培養(yǎng)基模擬灌裝(小容量注射劑)無菌生產(chǎn)工藝驗證方案

1、審批部門姓名簽名日期批準(zhǔn)人針劑車間 針劑車間 質(zhì)檢中心 分發(fā)部門：培養(yǎng)基模擬灌裝（小容量注射劑）無菌生產(chǎn)工藝驗證小組一、概述2010GMP及其附錄要求進(jìn)行設(shè)計，是專用于小容量注射劑非最終滅菌產(chǎn)品生產(chǎn)使用。某某產(chǎn)品因無法進(jìn)行 F08 分鐘濕熱滅菌，以達(dá)到 SAL10-6，但處方可以通過微生物滯留過濾器過濾，故采用除菌過濾和無菌工藝相結(jié)合的滅菌方法。染風(fēng)險的兩項重要措施為：人員的培訓(xùn) 無菌工藝驗證。本次驗證關(guān)鍵生產(chǎn)工藝流程圖安瓿的清洗稱量配安瓿的清洗稱量配料工器具清洗和滅菌除菌過濾干熱滅菌灌封燈D級背景C級背景A級背景一般區(qū)驗證原理失敗的驗證進(jìn)行菌種分析并調(diào)查，確認(rèn)并解決可能造成失敗的原因后，重新

2、進(jìn)行驗證。驗證次數(shù)2010GMP1要求因該生產(chǎn)線為新建廠區(qū)設(shè)施，為培養(yǎng)基模擬灌裝試驗的首次驗證，故需進(jìn)行連續(xù)三個批次的驗證活動。二、驗證目的通過該工藝驗證活動證明新設(shè)計廠房采用既定的無菌生產(chǎn)工藝能保證產(chǎn)品的無菌要求；通過該工藝驗證活動證明無菌操作相關(guān)人員資格，降低人員帶入無菌的風(fēng)險；GMP法規(guī)要求。三、驗證范圍和實施時間本驗證方案適用于廠區(qū)小容量注射劑車間無菌生產(chǎn)線正式投入使用前某某品種小容量注射劑無菌生產(chǎn)工藝培養(yǎng)基模擬灌裝驗證活動；20133月4月連續(xù)三個批次。并將記錄附于驗證報告后。姓名職務(wù)生產(chǎn)技術(shù)部經(jīng)理職責(zé)驗證小組組長，負(fù)責(zé)驗證文件的審核和工作總體安排和實施，組織調(diào)查和處理驗證過程中出現(xiàn)

3、的異常情況技術(shù)管理員負(fù)責(zé)驗證文件的起草，提供驗證過程中相關(guān)技術(shù)支持，參與驗證異常情況調(diào)查工作車間主任安排車間崗位人員配合驗證工作的實施，對驗證過程的異常情況進(jìn)行協(xié)助調(diào)查，負(fù)責(zé)驗證文件的審核車間技術(shù)副主任負(fù)責(zé)驗證文件的起草，提供驗證過程中相關(guān)技術(shù)支持，參與驗證異常情況調(diào)查工作配料崗位人員洗瓶崗位人員負(fù)責(zé)配料操作和除菌過濾以及滅菌操作并記錄負(fù)責(zé)洗瓶和安瓿滅菌操作并記錄灌封崗位人員負(fù)責(zé)灌封操作并記錄燈檢崗位人員負(fù)責(zé)燈檢操作和產(chǎn)品7和14天的觀察與統(tǒng)計維修員QCQCQA QA負(fù)責(zé)驗證相關(guān)檢驗工作和檢驗數(shù)據(jù)收集統(tǒng)計工作，參與驗證過程異常情況調(diào)查工作，負(fù)責(zé)驗證結(jié)束后培養(yǎng)基的滅活處理工作調(diào)查處理GMP取樣工

4、作QA負(fù)責(zé)驗證文件的起草，組織驗證方案相關(guān)培訓(xùn)，參與驗證異常情況調(diào)查工作調(diào)查工作質(zhì)量負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)驗證文件的批準(zhǔn)，驗證證書的簽發(fā)各部門職責(zé)品質(zhì)管理部協(xié)助驗證活動的執(zhí)行參與驗證異常情況的調(diào)查和處理參與驗證文件的起草工作負(fù)責(zé)驗證過程的取樣負(fù)責(zé)生產(chǎn)監(jiān)督，保證所有數(shù)據(jù)的真實性和完整性負(fù)責(zé)驗證文件的審批和歸檔質(zhì)檢中心協(xié)助驗證活動的執(zhí)行，提供必要的取樣工具參與驗證異常情況的調(diào)查和處理負(fù)責(zé)相關(guān)檢驗工作，提供相關(guān)檢驗數(shù)據(jù)負(fù)責(zé)最終培養(yǎng)基的處理生產(chǎn)技術(shù)部負(fù)責(zé)驗證活動的執(zhí)行負(fù)責(zé)驗證數(shù)據(jù)的收集和相關(guān)文件的起草負(fù)責(zé)組織驗證過程中異常情況的調(diào)查和處理生產(chǎn)車間負(fù)責(zé)驗證相關(guān)操作活動參與異常情況的調(diào)查和處理參與驗證文件的起草和審核

5、工程部協(xié)助驗證活動確保其順利完成維修人員參與驗證活動的實施物料管理部協(xié)助提供驗證活動過程中所需物料五、風(fēng)險評估分析表通過風(fēng)險評估，確認(rèn)本次驗證活動需要驗證的項目可可嚴(yán)可風(fēng)險風(fēng)險描述風(fēng)險控制措施驗證項目能重測指數(shù)性性性環(huán)境達(dá)不到相關(guān)生產(chǎn)要求中高高高建立廠房清潔消毒規(guī)程，定期環(huán)境監(jiān)測并趨勢分析培養(yǎng)基灌裝全程對環(huán)境進(jìn)行動態(tài)監(jiān)測人員培訓(xùn)并更衣考核上崗，所有相關(guān)人員，模擬生產(chǎn)實人員造成污染中高高高每批對進(jìn)入無菌區(qū)人員取際活動后取樣，對最多允許樣監(jiān)控人數(shù)進(jìn)行挑戰(zhàn)驗證滅菌后儲存方式和有相關(guān)驗證操作與正常生產(chǎn)滅菌后的衣服，效期，操作人員培訓(xùn)考核上一致，生產(chǎn)結(jié)束后對關(guān)鍵表器具等發(fā)生二低高高高崗，生產(chǎn)過程中進(jìn)行嚴(yán)

6、格監(jiān)面取樣，儲存方式和有效期次污染控，生產(chǎn)結(jié)束后與產(chǎn)品接觸在相關(guān)清潔滅菌驗證中完表面取樣成滅菌效果未達(dá)到低高中中所有滅菌裝載和參數(shù)須經(jīng)式滅菌在設(shè)備驗證中完成配液/灌封超過規(guī)定時限要求低中低中工藝規(guī)程中明確規(guī)定時限按照工藝規(guī)定工序最大時間挑戰(zhàn)進(jìn)行驗證灌封設(shè)備故障并維修中中低中人員培訓(xùn)，使用前通過試機(jī)，并定期設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)模擬維修操作進(jìn)行挑戰(zhàn)驗證過濾系統(tǒng)有效性和污染低高高高過濾后對除菌過濾器進(jìn)行潔和滅菌處理在無菌過濾系統(tǒng)工藝驗證中完成，并取過濾后的藥液進(jìn)行無菌檢查所有相關(guān)工具，記錄等進(jìn)入取樣工具，記錄等傳入污染中低高高要的經(jīng)酒精消毒和紫外加在消毒效果驗證中完成消毒從傳遞窗進(jìn)入清潔工具和清潔消毒劑使用

7、低高高高劑需除菌過濾后進(jìn)入無菌在無菌過濾效果和設(shè)備驗證中完成帶來的污染帶來的污染區(qū)在洗烘線驗證中完成滅菌灌封所用安瓿工藝規(guī)程規(guī)定安瓿的滅菌效果和單向流保護(hù)動態(tài)監(jiān)低高高高造成污染參數(shù)和暫存時間安瓿進(jìn)行取樣壓縮空氣帶來低中高高壓縮空氣系統(tǒng)驗證中完成的污染周期性進(jìn)行壓縮空氣系統(tǒng)驗證和監(jiān)測生產(chǎn)過程中，異嚴(yán)格異常操作的要求于常操作造成的中低中中可能污染的藥品報廢處理瓶等情況進(jìn)行挑戰(zhàn)驗證風(fēng)險產(chǎn)品暴露過長挑戰(zhàn)工藝規(guī)程中允許的最中低高低嚴(yán)格控制允許的灌封速度帶來的風(fēng)險慢速度進(jìn)行灌1確保已完成下列驗證和確認(rèn)工作： WFIPW系統(tǒng)驗證HVAC 系統(tǒng)的驗證壓縮空氣系統(tǒng)的驗證過濾系統(tǒng)的驗證無菌區(qū)人員更衣確認(rèn)滅菌系統(tǒng)滅

8、菌效果和儲存期確認(rèn)洗烘灌聯(lián)動線確認(rèn)無菌區(qū)清潔消毒方法驗證恒溫恒濕箱確認(rèn)配制罐的確認(rèn)無菌分析方法學(xué)驗證生產(chǎn)工藝規(guī)程某某品種的批生產(chǎn)記錄配料崗位 SOP工器具處理崗位 SOP洗烘瓶崗位 SOP灌封崗位 SOP各相關(guān)設(shè)備的清潔、操作和維護(hù)保養(yǎng) SOP驗證可接受標(biāo)準(zhǔn)模擬灌裝數(shù)量/瓶污染控制數(shù)量/瓶2996474204743629416295775127752模擬灌裝數(shù)量/瓶污染控制數(shù)量/瓶29964742047436294162957751277523201047灌裝試驗的目標(biāo)是零污染，應(yīng)當(dāng)遵循以下要求：（一）5000支時，不得檢出污染品。（二）500010000支時：12支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證

9、。（三）10000支時：12支污染，需調(diào)查后，進(jìn)行再驗證。（四）發(fā)生任何微生物污染時，均應(yīng)當(dāng)進(jìn)行調(diào)查。綜合上述標(biāo)準(zhǔn)，本次驗證數(shù)量50006294瓶之間1瓶。驗證活動前其他準(zhǔn)備工作經(jīng)確認(rèn)合格的胰酶酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)250g2206015個，金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、黑曲霉、生孢梭菌，枯草芽孢桿菌和白色念珠菌等各類菌種，API 鑒別菌種試紙，經(jīng)滅菌的具塞三角10個，80005ml23283035的培養(yǎng)區(qū)域以及便于觀察和運輸?shù)闹修D(zhuǎn)箱若干。工器具滅菌和準(zhǔn)備SOP要求儲存， SOP要求進(jìn)行清潔消TSB和相關(guān)包材存放在車間內(nèi)。配料配料前取該崗位所需注射用水進(jìn)行內(nèi)毒素檢查，確保內(nèi)毒素檢驗合格后

10、，取胰酶酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)360g6012L， 攪拌0BA50ml，在瓶身標(biāo)明取樣位置、取樣數(shù)量、取樣時間和樣品名稱后送質(zhì)檢中心測定溶液中微生物負(fù)載。其合格標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)1cfu/ml。除菌過濾（是否使用前進(jìn)行完整性測試按新工藝規(guī)程定0.2m上述培養(yǎng)基溶液。QA50ml2瓶過濾完的培養(yǎng)基，在瓶身標(biāo)明取樣位置、取樣數(shù)量、取樣時間和4180ml1810ml的試管中，送質(zhì)檢中心進(jìn)行培養(yǎng)基的微生物生長實驗。培養(yǎng)基無菌性檢查232814303514天。14天內(nèi)應(yīng)無任何微生物生長。培養(yǎng)基的微生物生長試驗：QCQA18210ml種量100cfu/210ml2支接種金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、黑曲霉、生孢

11、梭菌， 接種量100cfu/4金黃色葡7 天?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)：7TSB培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長，且空白對照管應(yīng)無菌生長則判定該培養(yǎng)基微生物性能生長試驗符合要求規(guī)定。洗烘瓶8000SOP6294瓶。2ml 56時（由生產(chǎn)工藝規(guī)程定。全過程，設(shè)備慢速運行120/2000(不走瓶每灌封一盤及時記錄好灌封時間和盤號放在裝中間產(chǎn)品的盤內(nèi)。灌封完的樣品及時傳出無菌區(qū)。最差灌裝條件的模擬：30分鐘，進(jìn)行設(shè)備模擬維修，保持現(xiàn)有人員在P約0錄上做好備注。模擬現(xiàn)場人員最大控制數(shù)7支/管調(diào)整、更換在灌裝正常運行過程中，進(jìn)行緊急停機(jī)，模擬調(diào)整、更換灌裝針2 支或以上，標(biāo)記更換針管后灌約0模擬空瓶倒瓶、破瓶

12、約0支模擬藥液瓶破瓶約0支模擬中控抽樣處理的過程灌裝過程的中間控制接觸碟和沉降菌的取樣應(yīng)做好空白對照。5個位置的用接觸A碟（mu；Bm。A2h更A4m4小時。格標(biāo)準(zhǔn)為所監(jiān)控懸浮粒子數(shù)（0.5m）3520/立方米。對灌裝區(qū)域的動態(tài)浮游菌取樣：灌封過程中選定灌裝針頭處，出瓶口，和封口處以及取樣人員1立方米，要求其折算后平均值1cfu/立方米。mu。9.2.53支已滅菌的安瓿瓶放置在裝有足量已滅菌23283035環(huán)境內(nèi)各培養(yǎng)七天，要求無菌生長。所有進(jìn)入無菌區(qū)人員均應(yīng)登記進(jìn)出時間。燈檢檢查按原灌裝盤號分別裝盤每盤內(nèi)放入原灌封物料標(biāo)簽和燈檢合格數(shù)量。培養(yǎng)23287天，期間在第三天將所有產(chǎn)品翻轉(zhuǎn)一次，在第

13、七天觀30357天，在第七天培養(yǎng)結(jié)束后統(tǒng)計污染數(shù)。接受標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)實際考察數(shù)，按照本文件 3.1 和 3.2 項目要求，50006294 之間，污染總數(shù)應(yīng)11支，除非有明確證明是破瓶所致，否則該驗證失敗。發(fā)現(xiàn)被污染的樣品應(yīng)進(jìn)行菌種分析。培養(yǎng)基陽性對照試驗60320（05培養(yǎng)（若無則取消該組試驗100cfu/5550%TSB培養(yǎng)基中應(yīng)出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長； 1瓶進(jìn)行鏡檢、API等已確定是添加的菌。七、可能的偏差或漏項的處理進(jìn)行培養(yǎng)基無菌模擬灌裝試驗。原因調(diào)查至少應(yīng)包括如下項：a、生產(chǎn)環(huán)境微生物監(jiān)測數(shù)據(jù)； d、生產(chǎn)環(huán)境浮游菌監(jiān)測數(shù)據(jù)； e、操作間的空氣流向、壓差；f、操作人員的操作方法、培

14、訓(xùn)情況； g、模擬灌裝試驗過程中的異常情況；h、無菌室生產(chǎn)工具及其他用品的儲存狀況；j、無菌室的清潔、清潔堆規(guī)程的培訓(xùn)及執(zhí)行情況； k、無菌生產(chǎn)用設(shè)備的控制系統(tǒng)和監(jiān)測系統(tǒng)的校正；l、生產(chǎn)后過濾器的完整性檢測結(jié)果；m、相關(guān)產(chǎn)品、相關(guān)生產(chǎn)過程存在的問題等。實施之后應(yīng)重復(fù)模擬灌裝試驗。八、再驗證周期當(dāng)空氣凈化系統(tǒng)、灌封和過濾設(shè)備、除菌過濾和灌封工藝以及灌封操作人員重大變更后，應(yīng)當(dāng)重復(fù)進(jìn)行培養(yǎng)基模擬灌裝無菌生產(chǎn)工藝驗證。1個月，重新開啟生產(chǎn)前未出現(xiàn)異常情況時也需每半年至少進(jìn)行一個批次培養(yǎng)基模擬灌裝無菌生產(chǎn)工藝驗證。九、附件培訓(xùn)記錄,TSB TSB 小容量注射劑多少規(guī)格）附件 1確認(rèn)相關(guān)驗證和確認(rèn)工作項

15、目WFI系統(tǒng)驗證PW系統(tǒng)驗證HVAC壓縮空氣系統(tǒng)驗證過濾系統(tǒng)驗證滅菌設(shè)備確認(rèn)洗瓶機(jī)確認(rèn)灌裝機(jī)確認(rèn)無菌區(qū)清潔消毒驗證恒溫恒濕箱確認(rèn)配制罐確認(rèn)無菌分析方法學(xué)驗證備注確認(rèn)人/日期附件 2驗證報告文件號 驗證有效期至 檢查結(jié)論符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合 符合不符合復(fù)核人/日期確認(rèn)相關(guān)文件確認(rèn)相關(guān)文件文件名稱檢查結(jié)論文件名稱檢查結(jié)論工藝規(guī)程符合不符合符合不符合批生產(chǎn)記錄符合不符合符合不符合SOP符合不符合SOP符合不符合配制罐清潔、操作和配制罐清潔、操作和符合不符合滅菌柜清潔、

16、操作和符合不符合洗瓶機(jī)清潔、操作和符合不符合隧道烘箱清潔、操作符合不符合SOP備注確認(rèn)人/日期復(fù)核人/日期附件 3培養(yǎng)基信息確認(rèn)表TSB培養(yǎng)基進(jìn)廠批號TSB培養(yǎng)基有效期至培養(yǎng)基全稱制方法備注：TSB培養(yǎng)基過濾前微生物限度檢查培養(yǎng)基灌封驗證批號培養(yǎng)條件試驗方法TSB培養(yǎng)基過濾前微生物限度檢查培養(yǎng)基灌封驗證批號培養(yǎng)條件試驗方法將mlTSB232848h303548h，統(tǒng)計菌落數(shù)。培養(yǎng)時間24h48h72h96h菌落數(shù)(cfu/ml)結(jié)論合格（1cfu/ml）不合格確認(rèn)人/日期：復(fù)核人/日期：供應(yīng)商上海中科昆蟲生物科技開發(fā)有限公胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基30g,1L蒸餾水，加熱溶解；分裝，12115min

17、品出現(xiàn)結(jié)塊，請勿使用。復(fù)核人/日期：TSB培養(yǎng)基無菌性檢查記錄TSB培養(yǎng)基無菌性檢查記錄培養(yǎng)基灌封驗證批號培養(yǎng)日期培養(yǎng)天數(shù)12345678910111213142328培養(yǎng)3035培養(yǎng)備注(打“-”表示不長菌，打“+”表示長菌)結(jié)論合格（14天后均無任何微生物生長）不合格確認(rèn)人/日期：復(fù)核人/日期：培養(yǎng)基微生物生長試驗培養(yǎng)基灌封驗證批號試驗日期培養(yǎng)基微生物生長試驗培養(yǎng)基灌封驗證批號試驗日期菌種名稱菌種信息培養(yǎng)條件12空白結(jié)論枯草芽孢桿菌白色念珠菌球 菌 菌黑曲霉生孢梭菌備注備注結(jié)論：合格（所有接種管出現(xiàn)明顯的所接種的微生物的生長，空白管顯陰性）不合格確認(rèn)人/日期：復(fù)核人/日期：安瓿瓶無菌檢查記

18、錄培養(yǎng)基灌封驗證批號培養(yǎng)日期取樣時間安瓿瓶無菌檢查記錄培養(yǎng)基灌封驗證批號培養(yǎng)日期取樣時間前期中期后期培養(yǎng)結(jié)果備注示不長菌，打“+”表示長)結(jié)論合格（14天后均無任何微生物生長）不合格確認(rèn)人/日期：復(fù)核人/日期：人員進(jìn)出無菌區(qū)登記臺賬培養(yǎng)基灌封驗證批 號 人員進(jìn)出無菌區(qū)登記臺賬培養(yǎng)基灌封驗證批 號 進(jìn)出無菌區(qū)時間主要操作活動備注備注培養(yǎng)基灌封試驗產(chǎn)品培養(yǎng)過程溫濕度記錄灌封試驗批號：生產(chǎn)日期：培養(yǎng)基灌封試驗產(chǎn)品培養(yǎng)過程溫濕度記錄灌封試驗批號：生產(chǎn)日期：2328培養(yǎng)期間溫濕度記錄產(chǎn)品入庫的日期/時間：入庫時溫濕度：是否符合要求：是否（標(biāo)準(zhǔn)：2328）培養(yǎng)上午下午備注記錄人天數(shù)1時間溫度濕度時間溫度濕度234545672328培養(yǎng)結(jié)束日期/時間：3035培養(yǎng)期間溫濕度記錄產(chǎn)品入庫的日期/時間：入庫時溫濕度：是否符合要求：是否（標(biāo)準(zhǔn)：3035）培養(yǎng)上午下午備注記錄人天數(shù)8時間溫度濕度時間溫度濕度910111213143035培養(yǎng)結(jié)束日期/時間： 備注：附件 10模擬灌封樣品培養(yǎng)最終結(jié)果記錄灌封批號生產(chǎn)日期培養(yǎng)日期至盤號1長菌數(shù)發(fā)現(xiàn)日期菌種鑒定盤號長菌數(shù)發(fā)現(xiàn)日期菌種鑒定192203214225236247258269271028112912301331143215331634173