙腫瘤抗原激活T、B細胞。當(dāng)腫瘤抗原數(shù)量過多時（如腫瘤晚期），則又會引起免疫麻痹。此外，腫瘤抗原往往在體內(nèi)長期存在，所以有可能作用于未成熟或幼稚的抗原特異性淋巴細胞，誘發(fā)免疫耐受。(三)抗原調(diào)變作用腫瘤組織主要由自身正常組織轉(zhuǎn)化而來，所以抗原性很弱。而有些瘤細胞在宿主體內(nèi)連續(xù)傳代后，原本特異的抗原也會進一步改變或喪失，使已致敏的淋巴細胞無法識別，造成瘤細胞的逃逸。(四)封閉作用一些可溶性腫瘤抗原和抗原抗體復(fù)合物能夠通過吸附于腫瘤細胞或效應(yīng)細胞上，干擾效應(yīng)細胞對腫瘤細胞的識別及殺傷。(五)免疫刺激作用有人估計淋巴細胞能為腫瘤提供某些生存所必需的物質(zhì)(即腫瘤營養(yǎng)因子)，刺激瘤細胞生長。四、禽類腫瘤的免疫診斷及防治目前，生產(chǎn)場和實驗室中對病毒引起的家禽腫瘤病的診斷，多用常規(guī)的免疫學(xué)方法進行，效果良好。例如，免疫熒光試驗(FA)、瓊脂凝膠試驗(AGP)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、病毒中和試驗(VN)等。檢測對象以組織或培養(yǎng)物中的腫瘤抗原以及血清中的腫瘤抗體為主。用免疫學(xué)方法防治家禽腫瘤病比較成功的例子見于MD。這種能通過主動免疫保護雞群的疫苗一方面可以誘發(fā)抗MDV的體液和細胞免疫，減少感染的病毒量；另一方面可以引起針對MATSA的抗腫瘤免疫，所以效果很好。MD疫苗不但是預(yù)防人和動物腫瘤疾病的第一個有效疫苗，而且在實際應(yīng)用中每年至少為世界家禽業(yè)減少損失數(shù)十億美元以上。目前常用的MD疫苗有3種，即人工致弱血清1型弱毒疫苗(HPRS-16/弱毒和CVI—988)、自然非致瘤血清2型弱毒疫苗(SB-1)以及血清3型火雞疤疹病毒(HVT)疫苗(FC-126)。雖然對其他禽類腫瘤的防治尚未找到有效的免疫學(xué)方法，但禽病學(xué)家們普遍認為選育抗病品系、凈化禽群、加強管理、改善營養(yǎng)和衛(wèi)生條件、提高家禽整體免疫力(包括特異性和非特異性)是最行之有效的預(yù)防措施。第七章禽類的異常免疫應(yīng)答禽類的異常免疫應(yīng)答有多種表現(xiàn)形式，包括：異常強烈的反應(yīng)（如超敏反應(yīng)）；對侵入機體的抗原異物不應(yīng)答（如免疫麻痹），以及將自身正常組織認為“異已”，加以清除（如自身免疫?。┑鹊取Ｑ芯窟@些現(xiàn)象不但有助于我們深入了解禽類免疫作用機制，而且為人類免疫系統(tǒng)相關(guān)疾病的研究提供了良好的動物模型。同時對生產(chǎn)者也有一定的指導(dǎo)意義。一、超敏反應(yīng)超敏反應(yīng)又稱為變態(tài)反應(yīng)。其過程與正常免疫應(yīng)答基本相同，但當(dāng)機體再次接觸同種變應(yīng)原(即抗原)后，應(yīng)答反應(yīng)會異常強烈，并引起組織損傷以及功能紊亂。超敏反應(yīng)根據(jù)發(fā)生機制可分為四型：I型(速發(fā)型)、Ⅱ型(細胞毒型)、Ⅲ型(免疫復(fù)合物型)和Ⅳ型(遲發(fā)型)。其中I型在臨床上比較常見，它主要由疫苗、寄生蟲、異種血清、抗生素、粉塵等引起，這些物質(zhì)通過形成變應(yīng)原-IgE復(fù)合物，激活肥大細胞和嗜堿性白細胞，使之脫粒并釋放組織胺、5-羥色胺、白三烯、前列腺素等活性介質(zhì)，由此而引發(fā)呼吸困難、驚厥、虛脫、肺水腫等一系列癥狀和病變。禽類I型超敏反應(yīng)的主要休克器官是呼吸道。Ⅱ型超敏反應(yīng)是抗體(IgG或IgM)直接作用于附著在相應(yīng)細胞或組織上的表面抗原，并在補體、巨噬細胞和K細胞參與下，造成正常組織損傷的過程。禽類在這方面的報道很少。正常情況下，免疫應(yīng)答過程中形成的抗原抗體復(fù)合物會迅速被吞噬細胞吞噬、消化和清除。如果復(fù)合物過多或形成的是中等大小(19S左右)的可溶性復(fù)合物，則較易沉積在局部毛細血管壁上，激活補體和肥大細胞，使該處正常細胞和組織溶解、壞死。這就是所謂的Ⅲ型超敏反應(yīng)。異種血清、微生物的降解成分或代謝產(chǎn)物、自身抗原及某些藥物(如磺胺)可誘發(fā)這種類型的反應(yīng)。Ⅳ型超敏反應(yīng)與前三型的最大區(qū)別在于發(fā)生過程較慢(往往在機體接受變應(yīng)原再次刺激24-48小時才會引起組織損傷)，而且主要由致敏T細胞(CD8+亞群)介導(dǎo)，不需抗體和補體參與。臨床上表現(xiàn)為以單核巨噬細胞及淋巴細胞浸潤為特征的炎癥反應(yīng)。其典型代表是禽結(jié)核桿菌感染。二、免疫缺陷這是由免疫器官、組織或免疫細胞的缺失或功能不全所引起的一系列免疫應(yīng)答障