臨床自動生化分析儀器課件

1、第八章 臨床自動生化分析儀器 automatic biochemistry analyzer2022/9/281第八章 臨床自動生化分析儀器 automatic HITACHI 7080 全自動生化分析儀2022/9/282HITACHI 7080 全自動生化分析儀2022/9/26BS-200全自動生化分析儀 2003年，我國第一臺擁有自主知識產(chǎn)權(quán)的BS-300全自動生化分析儀在深圳研制成功并投入臨床應(yīng)用。2022/9/283BS-200全自動生化分析儀 2003年，我國第一臺擁有自日立7180型全自動生化分析儀2022/9/284日立7180型全自動生化分析儀2022/9/264 自動生化

2、分析儀由電腦控制，將生化分析中的取樣、加試劑、混勻、保溫反應(yīng)、檢測、結(jié)果計算、可靠性判斷、顯示和打印、以及清洗等步驟組合在一起自動進行操作的分析儀器。 自動生化分析儀的定義2022/9/285 自動生化分析儀由電腦控制，將生化分析中的取樣、加試劑 自動生化分析技術(shù)的優(yōu)點提高了臨床生化檢驗質(zhì)量和速度；減輕檢驗人員的勞動強度；節(jié)約樣品和試劑；增加檢驗項目；提高檢測精密度，減少實驗誤差；并且有利于臨床檢驗標準化的實現(xiàn)。 2022/9/286 自動生化分析技術(shù)的優(yōu)點提高了臨床生化檢驗質(zhì)量和速度；202第一節(jié) 自動生化分析儀的類型按其工作方式不同分為：連續(xù)流動式(continuous streaming

3、 movementstyle)或管道式：已很少用離心式(centrifugation style) ：已很少用分立式(discretestyle)：應(yīng)用最廣泛干片式(drying style) ：急診多用2022/9/287第一節(jié) 自動生化分析儀的類型按其工作方式不同分為：2022一、連續(xù)流動式自動生化分析儀1957年，美國的Technicon公司根據(jù)Skeggs的設(shè)計方案制造了世界上第一臺自動生化儀AutoAnalyzer。它就是單通道連續(xù)流動式。連續(xù)流動式的自動生化分析儀從早期的單通道，只測定2個生化指標，到1977年發(fā)展成內(nèi)置計算機控制的連續(xù)多通道生化自動分析儀，每小時可測定150個樣本

4、，每個樣本可測 20個生化指標。2022/9/288一、連續(xù)流動式自動生化分析儀1957年，美國的Techni（一）儀器結(jié)構(gòu)1.概念：在測定過程中各待測樣品與試劑混合后的化學反應(yīng)均在同一管道內(nèi)流動的過程中完成的。2.儀器主要構(gòu)成部件：A.樣品盤:置放聚乙烯塑料杯(或試管)，用以置放待測樣品和標準液。B.比例泵:樣品和各種試劑的用量以及管道氣泡的多少均由比例泵決定。C.混合器:一種由玻璃制成的螺旋管，將比重不同的液體充分混合。D.透析器:作用是去除反應(yīng)管道中大、小分子干擾物。2022/9/289（一）儀器結(jié)構(gòu)2022/9/269（二）工作原理在微機控制下，通過比例泵將標本和試劑注入到連續(xù)的管道系

5、統(tǒng)中，在一定的溫度下，在管道內(nèi)完成混合、去除干擾物，保溫，比色測定，信號放大，運算處理，最后將結(jié)果顯示并打印出來。2022/9/2810（二）工作原理在微機控制下，通過比例泵將標本和試劑注入到連續(xù)（三）儀器特點在檢測過程中，樣品和樣品之間需用空氣進行隔離，或用空白試劑或者是緩沖液來隔離。1.空氣分段系統(tǒng):該系統(tǒng)是在樣品輸送的同時，由空氣管吸入氣泡，氣泡將由同樣原理吸入并在試劑管道中連續(xù)流動的試劑分成均勻的節(jié)段，防止交叉污染。2.試劑分段系統(tǒng):用試劑空白或緩沖液來間隔每個樣品的反應(yīng)液。又可分為流動注射系統(tǒng)和間隙式系統(tǒng)。流動注射系統(tǒng)的樣品用轉(zhuǎn)動閥加注，試劑流動仍用比例泵驅(qū)動，不再加入空氣。按此規(guī)律

6、，樣品依次連續(xù)地被檢測。間隙式的特點是每一次進樣都必須在前一樣品的分析過程結(jié)束后(包括清洗)才能開始，不能連續(xù)依次進樣 2022/9/2811（三）儀器特點在檢測過程中，樣品和樣品之間需用空氣進行隔離，由于所需試劑量大，易產(chǎn)生交叉污染，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，故障不易排除，到20世紀80年代初，連續(xù)流動式儀器已開始被20世紀70年代發(fā)展起來的分立式和離心式儀器所代替。2022/9/2812由于所需試劑量大，易產(chǎn)生交叉污染，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，故障不易排除，到二、離心式自動生物化學分析儀（一）儀器結(jié)構(gòu)離心式生物化學分析儀是1969年發(fā)展起來的一種機型，它的全部檢驗過程是在一個類似離心機轉(zhuǎn)頭樣的圓盤上完成的。離心式分析儀

7、由加樣和分析兩個部分組成。加樣部分：包括樣品盤、試劑盤、吸樣臂、試劑臂和電子控制部分等。分析部分：除安裝有特殊的離心轉(zhuǎn)盤外，還有溫控和光學檢測系統(tǒng)，以及微機信息處理和顯示系統(tǒng)。2022/9/2813二、離心式自動生物化學分析儀（一）儀器結(jié)構(gòu)離心式生物化學分（二）工作原理特點：在整個分析過程中的每一個步驟幾乎是同時完成的同步分析。樣品量和試劑量均為微量級（樣品1-50l，試劑120 -130l），分析速度快（可達600 tests/h）。此類儀器按照設(shè)計不同可用光度法、濁度法和散射法及終點法和動態(tài)法進行分析。2022/9/2814（二）工作原理特點：在整個分析過程中的每一個步驟幾乎是同時完三、干

8、化學式自動生物化學分析儀（一）工作原理 干化學式分析儀是采用干化學（dry chemistry）方法，將發(fā)生在液相反應(yīng)物中的反應(yīng)，轉(zhuǎn)移到一個固相載體上，利用分光檢測系統(tǒng)進行檢測的一類新型儀器。多采用多層薄膜(multiple layer film)的固相試劑技術(shù)，僅需將樣品加在固相試劑上進行測定。當編有條形碼的特定試驗的試條、試片或袋式試劑包放進測定裝置后，其貯存的信息就變成測定功能，直至最后報出結(jié)果。干化學分析儀大都采用反射光度法(reflectance spectroscopy)和基于離子選擇電極(ion selective electrode，ISE)的差示電位法(differentia

9、l potentiometry)。2022/9/2815三、干化學式自動生物化學分析儀（一）工作原理 干化學式分析（二）儀器的類型及特點1.反射光度法系統(tǒng):使用的是試紙條，每一個檢測項目都有各自專用的試劑條，由3個主要部分組成：密碼磁帶：位于劑試條背面,是該項目的全部檢測程序。血漿分離區(qū)：位于正面下部并標以紅色,由玻璃纖維和紙層構(gòu)成。反應(yīng)區(qū)：位于試劑條的正面上部。2.膠片涂層技術(shù)的化學分析系統(tǒng):使用試劑片（塊），采用的是膠片涂層技術(shù),各種反應(yīng)都在干片(多層膜片)內(nèi)進行。其工作原理為：應(yīng)用涂層技術(shù)制作膠片基礎(chǔ)的感光乳劑，將其均勻呈層狀地涂布在支持層或下層上。3.袋式分析儀:采用袋式的干試劑包進行

10、臨床化學分析。袋式試劑包由透明的雙層塑料薄膜制成，每袋均有不同的測定項目英文縮寫標記。測定操作開始時將試劑包放進儀器，樣品及其稀釋液由探針刺孔注入包內(nèi)，在反應(yīng)過程中的不同階段，試劑小袋經(jīng)破裂器擊碎，混合及保溫，然后透明小袋經(jīng)機械碾壓形成比色杯用于測定，最后通過計算機系統(tǒng)換算結(jié)果并發(fā)出報告。 2022/9/2816（二）儀器的類型及特點1.反射光度法系統(tǒng):使用的是試紙條，每四、分立式自動生化分析儀（一）工作原理 分立式自動生化分析儀是按人工操作的方式編排程序，并以有序的機械動作代替人工，按程序依次完成各項操作的自動分析儀器。儀器操作過程中的各環(huán)節(jié)用傳送帶連接，按程序依次操作。2022/9/281

11、7四、分立式自動生化分析儀（一）工作原理 分立式自動生化分析 （二）基本結(jié)構(gòu) 1. 樣品盤或樣品架 樣品盤（specimen disc）：放置待測樣品的轉(zhuǎn)盤，可放置一定數(shù)量的樣品杯（specimen cup）或不同規(guī)格的采血試管，通過樣品盤的轉(zhuǎn)動來控制不同樣品的進樣。2022/9/2818 （二）基本結(jié)構(gòu) 1. 樣品盤或樣品架 樣品盤（sp 樣品架（specimen stock）：每個樣品架可放數(shù)只樣品杯或采血試管（多為5只或10只）。樣品架的移動通過樣品傳送帶來進行。樣品架上的條形碼（barcode）或編碼孔可識別樣品架號及樣品位置號。 2022/9/2819 樣品架（specimen st

12、ock）：每個樣品架可樣品架的優(yōu)點隨著樣品架移動及樣品的被檢測，可不斷追加已放置樣品杯或采血試管的樣品架；通過樣品架的移動能將樣品傳送到另一個分析模塊（analysisdie-block）甚至另一臺分析儀上再進行分析。 2022/9/2820樣品架的優(yōu)點隨著樣品架移動及樣品的被檢測，可不斷追加已放置2.試劑室和試劑瓶 轉(zhuǎn)盤式試劑室（reagent chamber）：內(nèi)裝放置試劑瓶的轉(zhuǎn)盤，一般可放置20種以上具有一定形狀的塑料試劑瓶，大型分析儀可放置3045種試劑瓶。 試劑瓶容量一般為10100ml。通過試劑轉(zhuǎn)盤的轉(zhuǎn)動來選用不同試劑。 2022/9/28212.試劑室和試劑瓶 轉(zhuǎn)盤式試劑室（re

13、agent c 試劑架式試劑室：可放置容量為250ml500ml的任意形狀的試劑瓶，試劑瓶不能轉(zhuǎn)動，但每個試劑瓶內(nèi)引出一條試劑管路及其噴嘴，即每種試劑均有專用的加試劑裝置，因而不同試劑間無交叉污染。 但試劑管路較長使試劑存在一定的死體積，因而適宜用于使用頻率高、消耗試劑量大的檢測項目。 2022/9/2822 試劑架式試劑室：可放置容量為250ml500ml的 大型分析儀同時備有第一試劑室和第二試劑室，即具備對同一檢測項目添加兩次試劑的功能，個別分析儀還具有加入第三試劑的功能。 對有條形碼裝置的儀器可將帶條形碼的試劑瓶放在試劑室轉(zhuǎn)盤上的任意位置，儀器能自動識別試劑的種類、批號和有效期。試劑室均

14、具有冷藏裝置，可將試劑保存在410。 2022/9/2823 大型分析儀同時備有第一試劑室和第二試劑室，即具備對同3.反應(yīng)杯和反應(yīng)盤 反應(yīng)杯（reaction cup）是樣品與試劑進行化學反應(yīng)的場所，同時用作比色杯。由透光特性好的硬塑料或石英玻璃制成。比色杯光徑不同分析儀有0.50.7厘米不等，大多數(shù)分析儀在計算時將其折算為1厘米光徑。 2022/9/28243.反應(yīng)杯和反應(yīng)盤 反應(yīng)杯（reaction cup 反應(yīng)盤（reaction disc）：100只或更多的反應(yīng)杯圍成一圈組成。在測定過程中反應(yīng)盤作恒速的圓周運動，在靜止時向反應(yīng)杯中加入樣品、試劑或進行攪拌混勻，當反應(yīng)盤恒速圓周運動經(jīng)過檢

15、測窗口的比色杯可進行吸光度檢測。2022/9/2825 反應(yīng)盤（reaction disc）：100只或更多4.取樣和加試劑裝置 (1)取樣裝置（sampling assembly）： 由取樣針、取樣臂、取樣管路、取樣注射器和閥門組成，能定量吸取樣品并加入到反應(yīng)杯。 不同分析儀的取樣容量有不同的范圍，一般為235l，步進0.1微升不等。2022/9/28264.取樣和加試劑裝置 (1)取樣裝置（sampling 取樣針設(shè)有電子液面感應(yīng)器，取樣針于樣品上方下降，一旦接觸到樣品液面即停止下降而開始吸樣。適用于不同的采血試管上機測定2022/9/2827 取樣針設(shè)有電子液面感應(yīng)器，取樣針于樣品上方下

16、降，一旦 多數(shù)加樣裝置設(shè)有防撞功能，遇到阻礙時取樣針立即停止運動并報警。某些取樣針還設(shè)有阻塞報警功能，當取樣針被樣品中的凝塊、纖維蛋白等物質(zhì)阻塞時，機器會自動報警、沖洗取樣針，并跳過當前樣品，進行下一個樣品的取樣檢測。 2022/9/2828 多數(shù)加樣裝置設(shè)有防撞功能，遇到阻礙時取樣針立即停取樣針防交叉污染（crossing contamination）措施 絕大多數(shù)采用水洗方式（又有瀑布式和涌泉式之分），在吸取另一個樣品前對接觸樣品的樣品針內(nèi)外壁進行沖洗； 也有采用化學惰性液（chemical inertiafluid）膜的方式來隔絕樣品與取樣針內(nèi)外壁之間的接觸。 2022/9/2829取樣

17、針防交叉污染（crossing contaminati(2)加試劑裝置 加試劑裝置用于定量吸取試劑加入反應(yīng)杯，可加入試劑容量一般為20350l。步進15微升不等，取樣精度在1微升左右。 注射器方式：組成部件與取樣裝置類似，其液面感應(yīng)系統(tǒng)能檢測并提示試劑剩余量。 灌注式：具有許多條試劑管路及其噴嘴，每種試劑單獨使用一條試劑管路和噴嘴，不存在各試劑間的交叉污染。 2022/9/2830(2)加試劑裝置 加試劑裝置用于定量吸取試劑加入反應(yīng)杯， 大型自動生化儀多具有兩組加試劑裝置，可分別從兩個試劑室吸取同一個檢測項目的第一試劑和第二試劑，大多數(shù)分析儀所有檢測項目加入第二試劑的時間點統(tǒng)一固定為1個或2個

18、點，也有分析儀有3個加入時間點可供選擇。 2022/9/2831 大型自動生化儀多具有兩組加試劑裝置，可分別從兩個試劑5.混勻與攪拌裝置 反應(yīng)杯里的樣品與試劑通過攪拌棒攪拌而充分混勻，攪拌棒的形狀為扁平棒狀或扁平螺旋狀，表面的疏水材料能防止反應(yīng)液被攪拌棒所攜帶。其工作方式大多為旋轉(zhuǎn)式攪拌，也有震動式攪拌方式。也設(shè)置了防止攪拌棒在不同反應(yīng)液之間攜帶交叉污染的清洗措施。 2022/9/28325.混勻與攪拌裝置 反應(yīng)杯里的樣品與試劑通過攪拌棒攪拌6.溫控和定時系統(tǒng)(1)溫控系統(tǒng) 溫控系統(tǒng)使反應(yīng)杯浸浴在恒溫環(huán)境： 恒溫循環(huán)水浴方式：溫度傳遞速度快，保養(yǎng)要求較高。 恒溫空氣浴方式：溫度傳遞速度不如恒溫

19、水浴循環(huán)方式，保養(yǎng)簡單。 溫度控制器能使循環(huán)水或循環(huán)空氣的溫度控制在規(guī)定溫度0.1。規(guī)定溫度可有37和30兩種選擇，一般固定在37。2022/9/28336.溫控和定時系統(tǒng)(1)溫控系統(tǒng) 溫控系統(tǒng)使反應(yīng)杯浸 不同分析儀對檢測吸光度的間隔時間有不同的規(guī)定，反應(yīng)時間應(yīng)該設(shè)定為此間隔時間的倍數(shù)?？偡磻?yīng)時間一般限制在8.5-10min內(nèi)，個別分析儀可以設(shè)定為15或22min等。 (2)定時系統(tǒng)：2022/9/2834 不同分析儀對檢測吸光度的間隔時間有不同的規(guī)定，反7.光路和檢測系統(tǒng) 自動生化分析儀以紫外可見分光光度法為其中心和主要的檢測手段，與一般分光光度計一樣，其光路和檢測系統(tǒng)由光源、單色器和檢測

20、器組成。 2022/9/28357.光路和檢測系統(tǒng) 自動生化分析儀以紫外可見分光光度(1)光源（light source） 一般為鹵素鎢絲燈（halogentungsten filamentlamp），也有采用長壽命的氙燈（xe lamp），要求在340800nm波長范圍內(nèi)能發(fā)射出穩(wěn)定且較平坦的光能。 2022/9/2836(1)光源（light source） 一般為鹵素鎢(2)單色器（monochromato）干涉濾光片（interference filter）分光系統(tǒng)：常帶有340、380、405、500、550、600、660nm等幾種濾光片，各濾光片固定在轉(zhuǎn)盤上，以轉(zhuǎn)盤旋轉(zhuǎn)的方式來選

21、擇波長。這種分光系統(tǒng)在半自動和小型自動分析儀中常用，且不能同一時刻進行多波長檢測。 光柵（raster）分光系統(tǒng)：常在340（或293）800nm范圍內(nèi)選擇1013種固定的單色光。 2022/9/2837(2)單色器（monochromato）干涉濾光片（in前分光和后分光方式 光柵分光有前分光和后分光兩種方式，光源首先經(jīng)過單色器分光，然后透射到比色溶液的方式為前分光。目前以后分光方式為多見，其優(yōu)點是單色器中沒有轉(zhuǎn)動部分，雙波長在同一時刻檢測，因而提高了檢測的精度和速度。2022/9/2838前分光和后分光方式 光柵分光有前分光和后分光兩種方式， 光源先透過比色杯中的反應(yīng)液再照射到光柵上，經(jīng)色

22、散后所有固定單色光同時通過各自的光纖傳輸?shù)綄?yīng)的檢測器，微處理器按該分析項目的分析參數(shù)，后分光方式 選擇其中一個或兩個波長（雙波長方式）的吸光度值，用于分析結(jié)果的計算。2022/9/2839 光源先透過比色杯中的反應(yīng)液再照射到光柵上，經(jīng)色散后所光路無可移動部分，不需要移動儀器的任何部件?？赏瑫r選擇雙波長或多波長進行測定，大大降低noise,有效抑制標本混濁、溶血等因素對結(jié)果的影響。與前分光系統(tǒng)相比較，后分光光路系統(tǒng)的優(yōu)越性？2022/9/2840光路無可移動部分，不需要移動儀器的任何部件。與前分光系統(tǒng)相比(3)檢測器（detector） 由光敏二極管及放大電路組成，可按設(shè)定的間隔時間連續(xù)測定各

23、反應(yīng)杯的吸光度值。 2022/9/2841(3)檢測器（detector） 由光敏二極管及放大電8.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 具有多種數(shù)據(jù)處理功能。 計算測定結(jié)果 判斷結(jié)果準確性 保存各種數(shù)據(jù) 自我診斷功能 2022/9/28428.數(shù)據(jù)處理系統(tǒng) 具有多種數(shù)據(jù)處理功能。 2022/99.清洗系統(tǒng) 反應(yīng)杯清洗裝置：一個反應(yīng)杯內(nèi)反應(yīng)和檢測結(jié)束后，該反應(yīng)杯就被沖洗系統(tǒng)及時沖洗。 清洗過程：由廢液針吸取反應(yīng)杯內(nèi)廢液，加入清洗劑（detergent）沖洗并抽干后，再經(jīng)數(shù)次去離子水沖洗及抽干，然后做杯空白的吸光度檢查，若通過檢查則此反應(yīng)杯可繼續(xù)循環(huán)使用；更高級儀器帶有風干技術(shù)。如果不能通過，分析儀將提示該反應(yīng)杯異常，

24、并跳過此反應(yīng)杯使用下一個反應(yīng)杯，或提示更換反應(yīng)杯。 2022/9/28439.清洗系統(tǒng) 反應(yīng)杯清洗裝置：一個反應(yīng)杯內(nèi)反應(yīng)和檢測樣品針、試劑針和攪拌棒清洗 一般在用于下一個樣品、試劑或反應(yīng)杯前即清洗一次，此時多數(shù)為去離子水沖洗，在一批檢測完成后，則自動進行清洗劑清洗。 清洗劑可配有1至3種可供選擇，除一種常規(guī)清洗劑外，其它1至2種可按設(shè)定對試劑針、樣品針或反應(yīng)杯進行補充清洗。 2022/9/2844樣品針、試劑針和攪拌棒清洗 一般在用于下一個樣品、試劑第二節(jié) 組合式自動分析儀 一、組合式自動生化分析儀 將相同或不同的兩臺或兩臺以上的分析部分，即分析模塊進行組合連接，采用樣品架方式使樣品通過傳輸線

25、在不同分析模塊間進行傳遞并檢測。各分析模塊所分析項目的組合提高了分析效率，這些分析模塊除了基于紫外-可見光譜分析原理的分析模塊外，還有基于離子選擇電極(ISE)的電解質(zhì)分析模塊，甚至還可組合建立在免疫發(fā)光分析原理的免疫分析模塊。 2022/9/2845第二節(jié) 組合式自動分析儀 一、組合式自動生化分析儀202組合式分析儀2022/9/2846組合式分析儀2022/9/2646二、實驗室自動化系統(tǒng) （laboratory automation system，LAS） 包括樣品前處理系統(tǒng)、樣品輸送系統(tǒng)和各樣品分析系統(tǒng)。不同功能的各模塊以同一標準來連接，通過計算機控制運行。隨著檢測樣品量的增加，只需添

26、加需要的新模塊，將其安裝連接，即可擴大處理能力。這樣可避免同類硬件和功能的重復(fù)投資，節(jié)省占地面積所需的基礎(chǔ)投入。當一模塊發(fā)生故障時，其余模塊仍在運行，在24小時內(nèi)任意時間對模塊進行交替保養(yǎng)維護，不影響日常工作。 2022/9/2847二、實驗室自動化系統(tǒng) （laboratory automa樣品前處理系統(tǒng) 能獨立工作，由樣品投入部、離心分離部、開栓部、在線分注部、非在線分注部、貼條碼部、蓋栓部、樣品分注收存部、樣品接收部等模塊構(gòu)成前處理系統(tǒng)，每一模塊既是系統(tǒng)的部分，又是獨立的單元，可根據(jù)不同需要選擇使用，具有靈活性和擴展性。 也可通過樣品輸送部分與樣品分析系統(tǒng)連接，組成類似工業(yè)領(lǐng)域的生產(chǎn)流水線

27、，從而實現(xiàn)了從采血到報告的實驗室的全自動化。 檢驗周轉(zhuǎn)期的時間分配中，分析前:65%、樣品運送2%、分析中15% 、分析后18%，實驗分析前自動化是全實驗室自動化的重點2022/9/2848樣品前處理系統(tǒng) 能獨立工作，由樣品投入部、離心分離部、第三節(jié) 生化自動化分析方法概要一、分析方法分類（一）終點法（end assay)（最常用的方法） 被測物質(zhì)在反應(yīng)過程中完全被轉(zhuǎn)變?yōu)楫a(chǎn)物，到達反應(yīng)終點，根據(jù)終點吸光度的大小求出被測物濃度，稱為終點法。 該法稱為平衡法更為恰當。從時間-吸光度曲線來看，到達反應(yīng)終點或平衡點時，吸光度將不再變化。終點法參數(shù)設(shè)置簡單，反應(yīng)時間一般較長，精密度較好。 2022/9/

28、2849第三節(jié) 生化自動化分析方法概要一、分析方法分類（一）終點法終點時間的確定根據(jù)時間-吸光度曲線來確定，根據(jù)被測物反應(yīng)終點，結(jié)合干擾物的反應(yīng)情況來確定。2022/9/2850終點時間的確定根據(jù)時間-吸光度曲線來確定，2022/9/21一點終點法（one point end assay） 在反應(yīng)到達終點，即在時間-吸光度曲線上吸光度不再改變時選擇一個終點吸光度值，用于計算結(jié)果。結(jié)果計算公式：待測物濃度CU=（待測吸光度AU試劑空白吸光度AB）KK為校準系數(shù) 2022/9/28511一點終點法（one point end assay） 一點終點法反應(yīng)曲線 A單試劑一點終點法 B雙試劑一點終點法

29、 R:reagent(試劑)本方法：用來測定總蛋白、清蛋白、葡萄糖氧化酶2022/9/2852一點終點法反應(yīng)曲線 A單試劑一點終點法 B雙試2兩點終點法（two point end assay） 在被測物反應(yīng)或指示反應(yīng)尚未開始時，選擇第一個吸光度，在反應(yīng)到達終點或平衡時選擇第二個吸光度，此兩點吸光度之差用于計算結(jié)果。 計算公式為： CU=（待測吸光度A2待測吸光度A1）K。 2022/9/28532兩點終點法（two point end assay） 兩點終點法反應(yīng)曲線 A單試劑兩點終點法 B雙試劑兩點終點法 2022/9/2854兩點終點法反應(yīng)曲線 A單試劑兩點終點法 B 該法能有效地消除溶

30、血(hemolysis)、黃疸（icterus）和脂濁（lipo-turbid）等樣品本身光吸收造成的干擾。 血紅蛋白、膽紅素和脂濁的光吸收曲線 2022/9/2855 該法能有效地消除溶血(hemolysis)、黃疸（i（二）固定時間法（fixed-time assay） 指在時間-吸光度曲線上選擇兩個測光點，此兩點既非反應(yīng)初始吸光度亦非終點吸光度，這兩點的吸光度差值用于結(jié)果計算。有時也稱此法為兩點法 。 計算公式與兩點終點法相同， CU=(A2-A1)K。2022/9/2856（二）固定時間法（fixed-time assay） 固定時間法反應(yīng)曲線 A單試劑固定時間法 B雙試劑固定時間法該

31、分析方法有助于解決某些反應(yīng)的非特異性問題。 2022/9/2857固定時間法反應(yīng)曲線 A單試劑固定時間法 （三）連續(xù)監(jiān)測法（continuous monitoring assay） 又稱速率法（rate assay），是在測定酶活性或用酶法測定代謝產(chǎn)物時，連續(xù)選取時間-吸光度曲線中線性期（各兩點間吸光度差值相等）的吸光度值，并以此線性期的單位吸光度變化值（A/min）計算結(jié)果。2022/9/2858（三）連續(xù)監(jiān)測法（continuous monitorin連續(xù)監(jiān)測法反應(yīng)曲線 A單試劑連續(xù)監(jiān)測法 B雙試劑連續(xù)監(jiān)測法 2022/9/2859連續(xù)監(jiān)測法反應(yīng)曲線 A單試劑連續(xù)監(jiān)測法 B雙試酶促反應(yīng)的線

32、性段 1及5值偏小，而234，故A1點至A4點屬線性段 2022/9/2860酶促反應(yīng)的線性段 1及5值偏小，而234，故A連續(xù)監(jiān)測法的優(yōu)點 可以確定線性期并計算A/min，根據(jù)此值再準確地計算酶活性，因而使自動生化分析儀在酶活性測定方面顯著地優(yōu)于手工法。連續(xù)監(jiān)測法也可用于測定呈線性反應(yīng)的代謝物濃度，一般是某些基于酶法測定的代謝物。 酶活性（U/L） A/min理論（或校準）K值。 代謝物濃度CU=A/min校準K值。 2022/9/2861連續(xù)監(jiān)測法的優(yōu)點 可以確定線性期并計算A/min1理論K值 多用于酶活性測定中，因酶活性尚無公認的校準品可用。根據(jù)酶活性的國際單位定義得出酶活性的計算公式

33、為：酶活性 (U/L)=A/min將此式中 以K來表示，即為理論K值 可作為分析參數(shù)輸入到分析儀中。 2022/9/28621理論K值 多用于酶活性測定中，因酶活性尚無公認的校準采用理論K值的前提 應(yīng)當是樣品和試劑的加量準確、比色杯光徑準確、溫度控制精確以及波長準確等。但事實上由于各型分析儀在注射器容積步進電機精度、濾光片帶寬等方面的差異，可造成樣品和試劑加量以及吸光度檢測的偏差，溫度的影響有時也非常大。 2022/9/2863采用理論K值的前提 應(yīng)當是樣品和試劑的加量準確、比色2.實際摩爾吸光系數(shù)和K值測定 由于摩爾吸光系數(shù)受比色杯光徑、波長等的影響，書本上或試劑廠家提供的理論摩爾吸光系數(shù)可

34、能與實際所用分析儀所測的不同，因而有必要獲得實際的摩爾吸光系數(shù)，然后來計算理論K值。 2022/9/28642.實際摩爾吸光系數(shù)和K值測定 由于摩爾吸光系數(shù)受比色（1）NADH（NADPH）摩爾吸光系數(shù)的測定 NADH(還原型輔酶I)（NADPH）(還原型輔酶)沒有標準純制品，而且配成溶液后穩(wěn)定性又較差，不能直接用NADH 或NADPH標準液來校正儀器，須通過有NAD+(NADP+)參與的反應(yīng)途徑。 2022/9/2865（1）NADH（NADPH）摩爾吸光系數(shù)的測定 用已糖激酶 (HK)或葡萄糖脫氫酶(GD)方法測定葡萄糖時，葡萄糖的消耗與NADH的生成呈等摩爾關(guān)系。葡萄糖有標準純制品。根據(jù)

35、公式A=bC，已知比色杯光徑b和葡萄糖標準液濃度，測得葡萄糖標準管的吸光度A后便可計算出NADH（NADPH）的摩爾吸光系數(shù)為 A/bC。 2022/9/2866用已糖激酶 (HK)或葡萄糖脫氫酶(GD)方法測定葡萄糖時，測定方法 葡萄糖標準液濃度為1Ommo1/L(0.01mol/L)，標準液加入量為3.5L，酶試劑加入量為335L，比色杯光徑為0.7cm，在340nm測得吸光度為0.465，則實測NADH摩爾吸光系數(shù) = 6424，即在此臺分析儀上340nm波長處測得NADH（NADPH）的摩爾吸光系數(shù)為6424，而理論上NADH（NADPH）的為6220。 2022/9/2867測定方法

36、 葡萄糖標準液濃度為1Ommo1/L(0.（2）“色素原”酶促產(chǎn)物在405nm波長摩爾吸光系數(shù)的測定 有許多酶底物為人工合成的“色素原”底物，其本身無色，經(jīng)酶作用后釋放出有色的反應(yīng)產(chǎn)物，在405nm波長具有吸收峰。ALP底物：磷酸對硝基苯酚 (4-Nitrophenyl phosphate，4-NPP) 經(jīng)酶作用后釋放出黃色的對硝基苯酚(4-Nitrophenol，4-NP)GGT底物：-L-谷氨酰對硝基苯胺(-L-Glutamyl-p-nitroanilide)或-L-谷氨酰-3-羥基-對硝基苯胺(-L-Glutamyl-3-carboxyl-p-nitroan)經(jīng)酶作用后釋放出黃色的對硝基

37、苯胺(p-Nitroaniline，4-NA)或?qū)ο趸?5-氨基苯甲酸(2-amino-nitrobenzoicacid， ANBA)。 2022/9/2868（2）“色素原”酶促產(chǎn)物在405nm波長摩爾吸光系數(shù)的測定以對硝基苯酚的摩爾吸光系數(shù)測定為例試劑： 4-NP標準儲存液(1Ommo1/L) 4-NP標準應(yīng)用液(2.5mmo1/L，以0.84mol/L AMP緩沖液稀釋而成) 底物緩沖液(l5mmol/L 4-NPP配于0.84mol/L AMP-HCL緩沖液中，37,pH l0.09土0.02)。2022/9/2869以對硝基苯酚的摩爾吸光系數(shù)測定為例試劑：2022/9/266測定方法

38、 4-NP標準液加入量為5L，底物緩沖液加入量為350L，波長405nm，光徑0.7cm，溫度37，測定得吸光度為A1；另用蒸餾水代替4-NP標準液，按上述方法測定其吸光度為A2，4-NP標準液吸光度A= A1- A2，若測得A為0.460，則實測4-NP摩爾吸光系數(shù)18662 2022/9/2870測定方法 4-NP標準液加入量為5L，底3校準K值 酶活性校準品經(jīng)校準操作后由分析儀自動計算得出。在進行酶學測定時，如果分析條件的變化如溫度、樣品試劑加量和吸光度檢測偏差可同等程度地影響校準物和待測樣品，則使用校準品能進行補償。一般來說以使用校準K值為好，但必須有兩個先決條件：必須使用配套的試劑；

39、必須使用配套的高質(zhì)量的校準品，該校準品應(yīng)具有溯源性。 2022/9/28713校準K值 酶活性校準品經(jīng)校準操作后由分析儀自動計（四）透射比濁法 抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合形成的免疫復(fù)合物，在反應(yīng)液中具有一定的濁度，可由一般分光光度法進行透射比濁（transmission turbidimetry）測定，可用于某些蛋白質(zhì)和藥物濃度等的測定。該法須做多點校準，再經(jīng)非線性回歸，求出抗原或抗體的含量。 2022/9/2872（四）透射比濁法 抗原與相應(yīng)的抗體結(jié)合形成的免疫復(fù)二、常用生化檢測項目分析方法舉例 1終點法檢測 常用的有總膽紅素（氧化法或重氮法）、結(jié)合膽紅素（氧化法或重氮法）、血清總蛋白（雙縮脲法）

40、、血清白蛋白（溴甲酚氯法）、總膽汁酸（酶法）、葡萄糖（葡萄糖氧化酶法）、尿酸（尿酸酶法）、總膽固醇（膽固醇氧化酶法）、甘油三酯（磷酸甘油氧化酶酶法）、高密度脂蛋白膽固醇（直接測定法）、鈣（偶氮砷法）、磷（紫外法）、鎂（二甲苯胺藍法）等。 2022/9/2873二、常用生化檢測項目分析方法舉例 1終點法檢測 常2固定時間法苦味酸法測定肌酐采用此法。 2022/9/28742固定時間法苦味酸法測定肌酐采用此法。 2022/9/23連續(xù)監(jiān)測法 對于酶活性測定一般應(yīng)選用連續(xù)監(jiān)測法，如：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、堿性磷酸酶、谷氨氨酰基轉(zhuǎn)移酶、淀粉酶和肌酸激酶等。一些代謝物酶法測定

41、的項目如：脲酶偶聯(lián)法測定尿素等，也可用連續(xù)監(jiān)測法。 2022/9/28753連續(xù)監(jiān)測法 對于酶活性測定一般應(yīng)選用連續(xù)監(jiān)測法4透射比濁法 透射比濁法可用于測定產(chǎn)生濁度反應(yīng)的項目，多數(shù)屬免疫比濁法，載脂蛋白、免疫球蛋白、補體、抗“O”、類風濕因子，以及血清中的其他蛋白質(zhì)如前白蛋白、結(jié)合珠蛋白、轉(zhuǎn)鐵蛋白等均可用此法。 2022/9/28764透射比濁法 透射比濁法可用于測定產(chǎn)生濁度反應(yīng)的第四節(jié) 分析參數(shù)設(shè)置 各種測定項目的分析參數(shù)（analysisparamete）大部分已設(shè)計好，存于磁盤中，供用戶使用；目前大多數(shù)生化分析儀為開放式，用戶可以更改這些參數(shù)。 生化分析儀一般另外留一些檢測項目的空白通道

42、，由用戶自己設(shè)定分析參數(shù)。因此必須理解各參數(shù)的確切意義。 2022/9/2877第四節(jié) 分析參數(shù)設(shè)置 各種測定項目的分析參數(shù)（一、分析參數(shù)介紹（一）必選分析參數(shù) 1試驗名稱（test code）2方法類型（也稱反應(yīng)模式）(assay mode)3反應(yīng)溫度(temperature)4主波長（primary wavelength） 5次波長（secondary wavelength）6. 反應(yīng)方向（response direction）7樣品量（sampling volume）8第一試劑量 （first reagent volume）9第二試劑量（second reagent volume）202

43、2/9/2878一、分析參數(shù)介紹（一）必選分析參數(shù) 1試驗名稱（test10總反應(yīng)容量（total reacting volume） 一般180-350l。11孵育時間（incubate time）12延遲時間（delay time）13連續(xù)監(jiān)測時間 （continuous monitoring time）一般為60120s，不少于4個吸光度檢測點（3個吸光度變化值） 14校準液（calibrator）個數(shù)及濃度 15校準K值（calibrate coefficient）或理 論K值16線性范圍（linearity range）17小數(shù)點位數(shù)（decimal point digit） 2022

44、/9/287910總反應(yīng)容量（total reacting volume（二）備選分析參數(shù) 這類分析參數(shù)與檢測結(jié)果的準確性有關(guān)，一般來說不設(shè)置這類分析參數(shù)，分析儀也能檢測出結(jié)果，但若樣品中待測物濃度太高等，檢測結(jié)果可能不準確。 2022/9/2880（二）備選分析參數(shù) 這類分析參數(shù)與檢測結(jié)果的準確性有1樣品預(yù)稀釋 設(shè)置樣品量、稀釋劑量和稀釋后樣品量三個數(shù)值，便可在分析前自動對樣品進行高倍稀釋。 2底物耗盡值（substrate exhaust limit） 在負反應(yīng)的酶活性測定中，可設(shè)置此參數(shù)，以規(guī)定一個吸光度下降限。若低于此限時底物已太少，不足以維持零級反應(yīng)而導(dǎo)致檢測結(jié)果不準確。 3前區(qū)檢查

45、免疫比濁法中應(yīng)用，以判斷是否有抗原過剩。將終點法最后兩個吸光度值的差別（A）設(shè)置一個限值，如果后一點的吸光度比前一點低，表示已有抗原過剩，應(yīng)稀釋樣品后重測。2022/9/28811樣品預(yù)稀釋 設(shè)置樣品量、稀釋劑量和稀釋后樣品量三個數(shù)值4試劑空白吸光度范圍超過此設(shè)定范圍表示試劑已變質(zhì)，應(yīng)更換合格試劑。5試劑空白速率連續(xù)監(jiān)測法中使用，是試劑本身在監(jiān)測過程中沒有化學反應(yīng)時的變化速率。 6方法學補償系數(shù)用于校準不同分析方法間測定結(jié)果的一致性，有斜率和截距兩個參數(shù)。7參考值范圍對超過此范圍的測定結(jié)果，儀器會打印出提示。 2022/9/28824試劑空白吸光度范圍超過此設(shè)定范圍表示試劑已變質(zhì)，應(yīng)更換（三）

46、某些參數(shù)的特殊意義 1最小樣品量一般分析儀的最小樣品量是2l，目前也有小至1.6l的。2最大試劑量 對方法靈敏度很高而線性上限低的檢測項目，很重要。3彈性速率（flexrate） 在酶活性測定中，當酶活性太高，在連續(xù)監(jiān)測期中已不呈線性反應(yīng)時，有些儀器具有彈性速率功能，能自動選擇反應(yīng)曲線上連續(xù)監(jiān)測期中仍呈線性的吸光度數(shù)據(jù)計算結(jié)果，使酶活性測定的線性范圍得以擴大。如AST可從1000U/L擴展至2000U/L，從而減少稀釋及重測次數(shù)、降低成本。 2022/9/2883（三）某些參數(shù)的特殊意義 1最小樣品量一般分析儀的最小樣4標本空白速率 以膽紅素干擾堿性苦味酸法測定肌酐為例：樣品中存在膽紅素時，膽

47、紅素對堿性苦味酸速率法或兩點法測定肌酐有負干擾。因為膽紅素在肌酐檢測的波長505nm有較高光吸收，而且膽紅素在堿性環(huán)境中可被氧化轉(zhuǎn)變，因而在肌酐反應(yīng)過程中膽紅素的光吸收呈下降趨勢。2022/9/28844標本空白速率 以膽紅素干擾堿性苦味酸法測定肌酐為設(shè)置空白速率以消除膽紅素干擾 若在加入第一試劑后一段時間內(nèi)設(shè)置試劑空白速率，因為此段中苦味酸尚未與肌酐反應(yīng)，而膽紅素在第一試劑的堿性環(huán)境中已同樣被氧化轉(zhuǎn)變，因而以第二試劑加入后的速率變化，減去試劑空白速率變化，便可消除膽紅素的負干擾，見圖。 2022/9/2885設(shè)置空白速率以消除膽紅素干擾 若在加入第一試劑后一段空白速率法消除膽紅素對肌酐測定的

48、干擾 2022/9/2886空白速率法消除膽紅素對肌酐測定的干擾 2022/9/268二、單波長和雙波長方式 （一）概念 采用一個波長檢測物質(zhì)的光吸收強度的方式稱為單波長方式。當反應(yīng)液中含有一種組分，或在混合反應(yīng)液中待測組分的吸收峰與其它共存物質(zhì)的吸收波長無重疊時，可以選用。 使用一個主波長和一個次波長的稱雙波長方式。當反應(yīng)液中存在干擾物的較大吸收、從而影響測定結(jié)果的準確性時，采用雙波長方式更好。 2022/9/2887二、單波長和雙波長方式 （一）概念 采用一個波長（二）雙波長的作用消除噪音干擾;減少雜散光影響;減少樣品本身光吸收的干擾：當樣品中存在非化學反應(yīng)的干擾物如甘油三酯、血紅蛋白、膽

49、紅素等時，會產(chǎn)生非特異性的光吸收，雙波長方式可以部分消除這類光吸收干擾。 2022/9/2888（二）雙波長的作用消除噪音干擾;2022/9/2688（三）次波長的確定方法 當被測物的主波長確定之后，根據(jù)干擾物吸收光譜特征選擇次波長，使干擾物在主、次波長處有盡可能相同的光吸收值，而被測物在主、次波長處的光吸收值應(yīng)有較大的差異。 一般來說，次波長應(yīng)大于主波長100nm。以主波長與次波長吸光度差來計算結(jié)果。 2022/9/2889（三）次波長的確定方法 當被測物的主波長確定之后，根三、單試劑和雙試劑方式 反應(yīng)過程中只加一次試劑稱單試劑方式，加兩次試劑便為雙試劑方式。 雙試劑方式分析的優(yōu)點是： 可提

50、高試劑的保存穩(wěn)定性； 能設(shè)置兩點終點法； 在某些項目檢測時能消除非特異性化學反應(yīng) 干擾。 2022/9/2890三、單試劑和雙試劑方式 反應(yīng)過程中只加一次試劑雙試劑方式消除非特異性化學反應(yīng)干擾舉例 血清ALT測定時，血清中原有酮酸也可與試劑LDH起反應(yīng)，使結(jié)果偏高。若先加入缺乏-酮戊二酸的第一試劑，使原有酮酸與LDH反應(yīng)，之后加入含有-酮戊二酸的第二試劑，啟動ALT酶促反應(yīng)生成丙酮酸，這些丙酮酸與LDH反應(yīng)消耗的NAD能真正反映ALT活性，從而消除以上副反應(yīng)的影響。 2022/9/2891雙試劑方式消除非特異性化學反應(yīng)干擾舉例 血清AL四、測定過程的自動監(jiān)測 1試劑空白監(jiān)測 每瓶試劑在使用前先

51、自動檢測試劑空白吸光度；每個樣品測定前均檢測試劑空白吸光度。為某些先加試劑后取樣品的分析儀所采用。 2022/9/2892四、測定過程的自動監(jiān)測 1試劑空白監(jiān)測 每瓶試劑在使用2試劑空白變化速率監(jiān)測 設(shè)置此項監(jiān)測后，分析儀在結(jié)果計算時會自動減去試劑空白變化速率。在以監(jiān)測NAD（P）H減少為指示反應(yīng)的酶活性測定中，空白速率速率可監(jiān)測并消除由NADH自身氧化所造成的吸光度下降；在色素原為底物的酶活性測定中，空白速率可監(jiān)測并消除底物自身分解造成的吸光度升高。有關(guān)空白速率監(jiān)測在膽紅素對堿性苦味酸速率法測定肌酐負干擾消除中的作用，已如前述。 2022/9/28932試劑空白變化速率監(jiān)測 設(shè)置此項監(jiān)測后，

52、分析儀在3樣品信息監(jiān)測 由于樣品的溶血、脂濁、黃疸會對測定結(jié)果產(chǎn)生非化學反應(yīng)的干擾。根據(jù)溶血、脂濁、黃疸的光譜吸收特性，用雙波長或多波長檢測其性質(zhì)和程度，一般是測定樣品在600nm570nm、700nm/660nm和505nm/480nm吸光度比值的大小來分別判斷樣品溶血、脂濁和黃疸程度。然后在結(jié)果計算時自動減去這部分干擾，這將有利于提高分析結(jié)果的可靠性。 2022/9/28943樣品信息監(jiān)測 由于樣品的溶血、脂濁、黃疸會對測定結(jié)4結(jié)果可靠性監(jiān)測（1）終點監(jiān)測（2）線性期監(jiān)測 將連續(xù)監(jiān)測到的各吸光度值進行線性回歸，計算出各點的方差，根據(jù)方差值的大小來判斷是否呈線性； 取連續(xù)監(jiān)測期開始若干點的變

53、化速率與連續(xù)監(jiān)測期最后若干點的變化速率進行比較，來判斷是否為線性期。 2022/9/28954結(jié)果可靠性監(jiān)測（1）終點監(jiān)測2022/9/26955底物消耗的監(jiān)測 在連續(xù)監(jiān)測法測定酶活性時，如果在監(jiān)測期內(nèi)吸光度上升或下降超過其底物耗盡值，則說明該樣品酶活性非常高，底物將被耗盡，監(jiān)測期的吸光度將偏離線性，使測定結(jié)果不可靠。此監(jiān)測對于采用負反應(yīng)分析酶活性的方法甚為重要。 2022/9/28965底物消耗的監(jiān)測 在連續(xù)監(jiān)測法測定酶活性時，如果在監(jiān)底物消耗監(jiān)測 2022/9/2897底物消耗監(jiān)測 2022/9/26976方法線性范圍監(jiān)測 每種待測物分析都有一個可測定的濃度或活性范圍，樣品結(jié)果若超過此范圍

54、，分析儀將顯示測定結(jié)果超過線性范圍的提示，多數(shù)分析儀會自動將樣品減量或增量重新測定。 2022/9/28986方法線性范圍監(jiān)測 每種待測物分析都有一個可測定的濃四、分析參數(shù)設(shè)置舉例 以肌酸激酶測定為例。 1. 肌酸激酶試劑盒通用參數(shù) 樣品量50l，第一試劑1000l，37保溫5min，加第二試劑500l，延時2min在340nm讀第一點吸光度，連續(xù)監(jiān)測2min。 2022/9/2899四、分析參數(shù)設(shè)置舉例 以肌酸激酶測定為例。2022/2.某生化分析儀有關(guān)參數(shù)的設(shè)置范圍 樣品量235l，第一試劑量20270l，第二試劑量20270l，總反應(yīng)容量180350，吸光度監(jiān)測周期18s，總反應(yīng)時間10

55、min，各試劑可加入時間：1.5min，4.5min，9.5min。 2022/9/281002.某生化分析儀有關(guān)參數(shù)的設(shè)置范圍 樣品量2353. 參數(shù)設(shè)置如下（1）按比例減少樣品量和各試劑量，使反應(yīng)液總?cè)萘吭诜治鰞x180350l范圍內(nèi)。選擇樣品量為10l，第一試劑200l，第二試劑100l，這時反應(yīng)液總?cè)萘渴?10l。或者選擇樣品量為8l，第一試劑160l，第二試劑80l，這時反應(yīng)液總?cè)萘渴?48l。 2022/9/281013. 參數(shù)設(shè)置如下（1）按比例減少樣品量和各試劑量，使反（2）確定第二試劑加入時間，根據(jù)通用參數(shù)，應(yīng)選擇4.5min為第二試劑加入點。（3）確定各個吸光度選擇點，由于第

56、二試劑加入時間4.5min，換算成監(jiān)測時間為第16，17點之間，加上2min延時，則在第24監(jiān)測點為第一點吸光度，并連續(xù)選擇24-31監(jiān)測點。 2022/9/28102（2）確定第二試劑加入時間，根據(jù)通用參數(shù)，應(yīng)選擇4.5min（4）計算K值：根據(jù)樣品量10l，第一試劑200l，第二試劑100l，代入計算公式 則K = = = 4984 也可以采用肌酸激酶的校準品，執(zhí)行校準程序來得到校準K值。 2022/9/28103（4）計算K值：根據(jù)樣品量10l，第一試劑200l，第二4對新設(shè)置的反應(yīng)參數(shù)進行試運行 在開始運行時，分析儀會對各反應(yīng)參數(shù)之間的邏輯合法性進行檢測，如果反應(yīng)參數(shù)中出現(xiàn)邏輯性錯誤，

57、則分析儀會顯示錯誤信息并停機，這時可以根據(jù)提示信息對反應(yīng)參數(shù)進行修改。 2022/9/281044對新設(shè)置的反應(yīng)參數(shù)進行試運行 在開始運行時，分析第四節(jié)自動生化分析儀 工作過程和操作方法 一、工作過程 在測定過程中所有機械步驟均由微處理器根據(jù)已設(shè)定的程序（procedure）進行工作。2022/9/28105第四節(jié)自動生化分析儀 工作過程和操作方法1取樣加試劑和混勻樣品盤轉(zhuǎn)動使樣品進入待測位置 樣品針定量吸取樣品加入一反應(yīng)杯 反應(yīng)盤旋轉(zhuǎn) 試劑轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)動使所需試劑瓶進入試劑吸取位置 試劑針定量吸取試劑加入反應(yīng)杯 攪拌機構(gòu)將反應(yīng)杯內(nèi)液體進行攪拌混勻2022/9/281061取樣加試劑和混勻樣品盤轉(zhuǎn)動

58、使樣品進入待測位置 202保溫反應(yīng)和吸光度檢測反應(yīng)盤旋轉(zhuǎn) 反應(yīng)杯內(nèi)液體在恒溫條件下進行化學反應(yīng)當該反應(yīng)杯通過檢測窗口時被檢測得到一個吸光度值按規(guī)定的間隔時間檢測吸光度值直至總反應(yīng)結(jié)束 總反應(yīng)時間一般為10min，如果18s為檢測吸光度的間隔時間（interval time），則10min得到34個吸光度值，若15s為間隔時間，則得到40個吸光度值。 2022/9/281072保溫反應(yīng)和吸光度檢測反應(yīng)盤旋轉(zhuǎn) 2022/9/261073計算并顯示或打印結(jié)果 分析儀根據(jù)各測光點讀數(shù)對某一檢測項目進行結(jié)果計算，并顯示或打印出每個項目的報告，也可按標本顯示或打印出全部項目的累積。即待某樣品指定的項目測試

59、完畢，便顯示或打印檢測結(jié)果。 2022/9/281083計算并顯示或打印結(jié)果 分析儀根據(jù)各測光點讀數(shù)對某一二、操作方法 （一）操作前的各項檢查（1）正常開機以后，檢查沖洗用水裝置是否正常、各項分析試劑是否充足、各種清洗劑是否足夠，以及樣品針、試劑針和攪拌棒是否清潔。（2）確認要進行校準的項目，確認要做的質(zhì)控批號及項目，以及校準品、質(zhì)控品是否足夠。（3）進行光度計自檢來確認光路與檢測系統(tǒng)是否處于正常工作狀態(tài)。 2022/9/28109二、操作方法 （一）操作前的各項檢查2022/9/2610（二）校準 分析儀在樣品分析之前都要對該分析項目進行校準（也稱定標），得出一個該項目的校準系數(shù)（K）。校準

60、前首先必須在反應(yīng)程序里設(shè)定有關(guān)校準的參數(shù)，如校準液的代碼、位置及濃度值等。執(zhí)行校準程序，檢測得到該校準品的吸光度值，再根據(jù)校準濃度計算校準系數(shù)（K=校準品濃度/校準品吸光度）。 2022/9/28110（二）校準 分析儀在樣品分析之前都要對該分析項目1校準方式 有單點校準、兩點校準和多點校準單點校準：校準曲線呈直線且通過原點，用單個濃度的校準液即可，兩點校準：若校準曲線呈直線但不通過原點，則需用兩個濃度的校準液做兩點校準；多點校準：當校準曲線不呈直線而為真正的曲線時，應(yīng)做多點校準，并按其線形選擇不同的曲線方程進行擬和，如雙曲線、拋物線、冪函數(shù)、指數(shù)函數(shù)、對數(shù)函數(shù)等方程等。 2022/9/281